局部应用糖皮质激素对鼻息肉组织中Eotaxin蛋白的影响

目的观察局部应用糖皮质激素对鼻息肉组织中嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）表达的影响,探讨糖皮质激素治疗鼻息肉的可能机制。方法随机选取15例鼻息肉患者,以同期手术的6例鼻中隔偏曲者的下鼻甲黏膜组织作对照,采用免疫组织化学SP法,检测在激素治疗前、后Eotaxin在鼻息肉组织中的表达。结果激素治疗前,Eotaxinr阳性表达主要分布在鼻息肉组织的黏膜上皮细胞、炎性细胞及腺体、血管内皮细胞的细胞质中;激素治疗前Eotaxin蛋白的表达比对照组显著增高（P〈0．01）;激素治疗后,Eotaxin在鼻息肉组织黏膜上皮细胞、炎性细胞、血管内皮细胞中表达显著降低,且差异均有统计学意义（P均〈0．01）。结论糖皮质激素抑制鼻息肉组织黏膜上皮细胞、炎性细胞、血管内皮细胞中Eotaxin蛋白的表达,减少嗜酸性粒细胞募集和活化,从而减轻鼻息肉的炎症反应程度,是其治疗鼻息肉的作用机制之一。     

局部应用糖皮质激素对鼻息肉组织中水通道蛋白8表达的影响

目的观察鼻腔局部应用布地奈德喷雾剂(budesonide,BUD)对鼻息肉组织中水通道蛋白8(aquaporin8,AQP8)表达的影响,探讨AQP8在鼻息肉发病中的作用及了解糖皮质激素治疗鼻息肉的作用机制。方法40例鼻息肉患者随机分为治疗组20例,对照组20例。治疗组术前2周给予BUD喷鼻;对照组术前未予处理。术后采用免疫组织化学技术检测两组鼻息肉组织标本AQP8的表达情况,分析组间差异。结果治疗组鼻息肉组织中血管内皮和腺体中的AQP8阳性细胞数显著低于对照组(P0.01),而上皮细胞中的AQP8阳性细胞数增加,但与对照组的差异无统计学意义(P0.05)。结论鼻腔局部应用BUD可以减轻水肿程度,缩小鼻息肉体积,可能与AQP8的表达改变有关。     

蛋白激酶C抑制剂对离体鼻息肉组织中嗜酸粒细胞凋亡的影响

OBJECTIVE: To study the influence of the inhibitor of protein kinase C (PKC), Iso-H7 [1-(5-lsoquinolinyl-sulfony)-3-methylpiperazine dihydrochloride] on eosinophil apoptosis in nasal polyp tissues. METHODS: Nasal polyp tissues were cultured and divided into two groups, test group (with Iso-H7 in different concentration) and control group (without the inhibitor of PKC), to check out the influence of Iso-H7 on eosinophil apoptosis in nasal polyps. The nasal polyp tissues were cultured in Iso-H7 in concentration of 10(-6), 10(-4), 10(-2) mol/L for 1 d, 3 d, and 5 d, respectively. Eosinophil apoptosis index was measured with TUNEL (terminal-deoxynucleotidyl transferase d-UTP nick end labeling), in situ hybridization and MGG staining to identify eosinophil apoptosis. RESULTS: Occasionally, there was little eosinophil apoptosis in two groups in 1 d, but in 3 d, There were a great deal of eosinophil apoptosis in test group. The eosinophil apoptosis indexs of the two groups were significantly different (P < 0.01). The indexs of eosinophil apoptosis was not significantly higher in 3 d than that in 5 d in test groups (P > 0. 05), but significantly higher than that in 1d (P < 0. 01). CONCLUSIONS: Iso-H7 takes a important role in accelerating eosinophil apoptosis. The inhibitor of PKC could significantly promote eosinophil apoptosis in nasal polyps. There is no dosage and time dependence of PKC inhibitor in regulating eosinophil apoptosis of nasal polyps.     

蛋白激酶C抑制剂对离体鼻息肉组织中嗜酸粒细胞凋亡的影响

目的　研究蛋白激酶C(proteinkinaseC ,PKC)抑制剂对鼻息肉组织嗜酸粒细胞凋亡的作用。方法　用细胞培养的方法 ,观察研究PKC抑制剂——— 1 (5 异喹啉硫酰氨 ) 3 甲基哌嗪 [1 (5 lsoquinolinyl sulfony) 3 methylpiperazinedihydrochloride ,Iso H7]对鼻息肉组织嗜酸粒细胞凋亡的影响 ,即将鼻息肉组织分为 2组 ,实验组在培养液中加不同浓度 (10 -6,10 -4,10 -2 mol/L)的抑制剂———Iso H7,分别在培养后的第 1、3、5天 ,各取出 1块 ,常规石蜡包埋 ,连续切片 ,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记法 (terminal deoxynucleotidyltransferased UTPnickendlabeling ,TUNEL)、凋亡原位杂交和MGG(May GrunwaldGiemsa)双染进行嗜酸粒细胞凋亡指数测定 ;对照组不加PKC抑制剂。结果　①培养第 1天各浓度下的 2组标本均偶见凋亡的嗜酸粒细胞 ,培养到第 3天 ,实验组可见大量的嗜酸粒细胞凋亡 ,对照组第 1天与实验组第 1天比较嗜酸粒细胞凋亡指数差异无显著性 (t=1 72 0 0 ,P >0 0 5 ) ;②在实验组中 ,培养第 1天凋亡的嗜酸粒细胞与第 3天比较差异有显著性 (t=7 0 2 5 6 ,P <0 0 0 1) ,实验组第 3天与第 5天比较差异无显著性 (t=0 93995 ,P >0 0 5 ) ,但可见部分凋亡的嗜酸粒细胞膜破裂。结论     

糖皮质激素对鼻息肉组织中eotaxin蛋白的影响

目的：探讨糖皮质激素治疗鼻息肉的可能机制。方法：随机将15例鼻息肉患者均分为强的松治疗组、地塞米松治疗组和未治疗组,以同期手术的5例鼻中隔偏曲者的下鼻甲黏膜组织作对照,用免疫组化法测定鼻息肉组织中嗜酸细胞趋化因子（eotaxin）蛋白的表达。结果：激素未治疗组eotaxin蛋白的表达比对照组显著增高（P＜0.01）;激素治疗组eotaxin蛋白表达下降,与未治疗组比较差异有统计学意义（P＜0.01）,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论： eotaxin蛋白是诱导嗜酸细胞在鼻息肉组织中浸润的重要趋化因子,糖皮质激素可下调eotaxin蛋白的表达,发挥抗嗜酸细胞炎症的作用。     

蛋白激酶C导致鼻息肉组织中嗜酸粒细胞浸润增多

目的　探讨蛋白激酶C (proteinkinaseC ,PKC)在鼻息肉组织中嗜酸粒细胞 (eosinophlis,EOS)浸润增多的意义。方法　采用原位杂交和免疫组化法 ,对 2 6例鼻息肉组织和 2 0例下鼻甲黏膜进行PKC和促细胞凋亡基因Bax、抑凋亡基因B细胞淋巴瘤、白血病 2 (B celllymphoma leukemia 2 ,Bcl 2 )进行检测 ;用May Gr櫣ｎｗａｌｄ Giemsa(MGG)常规染色鉴别EOS。结果　①EOS中Bcl 2mRNA及其蛋白的阳性细胞表达率鼻息肉组均高于下鼻甲组 (P <0 0 1) ,而鼻息肉组EOS中BaxmRNA及其蛋白的阳性细胞的表达率均略高于下鼻甲组 ,但差异不显著 (P >0 0 5 ) ;②鼻息肉组 2 6例EOS中均有PKC表达 ,而下鼻甲组EOS只有 7例偶有PKC表达。 2组标本EOS中PKC的表达率差异有显著性。且鼻息肉组嗜酸细胞中PKC与Bcl 2mRNA及其蛋白的表达分别呈明显的正相关 (r1 =0 0 875 ,r2 =0 0 82 3,P <0 0 1)。结论　鼻息肉EOS中PKC表达增多与凋亡抑制密切相关 ,推测激活PKC传导途径是鼻息肉组织EOS凋亡抑制之一     

蛋白激酶C在鼻息肉组织嗜酸性粒细胞浸润增多中的调控作用

目的 :探讨蛋白激酶C(PKC)何种亚型对鼻息肉组织中嗜酸性粒细胞 (EOS)浸润增多具有调控作用。方法 :采用原位杂交法和免疫组织化学MGG染色 ,观察 2 6例鼻息肉组织中PKC几种亚型PKCα、PKCβ1、PKCβ2 、PKCγ的表达 ,分析何种亚型在鼻息肉EOS增多中起调控作用。 结果 :2 6例鼻息肉组织EOS中均有PKC表达 ,且与Bcl 2mRNA及其蛋白成正相关 (r1=0 .0 87 5 ,r2 =0 .0 82 3,P <0 .0 1) ,其中PKCα为强表达 ,而PKCβ1、PKCβ2 为弱表达 ,PKCγ则不表达。结论 :EOS增多主要是由于激活了PKC这一信号传导途径 ,使EOS凋亡受到抑制、生存延长 ,致使其数量增多 ,且主要是PKC亚型中的PKCα在鼻息肉组织EOS增多中起调控作用     

全身应用激素对鼻息肉组织中Eotaxin表达的影响

目的：观察全身应用糖皮质激素对鼻息肉组织中Eotaxin表达的影响。方法：采用免疫组织化学SP法,检测在激素治疗前后Eotaxin在鼻息肉组织中的表达,运用HPIAS-2000高分辨率图像分析系统分别对激素治疗前后鼻息肉组织的黏膜上皮细胞、血管内皮细胞、炎性细胞进行吸收度测定。结果：糖皮质激素治疗前,Eotaxin阳性表达主要分布在鼻息肉组织的黏膜上皮细胞、炎性细胞及血管内皮细胞的细胞质中;激素治疗后,Eotaxin在鼻息肉组织黏膜上皮细胞、炎性细胞、血管内皮细胞中表达显著降低,且均差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论：糖皮质激素抑制鼻息肉组织黏膜上皮细胞,炎性细胞,血管内皮细胞中Eotaxin蛋白的表达,减少嗜酸粒细胞募集和活化,从而减轻鼻息肉的嗜酸粒细胞性炎症反应程度,可能是其治疗鼻息肉的作用机制之一。     

糖皮质激素对鼻息肉组织中细胞因子Eotaxin、Eotaxin-2表达的影响

目的：观察嗜酸粒细胞趋化蛋白（Eotaxin）、嗜酸粒细胞趋化蛋白-2（Eotaxin-2）在鼻息肉组织中的表达,研究Eotaxin、Eotaxin-2对嗜酸粒细胞的趋化作用,探讨糖皮质激素（地塞米松）治疗对Eotaxin、Eotaxin-2表达的影响。方法：采用免疫组织化学SP法检测Eotaxin、Eotaxin-2在鼻息肉组织中的表达,HPIAL-2000型彩色全自动图像分析仪进行阳性细胞吸收度测定,对糖皮质激素治疗前后的差异进行分析。结果：①Eotaxin在鼻息肉黏膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞、黏膜下浸润炎性细胞均有阳性表达;糖皮质激素治疗后Eotaxin在黏膜上皮细胞、黏膜下浸润炎性细胞及血管内皮细胞中的表达显著降低,治疗前后差异有统计学意义（P〈0．05）;治疗后嗜酸粒细胞数减少,治疗前后差异有统计学意义（P〈0．05）。②Eotaxin-2在鼻息肉黏膜上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞、黏膜下浸润炎性细胞中均有阳性表达;激素治疗后,Eotaxin-2在黏膜上皮细胞显著降低,治疗前后差异有统计学意义（P〈0．01）;在黏膜下浸润炎性细胞中表达显著降低,治疗前后差异有统计学意义（P〈0．05）。Eotaxin-2在鼻息肉黏膜上皮细胞中表达最高,糖皮质激素治疗后对Eotaxin-2在黏膜上皮细胞中的表达影响最大。结论：①Eotaxin和Eotaxin-2在鼻息肉组织中均有高表达;②通过下调鼻息肉黏膜上皮细胞、炎性细胞和血管内皮细胞Eotaxin蛋白的表达,减少了嗜酸粒细胞募集和活化,从而减轻鼻息肉的嗜酸粒细胞性炎症反应程度,是糖皮质激素控制鼻息肉症状的重要途径之一。     

鼻息肉中诱导型一氧化氮合酶、Bax及Bcl-2的表达及相关性研究

目的:检测鼻息肉组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达及相关性。方法:30例鼻息肉组织,应用TUNEL方法检测其凋亡情况;免疫组织化学SABC法检测iNOS及Bax、Bcl-2的表达;western blot方法检测iNOS、Bax、Bcl-2的表达。结果:①TUNEL方法检测凋亡细胞位于鼻息肉表层上皮细胞及腺体上皮细胞,均为弱阳性。②免疫组织化学法检测iNOS、Bax、Bcl-2均表达于鼻息肉组织上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞和浸润的炎性细胞,阳性表达定位于细胞质,其中Bax表达为弱阳性,iNOS、Bcl-2表达为强阳性。③Western blot检测3种蛋白均有表达条带,iNOS、Bal-2条带清晰,Bax条带软弱,差异有统计学意义(P<0.01);iNOS与Bcl-2的灰度值比值呈正相关(r=0.851,P<0.01);iNOS与Bax的灰度值比值呈负相关(r=-0.714,P<0.01)。结论:鼻息肉组织中存在抗凋亡和促凋亡2种蛋白,iNOS抑制细胞凋亡,可能对鼻息肉的发生、发展起重要的促进作用。     

Fas及Bcl-2在鼻息肉组织中的表达及意义

目的：探讨Fas和Bcl 2在鼻息肉组织中的表达及与鼻息肉发病的关系。方法：应用S P免疫组化法检测36例鼻息肉组织及19例下鼻甲组织中Fas和Bcl 2的表达情况。结果： （1）Fas在鼻息肉上皮及腺上皮的表达弱于对照组（P＜0.05）;（2）Bcl 2在鼻息肉上皮及腺上皮的表达强于对照组（P＜0.05）;（3）鼻息肉上皮细胞中Fas、Bcl 2蛋白的表达无相关性（P＞0.05）。结论：（1）Fas和 Bcl 2在鼻息肉发生发展中起重要作用;（2）在NP上皮细胞中, Fas和Bcl 2无相关性,因此这两种凋亡基因在NP的形成过程中各起独立作用,协调抑制NP上皮细胞的凋亡。     

Bcl—2,Bax蛋白产物在鼻咽癌中的表达,分布及意义

目的：探讨Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白产物在鼻咽癌组织中的表达情况。方法：应用免疫组化技术Ｓ－Ｐ法,对４２例ＮＰＣ和１０例正常鼻咽粘膜组织标本,进行了调亡相关基因Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白产物检测。结果：（１）在正常鼻咽粘膜中,Ｂｃｌ－２蛋白主要分布在基底层细胞,而Ｂａｘ蛋白分布在基底层以上细胞;（２）在ＮＰＣ组织中,Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白产物表达阳性率为８５．７％和８３％,且Ｂｃｌ－２蛋白表达与ＢＰＣ颈淋     

鼻息肉组织嗜酸粒细胞中水通道蛋白-1和抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达及意义

目的 明确水通道蛋白-1(aquaporin-1,AQP-1)mRNA、抗凋亡基因Bcl-2 mRNA在鼻息肉组织中的表达、分布及其相关性,探讨AQP-1 mRNA在鼻息肉组织嗜酸粒细胞中表达的意义。方法 16例鼻息肉组织标本来源于鼻息肉切除的患者(女11例,男5例,年龄20-65岁);10例下鼻甲黏膜组织来源于有变应性鼻炎病史的鼻整形患者(女7例,男3例,平均年龄16-58岁)。上述标本取组织相邻切片,应用原位杂交方法检测AQP-1 mRNA和Bcl-2 mRNA的表达;以麦格-姬姆萨(May-Griunwald-Giemsa,MGG)染色法鉴别嗜酸粒细胞。结果 16例鼻息肉组织嗜酸粒细胞中均有AQP-1 mRNA和Bcl-2 mRNA表达,其阳性细胞表达率分别为(93.16±13.25)％;(84.74±12.10)％;而10例下鼻甲组织嗜酸粒细胞中均有Bcl-2 mRNA表达,但仅有4例表达AQP-1 mRNA;AQP-1mRNA和Bcl-2 mRNA在下鼻甲组织嗜酸粒细胞中阳性细胞表达率分别为(19.54±4.98)％和(16.45±3.12)％。AQP-1 mRNA与Bcl-2 mRNA在鼻息肉组织嗜酸粒细胞的表达呈明显正相关(r=0.875,P<0.01)。结论 AQP-1能够平衡鼻息肉组织嗜酸粒细胞内外液体渗透压,维持其存活,在嗜酸粒细胞抗凋亡中具有重要的意义。     

变应性鼻炎大鼠鼻黏膜Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达

目的 :探讨变应性鼻炎 (AR)大鼠鼻黏膜凋亡相关基因Bcl 2mRNA及其蛋白的表达 ,以进一步了解变应性鼻炎的发病机制。方法 :将 2 0只大鼠随机分为实验组和对照组 ,每组 10只。实验组以卵清蛋白腹腔注射致敏 ,继之鼻局部激发建立变应性鼻炎动物模型。取实验组与对照组动物鼻呼吸区黏膜 ,行Bcl 2mRNA原位杂交染色、Bcl 2与Bax蛋白免疫组化染色 ,并行苏木精 伊红染色以资对比。结果 :实验组Bcl 2mRNA与Bcl 2蛋白主要表达于鼻黏膜腺体细胞 ,其次是上皮层 ,鼻分泌物中可见大量呈强阳性反应的嗜酸性粒细胞 ,Bcl 2mRNA与Bcl 2蛋白表达水平显著高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,Bax蛋白与Bcl 2蛋白表达部位一致 ,两组表达水平差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :变应性鼻炎大鼠鼻黏膜凋亡调控基因Bcl 2mRNA及其蛋白表达上调 ,是变应性鼻炎鼻分泌物增多及鼻黏膜上皮破坏的机制之一     

Bcl-2和Bax在自发性糖尿病小鼠耳蜗中的表达研究

目的观察自发性糖尿病小鼠耳蜗组织细胞凋亡及Bcl-2和Bax基因的表达。方法非肥胖性糖尿病（non-obese,diabetes,NOD）雌鼠分为糖尿病4周组（D4组）、糖尿病12周组（D12组）和正常对照组（C组）。应用吖啶橙-碘化丙啶（AO-PI）荧光染色和DNA缺口末端原位标记法（TUNEL）检测耳蜗凋亡细胞;免疫组织化学法和Western blot技术检测Bcl-2和Bax在糖尿病耳蜗组织中的表达。结果 NOD小鼠耳蜗可见大量凋亡细胞,D12组比D4组明显增多（P〈0.05）;两组底回毛细胞较顶回凋亡率明显增高（P〈0.05）。D4组耳蜗中Bax在细胞浆内呈阳性表达,Bcl-2在细胞核及细胞浆内均呈阳性表达;D12组Bax在细胞核及细胞浆内均呈阳性表达,而Bcl-2在细胞浆内呈阳性表达;与C组比较,D4组Bax与Bcl-2表达显著增高（P〈0.05）,D12组Bax表达显著增高（P〈0.05）,但Bcl-2表达下调（P〈0.05）;D4组Bax表达较D12组显著降低（P〈0.05）,但Bcl-2表达较D12组显著增高（P〈0.05）。结论自发性糖尿病小鼠耳蜗存在明显细胞凋亡,其损伤机制与Bax表达增高及Bcl-2表达降低有关。     

地塞米松诱导胎鼠腭裂形成过程中鼻中隔软骨Bcl-2基因的表达

目的研究地塞米松诱导的腭裂胎鼠鼻中隔软骨Bcl-2基因的表达及其对鼻中隔软骨细胞发育的影响。方法选取孕鼠30只,随机分为实验组和对照组,实验组于11.5GD孕期（gestation day）鼠腹腔注射磷酸地塞米松（50mg/kg）,对照组以等剂量生理盐水代替。分别于12.5、13.5、14.5、15.5、16.5GD处死孕鼠,取胎鼠头部石蜡包埋,切片厚5μm。行HE染色和免疫组化染色,检测胎鼠鼻中隔软骨细胞中Bcl-2的表达。结果12.5、13.5GD几乎无Bcl-2蛋白表达;14.5、15.5、16.5GD鼻中隔软骨细胞中Bcl-2阳性信号强度和阳性细胞数密度依次递增,而同一时间点实验组阳性细胞数密度低于对照组。实验组和对照组胎鼠鼻中隔软骨细胞形态和数量随胚胎发育而变化。结论地塞米松诱导的腭裂胎鼠鼻中隔软骨细胞Bcl-2的低表达使细胞过度凋亡,影响鼻中隔发育,参与了腭裂的形成过程。     

Appearance of Bax Protein After Preoperative Chemoradiotherapy is a Prognostic Factor in Maxillary Cancer

The prognosis for maxillary squamous cell carcinoma (SCC) remains poor, despite advances in combination therapy. Combined treatment with anticancer drugs and radiation therapy is aimed at inducing apoptosis. As apoptosis is regulated by several proteins, we investigated the expression of p53, Bax and Bcl-2 in maxillary SCC before treatment and after preoperative chemoradiotherapy using an immunohistochemical approach. Furthermore, apoptotic cells were visualized using an in situ apoptosis detection kit and the apoptosis index (AI) was defined as the number of positive cancer cells per 1000 cancer cells. Expression of p53 and Bcl-2 and the AI in 23 maxillary SCCs were not associated with tumor size, lymph node metastasis, clinical stage, frequency of recurrence or 5-year survival rate either before treatment or after preoperative chemoradiotherapy. Bax expression before treatment was not correlated with any clinicopathological factors before treatment. However, no patients in the Bax-positive group (11/22 cases) after preoperative chemoradiotherapy had recurrence of maxillary SCC and all were alive after 5 years, while the 5-year survival rate was 34.1% in Bax-negative patients. These results suggest that the appearance of the Bax protein after preoperative chemoradiotherapy is a significant prognostic marker for maxillary SCC.