血管内皮生长因子增加内皮细胞通透性的基质金属蛋白酶-2机制

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)增加血管内皮细胞对脂蛋白 (LDL)通透性与基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )的关系。方法　用异硫氰酸荧光素 (FITC)标记LDL ,荧光分光光度法测定FITC LDL的含量 ,在牛主动脉内皮细胞通透性模型上研究VEGF对FITC LDL通透率的影响 ;采用明胶酶谱法测定MMP 2活性。结果　VEGF剂量依赖性地增加血管内皮细胞对FITC LDL的通透性 ,MMP 2特异性抗体显著抑制VEGF的作用 ;VEGF还能剂量依赖性地升高MMP 2的活性。结论VEGF增加血管内皮细胞对FITC LDL的通透性的作用可能由MMP 2介导。     

血管内皮生长因子对内皮细胞产生基质金属蛋白酶2的影响

研究血管内皮生长因子对人脐静脉内皮细胞产生基质金属蛋白酶2的影响.用免疫组织化学染色方法和酶联免疫吸附测定法测定基质金属蛋白酶2的蛋白含量,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2的活性.在基础条件下,内皮细胞自发产生基质金属蛋白酶2,在50 μg/L血管内皮生长因子刺激下,基质金属蛋白酶2的产生显著增加(P＜0.05),血管内皮生长因子浓度达到100μg/L时,基质金属蛋白酶2的产生进一步增加.与蛋白产生相一致,基质金属蛋白酶2分解明胶的活性也显著升高.血管内皮生长因子促进ECV304细胞产生基质金属蛋白酶2的作用可能与其促血管生成和增加血管通透性有关.     

血管内皮生长因子对内皮细胞产生基质金属蛋白酶2的影响

研究血管内皮生长因子对人脐静脉内皮细胞产生基质金属蛋白酶2的影响。用免疫组织化学染色方法和酶联免疫吸附测定法测定基质金属蛋白酶2的蛋白含量,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶2的活性。在基础条件下,内皮细胞自发产生基质金属蛋白酶2,在50μg/L血管内皮生长因子刺激下,基质金属蛋白酶2的产生显著增加(p<0.05),血管内皮生长因子浓度达到100μg/L时,基质金属蛋白酶2的产生进一步增加。与蛋白产生相一致,基质金属蛋白酶2分解明胶的活性也显著升高。血管内皮生长因子促进ECV304细胞产生基质金属蛋白酶2的作用可能与其促血管生成和增加血管通透性有关。     

高糖对系膜细胞金属蛋白酶表达的影响及肝素的干预作用

目的:研究高糖对正常人类系膜细胞(NHMc)增殖及金属蛋白酶2(MMP2)和金属蛋白酶9(MMP9)表达的影响及肝素对其的干预作用.方法:NHMC在含和(或)不含肝素的高糖培养基中培养,以正常糖培养基作对照.采用WST-1法测定NHMC增殖状况;用Western Blot技术分析MMP2、MMP9表达情况.结果:高糖组NHMC增殖明显高于对照组,二组间有显著性差异(P＜0.05).用肝素干预后,高糖组肝素浓度为50μg/ml时,NHMC增殖开始受到抑制,且随着肝素浓度递增,NHMC增殖抑制更明显(肝素50～400μg/ml浓度组与未加肝素组比较,均P＜0.05或P＜0.01).而对照组肝素浓度为200μg/ml时,NHMC增殖才出现抑制(肝素200～400μg/ml组与未加肝素组比较,均P＜0.05).另外,高糖与对照组NHMC均有一定量MMP2、MMP9表达,加入肝素后MMP2、MMP9出现高表达,特别是在高糖组尤为明显.结论:肝素能抑制高糖刺激下NHMC增殖并能使体外NHMC中的MMP2、MMP9出现高表达,推测MMPs可能参与了高糖状态下NHMC的细胞外基质的降解过程并且肝素有肾保护作用.     

老年黄斑变性脉络膜新生血管膜的基质侵袭增生活性

目的 研究老年黄斑变性(AMD)脉络膜新生血管膜(CNVM)的增殖活性.方法 22例AMD病人的CNV膜,用免疫组化的方法分析血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)在CNV膜中的表达.结果 活动期CNV膜与消退期、静止期CNV膜对比,VEGF、MMP2、MMP9均有较高的表达;在静止期CNV膜的 VEGF、MMP2、MMP9无表达或表达较少 (P＜0.01).结论 细胞的基质侵袭力、促细胞增殖活性的VEGF、MMP2、MMP9与CNV膜的病理分期(活动期、消退期、静止期)具有明显的相关性.     

羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠肾小球MMP9/TIMP1的影响

目的 观察羟苯磺酸钙对糖尿病(DM)大鼠肾小球基质金属蛋白酶9(MMP9)、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1)、胶原Ⅳ以及肾小球基底膜超微结构的影响。方法 糖尿病模型由Spregue-Dawley(SD)大鼠单肾切除联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导,糖尿病给药组(DD组)每天给予羟苯磺酸钙100mg／kg。12周后观察各组大鼠肾脏超微结构的改变以及免疫组化检查肾组织MMP9、TIMP1和胶原Ⅳ表达的变化。结果 12周后电镜检查显示DD组肾小球毛细血管基底膜增厚轻于糖尿病对照组(DM组),无胶原纤维的增生,内皮细胞孔距不及单肾切除对照组(NC组)均匀,但较DM组均匀,足细胞突起排列尚整齐,免疫组织化学显示DD组TIMP1、胶原Ⅳ明显低于DM组。结论 羟苯磺酸钙能抑制胶原Ⅳ过度积聚、减轻肾小球基底膜增厚,这可能与抑制糖尿病大鼠肾脏TIMP1表达、上调MMP9／TIMP1比值有关。     

辛伐他汀对不同血脂水平急性冠状动脉综合征患者血清基质金属蛋白酶水平的影响

目的　研究正常血脂和高血脂急性冠状动脉综合征 (ACS)患者应用辛伐他汀对抑制动脉粥样硬化斑块细胞外基质降解 ,减少炎症反应 ,稳定斑块的作用。方法　采用双盲、随机、对照方法 ,将正常血脂 (NC组 )和高血脂 (HC组 )ACS患者分为他汀治疗组 (辛伐他汀 2 0mg d ,共 8周。NC组 ,n =33;HC组 ,n =36 )和他汀对照组 (NC组 ,n =32 ,HC组 ,n =36 ) ;于治疗前后分别测定血清基质金属蛋白酶 (MMP) 1、MMP 9、基质金属蛋白酶抑制因子 (TIMP) 1、MMP 9 TIMP 1、高敏C 反应蛋白(hs CRP)水平。结果　 (1)治疗前NC、HC各组的血清MMP 1、MMP 9、MMP 9 TIMP 1、TIMP 1、hs CRP水平均较健康对照组 (n =6 0 )明显增高 ,与血脂水平不相关。 (2 )经辛伐他汀治疗 8周后 ,两治疗组血清MMP 1、MMP 9、MMP 9 TIMP 1、hs CRP水平均明显降低 ,血清TIMP 1水平无显著性差异。HC他汀治疗组血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)水平明显降低 ,高密度脂蛋白质胆固醇 (HDL C)水平略有上升 ;NC他汀治疗组血清TC、LDL C水平明显下降 ,TG、HDL C水平略有上升和下降 ,但无显著差异。结论　在正常血脂和高血脂ACS患者中 ,早期应用他汀治疗 ,可减少斑块基质成分的降解和炎症反应 ,具有稳定斑块作用。     

基质金属蛋白酶和氧化应激在大鼠动脉粥样硬化中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶和氧化应激在动脉粥样硬化中的表达。方法利用高脂饮食诱发的大鼠动脉粥样硬化模型(AS组,n=6),与正常饮食大鼠模型(N组,n=6)作对照,用比色法检测外周血清中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,利用Zymography法检测外周血中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况,利用免疫组织化学法观察MMP-2及MMP-9在主动脉弓表达情况。结果动脉粥样硬化模型大鼠外周血中MDA、MMP-2、MMP-9表达均高于正常饮食组大鼠[(863.12±42.16)CNN/mm2和(484.92±7.90)CNN/mm2,(367.80±44.68)CNN/mm2和(259.00±42.29)CNN/mm2,(12.88±2.47)mmol/ml和(4.69±0.69)mmol/ml],但SOD则低于正常饮食组大鼠[(71.34±7.06)μN/ml和(168.90±6.85)μN/ml],免疫组织化学法显示MMP-2、MMP-9在主动脉弓内皮细胞及内皮细胞间质中表达,而且AS组表达强于N组。结论动脉粥样硬化形成可能与基质金属蛋白酶异常表达及氧化应激有关。     

大鼠脑缺血再灌注中血脑屏障通透性的改变与基质金属蛋白酶9表达的关系

目的探讨大鼠脑缺血再灌注中基质金属蛋白酶9的表达变化与血脑屏障通透性改变的关系。方法采用大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,通过测定渗出血管外的伊文思蓝含量来评价血脑屏障通透性的变化,采用免疫组织化学的方法检测各组大鼠脑基质金属蛋白酶9的表达。90只大鼠用于上述实验检测,分别为对照组、假手术组、缺血2h后再灌注3h、6h、12h、1d、2d、4d和7d组共9小组,每组5只。结果与对照组和假手术组比较脑缺血再灌注后3h脑组织伊文思蓝渗出量增加(0.18±0.08比0.86±0.12μg/g),1d后达到高峰(4.64±1.27μg/g),2d以后逐渐减小(4.48±0.65μg/g)。基质金属蛋白酶9表达阳性细胞在缺血再灌注12h(3.64±0.56比6.76±2.26)、1d(11.24±2.64)、2d(21.52±2.03)、4d(16.66±1.38)和7d(14.64±3.77)均显著增加,其中2d为高峰期。结论脑缺血再灌注时基质金属蛋白酶9阳性细胞的表达与血脑屏障通透性的增加呈时间相关性,提示基质金属蛋白酶9参与了脑缺血急性期血脑屏障的破坏。     

凝血酶对血脑屏障通透性影响及其机制的实验研究

目的　探讨凝血酶 (TB)对血脑屏障通透性的影响及其可能机制。　方法　将TB或TB +组织蛋白酶G(CT G)立体定向注入SD大鼠右侧基底节 ,测定其血脑屏障通透性和脑水含量 ;将脑微血管内皮培养液中加入TB或TB +CT G ,相差显微镜动态观察内皮细胞形态的变化 ,免疫组织化学技术检测基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )表达的改变。　结果　TB脑内注射后 6h ,同侧基底节区血脑屏障通透性为 (0 4 19± 0 0 16 )A/mg (P <0 0 5 ) ,2 4h时血脑屏障通透性为 (0 5 94± 0 0 18)A/mg(P <0 0 1) ,持续至 4 8h (P <0 0 5 )逐渐消退 ,脑组织水含量的变化规律与血脑屏障通透性的变化类似。TB +CT G组在各个时间点血脑屏障通透性和脑组织水含量与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。TB使内皮细胞发生收缩 ,细胞收缩程度具有时间依赖性。TB入培养液 6h后 ,内皮细胞MMP 2表达水平为 (0 391± 0 0 17)A ,与对照组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。TB +CT G加入培养液后 ,细胞形态、MMP 2表达与对照组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。　结论　TB增加血脑屏障通透性是其诱发脑水肿形成的主要机制之一 ,TB通过激活蛋白酶激活受体 1(PAR 1) ,使内皮细胞发生收缩 ,促进MMP 2表达 ,是TB增加血脑屏障通透性的可能机制     

基质金属蛋白酶-2、-9与肝纤维化

研究基质金属蛋白酶－2（MMP－2）、基质金属蛋白酶－9（MMP－9）在实验性肝纤维化发生发展过程中的表达及动态变化。用皮下注射CCL4的方法复制大鼠化学性肝纤维化模型。用免疫组织化学方法在4周、8周、12周分别检测肝组织中MMP－2、MMP－9的表达。MMP－2主要位于血管内皮细胞、窦内皮细胞及肝窦细胞的胞浆；MMP－9主要位于静 肝细胞及肝窦细胞的胞浆。MMP－2、MMP－9免疫组化阳性表达面积，肝纤维化明显高于对照组（P＜0．05），并随造模时间延长而进行性增加。MMP－2、MMP－9参与了肝纤维化的进展，可能促进作用。     

糖基化终末产物对巨噬细胞基质金属蛋白酶9活性的影响以及辛伐他汀的干预作用

目的研究糖基化牛血清白蛋白对巨噬细胞的活化与基质金属蛋白酶9活性的影响,并观察辛伐他汀的干预效应。方法体外培养小鼠腹腔巨噬细胞,与不同浓度糖基化牛血清白蛋白、辛伐他汀共同培养,采用明胶酶谱法测定基质金属蛋白酶9活性。结果糖基化牛血清白蛋白可在体外诱发小鼠腹腔巨噬细胞形态变化。不同浓度的糖基化牛血清白蛋白(0、50、100、200、400mg/L)作用48h后,细胞培养基中基质金属蛋白酶9活性明显增强,且均明显高于对照组(n=5,P<0.05),呈剂量依赖效应。400mg/L糖基化牛血清白蛋白处理小鼠腹腔巨噬细胞不同时间后,作用12h时基质金属蛋白酶9活性与对照组比差异无显著性(n=5,P>0.05),作用24、36、48h时基质金属蛋白酶9活性均明显高于对照组,呈时间依赖效应(n=5,P<0.05)。加入辛伐他汀后,基质金属蛋白酶9活性明显降低。结论糖基化牛血清白蛋白可在体外活化巨噬细胞,使基质金属蛋白酶9活性增加,提示其致动脉粥样硬化及斑块破裂作用;辛伐他汀可明显降低基质金属蛋白酶9活性,说明其治疗作用的多向性。     

冠状动脉重构的血管内超声研究及基质金属蛋白酶和高敏C反应蛋白检测

目的用血管内超声(IVUS)对比研究不同类型冠心病患者的冠状动脉重构(remodeling)特点,探讨冠状动脉重构与临床表现、基质金属蛋白酶(MMPs)及高敏C反应蛋白(hs CRP)的关系。方法在行冠状动脉介入治疗前,应用IVUS研究38例急性冠状动脉综合征(ACS)和18例稳定性心绞痛(SA)患者,测量“罪犯”血管病变处及其近端、远端参考段的外弹力膜(EEM)面积、管腔面积,计算斑块面积和重构指数(RI),定义RI>1.05为正重构,RI<0.95为负重构。识别出高危斑块,检测外周血基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)和hs CRP水平。结果ACS组“罪犯”血管处的斑块面积大于SA组[(11.94±4.90)mm2比(9.17±3.36)mm2,P=0.035]。ACS组RI明显大于SA组(0.972±0.222比0.796±0.130,P=0.003)。两组正、负重构分布比率显著不同正重构在ACS组比SA组更常见(34.2%比5.6%,P=0.047),而负重构在SA组更常见(负重构在ACS组和SA组分别为52.6%与88.9%,P=0.003)。ACS组高危斑块发生率多于SA组(76.3%比50.0%,P=0.040)。ACS组患者血清MMP2高于SA组[(250.65±47.97)μg/L比(214.21±47.20)μg/L,P=0.029],前者的血浆MMP9也高于后者[(84.26±9.78)μg/L比(68.46±22.82)μg/L,P=0.038],前者的血清hs CRP亦高于后者[(3.62±3.37)mg/L比(1.48±1.52)mg/L     

桑黄提取物抑制circ＿0012129表达阻碍结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制

目的 研究桑黄提取物对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响，并探讨其可能的分子机制。方法 体外培养结直肠癌Caco-2细胞，分为低、中、高剂量桑黄提取物组(100、200、400μg/ml桑黄提取物干预Caco-2细胞24 h)、si-NC组(转染si-NC至Caco-2细胞)、si-circ＿0012129组(转染si-circ＿0012129至Caco-2细胞)、高剂量+pcDNA-NC组(400μg/ml桑黄提取物干预转染pcDNA-NC的Caco-2细胞24 h)、高剂量+pcDNA-circ＿0012129组(400μg/ml桑黄提取物干预转染pcDNA-circ＿0012129的Caco-2细胞24 h)和对照组(NC组，细胞常规培养24 h),CCK-8法检测细胞增殖，Transwell检测细胞迁移和侵袭，Western印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin的蛋白表达，RT-qPCR法检测circ＿0012129表达。结果 与NC组比较，桑黄提取物组Caco-2细胞A值、迁移数和侵袭数、MMP2、MM...     

血清基质金属蛋白酶-9及转化生长因子β1与糖尿病肾病的关系

目的　观察 2型糖尿病患者 (T2DM)血清基质金属蛋白酶 9(MMP 9)、转化生长因子β1(TGF β1)、IV型胶原 (CIV)的变化 ,探讨其在糖尿病肾病 (DN)进展中的作用。　方法　根据尿白蛋白排泄率 (UAER)将 6 4例T2DM患者分为正常白蛋白尿 (NA)组、微量蛋白尿 (MA)组、临床白蛋白尿 (ODN)组 ,分别检测各组的MMP 9、TGF β1、CIV。　结果　血清MMP 9含量在MA组及ODN组较正常对照 (NC)组明显升高 (P <0 .0 1) ,且ODN组较MA组明显升高 (P <0 .0 1)。血清TGF β1含量NA组、MA组及ODN组均较NC组明显升高 (P <0 .0 1) ,MA组及ODN组较NA组升高明显 (P<0 .0 1)。血清CIV含量ODN组明显高于其他三组 (P <0 .0 1) ,NA组、MA组虽较NC组升高但无显著差异 (P >0 .0 5 )。　结论　血清MMP 9、TGF β1升高在DN的发生、发展中起着重要作用     

牙龈卟啉单胞菌对血管内膜粘附因子和金属蛋白酶的影响(英文)

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(Pg,为牙周病的主要致病菌)对血管内膜粘附因子和金属蛋白酶的影响。方法:大鼠120只,按数字表随机分为空白对照组、Pg低剂量组(2ml)与Pg高剂量组(5ml),各40只,后两组每3d分别接受相应剂量Pg肌注,且均不进行抗生素干预,历时12周。取其静脉血,检测三组血液中的细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)、基质金属蛋白酶(MMP)-3及MMP-9的水平。结果:与空白对照组相比,Pg低剂量组与高剂量组大鼠静脉血中ICAM-1[(175.79±14.30)ng/ml比(182.62±15.07)ng/ml、(189.39±14.93)ng/ml]、VCAM-1[(256.49±37.17)ng/ml比(271.58±32.85)ng/ml、(286.66±30.66)ng/ml]、MMP-3[(3.23±0.69)ng/ml比(3.61±0.82)ng/ml、(3.97±0.83)ng/ml]及MMP-9[(1.30±0.39)mg/L比(1.48±0.39)mg/L、(1.67±0.45)mg/L]含量显著增加(P0.05或0.01),且与Pg低剂量组相比,Pg高剂量组上述因子含量显著增加(P0.05)。结论:牙龈卟啉单胞菌可引起大鼠血清中血管内膜粘附因子和金属蛋白酶含量的显著增加,可加剧冠心病的病理演变。     

基质金属蛋白酶-9与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系

目的研究基质金属蛋白酶(MMP)-9与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系。方法应用彩色多普勒超声仪探测48例颈动脉粥样硬化患者(ACA组)及20例健康体检者(NC组)的双侧颈动脉粥样硬化情况,采用酶联免疫吸附法检测各组血清MMP-9水平。结果 NC组未检出颈动脉粥样硬化斑块。ACA组血清MMP-9水平明显高于NC组(P0.05);ACA组中,易损斑块亚组血清MMP-9水平明显高于稳定斑块亚组,稳定斑块亚组血清MMP-9水平明显高于无斑块亚组(均P0.05)。结论 MMP-9水平升高可作为反映颈动脉粥样硬化斑块稳定性的血清学检测指标。     

丁苯酞联合甘露醇对弥漫性脑损伤大鼠咬合蛋白及基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的观察丁苯酞对弥漫性脑损伤大鼠咬合蛋白及基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法 240只成年SD大鼠随机数字法分为模型组(80只)、甘露醇组(80只)、丁苯酞+甘露醇组(80只),甘露醇组静滴甘露醇(剂量1.0 g/kg),丁苯酞+甘露醇组,在给予甘露醇的同时还要给予丁苯酞软胶囊灌胃(剂量0.4 ml/kg)。每组分别在伤后3 h、12 h、24 h、72 h、144 h干湿法测定大鼠脑组织含水量、伊文思蓝法测定血脑屏障通透性、免疫组化和Werstern印迹测定咬合蛋白及MMP-9的表达变化。结果与模型组相比,甘露醇组在各时间点脑组织含水量明显减少(P0.05),血脑屏障通透性明显降低(P0.05),咬合蛋白及MMP-9的表达无明显差异(P0.05)。与甘露醇组相比,丁苯酞+甘露醇组各时间点脑组织含水量明显减少(P0.05),血脑屏障通透性明显降低(P0.05),咬合蛋白的表达明显增加(P0.05),MMP-9的表达明显减少(P0.05)。结论丁苯酞与甘露醇联合应用可明显减少弥漫性脑损伤大鼠脑水肿程度,改善血脑屏障通透性,增加咬合蛋白的表达,减少MMP-9的表达。     

基质金属蛋白酶-9在脑缺血过程中的双重作用

基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是MMP家庭中的一员,可特异性降解细胞外基质。脑缺血早期(1～3d),MMP-9可通过降解基底膜及内皮细胞紧密连接破坏血脑屏障,导致继发性脑水肿和脑出血。脑缺血后期(7～14d),MMP-9则能促进神经血管再生,有利于损伤脑组织的恢复。     

益肾活血提取液对oxLDL诱导的人脐静脉内皮细胞CD40、MMP-9及VCAM-1表达的影响

目的 观察益肾活血提取液对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)CD40、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响.方法 原代培养HUVECs,取3～5代细胞用于试验,提取细胞RNA及蛋白.采用实时定量RT-PCR检测HUVECs VCAM-1 mRNA表达,采用Western印迹法观察HUVECs CD40及MMP-9的蛋白表达变化.结果 刺激组CD40、MMP-9及VCAM-1的表达较空白组明显升高(1.48±0.34 vs 0.45±0.16;1.54±0.16 vs 0.62±0.12, 12.82±0.16 vs 1.00±0.01,P均<0.001 ),大、中、小剂量的益肾活血提取液可以不同程度地抑制oxLDL诱导的HUVECs、CD40、MMP-9及VCAM-1的高表达.结论 益肾活血提取液具有改善内皮细胞功能的作用,其机制与抑制oxLDL诱导的HUVECs CD40、MMP-9及VCAM-1的高表达有关.