超氧化物歧化酶在视网膜毛细血管周细胞凋亡中的活性及意义

目的通过检测糖基化终产物（AGE）诱导培养的牛视网膜毛细血管周细胞凋亡及凋亡周细胞中超氧化物歧化酶（SOD）的活性及意义，进一步探讨糖尿病视网膜病变（DR）的发生机制。方法周细胞分别与不同浓度的AGE（0．47、1．88、7．5μmol／L）共同培养4d后，分别检测细胞凋亡、SOD活性，以及SOD对细胞凋亡及凋亡调节基因Bcl-2／Bax比率的影响。结果AGE能以浓度依赖的方式诱导周细胞凋亡（r=0．878，P〈0．01）、降低细胞内SOD的活性（r=-0．878，P〈0．01），而应用SOD能明显抑制AGE作用下的周细胞凋亡及提高凋亡调节基因Bcl-2／Bax的比率.结论凋亡及氧化应激的增加是DRP中周细胞选择性丧失的主要原因，SOD活性的下降是AGE诱导周细胞发生凋亡的关键因素。     

MAPK家族与糖尿病视网膜病变

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是细胞促增殖和传递应激信号的关键激酶，该家族包括ERK、JNK、p38等亚族，最近的研究显示，糖尿病状态下的高糖-蛋白激酶C(PKC)通路、糖基化终产物、氧化应激、生长因子、渗透压、牵张刺激等都可激活MAPK家族，使转录因子活性升高，参与糖尿病视网膜病变的发生，因此阻断MAPK通路将可能成为治疗糖尿病视网膜病变的新策略。     

糖尿病视网膜病变患者红细胞膜Ca~(2 )-Mg~(2 )-ATPase活性变化及相关研究

目的探讨糖尿病视网膜病变发生发展的有关因素。对40例糖尿病机网膜病变患者红细胞膜Ca~(2 )－Mg~(2 )－ATPasc活性进行了检测，并与红细胞内Ca~(2 )－Ms~(2 )－ATPasc含量、空腹血糖、糖基化血红蛋白及红细胞变形指数等进行了分析。结果糖尿病机网膜病变患者红细胞膜Ca~(2 )－Ms~(2 )－ATPasc活性显著下降（P＜0．01），细胞内Ca~(2 )含量增加（P＜0．01）而Mg~(2 )含量则显著下降（P＜0．01）。糖尿病视网膜病变者红细胞膜Ca~(2 )－Ms~(2 )－ATPasc活性下降与空腹血糖、糖基化血红蛋白、红细胞变形指数及红细胞内Ca~(2 )－Ms~(2 )－ATPasc含量等变化密切相关。结论糖尿病视网膜病变患者红细胞膜Ca~(2 )－Ms~(2 )－ATPasc活性异常下降可能是导致或加速视网膜病变发生发展的原因之一。     

糖基化终产物对纯化培养大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

糖尿病性视网膜病变是糖尿病患者严重的眼部并发症，其病因和发病机制尚未阐明。近年来人们认为慢性高血糖引起体内糖基化蛋白的过量沉积，形成糖基化终产物，从而导致各系统的慢性疾病和功能丧失。传统上人们多认为糖尿病性视网膜病变主要是微血管病变，包括：内皮细胞增殖、基底膜增厚、周细胞丧失等。但目前许多临床研究表明：在糖尿病性视网膜病变微血管病变发生以前，糖尿病患者已有视功能改变。动物实验发现在糖尿病早期，     

神经生长因子在糖尿病大鼠视网膜突触可塑性中的作用

目的 探讨神经生长因子(nerve growth factors,NGF)在糖尿病大鼠视网膜突触可塑性中的作用.方法 取清洁级雄性SD大鼠24只,随机分为对照组、糖尿病组、治疗组,每组8只.后两组采用链脲佐菌素诱导糖尿病模型,模型诱导成功后,治疗组给予腹腔注射鼠NGF(800 U·kg-1),每天1次.对照组、糖尿病组给予等剂量生理盐水.12周后,检测丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫荧光技术检测视网膜突触素表达,Western blot检测视网膜突触素、Caspase-3的表达.结果 3组间MDA含量比较,总体差异有统计学意义(F=85.46,P＜0.01);糖尿病组MDA含量较对照组明显升高(P＜0.01),治疗组较糖尿病组明显降低(P＜0.01).3组间SOD活性比较,总体差异有统计学意义(F=17.76,P＜0.01);糖尿病组SOD活性较对照组明显降低(P＜0.01),治疗组较糖尿病组明显升高(P＜0.01).3组间突触素免疫荧光强度比较,总体差异有统计学意义(F=395.42,P＜0.01),糖尿病组较对照组荧光强度明显下降(P＜0.01),治疗组较糖尿病组荧光强度明显升高(P＜0.01).3组间突触素相对表达量比较,总体差异有统计学意义(F=17.27,P＜0.01).糖尿病组较对照组突触素表达明显减少(P＜0.01),治疗组较糖尿病组明显增多(P＜0.01).Caspase-3蛋白相对表达量3组间比较,总体差异有统计学意义(F=217.13,P＜0.01).糖尿病组Caspase-3表达较对照组明显增多(P＜0.01),治疗组较糖尿病组明显减少(P＜0.01).结论 NGF通过降低糖尿病视网膜氧化应激,抑制了细胞凋亡,恢复了视网膜突触数量.提示NGF可能通过氧化应激途径参与了糖尿病视网膜突触可塑性的变化.     

VEGF、IL-6的水平与糖尿病视网膜病变关系的研究

目的:检测2型糖尿病患者眼房水中血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)的含量,并探讨其临床意义.方法:在白内障手术过程中获取66例2型糖尿病患者的房水,采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法测定VEGF和IL-6的含量.根据手术后散瞳眼底检查和眼底荧光素血管造影检查确定糖尿病视网膜病变的分期.实验组分为:无糖尿病视网膜病变组(NDR)21例、单纯型糖尿病性视网膜病变组(BDR)26例、增生型糖尿病性视网膜病变组(PDR)19例,正常对照组为健康的老年性白内障患者20例.结果:NDR组、BDR组、PDR组的房水VEGF含量分别为(240.30±26.15)pg/ml、(292.27±58.91)pg/ml、(477.41±91.01)pg/ml,IL-6含量分别为(160.83±33.41)pg/ml、(238.60±62.23)pg/ml、(389.13±90.35)pg/ml,对照组房水VEGF含量为(140.58±26.27)pg/ml、IL-6含量为(82.72±21.53)pg/ml,对照组与实验组比较差异均有统计学意义(F=113.67,P＜0.01;F=106.53,P＜0.01).实验组房水中的VEGF与IL-6含量有相关性(r=0.995,P＜0.01);糖尿病患者的病程与房水中VEGF(r=0.792,0.826,0.841均P＜0.01)、IL-6(r=0.829,0.817,0.896均P＜0.01)含量有相关性.结论:VEGF、IL-6在糖尿病视网膜病变的形成过程中有重要作用,且两者之间有相关性.     

非酶糖基化终产物及其受体在糖尿病视网膜病变中的作用

综述近年来有关高血糖状态下,蛋白质非酶糖化所产生的糖基化终产物（ａｄｖａｎｃｅｄ ｇｌｙｃａｔｉｏｎ ｅｎｄ ｐｒｏｄｕｃｔｓ,ＡＧＥｓ）及其受体在周细胞衰亡、糖尿病视网膜病变发生过程中的作用,以及ＡＧＥｓ及其受体抑制剂在该病的早期防治中的意义、为糖尿病视网膜病变的发病机制研究和早期防治提供参考。     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶在视网膜毛细血管周细胞凋亡中的活性及意义

目的探讨糖基化终产物（AGE）在糖尿病视网膜病变（DR）发生中的作用。方法培养的牛视网膜毛细血管周细胞分别与不同浓度（0．47、1．88、7．50μmol／L）的AGE共同培养4d后,分别检测细胞凋亡、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-3）活性及caspase-3抑制剂Z—DEVD-fmk对周细胞凋亡及凋亡调节基因Bcl-2／Bax比率的影响。结果AGE能以剂量依赖的方式诱导培养的牛视网膜毛细血管周细胞凋亡（r=0．867,P〈0．01）、增加细胞内caspase-3的活性,而选择性caspase-3抑制剂Z—DEVD—fmk能明显抑制AGE作用下的周细胞凋亡及提高凋亡调节基因Bcl-2／Bax的比率。结论凋亡是DR中视网膜毛细血管周细胞选择性丧失的机制之一,caspase-3活性的增加是AGE诱导周细胞发生凋亡的关键因素。     

视网膜微血管周细胞内明胶酶的表达及影响

目的　检测糖基化终产物 (AGE)对培养的牛视网膜微血管周细胞 (BRPs)分泌明胶酶的作用 ,以探讨糖尿病视网膜病变 (DRP)的发病机制。方法　不同质量浓度AGE( 0、8、3 2、12 5、5 0 0、2 0 0 0 μg/mL)与BRPs作用 4d后 ,明胶酶谱分析细胞所分泌的明胶酶。结果　正常BRPs有明胶酶 A的分泌 ,相对分子质量分别为 72 0 0 0的原酶及 62 0 0 0的活性酶 ;扫描单位分别为 13 3 73± 6 66及 160 18± 15 2 9,另有少量 92 0 0 0的明胶酶 B分泌 ,扫描单位 93 0 1± 5 89。AGE能以剂量依赖的方式抑制BRPs内明胶酶 A的分泌 (原酶和活性酶与AGE相关系数分别为r =-0 798及r =-0 73 4,P <0 0 1)。结论　周细胞分泌明胶酶 A的下降可能是DRP中基底膜增厚的重要原因之一     

糖基化终产物诱导牛视网膜毛细血管周细胞凋亡及凋亡调节基因的表达

目的　研究糖基化终产物 (advancedglycosylationendproducts,AGE)对培养的牛视网膜毛细血管周细胞凋亡及凋亡调节基因Bax、bcl 2表达的影响 ,以探讨糖尿病视网膜病变的发病机制。方法　在体外培养 3～ 6代近融合的视网膜毛细血管周细胞中加入不同浓度的AGE(8、32、12 5、5 0 0及2 0 0 0mg/L)液 ,于 4d后检测不同浓度AGE对牛视网膜毛细血管周细胞凋亡及凋亡调节基因Bax、bcl 2表达的影响。结果　周细胞与AGE作用 4d后 ,呈现出典型的细胞凋亡特征 ;AGE促周细胞凋亡(r=0 878,P <0 0 1)和凋亡调节基因Bax的表达 (r=0 85 5 ,P <0 0 1)及抑制凋亡调节基因bcl 2的表达 (r=- 0 85 0 ,P <0 0 1)呈剂量依赖性 ;而周细胞凋亡率与Bax/bcl 2的比率呈正相关 (r=0 80 8,P<0 0 1)。结论　AGE能以剂量依赖的方式促进周细胞的凋亡 ,周细胞的凋亡率取决于凋亡调节基因Bax/bcl 2的比率。细胞凋亡是糖尿病视网膜病变中毛细血管周细胞早期丧失的一种方式。     

晶状体糖基化终末产物与糖尿病视网膜病变的关系

背景 晚期糖基化终末产物(AGEs)的产生是糖尿病(DM)的重要特征之一,其在DM相关眼病中的表达及其意义仍有待研究. 目的 探讨DM性与非DM(NDM)性白内障患者晶状体中AGEs含量的变化,研究其与糖尿病视网膜病变(DR)程度之间的关系.方法 采用病例对照研究方法,于2014年8-12月从在沈阳何氏眼科医院行超声乳化手术的白内障患者中获取40例40眼的晶状体核,核硬度为Ⅲ-Ⅳ级(Emery分级方法).按照患者是否患有DM分为NDM组(10例)和DM组(30例),然后依据糖尿病视网膜病变国际临床标准将DM组分为无DR(NDR)组、非增生期DR(NPDR)组和增生期DR (PDR)组,每个组均为10例.采用ELISA法对各组患者晶状体中AGEs成分进行定量检测和比较. 结果 NDR组、NPDR组和PDR组患者晶状体中戊糖苷素质量浓度分别为(31.90±5.00)、(35.83±4.22)和(38.59±5.11) pg/ml,CML质量浓度分别为(18.82±3.84)、(19.65±2.12)和(23.77±4.73) μg/L,咪唑酮质量浓度分别为(13.12±2.71)、(14.48±2.01)和(15.37±2.74) pg/ml,均明显高于NDM组的(27.69±1.53) pg/ml、(11.36±1.47)μg/L和(10.21±0.54) pg/ml,差异均有统计学意义(均P＜0.01),PDR组患者晶状体中戊糖苷素和羧甲基赖氨酸(CML)质量浓度均明显高于NDR组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),而NDR组、NPDR组和PDR组间晶状体中咪唑酮质量浓度的差异均无统计学意义(均P＞0.05).受检患者晶状体核中CML质量浓度与戊糖苷素质量浓度间、CML质量浓度与咪唑酮质量浓度间和戊糖苷素质量浓度与咪唑酮质量浓度间均呈中等正相关(r=0.623、0.717、0.669,均P=0.000). 结论 DM组晶状体中戊糖苷素、CML、咪唑酮含量显著高于NDM组.晶状体AGEs的水平或可作为评估DR程度的指标.     

Increased vitreous levels of hydroimidazolone in type 2 diabetes patients are associated with retinopathy: a case-control study

PURPOSE: As advanced glycation endproducts (AGEs) and the vitreous body are both considered to be involved in the development of diabetic retinopathy and hydroimidazolone is one of the most prominent AGEs, we compared vitreous and serum hydroimidazolone in diabetes patients with proliferative diabetic retinopathy (PDR) to levels in non-diabetes controls, co-measuring vitreous albumin and vascular endothelial growth factor (VEGF). METHODS: In a cross-sectional case-control study design, we used immunoassays to compare vitreous and serum hydroimidazolone and VEGF levels in 23 consecutive type 2 diabetes mellitus patients with a median known diabetes duration of 12 years (range 1-38 years) with those in 32 non-diabetes age-matched controls undergoing vitrectomy. RESULTS: Vitreous hydroimidazolone was increased in the PDR group (median 1.3 U/ml, range 0.5-3.3 U/ml) compared with controls (median 0.8 U/ml, 0.5-2.5 U/ml) (p = 0.026). Hydroimidazolone levels in serum and vitreous correlated (r = 0.49, p = 0.019). In PDR, vitreous VEGF levels were increased (median 1600 pg/ml, range 20-14 700 pg/ml) compared with controls (median 7 pg/ml, range 2-500 pg/ml) (p < 0.001). Similarly, vitreous albumin concentration was increased in PDR (median 1.6 g/l, range 0.7-3.0 g/l) compared with controls (median 0.3 g/l, range 0.08-1.9 g/l) (p < 0.001). Albumin could not explain the differences in vitreous VEGF levels in a logistic regression analysis. No correlation was found between vitreous levels of VEGF and hydroimidazolone (r = 0.12, p = 0.59). CONCLUSIONS: Increased vitreous hydroimidazolone is associated with diabetic retinopathy, possibly due to a blood-retinal barrier breakdown. Irrespective of origin, it may add to the ocular damage and needs further causal investigation. Increased VEGF in diabetic vitreous is probably of intraocular origin. It is not associated with vitreous hydroimidazolone.     

晶状体内糖基化终末产物含量与糖尿病视网膜病变程度的关联分析

背景 糖基化终末产物(AGEs)在晶状体中沉积是糖尿病并发症发生的危险因素,研究发现AGEs与晶状体自发荧光有关,且晶状体蛋白为长寿蛋白,其中AGEs的蓄积与糖尿病视网膜病变(DR)程度的关系值得研究. 目的 探讨并分析晶状体中AGEs自发荧光强度变化是否对糖尿病严重程度有预测作用. 方法 采用横断面研究设计,对2015年9-12月在沈阳何氏眼科医院就诊的白内障患者100例100眼进行分析,按照患者有无糖尿病分为非糖尿病组40例40眼和糖尿病组60例60眼,糖尿病组患者再根据眼部并发症情况分为非DR组(NDR组)、非增生期DR组(NPDR组)和增生期DR组(PDR组),每个亚组均为20例20眼.所有患者均评估接受血浆糖化血红蛋白(HbA1c)和餐前血糖(FBG)测定,并采用晶状体荧光显微镜(Clearpath DS120)测定受检眼晶状体自发荧光强度,分析糖尿病患者晶状体自发荧光强度值与HbA1c水平和糖尿病程度的关系.结果 非糖尿病组、NDR组、NPDR组和PDR组间年龄和糖尿病病程总体比较差异均无统计学意义(F=2.587、2.899,均P＞0.05);NDR组、NPDR组和PDR组患者FBG和HbA1c水平均明显高于非糖尿病组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).非糖尿病组、NDR组、NPDR组和PDR组受检眼晶状体自发荧光强度值分别为(0.159±0.032)、(0.256±0.024)、(0.319±0.013)和(0.394±0.035) cd,总体比较差异有统计学意义(F=90.265,P=0.000),其中NDR组、NPDR组和PDR组晶状体自发荧光强度值均明显高于非糖尿病组,且NDR组、NPDR组和PDR组随着病情的加重晶状体自发荧光强度值逐渐增加,差异均有统计学意义(均P＜0.01).糖尿病患者晶状体自发荧光强度值与血HbA1c水平呈中等线性正相关(r=0.654,P＜0.05).结论 糖尿病患者晶状体自发荧光强度值与DR严重程度和血HbA1c水平均有一定关联,在一定条件下可作为DR早期评估的指标之一.     

虾青素对1型糖尿病大鼠代谢性白内障的预防作用及其机制

背景 糖尿病性白内障的发病机制尚未完全明了,研究认为多种代谢通路参与其发病,其中包括氧化应激机制.研究表明虾青素有强大的抗氧化作用,可有效抑制氧化应激损伤及脂质过氧化,但目前鲜见虾青素对糖尿病性白内障防治作用研究的相关报道. 目的 观察虾青素对1型糖尿病大鼠代谢性白内障的预防作用及其机制.方法 将38只SPF级6周龄雄性SD大鼠纳入研究,其中30只大鼠用一次性腹腔内注射质量分数1％链脲佐菌素(STZ)方法制备糖尿病大鼠模型,连续3d血糖值＞16.7 mol/L者为造模成功,应用随机数字表法将造模成功的24只大鼠随机分为糖尿病模型组、低剂量虾青素组和高剂量虾青素组,正常对照组8只大鼠同法注射等容量生理盐水.低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠分别给予50mg/(kg·d)和100 mg/(kg·d)虾青素以及橄榄油和饲料混合物连续喂养3个月,糖尿病模型组大鼠以等容量橄榄油混合饲料喂养,正常对照组以正常饲料喂养.造模后用裂隙灯显微镜行眼前节照相并对晶状体混浊的严重程度分为1～5级;收集大鼠双侧眼球制备晶状体切片,采用苏木精-伊红染色法观察大鼠晶状体的组织病理学改变;采用免疫组织化学法观察晶状体中糖基化终末产物(AGEs)的阳性表达并进行定量分析;采用ELISA双抗体夹心法测定各组大鼠晶状体内AGEs质量浓度、丙二醛(MDA)浓度、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平以及谷胱甘肽(GSH)质量浓度.结果 造模后2、4、6、8、10和12周糖尿病模型组、低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠血糖水平均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.05),而糖尿病模型组、低剂量虾青素组和高剂量虾青素组间大鼠血糖水平的差异均无统计学意义(均P＞0.05).正常对照组大鼠晶状体透明,为1级,糖尿病模型组晶状体混浊均为5级,不同剂量虾青素组大鼠晶状体混浊度多为3～4级.低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠晶状体匀浆内的AGEs质量浓度分别为(7.23±0.50) μg/ml和(7.01±0.37) μg/ml,MDA浓度分别为(1.43±0.22) mmol/L和(1.35±0.16)mmol/L,均低于糖尿病模型组的(7.61±0.45) μg/ml和(1.62±0.42) mmol/L,差异均有统计学意义(均P＜0.05).低剂量虾青素组和高剂量虾青素组大鼠晶状体中GSH质量浓度分别为(272.70±12.53) ng/L和(283.52±16.17) ng/L,SOD含量分别为(55.45±6.47)μmol/(min·L)和(56.73 ±5.12) μmol/(min·L),CAT含量分别为(2.91±0.41) μmol/(min· L)和(3.02±0.13) μmol/(min·L),均明显高于糖尿病模型组的(241.52±15.13) ng/L、(51.67±5.45) μmol/(min·L)和(2.72±0.27)μmol/(min·L),差异均有统计学意义(均P＜0.05),低剂量虾青素组大鼠晶状体中GSH质量浓度和SOD含量明显低于高剂量虾青素组,差异均有统计学意义(均P＜0.05). 结论 虾青素能够延缓1型糖尿病大鼠代谢性白内障的发生和发展,其作用机制与其抗氧化应激反应有关.     

Reactive oxygen species mediates a metabolic memory of high glucose stress signaling in bovine retinal pericytes

AIM: To investigate the role of reactive oxygen species (ROS) and antioxidant mechanism underlying the metabolic memory of bovine retinal pericytes (BRPs) induced by high glucose. METHODS: Effects of high glucose levels and culture time on BRPs viability were evaluated by CCK-8. BRPs were grown in high-glucose media (30 mmol/L) for 4d followed by culture in normal glucose condition (5.6 mmol/L) for 4d in an experimental group. In contrast, in negative and positive control groups, BRPs were grown in either normal-glucose media or high-glucose media for 8d, respectively. The ROS levels, apoptosis, the expression and activity of manganese superoxide dismutase (MnSOD) in BRPs, as well as the protective effect of adeno-associated viral (AAV)-mediated over expression of MnSOD were determined separately by DCHFA, ELISA and Western blot. RESULTS: Comparing the result of cells apoptosis, activity and protein expression of MnSOD and caspase-3, the cell culture system that exposed in sequence in 30 mmol/L and normal glucose for 4d was demonstrated as a suitable model of metabolic memory. Furthermore, delivery of antioxidant gene MnSOD can decrease BRPs apoptosis, reduce activated caspase-3, and reverse hyperglycemic memory by reducing the ROS of mitochondria. CONCLUSION: Increased ROS levels and decreased MnSOD levels may play important roles in pericyte loss of diabetic retinopathy. BRPs cultured in high glucose for 4d followed by normal glucose for 4d could be an appropriate model of metabolic memory. rAAV-MnSOD gene therapy provides a promising strategy to inhibit this blinding disease.     

生长激素、胰岛素样生长因子I与糖尿病视网膜病变的关系

目的探讨生长激素(growth hormone,GH)、胰岛素样生长因子I(insulin-like growth factor I,IGF-I)水平与非胰岛素依赖型糖尿病(noninsulin dependent diabetes mellitus,NIDDM)患者糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法用直接放射免疫法测定61例无DR的NIDDM患者、77例单纯型DR患者、48例增生型DR患者以及38例正常对照者的血清GH和IGF-I水平,用t检验、F检验、相关分析等统计学方法分析各组间的测量值。结果糖尿病组GH、IGF-I分别为(1.659±1.509)、(118.7±52.0)ng/ml,明显高于正常对照组的GH、IGF-I [(0.619±0.351)、(63.6±30.6)ng/ml](P＜0.01);DR组GH、IGF-I水平明显高于糖尿病无DR组(P＜0.01);增生型DR组GH、IGF-I分别为(2.953±1.648)、(159.2±47.5)ng/ml,明显高于单纯型DR组的GH、IGF-I [(1.742±1.523)、(123.6±40.6)ng/ml] (P<0.01).DR严重程度与GH、IGF-I水平呈正相关(P＜0.01)。结论DR 患者血清GH、IGF-I的水平与DR的发生发展可能有关。(中华眼底病杂志, 2000, 16: 30-31)     

恒定性及波动性高糖对牛视网膜周细胞凋亡的影响

目的探讨恒定性高糖及不同频率的波动性高糖对原代培养的牛视网膜周细胞增生、细胞周期及凋亡的影响。方法以体外培养3代近融合的牛视网膜毛细血管周细胞为对象，分别在对照组（5．5mmol／L）、恒定性高糖组（25mmol／L）及不同波动频率的高糖组（5．5mmol／L与25mmol／L交替，频率分别为6h和24h）中孵育6d，采用MTT比色法观察周细胞增生情况；流式细胞术观察周细胞周期情况；TUNEL法检测培养后周细胞的凋亡率。结果周细胞增生受抑制，周期阻滞，出现典型的细胞凋亡特征。恒定性高糖组的作用高于波动性高糖组（P〈0．05）；波动性高糖组内波动频率越高作用越明显（P〈0．05）。结论恒定性高糖较波动性高糖可能具有更强的抑制周细胞增生、周期阻滞及诱导凋亡作用，波动组间波动频率高者比频率低者作用更明显。     

2型糖尿病视网膜病变血清C肽测定及临床意义

目的 探讨血清C肽与2型糖尿病视网膜病变(DR)之间的关系及其临床意义.方法 将2型糖尿病住院病人167例分为3组,其中无糖尿病视网膜病变组(NDR组)60例,非增殖性糖尿病视网膜病变组(NPDR组)76例,增殖性糖尿病视网膜病变组(PDR组)31例.采用化学发光免疫分析法分别测定其空腹血清C肽含量并记录其他可能影响糖尿病视网膜病变发生、发展的因素.根据所测血清C肽值重新将病人分为C肽低值组(LCP组)37例,C肽正常值组(NCP组)78例,C肽高值组(HCP组)52例.结果 NDR组、NPDR组、PDR组空腹血清C肽平均水平呈降低趋势,三组之间空腹血清C肽平均水平比较差异有统计学意义(P＜0.01).LCP组、NCP组、HCP组之间DR发生率比较差异有统计学意义(x2=46.702,P＜0.01).Logistic回归分析显示空腹血清C肽水平与DR有明显相关性(B=-1.415,P=0.000),病程与DR有明显相关性(B=0.404,P=0.000).C肽水平和糖尿病病程呈负相关(r=-0.479,P=0.000),C肽水平与DR的程度呈负相关(r=-0.654,P=0.000).结论 血清C肽在2型DR的发生、发展过程中可能有重要的病理意义,其水平降低可能是2型糖尿病患者DR进展的临床标志.

Abstract：

Objective To explore the relationship of serum C-peptide with diabetic retinopathy (DR)and its clinical significance. Methods A total of 167 inpatients with type 2 diabetes were separated into three groups, NDR group (n=60 examination of ocular fundus showed normal), NPDR group (n=76 examination of ocular fundus showed nonproliferative diabetic retinopathy), PDR group (n=31 examination of ocular fundus showed proliferative diabetic retinopathy). Their fasting serum C-peptide (FCP) was tested with chemiluminescent immunoassay. At the same time, other factors that might affect the onset and progression of DR were recorded. Then all the patients were divided according to their C-peptide fasting levels in quartiles again, low C-peptide group (LCP) [n=37], normal C-peptide group (NCP) [n=78], high C-peptide group (HCP) [n=52].Results In three groups, the mean value of FCP in PDR group was the lowest, the NPDR group had the lower concentration than NDR group, [(0.61±0.33) ng/ml vs (1.34± 0.68) ng/ml vs (2.11 ± 0.80) ng/ml, P ＜0.01]. The incidence of DR among LCP group, NCP group and HCP group showed a significant difference (x2=46.702, P ＜0.01). Logistic regression analysis showed that only C-peptide (B=-1.415, P=0.000), duration of diabetes (B=0.404, P =0.000) were independently associated with DR. A negative correlation was evident between C-peptide levels and duration of diabetes (r=-0.479, P =0.000), a negative correlation was also found between C-peptide levels and DR (r=-0.654, P =0.000). Conclusions Serum C-peptide may have important significance in pathological form of Type 2 DR. The decrease of C-peptide levels may be a maker of the development of DR in type 2 diabetes.