实时荧光RT-PCR法在手足口病患儿病原检测中的应用

目的:了解核酸检测(RT-PCR)法在抚顺市手足口病患儿病原谱调查中的应用价值,为疾病防控提供依据。方法:在全市范围内收集2013年和2014年疑似手足口病患儿咽拭子、肛拭子标本,使用人肠道病毒通用引物、肠道病毒71型(EV71)引物和萨奇病毒A组16型(Cox A16)引物,采用实时荧光RT-PCR方法进行病原核酸检测。结果:2013年检测标本461份,其中EV71阳性16份,Cox A16阳性316份,其他肠道病毒阳性46份。2014年检测标本253份,其中EV71阳性112份,Cox A16阳性57份,其他肠道病毒阳性35份。两年标本肠道阳性率平均为81.51%,其中EV71型和Cox A16型占阳性标本总数的86.08%。结论:实时荧光RT-PCR方法因具有操作简便、快速和特异性高的优点,非常适合于手足口病患儿病毒核酸的快速分型。EV71型和Cox A16型肠道病毒是抚顺市近两年引起手足口病患儿感染的主要病原体。     

2013年崇左市手足口病实验室检测结果分析

目的对崇左市2013年手足口病实验室检查结果进行分析,了解手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2013年全市各地送检的428例手足口病患者的肛拭子、咽拭子、疱疹液等标本432份,应用Real Time RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒71型(Human enterovirus 71,EV 71)、柯萨奇病毒A组16型(Coxsachie virus A16,Cox A16)。结果 428例手足口病患者的432份各类样本中,检测到EV 71病毒特异性基因片段阳性41份、Cox A16特异性基因片段阳性67份、无标本检测出EV 71和Cix A16混合感染。428例手足口病患者中,Cox A16的检出率较EV 71高,检出率分别为15.65%(67/428)和9.58%(41/428);13例手足口重症患者中4例均为EV 71感染患者、1例为Cox A16。患者人群男性高于女性(1.84:1),差异无统计学意义(χ2=0.001,P>0.05)。肛拭子标本的病毒检出率与咽拭子标本差异无统计学意义(χ2=1.344,P>0.05)。结论 Cox A16是2013年崇左市手足口病的优势病原体,EV 71是手足口重症患者的主要毒株类型。     

玉溪市2010年儿童手足口病的病原学监测分析

目的 对玉溪市2010年1～12月手足口病流行时期该病患儿进行病原学调查,了解导致流行的肠道病毒感染情况.方法 采用逆转录荧光聚合酶链反应(Fluorescence RT-PCR)方法,对238例临床诊断为手足口病患儿的咽拭子标本进行肠道病毒71型和柯萨奇病毒A16型RNA的检测.结果 检测结果73份标本为阳性,阳性检出率为30.67%.其中41例患儿为CoxA16阳性,32例患儿EV71阳性.结论 所检测2010年玉溪市儿童手足口病流行以CoxA16感染和EV71为主,CoxA16和EV71感染患儿的表现相似,临床难以鉴别,重症病例以EV71感染为主;普通病例以CoxA16感染为主.     

2010~2013年濉溪县手足口病病原学及流行病学特征分析

目的了解本地区手足口病(HFMD)病原及流行病学特征,为HFMD防治提供科学依据。方法 251例临床诊断手足口病患者来自濉溪县医院2010年1月至2013年12月住院病例,采集咽拭子标本,应用实时荧光RT-PCR法检测标本中的人肠道病毒(HEV)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)特异性核酸,分析手足口病的流行病学特征。结果251例HFMD患者标本,肠道病毒阳性率为28.69%(72/251),EV71阳性率为19.92%(50/251),Cox A16阳性率为6.77%(17/251),其他HEV阳性率为1.99%(5/251)。72例检测阳性病例中,EV71阳性病例50例占69.44%,Cox A16 17例占23.61%,CoxA16在年检测阳性率方面有统计学意义(P<0.05),EV71病毒在每年病原检测比例中都处于较高水平,为2010~2013年手足口病的优势病原。流行高峰主要是每年的3~6月份,发病年龄主要集中在1~3岁幼儿,肠道病毒检测阳性率在性别、年龄、流行季节方面比较无差异统计学意义(P>0.05)。结论 2010~2013年手足口病流行中,病原体主要为以EV71和Cox A16,其中EV71是优势病毒型,应加强1~3岁婴幼儿手足口病的预防和监测。     

疱疹性咽峡炎患儿体内3种相关病毒检测及临床意义

目的检测疱疹性咽峡炎患儿体内肠道病毒(EV)、巨细胞病毒(CMV)和单纯疱疹病毒-1型(HSV-1)病毒核酸,并分析其临床意义。方法选取2014年3月—2015年8月唐山市妇幼保健院儿科就诊的疱疹性咽峡炎患儿394例,采用实时荧光PCR方法检测肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)RNA以及CMV、HSV-1病毒DNA。结果检出EV71阳性83例,Cox A16阳性79例,其它EV阳性124例,EV总检出率为72.6%;CMV阳性87例;HSV-1阳性21例。EV71合并CMV阳性10例,Cox A16合并CMV阳性11例,其它EV合并CMV阳性21例;EV合并HSV-1阳性2例,HSV-1合并CMV阳性1例。合并CMV感染在EV71和Cox A16组间比较差异无统计学意义(P0.05);CMV合并EV感染率高于HSV-1合并EV(P0.01)。患儿中有69例发展成重症病例,其中单纯EV71阳性26例,单纯Cox A16阳性12例,其它EV阳性6例;单纯CMV阳性5例,单纯HSV-1阳性2例;EV71合并CMV阳性8例,Cox A16合并CMV阳性6例,其它EV合并CMV阳性4例。EV71感染重症率高于Cox A16感染(P0.01),且Cox A16重症率高于其它EV病毒感染(P0.05);单纯CMV和HSV-1感染重症率无统计学差异(P0.05);合并感染重症病例的发生率均高于单个EV病毒感染(P0.01)。结论 EV、CMV和HSV-1检测对疱疹性咽峡炎的诊断有重要意义;疱疹性咽峡炎也可出现重症病例,双重感染对病程发展有明显促进作用。     

湖北省2015年手足口病实验室确诊情况分析

目的分析湖北省2015年手足口病病原学特征,为手足口病科学防控提供依据。方法对手足口病临床诊断病例标本用实时荧光定量PCR法进行肠道病毒检测及EV 71、Cox A16特异性核酸检测。结果全年共检测粪便标本1 308份、咽拭子标本5 131份、疱疹液137份,粪便标本检测阳性率最高。2015年实验室确诊手足口病病例2 880例,其中EV 71、Cox A16和其他肠道病毒感染的构成比分别为21.0%、20.7%和58.3%。EV 71、Cox A16和其他肠道病毒均为男性病例多于女性.三者病例均以1~3岁组为主。4~6月为发病顶峰,Cox A16比EV 71和其他肠道病毒发病峰提前一个月。结论 2015年湖北省手足口病病原主要由其他肠道病毒引起,发病具有明显季节、人群特征。应做好重点人群、重点时段监测,同时进一步加强其他肠道病毒病原深入研究.     

手足口病不同标本类型病原检出率对比分析

目的对比分析手足口病患儿咽拭子和肛周拭子标本的病原检出率。方法采用实时荧光定量PCR技术对310例手足口病患儿的咽拭子和肛周拭子标本进行肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(Cox A16)、肠道通用型病毒检测。结果 310例患儿的咽拭子、肛周拭子标本中,肠道通用型病毒阳性率分别为73.87%、89.68%,EV71阳性率分别为14.52%、20.00%,Cox A16阳性率分别为6.45%、9.35%。两种类型标本中肠道病毒通用型、肠道病毒EV71型、柯萨奇病毒Cox A16型阳性检出率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论手足口病患儿肛周拭子病原标本检出率高,提倡及时优先采集肛周拭子标本。     

大庆市2011年手足口病疫情的病原学检测结果分析

目的通过分析大庆市手足口病(hand-food-mouth disease,HFMD)疫情的病原学检测结果,了解大庆市手足口病疫情流行特征,为疫情的控制和病例的治疗提供科学依据.方法采集手足口病病例的肛拭子或咽拭子标本,提取标本中的核酸,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术,检测肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(Cox A16).结果2011年大庆市手足口病全年共发病1061例,其中155例进行手足口病病原学检测,检测结果中EV71阳性73例(47.10%),阴性70例(45.16%),Cox A16阳性12例(7.74%),阴性0例.1例重症病例(后死亡)EV71阳性.疫情主要集中在6~9月;发病人群以1~4岁幼托儿童和散居儿童为主.结论2011年大庆市手足口病疫情主要由EV71引起,特别要加强对EV71引起的重症、死亡病例的监测.     

EV71和CoxA16感染致手足口病的临床体征与实验室指标的对比分析

目的对比分析肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇A组16型病毒(Cox A16)感染致手足口病的临床体征与实验室指标,为手足口病的诊疗和防控提供依据。方法选择2012年2月至2015年3月在大理白族自治州人民医院接受治疗的600例手足口病患儿为研究对象,根据粪便样本检测分为两组:其中454例为EV71感染,记为EV71组;146例为Cox A16感染,记为Cox A16组。对两组患儿的临床体征以及实验室指标情况进行比较分析。结果两组患儿最高体温比较差异无统计学意义(P>0.05),Cox A16组肢体抖动发生率低于EV71组[23.3%(34/146)比70.0%(318/454)],差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿B淋巴细胞、T淋巴细胞、CD+3CD+4T细胞以及CD+3CD+8T细胞水平比较差异无统计学意义(P>0.05),Cox A16组自然杀伤细胞水平患儿高于EV71组[(13±5)%比(8±3)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论在EV71和Cox A16感染致手足口病的鉴别方面,肢体抖动这一临床体征能起到一定的辅助作用,同时患儿机体自然杀伤细胞的水平亦能用于两种感染的有效鉴别,具有重要的临床意义。     

泰安市2013年手足口病病原体检测结果分析

目的对2013年泰安市手足口病病例进行病原体检测和分析。方法对临床诊断为手足口病病例的粪便标本505份,用实时荧光定量PCR筛选出肠道病毒通用引物阳性的标本,再分别使用Cox A 16和EV71型的特异引物进行分类检测。结果标本总肠道病毒阳性率为95.05%（408/505）,Cox A 16阳性率为31.09%（157/505）,EV71阳性率为27.92%（141/505）,其他肠道病毒阳性率为36.24%（183/505）,Cox A 16的阳性率高于EV71。发病年龄多为1-6岁,男性多于女性。结论 2013年度泰安市的手足口病疫情以EV71和Cox A 16并发为主,采用分子生物学方法检测手足口病的病原体,对手足口病的监测及防控具有重要作用。     

人肠道病毒71型和科萨奇病毒A组16型所致手足口病的主要临床表现和预后

目的:人肠道病毒71型(human Enterovirus 71,EV71)和科萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,Cox A16)是引起手足口病的主要病毒病原,本文比较了两种病毒致手足口病的主要临床表现及其预后?方法:收集2011年1月至6月南京医科大学附属南京市儿童医院手足口病患者共570例的临床资料及咽拭子标本,采用实时荧光探针PCR法检测患者的咽拭子标本的病毒类型,比较EV71和CoxA16两种病毒引起的手足口病的主要临床表现及其预后?结果:350例EV71感染患者平均年龄(2.5 ± 1.7)岁,220例Cox A16感染患者平均年龄(2.3 ± 1.3)岁?EV71感染患者的住院时间长(P < 0.01);发热超过39℃且持续时间长(P < 0.001);肌阵挛性反射?口腔溃疡都明显偏高(P < 0.05);咳嗽?热性惊厥明显偏低(P < 0.05);嗜睡等中枢神经系统感染的临床表现明显偏高(P < 0.05),其中EV71感染患儿经治疗后有3.7%留有四肢肌力下降等后遗症,并有5例死于心肺衰竭;CoxA16感染的患者经过治疗后都治愈且没有留下后遗症?结论:南京地区2011年1月到6月引起的手足口病病毒以EV71为主?相对于Cox A16,EV71引起的临床表现严重?预后差?     

FQ-PCR法检测遵义地区由EV71感染引起儿童手足口病临床特征研究

目的:了解遵义地区各型肠道病毒感染引起手足口病的流行病学特征,为预防和诊断遵义地区的手足口病提供理论依据。方法:采用FQ-PCR的方法对咽拭子进行肠道病毒通用型、肠道病毒EV71型和Cox A16的检测,并采集疑似手足口病患儿和血液样本,进行辅助检查的结果对比。结果:获得各种类型肠道病毒的患儿,无性别差异,而就诊方式和年龄的大小与感染肠道病毒的类型存在有统计学意义的差异。结论:在手足口病大规模流行时,通过采集咽拭子进行RT-PCR检测,对手足口病的诊断有重要意义。     

2012-2018年西宁地区手足口病病原检测结果分析

目的分析2012-2018年西宁地区手足口病病原学特点,为手足口病防控提供科学依据。方法应用实时荧光RT-PCR法对2012-2018年西宁地区疑似手足口病病例咽拭子标本进行肠道病毒71型(enterovirus 71,EV 71)、柯萨奇病毒A组16型(coxsackie virus A16,Cox A16)和非EV 71/非Cox A16的其他肠道病毒(其他EV)进行核酸检测,并对结果进行分析。结果共检测标本2855份,检出核酸阳性标本2176份,病毒核酸阳性率为76.22%,其中EV 71、Cox A16和其他肠道病毒核酸阳性率分别为28.68%、25.09%和46.23%,以其他肠道病毒为主要型别。发病人群集中在1~5岁组,构成比为91.04%(1981/2176);男性病例阳性率稍高于女性(χ^2=8.647,P=0.004);全年均有发病,发病高峰在6~7月,具有明显的季节性。结论西宁地区各年手足口病病原谱有所不同,近几年其他肠道病毒所占比例逐渐增大,应加强对EV 71和Cox A16以外其他肠道病毒的监测,为更好地做好手足口病的防控工作提供病原学依据。     

血清淀粉样蛋白A在不同类型手足口病急性期中的应用

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)在手足口病急性期轻症患儿、危重症[包括肠道病毒71型(Enterovirus71,EV 71)、柯萨奇病毒A组16(Coxsackievirus A 16,Cox A 16)型]感染患儿中的诊断价值。方法选取2015年7~12月间轻症手足口患儿442例,危重症患儿85例,其中包括EV71感染患儿57例、Cox A16感染患儿28例,入院24 h内检测各组患儿SAA水平,并进行统计学对比分析。结果轻症组手足口病患儿SAA水平显著高于危重症组,差异有统计学意义(P0.05);危重症组手足口患儿EV71型、Cox A16型SSA水平组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论 SAA在手足口病患儿急性期明显升高,而且在Cox A16组、EV71组中升高低于轻症组。SAA在儿童手足口病的辅助诊断、轻重症的早期鉴别诊断以及治疗中起到重要作用,值得临床广泛应用。     

实时荧光PCR技术在手足口病原学检查中的应用

目的：采用实时荧光PCR法检测手足口病患儿病原体。方法：收集40例本市确诊手足口病患儿的肛拭子样本,进行肠道病毒筛选和柯萨奇病毒16型与肠道病毒71型鉴别与分析。结果：实时荧光PCR法检测40例患儿肛拭子标本使用通用型试剂盒检出22例阳性,其中9例为CVA-16感染,12例为EV71感染,发病3 d内采集标本检出阳性患儿占75%。结论：CVA-16和EV71肠道病毒是手足口病的主要病原体,手足口病病毒检出率与标本的采集时间相关性,实时荧光PCR技术对手足口病的病原诊断具有重要价值。     

165例手足口病重症患者病原学检测分析

目的分析2010年百色市手足口病重症病例的病原学特点,为制定防控措施提供依据。方法取患者咽拭子和肛拭子标本,用荧光PCR法检测肠道病毒通用型(EV)、柯萨奇病毒A16型(CoxA16)、肠道病毒71型(EV71)。结果在165例临床诊断为手足口病重症的患者中,肠道病毒核酸阳性137例,阳性率83.03%。其中EV71感染91例,占55.15%;CoxA16感染7例,占4.24%;其他型肠道病毒感染39例,占23.64%。结论 2010年引起百色市重症手足病的病原体主要为EV71病毒。应做好该病的防控工作,向大众普及健康卫生常识。     

惠州地区2010年手足口病实验室检测分析

目的了解惠州市手足口病例肠道病毒的感染情况,为制定预防和控制肠道病毒感染策略提供依据。方法采集2010年5月至12月惠州市中心人民医院、惠州市第一人民医院等全市各大医院的998例疑似手足口病患者的疱疹液、脑脊液、咽拭子、粪便等标本,采用实时荧光RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒（EV）、肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CA16）。结果在检测的682份EV阳性标本中,EV71阳性率偏高,为总数的48.9%,而CA16阳性率较低,为总数的5.71%;在998例疑似手足口病患者中,男性患者居多,占62.12%,女性患者相对较少,占37.88%;0～4岁的儿童是手足口病的高发人群,占所有患者的92.99%;5～7月的夏季为手足口病感染的高峰期,其阳性率占98.9%。结论惠州市2010年5月～12月手足口病的病原体以肠道病毒71型为主,0～4岁的男性儿童是感染肠道病毒的高危人群,5～7月的夏季较为高发。     

2012年贵阳地区住院患儿手足口病的病原学研究

目的：了解2012年贵阳地区儿童手足口病住院患者的病原体分布情况,为手足口病的诊断、治疗及预防提供依据。方法收集3179例手足口病患儿资料,用荧光定量PCR法进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）定量分型。结果共检测手足口病病例标本3179份,CA16阳性151份,占4．75％;EV71型331份,占10．41％;CA16和EV71混合感染7份,占0．22％;其他型肠道病毒897份,占28．22％。全年有2个发病高峰,分别为4～7月及10～11月,发病年龄主要集中在5岁以下儿童,其中0～3岁发病最高;男性患儿多于女性。结论2012年贵阳地区儿童手足口病住院患者的病原学分布以其他型肠道病毒和EV71型为主。     

唐山市手足口病病原学特征及重症病例危险因素研究

目的分析唐山市手足口病病原体分布特征、手足口病重症危险因素,比对不同类型临床标本检出率,为做好手足口病预防和治疗提供科学依据。方法对2009-2011年唐山市手足口病临床诊断病例肛拭子及咽拭子标本进行肠道病毒71型(Human enterovirus 71,EV 71)、柯萨奇病毒A16型(Coxsackie virus A16,Cox A16)及其他肠道病毒(Pan-enterovirus,PE)核酸检测及重症病例危险因素分析。结果 1 286例被检测手足口病病例标本中859例为肠道病毒阳性,阳性率为66.80%(859/1 286)。病原体构成以EV 71病毒感染率最高,占37.37%。肛拭子标本检出率明显高于咽拭子标本检出率,低龄、北部地区和EV 71均为手足口病并发重症病例的危险因素,感染EV 71引发重症是Cox A16和其他肠道病毒的6.3倍和2.9倍。结论 2009-2011年引起唐山市手足口病的主要病原体是EV 71,提高病原体检出率对手足口病的临床治疗、流行病学调查意义重大。