不同产地桔梗的聚丙烯酰胺凝胶电泳指纹图谱鉴别研究

 目的建立不同产地桔梗药材的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)指纹图谱鉴别方法。方法蛋白质(Pro)、过氧化物酶同工酶(POD)、酯酶同工酶(EST)PAGE指纹图谱分析。结果不同产地桔梗的Pro-PAGE图谱差异极小;POD-PAGE与EST-PAGE图谱在谱带分布及数量上均具有显著性差异,分别具有各自的鉴别谱带。结论POD-PAGE与EST-PAGE指纹图谱可作为鉴别不同产地桔梗的有效方法。     

不同产地乌梅的SDS-PAGE的电泳鉴别

目的:对炮制程度和产地不同的乌梅中蛋白成分进行电泳鉴别.方法:利用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术对未经清洗的四川长兴乌梅,百顺乌梅标准炭,大邑净乌梅,大邑乌梅标准炭,净洗2次的大邑乌梅生品进行鉴别分析.结果:不同产地乌梅的电泳图谱存在差异,各品种图谱基本相似.结论:电泳鉴别可为中药不同产地药材蛋白质成分鉴别提供一项可靠的简便的检测方法.     

不同产地乌梅的SDS-PAGE的电泳鉴别

目的：对炮制程度和产地不同的乌梅中蛋白成分进行电泳鉴别.方法：利用十二烷基硫酸钠-聚丙酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）技术对未经清洗的四川长兴乌梅,百顺乌梅标准炭,大邑净乌梅,大邑乌梅标准炭,净洗2次的大邑乌梅生品进行鉴别分析.结果：不同产地乌梅的电泳图谱存在差异,各品种图谱基本相似.结论：电泳鉴别可为中药不同产地药材蛋白质成分鉴别提供一项可靠的简便的检测方法.     

山东同一种植基地不同形态瓜蒌的种子蛋白研究

目的：研究山东同一种植基地不同形态瓜蒌种子中的蛋白质。方法：采用紫外分析法测定蛋白质的含量,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行蛋白电泳分析,采用Biosens Gel Imaging System软件绘制指纹图谱。利用NTSYS-pc软件进行聚类分析,计算遗传相似系数。结果：不同样品的蛋白质含量具有明显差异,蛋白电泳图谱具有多条共有带。结论：种子蛋白质的含量不是评价瓜蒌质量优劣的主要指标,蛋白电泳图谱的共有条带可作为鉴定瓜蒌真伪的重要依据。     

不同产地山羊角凝胶电泳指纹图谱及其混伪品鉴别研究

目的:研究建立不同产地山羊角药材的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)的指纹图谱以及与混伪品的鉴别方法。方法:采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法对山羊角及其伪品的蛋白成分进行分析比较。结果:不同产地山羊角电泳图谱相似,有5个共有带峰,可作为山羊角的专属条带。结论:该方法简单易行、灵敏度高,可为山羊角的产地鉴别及与伪品的鉴别提供参考。     

山东产不同农家品种瓜蒌的种子蛋白电泳分析

目的：鉴定山东产瓜蒌的不同农家品种，并探讨它们的亲缘关系。方法：利用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对山东产瓜蒌的不同农家品种、野生种及湖北栝楼进行种子蛋白电泳分析，并绘制指纹图谱。结果：山东产瓜蒌不同农家品种和野生种种子的蛋白电泳图谱具有多条共有带，而与湖北栝楼图谱差异显著。结论：种子蛋白电泳分析可用于瓜蒌不同农家栽培品种的辅助鉴别，仁瓜蒌与牛心瓜蒌、小光蛋与野瓜蒌彼此间亲缘关系较近。     

薏苡仁蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

目的:比较酸沉前后蛋白种类的差异,获取薏苡仁蛋白分子量的信息。方法:采用碱溶酸沉法制备薏苡仁蛋白,SDS-PAGE电泳分离蛋白,标准曲线法计算分子量信息。结果:得到了6种薏苡仁水溶性蛋白条带,确定了其分子量分别是91.598,77.169,39.839,28.977,23.822,16.100 k Da,对比了薏苡仁蛋白酸沉前后的变化,即酸沉后缺失了23.822 k Da和16.1 k Da两个条带。结论:该方法得到的谱图清晰,重现性好,对薏苡仁蛋白分离与分析的研究有着重要的指导意义。     

酸浆种子蛋白提取方法的比较研究

目的:建立适用于酸浆种子的SDS-PAGE和2-D PAGE蛋白样品提取方法。方法:比较直接提取法、TCA-丙酮法、Tris-丙酮法、饱和酚法、改良饱和酚法等7种提取方法所获酸浆种子总蛋白含量以及SDS-PAGE电泳的谱带数目、强度和电泳分辨率等方面的差异。结果:HEPES buffer直接提取法提取蛋白效率较高,杂质少,电泳谱带清晰,分辨率高;PVP buffer和Lysis buffer A直接提取法次之,但杂质较多;TCA-丙酮法、Tris-丙酮法、饱和酚法和改良的饱和酚法差别不大,蛋白纯度较高,但提取效率低,谱带数目少;此外,Lysis buffer A法、丙酮法和酚法易产生高丰度蛋白的干扰。结论:直接提取法中的HEPES buffer法最好,优于丙酮法、酚法和其它直接提取法。     

不同产地苍耳子UPLC指纹图谱研究

建立不同产地苍耳子药材UPLC指纹图谱,为其质量控制提供比较全面的评价方法.实验采用UPLC-PDA检测法,测定了26个产地的苍耳子药材进行UPLC指纹图谱,采用Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×l00 mm,1.7 μm),乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.25 mL· min-1;检测波长220 nm.建立了26个产地苍耳子药材的共有图谱,确定了19个共有峰,对9个峰进行了指认;其中21批样品相似度大于0.9; 26批药材可大致聚成6类;计算了各个指纹峰的主成分分值,6个主成分累计变量贡献值达到81.140％.该方法可用于苍耳子药材质量评价.     

三组中药的电泳指纹图谱研究

目的:利用电泳指纹图谱鉴别二组中药。方法:对三组不同种或不同农家品种的中药分别进行蛋白质、过氧化物酶(POD)同丁酶及酯酶(ES)同工酶三种聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,并建立相应的指纹图谱。结果:各样品组的三种电泳指纹图谱至少有一种存在显著差异,可准确区分该组的所有样品。结论:选择适当的电泳方法可准确鉴别不同种甚至不同农家品种的中药。     

厚朴及姜厚朴乙酸乙酯提取部位对小鼠胃肠运动功能的影响

目的: 比较厚朴与姜厚朴乙酸乙酯提取部位对促进胃肠运动功能的药效. 方法: SPF级昆明种小鼠随机分为阴性(或模型)对照组、阳性药多潘立酮35 mg·kg^-1或雷尼替丁45.5 mg·kg^-1组和厚朴高、中、低剂量(0.678,0.452,0.226 g·kg^-1),姜厚朴高、中、低剂量(0.708,0.472,0.236 g·kg^-1)给药组,各组小鼠均连续ig 3 d,比较小肠推进率、盐酸性溃疡率、血清胃泌素含量. 结果: 厚朴和姜厚朴乙酸乙酯提取部位均能不同程度促进胃肠动力功能,在促进小肠推进率上,各给药组与阴性组有显著差异(P<0.05),与阳性药组无显著差异.在抑制溃疡上各给药组与模型组有显著差异(P<0.05).胃泌素含量厚朴低、中剂量与姜厚朴中剂量组血清胃泌素升高与阴性组存在显著差异(P<0.05). 结论: 姜厚朴与厚朴乙酸乙酯提取部位具有促进胃肠运动功能保护胃黏膜的作用,姜厚朴药效优于厚朴.     

厚朴与凹叶厚朴群体遗传学研究

目的:对厚朴与凹叶厚朴的群体遗传学进行研究,为中药厚朴的质量控制提供分子生药学方面的依据。方法:对厚朴与凹叶厚朴15个居群应用2个叶绿体基因间序列psbA-trnH和trnL-trnF进行PCR扩增并测序,计算厚朴与凹叶厚朴单倍型频率,用程序HaploNst分析遗传多样性和遗传结构,应用TCS version 1.13软件构建单倍型网状进化树。结果:厚朴与凹叶厚朴均无特有单倍型存在,但单倍型频率存在显著差异,已开始出现遗传分化的趋势,NST略大于GST。结论:厚朴与凹叶厚朴在遗传上已出现遗传分化的趋势,但尚未完全分化成彼此独立的单系。     

厚朴酚类物质含量层次变异规律研究

目的:揭示厚朴种源间、家系间及家系内个体间酚类物质含量的变化规律,为厚朴良种选育提供依据。方法:以广西资源、湖北五峰及浙江景宁等3个厚朴主要产区种源的半同胞家系子代为材料,采用HPLC测定厚朴酚与和厚朴酚含量。结果:厚朴酚含量、和厚朴酚含量、酚类物质总量种源间均存在极显著差异,均为湖北五峰种源最高,浙江景宁种源最低;种源内家系间、半同胞家系内单株间厚朴酚含量、和厚朴酚含量、酚类物质总量也存在显著差异,含量高的种源家系间、家系内变异也大,但厚朴酚含量与和厚朴酚的比值差异不显著。结论:厚朴酚类物质含量不仅在种源间存在显著差异,种源内家系间及家系内单株间也存在显著差异,且质量好的种源家系间变异更大,因此,根据厚朴种内酚类物质含量层次变异规律,厚朴良种选育应将种源选择赋于重要地位,建立种源、单株配合选择的遗传改良方法与程序。     

濒危植物厚朴种子萌发特性研究

目的:找出厚朴种子发芽的最佳基本适宜条件,从而为厚朴的规范化栽培提供一定的依据.方法:通过室内模拟试验,采用光照、温度、土壤含水量、不同水温浸种处理研究了不同处理对厚朴种子发芽率的影响.结果与结论:光照和黑暗处理的种子发芽率有显著差异,种子萌发表现为光敏性.在20～35℃,厚朴种子都能萌发,但萌发适宜温度为25,30℃,在此温度下的发芽率分别为59.2%,54.6%,最适温度为30/20℃变温,最大发芽率为65%.种子萌发最适宜土壤含水量为25%,发芽率为66.7%,萌发的适宜含水量在20%～25%.为改善种皮透水性,分别用40,60,80,90℃的温水浸种10 min,60℃温水浸种效果最好,并能有效地降低硬实率.水温过高会使种子发芽率受抑制.不同发芽基质对种子的发芽率有显著影响.     

不同炮制方法对厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量的影响

目的: 测定不同炮制品及地区厚朴中有效成分(厚朴酚与和厚朴酚)含量,进行考察,为制定厚朴的质量标准提供依据。 方法: 采用HPLC法对不同炮制品及地区厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量进行测定。色谱柱Phenomsil C₁₈柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(78 ∶22),流速1 mL·min^-1,柱温25 ℃,检测波长294 nm.进样量10 μL。 结果: 不同炮制品及地区的厚朴在有效成分含量上有一定差异。 结论: 该方法简便、准确、分离效果好,可以用来测定厚朴中有效成分的含量。     

O/W型微乳用于厚朴提取的研究

目的:探讨以O/W型微乳液为溶剂提取厚朴脂溶性成分的可行性。方法:采用动态光散射法测定空白微乳液加热过程中粒径的变化,比较加热前后微乳液的物理指标的变化;采用HPLC测定不同溶剂中厚朴酚、和厚朴酚的溶解度及以O/W型微乳、水、乙醇为溶剂的厚朴提取液中二者的含量;比较不同溶剂、不同微乳配方和不同提取方法对厚朴脂溶性成分提取的影响,并采用薄层色谱法对比不同厚朴提取液薄层图谱的异同。结果:以微乳为溶剂可提取厚朴中90%以上的厚朴酚与和厚朴酚,其提取率与60%乙醇相当,微乳的配方组成和提取方法对厚朴中的脂溶性成分具有显著影响。空白微乳加热前后未见明显变化。结论:O/W型微乳用于厚朴的提取,可在保证脂溶性成分提取效率的前提下,避免有机溶剂的使用,节约能源,减少生产环节,有利于中药可持续发展和低碳经济的发展方向。     

胆木叶化学成分研究

目的:研究胆木叶的化学成分.方法:采用柱色谱法和半制备高效液相色谱法进行分离和纯化,通过波谱分析鉴定其化学结构.结果:分离得到5个已知化合物,分别为异长春花苷内酰胺(strictosamicle,1),10-羟基异长春花苷内酰胺(10-hydroxy strictosamide,2),山奈酚-3-O-芸香糖苷(kaempferol-3-O-rutinoside,3),芦丁(rutin,4),短小蛇根草苷(pumiloside,5).结论:化合物2,3,4是首次从胆木叶中分离得到.     

异长春花苷内酰胺大孔树脂纯化研究

目的:研究大孔树脂吸附分离纯化异长春花苷内酰胺的工艺,为异长春花苷内酰胺的工业化生产提供参考.方法:采用静态吸附-解吸方法,从10种大孔吸附树脂筛选出最佳树脂,另外采用单因素影响试验,对吸附量、水洗脱体积、乙醇洗脱浓度及体积进行了考察.结果:HPD400大孔树脂对异长春花苷内酰胺的吸附及解吸附效果最好,树脂的最佳吸附量为20.23mg·g-1,水及30%乙醇洗脱体积为6 BV,70%乙醇洗脱体积为4 BV.结论:该法简单可行,分离效果好,对大生产有一定指导作用.     

川牛膝种子质量检验方法研究

目的:研究川牛膝种子质量各指标的检验方法,为川牛膝种子质量检验规程的制定提供一定的参考依据.方法:参照<农作物种子检验规程>,筛选适合川牛膝种子质量检验的方法.结果与结论:初步建立了川牛膝种子质量检验方法:即最少扦样量8 g;过20目筛后进行净度分析;真实性检验采用形态观察和种子大小测量;健康度检测则直接将种子接种于PDA培养基上,28℃培养5 d后观察统计;五百粒法测定千粒重;高恒温(133±2)℃烘干时间3 h测定水分;0.1%TTC溶液浸染3 h测定生活力;种子置褶裥纸上25℃计数,2～9 d进行发芽试验.     

中药山茱萸SCAR标记的研究

目的:建立山茱萸的SCAR标记,为山茱萸药材分子鉴定提供科学依据.方法:用随机引物进行RAPD筛选,获取特异的RAPD标记条带,分离提取RAPD标记条带,进行克隆和测序,根据测定RAPD标记条带的两端序列设计1对特异引物进行常规PCR反应,获得SCAR标记.结果:根据RAPD标记条带的序列设计筛选了4对特异引物,其中YST38,YST43分别对7个山茱萸品种样本的DNA进行SCAR扩增,7个山茱萸栽培品种均能产生单一的PCR条带,可以用作山茱萸的鉴别;而YST38对圆柱形果型、长梨形果型还有1条特异性条带,可以做为这2个品种的鉴别依据;YST39对7个山茱萸品种进行扩增,纺锤形果型样本的谱带大小(350～400 bp)比其余6个果型的谱带大小(650～700 bp)短了300 bp左右,这条谱带可以做为纺锤形果型的鉴别依据;YST92对圆柱形果型、长梨形果型均产生了1条600～700 bp的条带,椭圆形果型、短圆柱形果型产生了1条200～300 bp的条带,长圆柱形果型、纺锤形果型、短梨形果型3个果型无扩增,YST92可用来筛选山茱萸的几种果型.结论:建立的SCAR标记,条带清晰明亮,结果稳定,可作为山茱萸品种选育和药材分子鉴定的依据.