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1.
传统中药金钱草ISSR-PCR反应体系的正交优化研究   总被引:1,自引:1,他引:1  
建立稳定、可靠的金钱草ISSR-PCR反应体系,为金钱草遗传多样性分析、优良品种选育、药材分子鉴定奠定基础。该研究在7水平单因素实验的基础上,采用L16(45)正交试验设计,应用SPSS 19.0进行方差分析,对影响反应体系的5个主要因素在4个水平上进行优化。利用优化的反应体系,筛选引物最适退火温度,以23份不同产地金钱草材料检测体系稳定性。结果显示模板DNA,引物,dNTP,Mg2+,Taq酶5个因素对金钱草ISSR-PCR反应结果均有极显著影响,影响大小依次为引物>Taq酶>模板DNA>Mg2+>dNTP,确定最优反应体系为总体积25 μL,模板DNA 60 ng,引物0.3 μmol·L-1,dNTP 0.2 mmol·L-1,Mg2+ 1.8 mmol·L-1,Taq酶1.25 U。经不同产地样品检测,该优化体系稳定、可靠。该研究为其他物种ISSR-PCR体系的优化提供参考。  相似文献   

2.
目的: 研究黄芩与五味子配伍对黄芩苷和五味子酯甲的大鼠药代动力学规律的影响。方法: 大鼠灌胃黄芩提取物2.5 g ·kg-1﹑五味子提取物2.5 g ·kg-1和黄芩提取物加五味子提取物各2.5 g ·kg-1,分别于0.25,1,2,4,8,12,24 h取血分离血浆,采用HPLC测定其黄芩苷﹑五味子酯甲的含量,结果运用DAS 3.0计算其药动学参数。结果: 测定黄芩组黄芩苷的药动学参数分别为t1/2=(6.203±3.324)h,AUC=(41.868±28.254)μg ·L-1 ·h-1,Cmax=(2.883±0.684) μg ·L-1,MRT=(11.697±4.108) h,Vd=(568 112.69±81 364.658)L ·kg-1,CL=(98 526.569±93 774.892)L ·h-1 ·kg-1;黄芩+五味子组黄芩苷的药动学参数分别为t1/2=(10.686±1.533)h,AUC=(53.064±30.047) μg ·L-1 ·h-1,Cmax=(3.168±1.312) μg ·L-1,MRT=(16.147±1.79) h,Vd=(2 240 724.1±1 824 718.9)L ·kg-1,CL=(139 855.27±107 995.59)L ·h-1 ·kg-1;黄芩+五味子组五味子酯甲的药动学参数分别为t1/2=(21.544±14.611)h,AUC=(11.554±5.516) μg ·L-1 ·h-1,Cmax=(0.311±0.074) μg ·L-1,MRT=(34.139±18.532) h,Vd=(12 153 917±5 806 489.8)L ·kg-1,CL=(564 758.71±384 128.86)L ·h-1 ·kg-1;五味子组五味子酯甲的药动学参数分别为t1/2=(4.926±5.371)h,AUC=(4.988±3.029) μg ·L-1 ·h-1,Cmax=(0.287±0.071) μg ·L-1,MRT=(12.002±6.854) h,Vd=(3 091.656±1 585.602)L ·kg-1,CL=(615.571±250.643)L ·h-1 ·kg-1。结论: 黄芩与五味子配伍,可以促进黄芩苷和五味子酯甲在血液中的吸收,并可延长这两种成分的半衰期,使其血药浓度维持在较高水平,达到协同增效的目的。  相似文献   

3.
铁皮石斛居群差异的研究ⅡISSR指纹标记方法的建立与优化   总被引:17,自引:1,他引:17  
目的:针对铁皮石斛ISSR的反应特点,建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系,为进一步研究铁皮石斛的居群差异奠定基础。方法:通过筛选引物并设定影响铁皮石斛ISSR反应的诸因子的不同浓度,检测IS-SR不同反应体系的扩增效果;通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化,建立铁皮石斛ISSR稳定可靠的反应体系。结果与结论:首次建立了可用于铁皮石斛ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系:25μL PCR反应体系中,10×Taq酶配套缓冲液,1.5 U Taq DNA聚合酶,1.2~1.8 mmol.L-1MgCl2,80μmol.L-1dNTP,0.2μmol.L-1引物,DNA模板约20 ng,退火温度52~60℃;实验表明:Taq酶质量、DNA模板品质、退火温度等对ISSR反应结果具有较大影响。所建立的铁皮石斛ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点,可以较好地应用于铁皮石斛的居群鉴别及居群分子生态的研究。  相似文献   

4.
半夏试管块茎银染mRNA差异显示条件的建立及优化   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:建立半夏试管小块茎DDRT-PCR反应最佳体系,为进一步研究半夏试管小块茎相关基因表达提供技术参考。方法:以半夏试管苗的叶柄﹑试管小块茎为材料,利用正交试验设计,研究模板。Mg2+,dNTPs,引物和DNA聚合酶等因素,对DDRT-PCR反应体系的影响。结果与结论:20 μL 的反应体系中含有dNTPs 150 μmol·L-1Taq酶0.6 U,锚定引物2 μmol·L-1 ,随机引物1 μmol·L-1,Mg2+ 2.5 mmol·L-1,2 μL 10×buffer和2.5 μg的cDNA模板。各因素影响程度依次为Taq酶>cDNA 模板>dNTPs>Mg2+>引物。  相似文献   

5.
目的 建立宽叶缬草的相关序列扩增多态性(SRAP)-聚合酶链式反应(PCR)反应体系,为宽叶缬草良种选育提供理论和技术基础。方法 采用单因素试验考察Taq Mix用量,Mg2+浓度,模板DNA浓度,Taq DNA聚合酶浓度对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响,以此为基础进行正交试验,优化宽叶缬草SRAP-PCR反应体系,并在最优反应体系条件下筛选可用于宽叶缬草遗传多样性研究的有效引物。结果 单因素实验结果表明Taq Mix用量为8~11 μL时扩增效果较佳;加入低浓度Mg2+可获得较佳扩增效果;中低浓度模板DNA用量可提高扩增效果;加入少量Taq DNA聚合酶可增加扩增结果丰富度。正交实验结果表明各因素对宽叶缬草SRAP-PCR扩增结果的影响程度大小依次为Taq Mix用量>Taq DNA聚合酶加入量>Mg2+加入量>模板DNA用量。适于宽叶缬草的最优反应体系为Taq Mix 11 μL,模板DNA 30 ng,Mg2+ 0.025 mmol·L-1,Taq DNA 1.5 U,正向引物与反向引物各5 μmol·L-1,用双蒸水补足体系至 20 μL。最优退火温度为36.8 ℃。应用最优体系从88对引物中筛选出17对适用于宽叶缬草SRAP-PCR的条带清晰、多态性较高的有效引物。结论 建立的宽叶缬草SRAP-PCR反应体系稳定性良好,可用于宽叶缬草遗传多样性研究。  相似文献   

6.
莫诺苷是从中药山茱萸Cornus officinalis Sieb. & Zucc.中提取分离获得的环烯醚萜苷类化合物,具有神经保护等多种药理活性.本研究首次采用LC-MS/MS技术建立了大鼠血浆中莫诺苷浓度的测定方法.血浆样品采用蛋白沉淀法,以金丝桃苷作为内标,色谱柱为Inertsil C8-3色谱柱(2.1 mm×50 mm,5 μm),流动相为水(含1 mmol·L-1甲酸钠)-乙腈梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1.采用电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应监测(MRM).莫诺苷在2~5 000 μg·L-1 (r= 0.995 7)线性关系良好,最低定量限为2 μg·L-1.方法精密度、准确度、回收率和基质效应均符合生物样品测定的要求,适合大鼠血浆中莫诺苷浓度的测定.应用该方法进行莫诺苷在大鼠体内的药代动力学研究,给药剂量为20 mg·kg-1,绘制血药浓度-时间曲线,并采用DAS 2.0 计算得主要药代动力学参数:AUC0-∞为(587.6±290.7) μg·min·L-1,Cmax为(334.2±148.0) μg·L-1,Tmax为(0.6±0.3) h,t1/2为(0.7±0.3) h.  相似文献   

7.
头花蓼对α-葡萄糖苷酶的抑制活性研究   总被引:3,自引:3,他引:0  
目的 :研究头花蓼不同溶剂提取物对 α -葡萄糖苷酶的抑制活性。 方法 :采用索氏提取法对头花蓼进行不同溶剂提取,以体外法测定各提取物对 α- 葡萄糖苷酶的抑制作用。 结果: 头花蓼各提取物均具有较好的 α -葡萄糖苷酶抑制活性。其中头花蓼的甲醇提取物抑制活性最高(IC50 1.68 μg·mL-1),乙酸乙酯提取物(IC50 7.27 μg·mL-1)和石油醚提取物(IC50 116.81 μg·mL-1)的活性次之。3个提取物活性均远大于阳性对照acarbose(IC50 1 081.27 μg·mL-1)。且各提取物对 α- 葡萄糖苷酶的抑制作用均具有剂量依赖性。 结论: 头花蓼甲醇提取物对 α- 葡萄糖苷酶活性的抑制效果非常显著,具有很好的开发价值。  相似文献   

8.
研究川续断皂苷VI(asperosaponin VI,A-VI)及其活性代谢产物常春藤皂苷元(hederagenin,M1)在大鼠体内的药代动力学、排泄特征和A-VI 的大鼠血浆蛋白结合率。采用已建立的LC-MS/MS法测定大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中A-VI 和M1 浓度,计算药代动力学参数,并用平衡透析法测定大鼠血浆中A-VI的血浆蛋白结合率。大鼠以低、中、高(0.03,0.09,0.27 g·kg-1)3个剂量分别单次灌胃给予A-VI 后, A-VI 的血药浓度-时间曲线出现双峰现象,Cmax1Cmax2分别为(28.88±49.78)和(4.480±1.872) μg·L-1,(35.19±23.53)和(22.11±16.15) μg·L-1,(73.37±37.28)和(132.2±160.7) μg·L-1;AUC0-t分别为(43.21±37.32),(133.9±102.5),(779.6±876.9) μg·h·L-1;t1/2 分别为(3.3±0.8),(3.2±2.3),(4.5±1.2) h。代谢产物M1相应的Cmax分别为(16.03±9.336),(26.41±11.95),(28.71±5.874) μg·L-1;AUC0-t分别为 (105.6±73.60),(260.0±153.9),(323.1±107.9) μg·h·L-1;t1/2 分别为(4.1±3.4),(4.4±2.3),(3.9±0.9) h。A-VI 和M1 在大鼠体内药动学特征不存在性别差异,按0.09 g·kg-1剂量多次灌胃A-VI后A-VI 和M1 在体内均无蓄积。灌胃 A-VI 后, A-VI 的胆汁和尿液排泄速率-时间曲线也出现双峰现象,灌胃A-VI 6 h以后可以在大鼠粪便中检测到M1。A-VI 在大鼠血浆中的平均血浆蛋白结合率为 92.9%。  相似文献   

9.
通过建立准确灵敏的LC-MS/MS法,测定8只SD大鼠,单剂量尾静脉注射(4 mL·kg-1)脉络宁注射液后,血浆中绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰基奎宁酸(3,4-DCQA)、阿魏酸、肉桂酸的浓度,所测数据使用DASver 1.0软件进行处理,计算主要药动学参数。结果显示,绿原酸、咖啡酸、3,4-DCQA、阿魏酸、肉桂酸的线性范围分别为2.006~1 027 μg·L-1r=0.999 6),1.953~1 000 μg·L-1r=0.999 7),28.51~1.459×104 μg·L-1r=0.998 9),1.836~940.0 μg·L-1r=0.997 7),4.780~2 447 μg·L-1r=0.998 6)。方法学考察5种酚酸类成分血浆样品反复冻融3次、-75 ℃放置20 d、室温放置4 h以及血浆样品处理后的分析物放置24 h的稳定性均良好,日内、日间变异系数(RSD)小于5.0%,精密度和准确度等均符合生物样品分析的要求。大鼠体中绿原酸药代参数:t1/2为(49.78±12.81) min,AUC0-t为(123.55±14.82) mg·min·L-1, CL为(0.004 3±0.000 5) L·min-1;咖啡酸药代参数t1/2为(36.65±10.59) min,AUC0-t为(91.67±11.77) mg·min·L-1,CL为(0.005 7±0.000 7) L·min-1;3,4-DCQA药代参数:t1/2为(50.08±13.78) min,AUC0-t为(278.34±31.82) mg·min·L-1,CL为(0.001 6±0.000 2) L·min-1;阿魏酸药代参数t1/2为(51.39±15.52) min,AUC0-t为(34.72±4.67) mg·min·L-1,CL为(0.000 4±0.000 1) L·min-1;肉桂酸药代参数t1/2为(74.42±18.32) min,AUC0-t为(34.63±4.82) mg·min·L-1,CL为(0.007 7±0.001 1) L·min-1。该文所建立的LC-MS/MS适用于绿原酸等5种酚酸类成分的药代动力学研究。  相似文献   

10.
俞旭平  李钧敏  金则新 《中草药》2009,40(Z1):243-245
目的 建立稳定可靠的SRAP分子标记反应体系,为进一步研究薏苡种质资源的分子鉴定提供依据。方法 采用改进的SDS法提取薏苡种子胚基因组DNA,并采用单因素试验分析Mg2+浓度、dNTP浓度、BSA浓度、模板DNA用量、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量等6个因素对薏苡相关序列扩增多态性(SRAP)扩增结果的影响。结果 建立了薏苡最适的SRAP反应体系:10 μL PCR反应体系中,含1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris·HCl,pH9.0,50 mmol/L KCl,0.1%Triton X-100),1.5 mmol/L Mg2+,0.15 mmol/L dNTP,10 ng模板DNA,10 pmol引物,0.5 U Taq酶。结论 所建立的薏苡SRAP反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定等特点,为薏苡种质资源的分子鉴定提供了良好的基础。  相似文献   

11.
泽兰的化学成分研究   总被引:3,自引:3,他引:0  
目的:研究泽兰的化学成分.方法:用硅胶、反相硅胶、凝胶柱色谱等方法分离化合物,用波谱方法结合理化性质鉴定其结构.结果:从泽兰中分离得到8个化合物,分别为白桦酸(1),arjunetin(2),齐墩果酸-28-O-β-D-葡萄糖酯(3),芹菜苷(4),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(5),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(6),木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸丁酯(7),邻苯二甲酸二丁酯(8).结论:化合物2,3,4,7均为首次从该植物中分离得到.  相似文献   

12.
绒毛诃子与诃子质量评价与比较   总被引:2,自引:2,他引:0  
目的:对诃子与绒毛诃子成分含量等进行比较研究,为完善其质量标准奠定基础。方法:采用性状鉴别、薄层鉴别、HPLC测定其没食子酸成分等。结果:从所测定的13批诃子与11批绒毛诃子没食子酸含量看,诃子含量显著高于绒毛诃子,最高高7倍多。鉴别结果也表明两者差距很大。结论:本文建立的没食子酸的含量测定方法,能够对诃子进行准确的定量,结果可靠,重复性好。建立的薄层鉴别方法,专属性较强,能很好了解两者成分的差异,可以达到鉴别目的。  相似文献   

13.
目的:研究菊科千里光属植物单麻叶千里光Senecio cannabifolius var.integrilifolius的肝毒性吡咯里西啶生物碱.方法:运用多种色谱方法进行分离纯化,应用现代波谱学分析方法进行结构鉴定.结果:从单麻叶千里光的总碱部位中分离得到4个吡咯里西啶生物碱,分别鉴定为:jacobine(1),jacoline(2),jaconine(3),senecicannabine(4).结论:化合物1~4均为首次从该植物中分离得到.  相似文献   

14.
目的:探讨从山东莱芜引种到湖南地区的白花丹参药材的产量及质量.方法:相同条件种植白花丹参和紫花丹参,计算2种丹参根的条数、粗细、根的鲜干质量,采用高效液相色谱法测定丹参中丹参酮ⅡA和丹酚酸B的含量,并对根横切面的显微特征进行研究.结果:引种后的白花丹参有效成分含量符合药典标准,产量显著提高,二者的根横切面显微特征有明显的差异.结论:白花丹参适合在湖南种植,可作为优质的丹参资源在湖南引种并开发利用.  相似文献   

15.

Ethnopharmacological relevance

Scientific validation of ethnopharmacologically used plants and their utilization for therapeutic interventions can be a source of affordable treatment especially for neglected diseases in endemic areas. Conyza sumatrensis is a plant which finds its use in treating malaria like fevers but lacks proper scientific validation. Our study has tried to address this gap by authenticating its traditional use for the treatment of malaria.

Aim of the study

Evaluate the antimalarial activity of extracts derived from Conyza sumatrensis for its ethnopharmacological validation.

Materials and methods

Shade dried leaves were extracted with varying concentrations of ethanol and concentrated for bio-evaluation. Swiss albino mice infected with 1×106 parasitized red blood cells, were orally administered with test extracts for 7 days in two sets of experiments. The first set was used to evaluate alcoholic, hydroalcoholic and aqueous extracts while the second set was used to evaluate the dose response of alcoholic extract ranging from 500–1600 mg/kg. Mean survival time, parasitaemia and haemoglobin levels were considered to interpret the antimalarial potential. Phytochemical analysis for the presence of flavonoids, alkaloids tannins, total phenolics, riboflavin and thiamine was also carried out.

Results

Among the three extracts administered at 1000 mg/kg, chemo suppression was significantly (p<0.001) observed in the alcoholic extract (62.59±12.52%) followed by hydroalcoholic (41.81±19.04%, p<0.01) and aqueous (32.04±19.04%, P<0.05) indicating that the active constituents leach out in ethanol. The dose response study involving the ethanol extract concluded the optimum dose to be 1000 mg/kg, as also evidenced by the haemoglobin levels.

Conclusion

The plant exhibits moderate antimalarial activity which can be further prospected for active fractions or pure molecules for adjunctive therapy.  相似文献   

16.
The present study was undertaken to investigate the protective effect and possible mechanism of aqueous extract from Phyllanthus amarus Schum. et. Thonn. (PA) on ethanol-induced rat hepatic injury. In the in vitro study, PA (1-4 mg/ml) increased %MTT reduction assay and decreased the release of transaminases (AST and ALT) in rat primary cultured hepatocytes being treated with ethanol. Hepatotoxic parameters studied in vivo included serum transaminases (AST and ALT), serum triglyceride (STG), hepatic triglyceride (HTG), tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha), interleukin 1 beta (IL-1beta), together with histopathological examination. In acute toxicity study, single dose of PA (25, 50 and 75 mg/kg, p.o.) or SL (silymarin, a reference hepatoprotective agent, 5 mg/kg), 24h before ethanol (5 g/kg, p.o.) lowered the ethanol-induced levels of transaminases (AST and/or ALT). The 75 mg/kg PA dose gave the best result similar to SL. Treatment of rats with PA (75 mg/(kg day), p.o.) or SL (5 g/(kg day), p.o.) for 7 days after 21 days with ethanol (4 g/(kg day), p.o.) enhanced liver cell recovery by bringing the levels of AST, ALT, HTG and TNF-alpha back to normal. Histopathological observations confirmed the beneficial roles of PA and SL against ethanol-induced liver injury in rats. Possible mechanism may involve their antioxidant activity.  相似文献   

17.
石油菜化学成分研究   总被引:1,自引:1,他引:1  
目的:对民间药材石油菜的化学成分进行研究.方法:用硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等手段进行分离纯化,并通过1H,13C-NMR,MS等波谱方法鉴定结构.结果:分离鉴定了17个化合物,其中酚酸类6个,分别为苯甲酸(benzoic acid,1),对羟基苯甲醛(4-hydroxy benzaldehyde,2),香豆酸(coumaric acid,3),原儿茶酸(protocatechuic acid,4),没食子酸(gallic acid,5),对羟基苯甲酸(4-hydroxy benzoic acid,6);含N化合物6个,分别为3-吲哚甲醛(3-indole carboxaldehyde,7),3-吲哚甲酸(3-indole carboxylic acid,8),4-甲基-(1,2,3)-三唑[4-methyl-(1,2,3)-tfiazole,9],尿嘧啶(uracil,10),菸酰胺(nicotinamide,11),(2S,E)-N-[2-羟基-2-(4-羟基苯)乙酯]阿魏酰胺{(2S,E)-N-[2-Hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl) ethyl] ferulamide,12};5个其他类成分,(+)-去氢催吐萝芙醇[(+)-dehydrovomifoliol,13],正三十一烷(hentriantane,14),β-谷甾醇(β-sitosterol,15),棕榈酸(palmitic acid,16),胡萝卜苷(daucossterol,17).结论:所有化合物均为首次从该属植物中分离得到.  相似文献   

18.
目的:利用高效毛细管电泳-场强放大柱内堆积技术分离测定白花丹参中的水溶性有效成分原儿茶醛,原儿茶酸,丹参素,迷迭香酸和丹酚酸B.方法:采用未涂层熔融石英毛细管柱(75 μm×50.2 cm,40 cm),以含15%甲醇的20 mmol·L-1硼砂(pH 10.0)为运行缓冲液,分离电压28 kV,柱温25℃,检测波长210 nm.进样前压力进水3.4 kPa;电动进样-8kV×3 s.结果:原儿茶醛的线性范围是3.0~60.0 mg·L-1(R2=0.9996);原儿茶酸,丹参素,迷迭香酸,丹酚酸B的线性范围均为1.0~20.0 mg·L-1(R2=0.9991,0.9994,0.9989,0.9998),检测限分别为0.55,0.40,0.25,0.32,0.38μg·L-1,富集倍数高,灵敏度高;将此方法应用于实际样品测定,回收率为97.31%~99.81%.结论:该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于白花丹参的质量控制.  相似文献   

19.
追风伞中黄酮类成分的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:对追风伞中的黄酮类成分进行分离、鉴定。方法:追风伞干燥全草用95%乙醇溶液加热回流提取,减压回收乙醇,浓缩液依次用石油醚、氯仿萃取后,水层部分利用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱、反相Rp-18柱色谱及重结晶等方法进行分离及纯化,并通过1H-NMR,13C-NMR,EI-MS及理化常数对分离化合物进行结构鉴定。结果:从追风伞提取物中分离鉴定9个黄酮类化合物,分别为:木犀草素(1),木犀草素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(2),刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖苷(3),芦丁(4),刺槐素(5),槲皮素(6),槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(7),山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(8),异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷(9)。结论:所得化合物均为首次从追风伞中分离鉴定。  相似文献   

20.
孙吉庆  雷春  侯爱君 《中国中药杂志》2014,39(19):3772-3776
利用各种色谱技术和波谱手段,从凝毛杜鹃茎枝乙醇提取物中分离鉴定了8个酚类化合物,分别为凝毛杜鹃素(1),(2R)-4-(3’,4’-二羟基苯基)-2-丁醇(2),(-)-杜鹃醇(3),白色杜鹃素(4),(+)-异落叶松脂素(5),(-)-南烛木树脂酚(6),南烛木树脂酚-9’-O-β-D-吡喃木糖苷(7),二氢脱氢松柏醇-3a-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(8)。化合物1为新化合物,化合物2,5~8为首次从该植物中分离得到。  相似文献   

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