肾阳虚大鼠生殖细胞凋亡及Bcl-xl和Bad蛋白的表达

目的:观察实验性肾阳虚大鼠生殖细胞凋亡及Bcl-xl、Bad蛋白表达的变化。方法:12只成年健康雄性SD大鼠随机分成肾阳虚组(n=6)和对照组(n=6)。建立单侧肾阳虚动物模型后,取睾丸,对照组同侧取材。采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生殖细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-xl、Bad蛋白表达。结果:凋亡细胞主要是初级精母细胞和圆形精子细胞。肾阳虚组生殖细胞凋亡指数高于对照组(P<0.05);肾阳虚组Bcl-xl蛋白表达低于对照组(P<0.05);Bad蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论:实验性肾阳虚大鼠生殖细胞凋亡明显增多,可能与Bcl-xl蛋白表达降低、Bad蛋白表达升高相关。生殖细胞凋亡可能是肾阳虚所致生殖功能障碍的一个重要原因。     

先天性肾盂输尿管连接部狭窄患儿平滑肌细胞凋亡及Bcl-xl,Bad表达检测

目的:检测先天性肾盂输尿管连接部狭窄患儿平滑肌细胞凋亡及Bcl-xl,Bad的表达.方法:采用免疫组化SABC法检测30例先天性肾盂输尿管连接部狭窄患儿肾盂输尿管连接部狭窄段(观察组)与其周围相应正常输尿管(对照组)平滑肌中凋亡调控基因Bcl-xl,Bad的表达;用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP生物素缺口末端标记技术(TUNn)检测2组平滑肌凋亡细胞.结果:观察组平滑肌细胞中Bad表达率高于对照组((15.54±3.18)%vs(11.00±2.07)%,P＜0.05),Bcl-xl在2组平滑肌细胞中均不表达;观察组平滑肌细胞凋亡指数高于对照组((21.60±3.12)%vs(10.20±2.18)%,P＜0.05).结论:先天性肾盂输尿管连接部狭窄平滑肌细胞减少与其细胞凋亡及Bad表达升高有关,与Bcl-xl表达无关.     

大鼠隐睾生殖细胞凋亡与总抗氧化能力、bcl-2蛋白表达的关系

目的探讨总抗氧化能力和bcl-2蛋白表达对大鼠隐睾生殖细胞发育、凋亡的影响。方法SD雄性大鼠,日龄22天时复制单侧隐睾模型。用生物素-dUTP／酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡;用化学比色法测定总抗氧化能力;用免疫组织化学SP法检测bcl-2蛋白表达。结果术后第7天,与对侧正常睾丸相比,隐睾侧睾丸的重量显著减轻(P<0．01),其发生凋亡的生殖细胞显著增加(P<0．01),总抗氧化能力降低(P<0．01),bcl-2蛋白表达降低(P<0．01)。结论手术诱导的隐睾生殖细胞凋亡增加,且与睾丸组织中总抗氧化能力和bcl-2蛋白表达降低有关。     

大鼠陷睾生殖细胞凋亡与总抗氧化能力,bcl—2蛋白表达的关系

目的 探讨总抗氧化能力和ｂｃｌ－２蛋白表达对大鼠隐睾生殖细胞发育、凋亡的影响。方法 ＳＤ雄性大鼠，日龄２２天时复制单侧隐睾模型，用生物素ｄＵＴＰ／酶标亲和 测定法检测睾丸生殖细胞凋亡；用化学比色法测定总抗氧化能力；用免疫组织化学ＳＰ法检测ｂｃｌ－２蛋白要术后第７天，与对侧正常睾丸相比，隐睾侧睾丸的重量显著减轻，其发生凋亡的生殖细胞显著加，总抗氧化能力降低，ｂｃｌ－２蛋白表达降低。结论 手术诱导的隐     

大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织神经细胞凋亡与Bcl-2、Bcl-xl蛋白检测

目的：探讨Bcl-2、Bcl-xl与神经细胞凋亡在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织中的表达。方法：栓线法阻断健康雄性大鼠大脑中动脉(MCA)血流2h后再灌注,分别于再灌注0．5h,3h,6h,12h,24h和48h断头取脑,在前联合处连续切片,分别进行TUNEL染色及Bcl-2、Bcl-xl蛋白免疫组化染色。以假手术组作对照。结果：①脑缺血区部分神经细胞发生凋亡,再灌注0．5∽48h,凋亡细胞逐渐增多,凋亡指数随再灌注时间的延长而逐渐升高。至48h时达高峰。②Bcl-2、Bcl-xl蛋白在脑缺血再灌注早期开始表达,36∽h达到高峰,24h开始逐渐降低,至48h时与对照组差异无统计学意义。③凋亡细胞,Bcl-2及Bcl-xl蛋白均分布在脑缺血梗死灶的周边,梗死中心区及正常区无表达。结论：局灶性脑缺血再灌注损伤过程中神经细胞凋亡起着重要的作用,而Bcl-2及Bcl-xl抑制神经细胞的凋亡。     

切除精索上神经诱发大鼠生殖细胞凋亡的研究

目的：探讨精索上神经对精子发生的调控作用。方法：SD大鼠分为实验组和假手术组，实验组分离并切除睾丸精索上神经，假手术组分离但不切除该神经，运用光镜和电镜观察睾丸组织病理学变化；脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测生殖细胞凋亡。结果：切除精索上神经导致生精上皮萎缩、生精功能退化，电镜下生殖细胞内染色质出现浓缩、断裂等改变，TUNEL进一步显示切除精索上神经诱发精原细胞和间质细胞大量凋亡。结论：精索上神经参与对精子发生的调控，其对于生精过程的正常进行是不可缺少的。     

实验性大鼠隐睾中eNOS的表达与生精细胞凋亡

①目的 研究内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)的表达与实验性大鼠隐睾生精细胞凋亡的关系.②方法 通过手术建立单侧大鼠隐睾模型,术后第7天采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化SABC法及RT-PCR检测隐睾及对侧睾丸eNOS基因表达的变化.③结果 术后第7天隐睾侧重量明显减轻,生精细胞凋亡指数较对侧睾丸明显增加;RT-PCR显示隐睾中eNOS mRNA的表达较对侧睾丸增强;免疫组化显示对侧睾丸生精上皮内未见eNOS表达,隐睾侧睾丸生精上皮中有eNOS表达.④结论 隐睾生精细胞凋亡明显增加,eNOS参与介导生精细胞凋亡.     

Bad蛋白对细胞凋亡的调控作用

Bad是Bcl-2家族中与Bcl-2和Bcl-xL相关的促凋亡基因。Bcl-2家族促凋亡蛋白和抗凋亡蛋白通过竞争性相互作用来调控细胞凋亡。Bad在多种细胞中表达,近年研究表明Bad可通过细胞信号转导通路和与caspase家族成员的作用来参与细胞凋亡的全过程。其在脑缺血损伤和肿瘤方面的研究受到重视。     

实验性隐睾对大鼠睾丸波形蛋白表达的影响及其意义

①目的 探讨实验性隐睾对大鼠睾丸支持细胞波形蛋白表达的影响及其意义.②方法 将30只健康雄性SD大鼠随机分为隐睾组和假手术组,建立单侧隐睾模型.术后7天采用TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化检测波形蛋白表达的变化.③结果 与正常侧睾丸相比,隐睾侧睾丸重量明显减轻,生精小管内生精细胞排列紊乱,生精细胞与精子的数量减少,可见较多多核巨细胞;免疫组化显示波形蛋白在支持细胞、间质细胞胞质中均有表达,假手术组波形蛋白沿基膜形成棕色的环,并随支持细胞胞质呈辐射状伸向管腔,而隐睾组可见波形蛋白表达明显增加且波形蛋白丝排列紊乱.④结论 隐睾能导致睾丸内波形蛋白表达增高,影响支持细胞的功能,从而促进生精细胞凋亡.     

促凋亡基因Bad在肿瘤细胞凋亡中的作用及进展

肿瘤的发生及其生物学特性与肿瘤细胞的过度增殖有关,而且与肿瘤细胞的凋亡减少有关,针对细胞凋亡现象的研究有助于人们揭示肿瘤的生物学特性,进而探求肿瘤诊治的方法。而且对于肿瘤的化疗、放疗和生物治疗都是主要通过诱导凋亡来治疗肿瘤。Bad基因,一种促凋亡基因,编码产物可通     

染氟大鼠生精细胞端粒酶逆转录酶表达的测定

目的:探讨氟对大鼠生精细胞端粒酶表达的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机等分为对照组、高剂量染毒组、低剂量染毒组,分别腹腔注射蒸馏水、20mg/kgNaF和10mg/kgNaF溶液39d后,采用放射免疫法检测血清中雌二醇水平,原位杂交法检测端粒酶逆转录酶(TERT)表达情况,同时观察成熟精子质量和睾丸病理学的变化情况。结果:低剂量染毒组、高剂量染毒组雌二醇水平、TERT表达水平、精子计数和活动率均低于对照组(P均<0.05),精子畸形率高于对照组(P<0.05)。高剂量染毒组精子计数、精子畸形率和活动率与低剂量染毒组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:氟可降低TERT表达水平从而对生殖系统造成损害。     

喉鳞状细胞癌中 Bak、Bcl－xl 的表达及其与 EB 病毒的相关性研究

目的：检测凋亡相关基因Bak、Bcl－xl在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨其与EB病毒感染的关系。方法采用原位杂交方法检测50例原发性喉鳞癌和20例癌旁正常喉黏膜的石蜡标本组织中EB病毒表达情况。免疫组织化学染色方法检测Bak和Bcl－xl蛋白的表达。结果喉鳞癌与癌旁正常喉黏膜中EB病毒表达情况存在显著差异（ P＜0．01）。在喉鳞癌中Bak的阳性表达率为40．0％（20／50）, Bcl－xl为50．0％（25／50）。18例EB病毒原位杂交阳性的喉鳞癌组织中Bak阳性检出3例,32例EB病毒原位杂交阴性的喉癌组织中Bak阳性检出17例,两组间存在显著差异（ P＜0．05）。18例EB病毒原位杂交阳性的喉鳞癌组织中Bcl－xl阳性检出14例,32例EB病毒原位杂交阴性的喉癌组织中Bcl－xl阳性检出11例,两组间存在显著差异（ P＜0．01）。结论喉癌组织中Bak、Bcl－xl基因表达的失调可能与喉癌的发生、发展有关;EB病毒在喉癌的发生机制中与Bak、Bcl－xl基因有协同作用。     

单侧隐睾复位大鼠血清性激素及抗精子抗体的检测

目的探讨单侧隐睾复位大鼠血清性激素及抗精子抗体(AsAb)的水平。方法将21日龄SD雄性大鼠48只随机分为假手术组和单侧隐睾组各24只,2周后行隐睾大鼠睾丸下降固定术,于40日龄、60日龄采集血清后处死。采用ELISA间接法测定血清AsAb水平。用放射免疫方法测血清雌二醇(E2)、睾酮(T)水平。结果40日龄、60日龄时2组血清E2和T水平比较均无显著差异(P>0.05);2组60日龄时的E2、T水平均较40日龄时显著增高(P<0.05)。单侧隐睾组大鼠40日龄、60日龄时血清AsAb IgG、IgA、IgM水平均显著高于假手术对照组(P<0.05);60日龄时隐睾组大鼠血清AsAb水平高于40日龄(P<0.05),而假手术组血清AsAb水平无显著差异(P>0.05)。单侧隐睾组大鼠AsAb的检出率明显高于假手术组(P<0.01)。结论隐睾大鼠行睾丸下降固定术后,存在高雌激素血症;AsAb产生可能是导致男性不育的原因之一。     

Difference in Expression of Bcl-2 and Bcl-xl Genes in Cisplatin- sensitive and Cisplatin-resistant Human in Ovarian Cancer Cell Lines

Apoptosisisthemainmechanismofcelldeathandisregulatedbyalargenumberofgenes.Amongthem ,theBcl 2familiesareconsideredtoplayakeyroleintheexecutionorpreventionofapoptosisinducedbygenotoxicstressthroughthealterationofapoptoticsignals.Epithe lialovariancancerist…     

人类精液溶脲脲原体感染与生殖细胞凋亡的关系

目的:探讨人精液溶脲脲原体(ureaplasma urealyticum,Uu)感染与生殖细胞凋亡的关系.方法:采用PCR检测精液中Uu.用瑞-姬染色和末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡的生殖细胞.结果:Uu感染组凋亡的生殖细胞体积缩小、核固缩、染色质密度增加,聚集在核膜周边形成半月形,胞质有空泡.凋亡率为(14.5±4.6)%明显高于正常对照组(4.1±1.8)%(P＜0.01).结论:Uu感染能引起生殖细胞凋亡的增加.     

Survivin蛋白在小鼠生精恢复过程中的表达及其与生殖细胞凋亡的关系

目的: 探讨新的凋亡相关基因survivin蛋白在小鼠生精恢复过程中的表达及其与生殖细胞凋亡的关系. 方法: 间隔24 d两次腹腔注射白消安建立小鼠生精恢复过程的动物模型,第2次给药后随机分为1,2,3,4,6,8,10 wk 7组,于相应时间点及给药前取材,采用免疫组化S-P法和透射电镜、DNA原位末端标记TUNEL法分别检测survivin蛋白的表达和细胞凋亡. 结果: Survivin蛋白主要表达于间质细胞、次级精母细胞和精子细胞,生殖细胞的凋亡主要发生于初级精母细胞和圆头精子细胞. Survivin蛋白的表达与生殖细胞凋亡指数(AI)呈负相关(r=-0.784,P<0.01). 结论: Survivin蛋白表达而引起的凋亡抑制,有利于生殖细胞凋亡稳态的维持,对正常的精子发生起重要作用.     

大鼠哮喘模型气道重塑中细胞增殖和凋亡的变化

目的探讨大鼠哮喘气道重塑中细胞增殖和凋亡的变化,以及地塞米松对其影响.方法将39只大鼠随机等分为正常对照组、哮喘模型组和地塞米松干预组,以卵蛋白致敏制作大鼠哮喘模型,病理观察3组气道壁形态学改变;采用免疫组化方法观察细胞增殖核抗原(PCNA)和Caspase-3在气道壁和肺组织中的表达.结果哮喘模型组气道壁、气道周围及肺泡区细胞PCNA阳性表达(13.00±1.87,20.46±4.16)明显高于正常对照组的(10.00±2.20)及(15.00±4.83)(P＜0.05),且与气道上皮层、黏膜层厚度及胶原沉积面积呈正相关(r=0.67,0.66,0.57;P＜0.05).地塞米松干预组PCNA表达(9.54±2.15,13.08±3.40)明显低于哮喘模型组,Caspase-3表达(5.38±1.45,3.82±1.70)高于哮喘模型组(4.92±1,85,5.62±1.56)(P＜0.05).结论细胞增殖过度和凋亡异常是哮喘气道炎症和重塑反应的重要机制之一,地塞米松可通过调控细胞增殖和凋亡阻止气道重塑发生.