麻疹野病毒的分离鉴定及病毒分离的影响因素

目的确定吉林省近年流行的麻疹病毒基因型,分析麻疹野病毒分离的影响因素,为防控措施的制定及做好麻疹病原学检测提供参考依据。方法利用Vero／Slam细胞对114份麻疹咽喉拭子标本进行麻疹病毒分离,用逆转录一聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析方法扩增麻疹病毒核酸并进行基因型鉴定;统计分析不同采样时问、不同咽试子保存液对麻疹病毒分离的影响。结果114份麻疹咽喉拭子标本中分离到麻疹病毒31株,经鉴定均为H1基因型,出疹2d内的标本分离率较高,为38．09％。2％DMEM维持液作为咽拭子保存液的病毒分离成功率为30．69％。0．9％生理盐水作为保存液的病毒分离率为0。结论H1基因型麻疹病毒为吉林省近年流行的主要优势基因型,麻疹病毒的成功分离取决于采样时间、好的标本质量以及正确标本保存液。     

分离胶促凝管保存血清标本部分生化指标的变化

目的观察分离胶促凝管保存血清标本部分生化指标的变化,探讨分离胶促凝管原管保存血清标本的可行性。方法采用分离胶促凝管对82例血清标本加原配试管盖置（4±2）℃冰箱保存7d,每天对冷藏血清标本进行21项生化指标测定,观察其变化。结果绝大部分生化指标测定结果与第1天测定结果无显著性差异（P〉0．05）。只有少数生化指标（K^＋、Glu）随保存时间的增长有不同的变化。结论分离胶促凝管保存血清标本7d,绝大部分生化指标测定结果具有良好的稳定性。少数生化指标（K^＋、Glu）亦有一定时间的稳定性。因此,采用分离胶促凝管原管保存血清标本在一定时间内具有可行性。     

上海地区SARS患者冠状病毒样颗粒培养与分离

目的 对上海地区SARS患进行病原体的培养10分离。方法 复旦大学公共卫生学院与上海市疾病预防控制中心合作,对上海地区第1例、第2例SARS确诊病例咽拭标本接种多种细胞,进行病原分离、观察。结果 在第1例SARS确诊病例咽拭标本感染的Vero E6细胞观察到CPE;经超速离心、电镜负染观察见到了直径在60～100nm的冠状病毒样颗粒;感染的VeroE6细胞和病人血清间接荧光抗体显示阳性。此株冠状病毒样颗粒暂时命名为SARS—CoV—Fudan I株。结论 在上海市的第1例确诊SARS病例的咽试培养中,见到新型冠状病毒样的颗粒。     

流感标本的采集和保存条件对分离率的影响

作为四川省流感监测网络中的重点监测城市，本实验室负责病例标本的采集、保存及运送。工作中我们发现，流感病毒的分离阳性率除与分离方法、发病率等密切相关外，标本的采集、保存和运送条件对分离率亦影响极大。通过对2004年3月至2006年12月3年中流感病毒的分离情况进行分析总结，讨论各细节的影响因素，现将情况报告如下。     

手足口病配对标本病原学检测及流行病学特征分析

目的比较手足口病门诊患者疱疹液、咽拭液肠道病毒检出率及一致性,分析病例群流行病学特征。方法以准分层随机法抽取同人疱疹液和咽拭液配对标本451人份,用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A group 16 strain,CVA16)、肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)和总肠道病毒(Pan-enterovirus,EV)。统计分析用卡方检验、Kappa检验、秩和检验。结果疱疹液标本EV、CVA16、EV71阳性率为77. 38%、39. 47%、28. 16%,咽拭液标本为64. 97%、31. 49%、26. 39%,疱疹液检出率为高(χ~2值为39. 20,24. 92,3. 06,P值为0. 000,0. 000,0. 077)。EV71、CVA16、EV检出一致性的Kappa检验K值为0. 911,0. 750,0. 576,P 0. 001,差异有统计学意义。疱疹液、咽拭液中EV、CVA16、EV71检出率顺序,与其Kappa检验K值顺序相反。病例星期分布性别比稳定,动态趋势一致但发病不均匀,呈以星期六为顶点并递降的峰形。结论手足口病门诊标本疱疹液优于咽拭液;病原检出率顺序与检出一致性K值顺序不一致;在一般流行病学特征下,手足口病发病星期分布可能不均并伴跨周单峰; 2016年十堰市手足口病主要病原是CVA16、EV71。     

肠道病毒在手足口病患者不同标本中检出率比较分析

目的:比较手足口病患者咽拭、肛拭标本中肠道病毒检出率是否有差异,了解不同的标本采集时间的肠道病毒检出率。方法:对许昌市2012年的临床诊断手足口病例350例分别采集咽拭和肛拭标本,进行荧光定量PCR检测柯萨奇病毒A 16型(Cox A16)、肠道病毒71型(EV71)和肠道病毒属其它病毒(EV)。同时根据350对咽拭和肛拭标本荧光定量PCR检测结果按照标本采集时间进行分析。结果:用x2检验比较两种标本检测结果的差异,EV71、EV和COXA16在咽拭子和肛拭子两种标本检测结果有差异,P值均0.05。应用Kappa检验,Kappa值均0.5,显示咽拭子和肛拭子的检测结果基本一致。根据配对标本检测EV71、EV和Cox A16结果与标本采集时间进行分析,对于EV71来说,咽拭标本在发病后3天、4~11天均可检出阳性,而Cox A16、其他肠道病毒在发病3天后都无法检出阳性。结论:肛拭标本总体阳性率高于咽拭标本。EV 71在呼吸道带毒持续时间长于Cox A16和其它肠道病毒属病毒。肠道病毒可能在发病2天内在咽部大量繁殖扩增,此时通过呼吸道传播的可能性较大。     

昆明市一起流感局部暴发调查分析

目的对1起流感局部暴发病例进行流行病学调查,分析流感暴发疫情的特点,探讨流感监测和疫情控制的策略。方法用个案调查表对病例进行流行病学调查,用RT-PCR对病例咽拭标本进行核酸检测,用MDCK细胞进行流感病毒分离,参照《流行性感冒诊断标准及处理原则》(GB15994-1995)对病例进行诊断。结果病例的咽拭标本均检出甲3型流感病毒。结论疫情可确诊为流感局部暴发。     

用无血培养基分离空肠弯曲菌的效果

关于空肠弯曲菌的分离培养,目前国内外广泛采用含血培养基。但含血培养基不易得到,价格昂贵,易污染变质,又不易保存。因而,我们采用无血培养基与改良Camp-BAP含血培养基(简称含血培养基)对已知空肠弯曲菌株的检出率、染色形态、菌落特征、菌量分布、抑制杂菌等方面进行研究,取得了满意的结果,现报告如下。材料与方法 1、采集标本和接种:采集鸡、人肛拭标本放入消毒的0.3毫升布氏肉汤,反复旋转8～10次将棉拭上的粪样冼下,经充分摇匀后接种子两种培养基上进行培养分离。 2、培养基:(1)含血培养基基础成份的配制按照改良Camp-BAP含血培养基制作法进行;(2)无血培养基的基础成份和抗     

付霍乱的实验诊断

一、付霍乱的常规检查方法一、标本的采集和送检: 标本以病人粪便为主,争取在发病早期、服用抗菌药物之前采取。自便盆采便注意防止交叉污染或消毒药的杀菌作用。直肠拭子采便注意棉拭应能吸水0.1～0.2毫升。采取无水样便的带菌者大便时,先将棉拭用胨水蘸湿。采取的大便标本可放pH8.4的硷胨水中,既能增菌也有保存液的作用。天热,保存时间长,杂菌生长过多时,收到标本     

一起由H3N2流感病毒引起的局部流感暴发的病原学研究

目的 对一起流感局部暴发的病原体进行分离并鉴定，研究其变异情况，为流感的预防和控制提供依据。方法 用MDCK细胞对病人的咽拭标本进行分离培养，并对分离到的流感病毒HAl基因核苷酸序列进行测定及抗原分析。还检测了患者的血清抗体水平。结果在22份病人的咽拭标本中，分离到3株H3N2亚型流感病毒，患者恢复期血清抗体水平较急性期抗体水平升高4倍。将其中1株的HAl基因测序，与国际代表株进行比较，并与国际代表株进行交叉血抑试验，表明分离到的流感病毒发生抗原漂移。结论这种变异具有流行病学意义，造成甲3亚型流感病毒在湛江地区的局部暴发。