支气管灌洗液MMP-7基因检测在肺癌诊断中的价值

目的探讨支气管灌洗液基质金属蛋白酶-7（MMP-7）mRNA检测在肺癌诊断方面的价值。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对124例肺癌、103例支气管肺部良性病变患者支气管灌洗液（BLF）,进行MMP-7 mRNA表达检测,并与相应的组织病理学检查等结果相比较。结果肺癌、气道良性病变BLF中MMP-7 mRNA表达阳性率分别为24.2%（30/124）、18.4%（19/103）,前者高于后者但差异无统计学意义（χ2=1.098,P=0.295）。肺癌患者BLF的MMP-7 mRNA表达强度与患者有无吸烟史均有明显相关性（t=2.666,P=0.011）,与性别、年龄,与肿瘤的部位、病理类型、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移及临床分期之间均无明显相关性（P值大于0.05）。124例肺癌中其中113例有明确的病理诊断,这113例肺癌患者BLF的MMP-7 mRNA联合细胞病理学阳性率为83.3%（48/113）,高于单纯细胞病理学阳性率23.9%（27/113）或MMP-7 mRNA阳性率22.1%（25/113）,差异均有统计学意义（χ2=8.801、10.704,P=0.003、0.001）。结论 BLF的MMP-7 mRNA检测对肺癌诊断有一定帮助。     

支气管镜活检组织基质金属蛋白酶-7 mRNA检测在肺癌诊断中的价值

目的探讨支气管镜活检组织基质金属蛋白酶-7(MMP-7)mRNA检测在肺癌诊断中的价值。方法应用反转录聚合酶链反应技术对42例中心型肺癌、30例气道良性病变患者支气管镜活检组织进行MMP-7 mRNA表达检测,并与病理学检查结果进行比较。结果支气管镜活检组织标本中肺癌、气道良性病变MMP-7 mRNA表达阳性率分别为54.8%(23/42)、6.7%(2/30),前者明显高于后者,差异有统计学意义(χ2=17.860,P=0.000)。肺癌患者组织病理学检查阳性率为66.7%(28/42),与支气管镜钳夹活检标本MMP-7 mRNA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论支气管镜活检组织中MMP-7 mRNA表达可作为肺癌诊断的分子标志物。     

外周血表皮生长因子受体和LUNX mRNA表达对肺癌微转移诊断的价值

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者和肺良性病变患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA和LUNX mRNA表达情况,探讨其在肺癌微转移诊断中的价值.方法:采用荧光定量PCR方法检测42例肺癌患者和18例肺良性疾病患者外周血EGFR mRNA和LUNX mRNA表达.结果:42例NSCLC患者EGFR mRNA表达的阳性率为45.2%(19/42),LUNX mRNA表达的阳性率为40.5%(17/42),两者联合检测阳性率可提高到64.3%.良性肺部疾病患者均为阴性.结论:EGFR mRNA和LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的分子标志物,联合检测可提高外周血癌细胞的检出率.     

肺癌组织survivin mRNA的表达及其与预后的关系

目的: 探讨生存素(survivin)mRNA在肺癌组织中的表达与临床病理及其预后的关系。方法: 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测41例肺癌患者、9例良性肺疾病患者手术标本中的survivin mRNA表达,并随访2年,将其表达及表达强度与临床病理特征进行相关分析。结果: 肺癌患者手术标本癌组织中survivin mRNA表达的阳性率(70.7%)均高于癌旁正常组织(17.1%)和良性肺疾病患者组织survivn mRNA表达的阳性率(1/9)(P<0.005);癌旁正常组织与良性肺疾病组织survivin mRNA表达的阳性率差异无显著性(P>0.05);survivin mRNA在肺癌组织的表达及表达强度与年龄、性别、病理分型、病理分级、解剖部位分型及淋巴结和(或)不同肺叶及远处转移均无明显关系(P>0.05),但与预后有明显关系(P=0.001 8)。结论: 肺癌组织检测survivin mRNA表达可以作为肺癌诊断的特异性分子标志物之一,且可独立作为预测肿瘤的预后。     

周围型非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液p53基因突变及其临床意义

目的:DHPLC分析周围型非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液标本p53突变及其作为分子诊断标记的可行性.方法:DHPLC分析46例支气管肺泡灌洗液标本(33例肺癌,13例对照)p53基因Exon5～9突变.结果:肺癌组p53突变检出率36.36%(15/33),对照组未检出一例,两组p53突变率比较具有明显差异(P＜0.05);p53突变作为肺癌诊断分子标记,灵敏度36.36%(12/33),特异度100%(13/13).结论:DHPLC分析周围型非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液标本p53基因热点突变可以作为周围型肺癌诊断的分子标记,但在支气管肺泡灌洗液标本检测单一基因突变不能满足临床诊断的需要.     

非小细胞肺癌中Survivin的表达及其临床意义的研究

目的 探讨Survivin基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与临床病理因素的关系.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测80例非小细胞肺癌组织以及60例癌旁肺组织中Survivin 基因mRNA的表达.结果 Survivin在NSCLC组织中阳性表达率为67.75％(55/80),在NSCLC癌旁组织中阳性表达为41.6％(25/60),肺癌组织和癌旁组织中Survivin基因表达差异有统计学意义(P＜0.05),Survivin在不同的临床分期、有无淋巴结转移中的表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 检测肺癌组织中Survivin的表达,可作为判断肺癌转移和分期以及预后的指标.     

miR-218和Survivin基因/蛋白在喉癌中的表达及其与喉癌化疗敏感性的关系

目的探讨微小核糖核酸-218(miR-218)和存活素(Survivin)基因/蛋白在喉癌中的表达情况及其与喉癌化疗敏感性的关系。方法选取2011年2月—2015年8月邯郸市中心医院耳鼻喉头部外科收治的喉癌85例(观察组)组织标本和正常喉黏膜组织30例(对照组)石蜡切块,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测喉癌组织和正常喉组织标本miR-218和Survivin mRNA表达,免疫组织化学法检测Survivin蛋白表达,分析miR-218和Survivin mRNA表达与喉癌患者临床病理特征及肿瘤化疗敏感性的关系,用Spearman方法分析miR-218和Survivin mRNA表达的相关性。结果与对照组比较,喉癌组织中miR-218表达显著降低(t=12.003,P<0.01),Survivin mRNA和蛋白表达均显著升高(t=12.953,χ~2=8.012,P<0.01)。miR-218和Survivin mRNA表达均与肿瘤直径大小、TNM分期、分化程度及淋巴结是否转移相关(miR-218:χ~2=11.318、12.584、16.910、20.102;Survivin:χ~2=12.966、8.300、9.910、13.963,P均<0.01),miR-218和Survivin mRNA表达均与喉癌患者性别、年龄、是否吸烟及病理类型无关(P>0.05)。Spearman相关性分析结果显示,喉癌组织中miR-218和Survivin mRNA表达呈明显负相关(r=-0.534,P<0.05)。与化疗不敏感患者比较,化疗敏感患者miR-218表达水平显著升高(χ~2=6.139,P<0.05),Survivin表达水平显著降低(χ~2=5.818,P<0.05)。结论喉癌组织miR-218和Survivin mRNA均表达异常,与术前化疗敏感性关系密切,可能作为预测化疗疗效的参考指标。     

非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

Significance and Expression of LUNX mRNA in Peripheral Blood and Lymph Node of Non-small Cell Lung Carcinoma

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血及淋巴结组织中肺特异性X蛋白(LUNX)mRNA的表达及其临床意义.方法 采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测56例NSCLC患者及34例肺良性病变患者外周血及淋巴结组织中LUNX mRNA的表达情况,对比两组表达的差异,并分析其表达与NSCLC临床组织病理学特征的关系.结果 病理组织学检查NSCLC淋巴结微转移阳性率为50.0%(28/56),RT-PCR法检查淋巴结组织LUNX mRNA阳性表达率为53.6%(30/56),两者差异无统计学意义(P=0.705).NSCLC组外周血中LUNX mRNA阳性表达率为58.9%(33/56),在淋巴结组织中的阳性表达率为53.6%(30/56),两者差异无统计学意义(P=0.453);肺良性病变组外周血及淋巴结组织中均无LUNX mRNA表达,NSCLC组外周血及淋巴结组织中LUNX mRNA阳性表达率与对照组比较,差异有统计学意义(P均＜0.01).外周血和淋巴结组织中LUNX mRNA阳性表达率与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和临床分期均有关(P＜0.05),与患者年龄、性别、有无吸烟以及病理类型、肿瘤部位等均无关(P＞0.05).结论 外周血和淋巴结中LUNX mRNA的表达是肺癌微转移的一个潜在的特异性指标,外周血LUNX mRNA可能更具敏感性,LUNX mRNA的检测对预后评估具有重要的临床意义.     

痰P16基因甲基化及K-ras基因突变联合检测对周围型肺癌的诊断价值

目的探讨痰脱落细胞P16基因甲基化及K-ras基因突变联合检测对周围型肺癌的诊断价值。方法选择49例周围型肺结节患者的痰液及术后病理标本作为研究对象,同时以15例正常人作为对照组,应用甲基化特异性PC R(m ethylation-specific PC R,M SP)和PC R-测序法检测其P16基因甲基化及K-ras基因突变情况。结果痰脱落细胞及肿瘤标本P16 M SP阳性率分别为51.2%(21/41)和58.5%(24/41),两者比较差异无统计学意义(χ2=0.4432,P>0.05),但明显高于良性肺结节及正常人(χ2分别为4.056、6.513及5.677,P<0.05);痰脱落细胞及肿瘤标本K-ras基因突变率为17.1%(7/41)和22.0%(9/41),两者比较差异无统计学意义(χ2=0.0038,P>0.05),而良性肺结节及正常人痰脱落细胞和肿瘤标本未检测到K-ras基因突变。如果以痰脱落细胞P16M SP阳性和K-ras基因突变分别作为筛选肺癌的标准,则对周围型肺癌诊断的敏感度和阴性预测值P16 M SP阳性为51.2%和25.9%,K-ras基因突变为17.1%和19.0%;而P16 M SP阳性及K-ras基因突变联合检测对肺癌的敏感度和阴性预测值分别上升为61.0%和30.4%。结论痰脱落细胞P16基因甲基化及K-ras基因突变联合检测可以提高周围型肺癌的诊断效率,对周围型肺癌的诊断具有一定价值。     

HER家族在胃癌中表达及过表达的临床病理意义

【目的】 通过检测表皮生长因子受体(HER)家族蛋白在胃癌组织中的表达,探讨HER家族蛋白表达或过表达及联合表达或过表达与胃癌临床病理特征之间的关系。【方法】 采用免疫组织化学法检测124例手术切除的胃癌组织中HER家族蛋白的表达,分析HER家族蛋白表达、过表达、联合表达、联合过表达及其与胃癌临床病理特征及预后之间的关系。【结果】 124例胃癌中HER家族蛋白HER1、HER2 、HER3、HER4的表达率分别为41.1%(51/124)、59.7%(74/124)、82.2%(102/124)、28.2%(35/124);其过表达率分别为6.5%(8/124)、26.6%(33/124)、22.6%(28/124)、12.1%(15/124);癌旁非肿瘤胃黏膜均未见HER家族蛋白的表达;HRE2过表达在肠型胃癌较弥漫型胃癌更常见(P = 0.001);HER3过表达与胃癌更深的浸润深度、易于淋巴结转移、易于远处转移、TNM分期更晚及预后差有关(P均 < 0.05);HER1、HER2和HER3联合表达与胃癌远处转移有关(P = 0.035)。【结论】 HER家族中HER3过表达可以作为评估胃癌恶性生物学行为的指标。     

Real-time PCR检测人非小细胞肺癌中CYP2A6基因的表达

目的检测肺癌及相应癌旁正常组织中细胞色素P450 2A6(CYP2A6)mR NA的表达,探讨其可能的临床意义。方法采用Real-time PCR技术比较人肺癌与相应癌旁正常组织中CYP2A6mRNA的表达差异,并比较CYP2A6基因的表达与患者临床病理参数的关系。结果 CYP2A6 mR NA在肺癌组织中的表达低于对应的癌旁组织(P<0.05),CYP2A6 mRNA的表达程度与患者的性别、年龄、肺癌的病理分型及有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 CYP2A6 mRNA在肺癌组织中的表达下调,提示CYP2A6基因表达下调可能在肺癌的发生发展中起作用。     

EGFR和K-ras在结直肠癌中的表达及其临床意义

【目的】检测结直肠癌中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和K-ras蛋白的表达情况,分析其在结直肠癌组织中表达与临床病理特征之间的关系。【方法】应用免疫组化SP法检测80例原发性结直肠癌及其相应的癌旁组织中EGFR和K-ras蛋白的表达情况。【结果】EGFR、K-ras蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达显著高于其在癌旁组织中的表达(P<0.01)。EGFR蛋白的表达与肿瘤病理分化程度、浸润深度以及肿瘤Dukes分期、有无淋巴转移有关,Dukes分期越晚(χ2=8.935,P=0.030),分化程度越低(χ2=11.757,P=0.001),浸润深度越深(χ2=6.888,P=0.009)及有淋巴结转移者(χ2=10.889,P=0.001),其表达越高,而与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤部位无关(P>0.05);K-ras蛋白仅与肿瘤的病理分化程度有关,分化程度越低(χ2=9.528,P=0.001),其阳性表达越多。结直肠癌组织中EGFR和K-ras蛋白的共表达呈正相关性(r=0.327,P=0.002)。【结论】EGFR和K-ras在结直肠癌中存在共表达现象,二者的高表达可能促进结直肠癌的发生、发展,检测二者可辅助判断患者的预后和转移情况以及指导临床治疗。     

促红细胞生成素受体在不同分期食道癌中的表达及与肿瘤血管生成的关系

目的 探讨促红细胞生成素受体(EPO-R)在不同分期食道癌中的表达及与肿瘤血管生成的关系.方法 选取48例食道癌患者手术切除肿瘤组织标本及28例肿瘤癌旁组织标本,采用免疫组织化学法对标本中EPO-R及肿瘤微血管密度(MVD)进行观察,并分析EPO-R表达水平与肿瘤TNM分期、肿瘤分化程度以及MVD之间的关系.结果 EPO-R在食道癌肿瘤组织中表达水平显著增高(P＜0.05);EPO-R在食道癌肿瘤组织中表达水平随着TNM分期的提高及肿瘤分化程度的降低而显著增高(P＜0.05);EPO-R在食道癌肿瘤组织中的表达水平与MVD值呈现正相关(r=0.3795,t=5.416,P＜0.02).结论 EPO-R可能通过肿瘤血管生成参与食道癌发生发展过程,具有判定食道癌严重程度及预后的潜在价值.     

非小细胞肺癌Stathmin mRNA的表达及临床意义

目的 探讨Stathmin mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义.方法 成对收集非小细胞肺癌手术切除的癌和癌旁组织,抽提总RNA,利用半定量RT-PCR技术检测Stathmin mRNA的表达,对其与临床病理指标的关系进行统计学分析.结果 共收集癌和癌旁组织43对,癌组织中Stathmin mRNA表达的阳性率为76.7%,癌旁组织中为60.5%,癌组织的Stathmin相对表达量明显高于癌旁组织（Z=5.359,P=0.000）;无论是癌还是癌旁组织,男性中Stathmin的相对表达量明显高于女性（χ^2=5.059、5.799,P=0.024、0.016）.癌组织中,鳞癌中Stathmin的相对表达量高于腺癌（χ^2=5.821,P=0.016）、中央型明显高于周围型（χ^2=4.308,P=0.038）.结论 非小细胞肺癌中Stathmin mRNA的表达具有较高的阳性率,其中鳞癌、中央型肺癌和男性患者中增高最明显.     

胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达

目的探讨胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白的表达情况。方法分别采用原位杂交方法和免疫组织化学SP法对40例胃癌组织、22例癌旁不典型增生组织及40例正常胃黏膜组织进行KiSS-1 mRNA和蛋白的检测。结果胃癌组织、癌旁不典型增生组织及正常胃黏膜组织中KiSS-1 mRNA的阳性表达率分别为57.5%（23/40）、77.3%（17/22）、97.5%（39/40）,依次升高（X2=18.323,P〈0.01）;KiSS-1蛋白的阳性表达率分别为52.5%（21/40）、81.8%（18/22）、95.0%（38/40）,依次增高（X2=20.131,P〈0.01）;胃癌组织中KiSS-1 mRNA及蛋白表达与胃癌分化程度无关（P〉0.05）,与浸润深度、淋巴结转移有关（P〈0.05）;胃癌组织中KiSS-1 mRNA与蛋白的表达呈正相关（rs=0.702,P〈0.05）。结论 KiSS-1表达缺失与胃癌的发生、转移有关;KiSS-1有望成为胃癌早期诊断和判断预后的辅助指标。     

油酸性急性肺损伤家兔γ-干扰素的表达与膈神经放电曲线变化的关系

目的探讨家兔油酸性急性肺损伤时膈神经放电曲线变化与γ-干扰素(IFN-γ)表达的关系。方法健康新西兰家兔40只,随机分为复制油酸性急性肺损伤模型组(实验组)和对照组,每组20只,分别测定实验组和对照组家兔动脉血氧分压(PaO2)、外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中IFN-γ表达水平及膈神经放电曲线,并进行对比分析。结果实验组PaO2低于对照组(P<0.05)。实验组BALF中和外周血中IFN-γ的表达水平高于对照组(P<0.05),在肺组织中IFN-γ的表达高于对照组(P<0.05),家兔膈肌放电曲线幅度和对照组家兔相比明显减小,放电持续时间缩短,频率减少(P<0.05),而且实验组家兔PaO2数值与膈神经放电曲线的幅度、放电持续时间、放电频率呈正相关(r=0.1826,P<0.05)。结论 IFN-γ参与油酸引起的肺部急性炎症反应,放大炎症反应,导致急性肺泡-毛细血管膜损伤,膈神经放电减弱。