流式细胞仪在细胞凋亡检测中的应用

流式细胞仪(flowcytometry,FCM)是一项集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体新型高科技仪器。它可对单细胞或其他生物颗粒膜表面以及内部的化学成分进行快速定量分析与分选的仪器。随着现代技术的发展使其在分子生物学、免疫学、遗传学、临床医学、药学等领域中的应用有了更加突飞猛进的发展。其具有操作简单、分析精确、重复性好、费用低廉、分析速度快等优点,在临床医学和科研中发挥着越来越重要得作用。细胞凋亡(apoptosis,Apo),又称细胞程序性死亡,是指细胞在一定的生理或…     

流式细胞仪在细胞凋亡检测中的应用

凋亡是一种细胞主动参与的自毁过程,与细胞坏死有根本区别。异常的凋亡状态与多种疾病密切相关,凋亡研究在临床有广泛的应用前景。本文介绍了4种应用流式细胞仪检测凋亡的方法。DNA含量分析最为常用,操作简便、成本低廉;Caspase-3是凋亡的早期检测指标,可以发现细胞内蛋白酶的升高;Annexin-Ⅴ探针能检测凋亡早期胞浆膜的改变;DNA断裂点标记是对凋亡形态学改变特征的流式检测方法。     

流式细胞仪在细胞凋亡检测中的应用

凋亡是一种细胞主动参与的自毁过程，与细胞坏死有根本区别。异常的凋亡状态与多种密切相关，凋亡研究在临床有广泛的应用前景。本文介绍了４种应用流式细胞仪检测凋亡的方法。ＤＮＡ含量分最为常用，操作简便、成本低廉；Ｃaspase－３是凋 亡的早期检测指标可以发现细胞内蛋白酶的升高；Ａnnexin-Ｖ探针能检测凋亡早期胞浆膜的改变；ＤＮＡ断裂 点标记是对凋亡形态学改变特征的流式检测方法。     

流式细胞技术在临床医学检验中的应用

流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM )是集激光、电子物理、光电测量、计算机、细胞荧光化学及单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器。流式细胞术是在单细胞水平上 ,对于处在快速直线流动状态中的大量细胞或生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选 ,该技术已成为现代医学研究最先进的分析技术之一 ,在临床医学中有着非常广泛的应用前景。1　发展史流式细胞仪从诞生至今近 4 0年中经历了发展和完善的过程。从 1973年开始逐渐形成了较为完善的商品化分析仪器 ,如BD公司研制并生产的流式细胞仪 (FluorescenceActivedCellSorter,FACS) ,C…     

流式细胞定量检测细胞凋亡

目的研究流式细胞仪定量检测细胞凋亡。方法用流式细胞仪检测雷公藤多甙对慢性肾疾病患者的外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）凋亡，再用琼脂糖凝胶电泳观察ＤＮＡ电泳情况。结果流式细胞仪出现亚二倍体峰，凋亡细胞百分比明显增多。琼脂糖凝胶电泳呈现特征性的“梯状”带。结论流式细胞仪可定量检测细胞凋亡。     

流式细胞术Annexin Ⅴ细胞凋亡检测方法探讨

目的:研究流式细胞术用Annexin Ⅴ/PI双染方法来检测细胞凋亡的合理的实验操作步骤.方法:将Annexin Ⅴ/PI中的抗体先加入到单个细胞样本中,再加入PI,最后加入Buffer工作液,反应30min后再加入Buffer工作液上机.结果:图像清晰,细胞凋亡率明显增加并与临床和科研的结果一致.结论:Buffer工作液必须在样本加入PI之后再加入,以避免出现所测细胞物理特性的改变.     

流式细胞术检测细胞凋亡的分析软件比较

采用PI染色法 ,以流式细胞术通过检测DNA含量分析细胞凋亡 ,比较ModFitLT及CEL LQuest软件的分析数据。结果显示 :ModFitLT与CELLQuest软件均可分析细胞凋亡 ,ModFitLT软件更客观、准确。我们建议使用ModFitLT软件进行细胞凋亡相对定量分析 ,CELLQuest软件只用于细胞凋亡的定性分析。     

早期细胞凋亡的流式细胞术分析

目的：探讨多参数流式细胞术分析肿瘤细胞早期凋亡的方法。方法：采用Annexin V FITC／PI双染法及JC-1染色法标记食管癌EC6细胞，通过多参数流式细胞术分析X射线、顺铂诱导产生的细胞凋亡情况及线粒体膜电位的变化。结果：随着剂量的增加，凋亡细胞的百分率逐渐增加，线粒体膜电位下降，去极化细胞增多，并且有明显的剂量依赖性。结论：多参数流式细胞术具有广阔的应用前景，短时间内能够获得大量统计学意义上可靠的数据，为探讨细胞凋亡机制、寻找治疗靶点提供了有益线索。     

PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡的影响因素

目的 利用ＰＩ染色流式细胞仪检测细胞凋亡时影响亚二倍体峰位置的因素。方法 用地塞米松诱导ＳＤ大鼠胸腺淋巴细胞凋亡，采用不同的固定剂、固定温度和时间、在悬浮缓冲液洗涤细胞时悬浮不同的时间，然后进行ＰＩ染色流式细胞仪分析。结果４种不同的固定剂中，只有７０％乙醇固定的胸腺淋巴细胞出现亚二倍体峰，而其它３种固定方法无亚二倍体峰出现；乙醇固定的温度以及细胞在悬浮缓中液悬浮的时间对亚二倍体峰的位置有明显的影响     

流式细胞术Annexin V细胞凋亡检测方法探讨

目的：研究流式细胞术用Annexin V/PI双染方法来检测细胞凋亡的合理的实验操作步骤。方法：将Annexin V/PI中的抗体先加入到单个细胞样本中，再加入PI，最后加入Buffer工作液，反应30min后再加入Buffer工作液上机。结果：图像清晰，细胞凋亡率明显增加并与临床和科研的结果一致。结论：Buffer工作液必须在样本加入PI之后再加入，以避免出现所测细胞物理特性的改变。     

流式细胞仪检测正常男性精子细胞凋亡

随着工业化进程加快,人们生活更加方便快捷,生活水平也不断提高,不过人们在享受现代科技成果的同时,也在经受环境污染对健康的危害.特别是大量使用除草剂、杀虫剂、去污剂、洗涤剂等,这些物质被统称为内分泌干扰物(endocrinedisrupting,EDs).它们对男性生殖功能的影响,已引起社会各界的广泛关注[1].     

PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡的影响因素

目的 利用PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡时影响亚二倍体峰位置的因素。方法 用地塞米松诱导SD大鼠胸腺淋巴细胞凋亡,采用不同的固定剂、固定温度和时间,在悬浮缓冲液洗涤细胞时悬浮不同的时间,然后进行PI染色流式细胞仪分析。结果 4种不同的固定剂中,只有70％乙醇固定的胸腺淋巴细胞出现亚二倍体峰,而其它3种固定方法无亚二倍体峰出现;乙醇固定的温度以及细胞在悬浮缓冲液悬浮的时间对亚二倍体峰的位置有明显的影响,而固定时间的长短对其影响较小。结论 不同的固定剂、固定温度和时间以及细胞在悬浮缓冲液悬浮的时间对PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡的结果均有影响,但如条件掌握得当,PI染色是一种检测细胞凋亡的较好方法,具有简单、直观和可以定量的特点。     

DADS诱导人白血病细胞HL-60凋亡的流式细胞术检测

目的 运用流式细胞术检测二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的作用. 方法 实验分对照组和DADS处理组,进行体外细胞培养,进行细胞形态学观察,应用流式细胞术检测凋亡率、早期凋亡细胞以及caspase-3活性. 结果 DADS诱导前后,HL-60细胞形态学发生明显改变,PI单染法检测结果 :随着不同浓度DADS作用HL-60细胞24 h,HL-60细胞出现明显亚二倍峰,细胞周期也发生了相应的改变;Annexin V/PI 双染法检测结果 :10 mg/L DADS作用HL-60细胞4、8、12和24 h后,早期凋亡细胞显著增加,具有明显的时间依赖性(P<0.05);间接免疫荧光流式细胞术结果 显示在DADS诱导HL-60细胞凋亡过程中有caspase-3的活化,且与作用时间呈依赖关系. 结论 流式细胞术检测结果 表明,DADS能有效诱导HL-60细胞凋亡.     

细胞凋亡主要检测方法及其应用

细胞凋亡是在一定的生理或病理条件下,受基因调控的细胞生理性主动死亡的过程,其在维持生物体内环境稳态、组织器官的正常形态、胚胎的正常发育以及生物体的正常生理活动和功能等方面起着不可或缺的作用。凋亡机制的异常会使细胞失去控制,与包括肿瘤在内的许多疾病的发生发展密切相关,准确地对细胞凋亡进行检测是开展凋亡研究的必需步骤。近年来,随着对凋亡研究的深入,在细胞凋亡的识别、确认及机制等方面的研究进展显著,用于检测细胞凋亡的新方法不断涌现,原先使用的技术方法也日趋成熟,在形态学观察的基础上,生物化学、分子生物学和免疫学等方面的技术均已广泛应用于细胞凋亡的检测。     

流式细胞术检测石见穿多糖诱导的肝癌细胞凋亡率

目的 探讨石见穿多糖抑制肝癌细胞SMMC-7721增殖的机制. 方法 利用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI法检测经不同浓度石见穿多糖作用的SMMC-7721肝癌细胞的凋亡率.结果石见穿多糖各浓度组平均细胞凋亡率为(7.87±1.860)%、(13.63±2.87)%、(21.05±2.68)%,显著高于对照组(0.67±0.28)%. 结论 石见穿多糖能够诱导肝癌细胞SMMC-7721凋亡,且凋亡率随着石见穿多糖浓度的增加而增高.     

流式细胞仪检测直方图在常见故障维护中的应用

本文介绍了将流式细胞仪检测直方图与仪器含义性报警结合,更有效地发现仪器不良工作状态的方法,以及相应故障的检修和维护.     

细胞凋亡：流式细胞术DNA含量分析中的第三类信息

喜树碱(CAM)诱导人类急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)细胞,以高渗磷酸-柠檬酸盐缓冲液(PC)处理,并同时用线性放大和对数放大进行DNA含量分析。结果显示,在DNA直方图上,可将亚G1凋亡峰和坏死细胞碎片峰有效地分开,并且不影响G1期细胞与G2期细胞DNA含量间的线性关系。提示流式细胞术DNA含量分析是细胞生物学和临床分析的重要手段。     

流式细胞术在临床医学上的应用

流式细胞术是能在分子水平上对细胞内外因子进行快速定性和定量研究的一种细胞分析和检测的手段,是当代最先进的细胞定量分析技术。是近代细胞生物学、分子生物学、分子免疫学和单克隆技术、激光技术、电子计算机技术等学科高度发展的结晶。其具有测量指标多、采集数量大、可高速分析上万个细胞,而且可同时检测一个样本中的多个被测因子,可进行多参数测量等优点。近年来流式细胞术的发展取得了显著的成果,其应用领域和使用范围也在不断扩大。本文对流式细胞术的工作原理和流式细胞仪的结构进行了简单的概述,并对其在血液学、免疫学、肿瘤学、细菌学、中医学等方面进行了综述。