白血病MICM分型的临床和实验研究

从形态学、免疫学、细胞遗传学及分子生物学特性（MICM）探讨白血病与临床疗效的关系,用骨髓细胞形态及组织化学染色分析作FAB分型诊断;流式细胞术（FCM）单克隆抗体直接免疫标记技术检测白血病细胞分化抗原,短期培养法与直接法G显带染色体组型分析。双色荧光原位杂交技术检测bcr/abl融合基因,结果：共检测出异常抗原表达急性白血病7例,47例FAB分型的急性髓细胞性白血病（AML）中5例伴有淋系相关抗原表达。15例FAB分型的急性淋巴细胞性白血病（ALL）中2例伴有髓系相关抗原表达,2例ALL呈T,B相关抗原混合表达。急性白血病中检出46,XY,t(8;21）等染色体畸变和bcr/abl融合基因,20例慢性髓细胞性白血病（CML）中Ph染色体阳性16例,7例伴有复杂染色体核型变异,5例检出bcr/abl融合基因,Ph染色体阴性的CML中,1例检测出bcr/abl融合基因,3例为夏杂染色体核型变异。伴有异常抗原表达的急性白血病化疗一疗程完全缓解（CR）率和二疗程总CR率均低于呈单系相关抗原表达的急性白血病（P＜0.05）,伴复杂核型变异的CML急变时间短于Ph阳性的CML（P＜0.05）,结论：白血病的MICM分型与临床疗效密切相关。     

65例急性白血病形态学、免疫学和细胞遗传学分型诊断

对65例急性白血病(AL)进行了形态学、免疫学和细胞遗传学综合分型,其中ALL41例,包括B系ALL21例、T系ALL18例、T/B杂合型2例;ANLL19例中具有粒或单核系免疫表型者11例,8例结合形态学分型与核型分析定为ANLL;另有5例免疫表型及核型等不具有亚型特异性,暂定为急性未定型白血病。检出的特异性染色体异常包括ph、6q~-、12p~-、t(8;21)、t(15;17)、inv(3q)等。形态学检查是AL诊断分型的基本方法,但单纯依靠形态学诊断可能造成分型的偏差;免疫分型有助于ALL的正确诊断与分型,是对ALL形态学诊断的有力补充,而对ANLL的分型目前尚有局限性;核型分析对AL尤其是ANLL的分型诊断有重要意义。     

Ph1染色体及bcr/abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病中的诊断意义

目的 探讨Ph1染色体和bcr/abl融合基因检测在慢性粒细胞白血病诊断中的意义.方法 选择28例慢性粒细胞白血病患者和20例缺铁性贫血患者作为研究对象,采用骨髓细胞短期培养法制备染色体、采用RT-PCR法分析bcr/abl融合基因.结果 28例慢性粒细胞白血病患者中,Ph1染色体阳性者25例(89.3%),bcr/abl阳性者26例(92.9%),Ph1和bcr/abl均阳性25例(89.3%),Ph1阴性、bcr/abl阳性1例(3.6%),Ph1和bcr/abl均阴性2例(7.1%).20例缺铁性贫血患者Ph1和bcr/abl均阴性.结论 Ph1染色体、bcr/abl融合基因的检测有助于慢性粒细胞白血病的诊断和鉴别诊断.     

成人急性白血病免疫表型特征分析及意义

采用活细胞间接免疫荧光技术 ,使用常规 8种抗CD单抗 ,测定 12 0例成人急性白血病免疫表型。结果显示免疫分型与FAB形态学分型有较高的符合率 ,但亦存在CD抗原在淋系或髓系交叉或反向表达、甚或不表达的情况。急性粒细胞白血病 (AML)M3 型和急性淋巴细胞白血病 (ALL)L3 型以及B淋巴系和T淋巴系ALL在免疫表型上各有其特点。部分免疫表型特征对提示预后有一定意义     

慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因T315I点突变的检测及靶向治疗

慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)占所有白血病的15%~20%,90%以上患者存在特征性的Ph染色体(费城染色体)及bcr/abl融合基因。Ph染色体由位于9q34的abl原癌基因断裂并易位到22q11的断裂点集簇区(bcr)形成,并融合形成bcr/abl融合基因[1]。CML治疗重点在于慢性期获得分子水平的缓解。伊马替尼(imatinib mesy-     

急性淋巴细胞性白血病的细胞遗传学研究

对40例中国人急性淋巴细胞白血病(急淋)进行了细胞遗传学的研究,发现正常核型为40%,染色体数量异常占42.5%,染色体结构异常为17.5%,特异染色体异常包括有t(9;22)(q34;q11),t(4;11)(q21;q23)和t(8;14)(q24;q32)及环状染色体等.分析了2例急淋患者初发和复发时核型的变化,显示复发时有附加异常。研究认为细胞形态学,免疫表型和细胞遗传学的联合分析(MIC)有助于急淋的诊断和分型。此外,细胞遗传学检查对于急淋白血病的预后具有重要意义。     

儿童急性淋巴细胞白血病的免疫表型分析

目的 分析儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的免疫表型特点.方法用一组相关单克隆抗体和流式细胞技术间接免疫荧光法对85例儿童ALL进行免疫分型.结果 T系ALL占28.2%,B系ALL占61 2%,T/B急性混合细胞白血病(AMLL)8.2%,其中髓系抗原表达率21.2%.各组L1、L2比率、染色体异常及治疗完全缓解(CR)率均无显著性差异(P＞0.05);T-ALL中CD3平均阳性率较CD2、CD7低(P＜0.01,P＜0.05),B-ALL中CD22阳性率明显低于CD10、CD19(P＜0.01).结论 ALL免疫分型与FAB分型、染色体核型变化无相关性系列特异性单抗CD3、CD22在诊断T-ALL、B-ALL中起决定作用;ALL髓系抗原阳性与治疗CR率无关.     

Ph染色体bcr/abl融合基因在诊断慢性粒细胞白血病中的意义——附妊娠合并慢性粒细胞白血病1例报告

慢性髓系白血病(CML)的细胞遗传学特征是具有Ph染色体,即t(9;22)(q34;q11),其结果在分子水平上形成bcr/abl融合基因,90%患者在慢粒慢性期具有Ph染色体,极少数病人同时伴有附加异常[1].妊娠合并慢性粒细胞白血病,其染色体核型具有Ph染色体外还伴有附加异常,并且中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)积分明显增高者,实属少见,我们遇到1例,报告如下.     

Ph染色体在慢性粒细胞白血病诊断中的价值

慢性髓系白血病(CML)的细胞遗传学特征是具有Ph染色体，即t(9；22)(q34；q11)，其结果在分子水平上形成bcr／abl融合基因。根据Ph染色体的检测结果，结合外周血象、骨髓象及中性粒细胞碱性磷酸酶染色(NAP)，使CML区分为三型，即典型(Ph^ ／bcr／abl^ 或Ph^-／bcr／abl^ )慢性粒细胞白血病(CGL)、非典型(Ph^-／bcr／abl^-)慢性粒细胞白血病(α—CML)和慢性粒单核细胞白血病(CMML)，并且使早期CGL得以明确诊断。     

成人急性淋巴细胞白血病的MIC分型与临床预后分析

分析成人急性淋巴细胞白血病（ALL）的MIC：分型与临床及预后的关系。方法：40例ALL。患者按常规骨髓涂片及细胞化学染色进行形态学分析，并用单克隆抗体间接免疫荧光法检测细胞免疫表型，用R显带技术分析13例的细胞遗传学。结果：FAB分型ALL-LI型3例，L2型35例，L3型2例。细胞免疫表型符合T细胞系ALL13例（伴髓系表达2例），B细胞系ALL21例（伴髓系表达4例），T／B细胞系共同表达ALL5例（伴髓系表达1例），未分化型急性白血病1例。13例中有8例核型异常。结论：ALL患者形态学检查结合免疫学和细胞遗传学综合分析，有利于明确白血病细胞克隆的来源，有利于估计预后，并指导治疗。     

婴儿慢性粒细胞白血病1例并文献复习

慢性粒细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)为克隆性造血千细胞疾病,主要累及粒细胞系,其细胞遗传学基础是9号染色体和22号染色体之间的平衡易位后衍生出Ph染色体,并成为bcr/abl融合基因形成的结构基础,95%以上患者Ph染色体和/或bcr/abl融合基因阳性,儿童发病率较低,仅占同期白血病患者的2%～3%[1],婴儿CML更为少见,而近年国内对儿童尤其是婴儿的慢性髓系肿瘤的诊断名称缺乏规范化.本文报告1例婴儿CML并结合文献进行讨论,以期提高对儿童/婴儿慢性髓系肿瘤的认识.     

成人急性白血病细胞三色流式细胞术的免疫分型

目的:探讨成人急性白血病(AL)细胞三色流式细胞术免疫分型的特点.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法、三色流式细胞术对197例急性白血病细胞进行免疫表型分析.结果:急性淋系白血病细胞均表达淋系抗原,46.7%和11.1%的成人ALL细胞表达CD13和CD33;急性髓系白血病细胞均表达髓系抗原,M3中只有1例表达CD34,HLA-DR均无表达;同时AML中有12例表达淋系抗原CD7,21例表达CD10;197例急性白血病中有11例(占5.6%)为杂舍型急性白血病(HAL),其中有6例B/M型.结论:CD45/SSC设门方法能排除骨髓中正常细胞的干扰,免疫表型的检测和研究对急性白血病的分型和明确诊断有帮助.     

白血病bcr/abl mRNA的荧光定量RT-PCR检测

①目的探讨bcr/abl基因表达水平与白血病诊断、预后的关系及在微小残留病检测中的意义.②方法荧光定量RT-PCR法(FQ-RT-PCR)测定34例不同类型及处于不同疾病阶段的白血病病人bcr/abl基因的表达.③结果对照组bcr/abl基因表达均为阴性.慢性粒细胞白血病(CML)病人bcr/abl基因表达阳性率为89.5%(17/19),经治疗达临床缓解者8例,bcr/abl基因表达均值为(2.43±0.67)×105基因拷贝/L;初诊CML未经治疗及治疗无效并发生急变或死亡者bcr/abl基因表达均值为(2.60±0.90)×107基因拷贝/L,两者有极显著性差异(t＝3.43,P＜0.01).随访4例CML,2例治疗缓解,bcr/abl转录减少,无阴转;持续增高2例中,1例急变,1例死亡.急性淋巴细胞白血病(ALL)病人bcr/abl表达阳性率为11.8%(2/15),均复发,1例死亡,bcr/abl基因转录复发前表达明显增高.④结论 FQ-RT-PCR实验方法灵敏、快速、特异性好、结果准确;bcr/abl基因表达水平的定量观察及动态监测,有助于白血病的临床诊断与分型,以及推测微小残留白血病的存在状况和预后.     

62例急性白血病流式细胞仪免疫分型的特点及预后分析

目的探讨流式细胞仪免疫分型在急性白血病(AL)患者中的表达特点、诊断价值及其预后意义,为建立个体化的治疗提供指导。方法回顾性对我院收治的62例初发AL患者的骨髓细胞形态学、流式细胞仪免疫分型检测结果进行对比分析,了解二者诊断相符率。结合细胞遗传学及分子生物学检查结果进行预后分析,之后分组观察患者治疗反应及生存情况。结果 5例急性白血病患者通过骨髓细胞形态学和组织化学检查未能明确分型诊断,经流式细胞仪免疫分型检测后确定。2例骨髓细胞形态与流式细胞仪免疫分型结果不符,结合细胞遗传学特点,予以修正诊断。AML及ALL均存在跨系表达抗原,AML常见的跨系抗原表达为CD56、CD7、CD19。ALL常见跨系抗原表达为CD13、CD15、CD33。部分分子遗传学异常可对应有异常抗原表达,AML中CD7表达常伴有FLT3/ITD突变。AML伴t(8;21)(q22;q22)/AML1-ETO阳性患者中,60%左右表达CD19。在疗效观察中发现伴有预后不良染色体核型或分子遗传学标志的老年性急性髄系白血病患者(年龄≥70岁)中,非化疗组总生存期(OS)与化疗组相比无差异性(P0.05)。结论流式细胞仪免疫分型检测可以提高急性白血病分型诊断的准确性,结合细胞遗传学和分子生物学可有效地指导临床制定治疗方案和预后判断。     

儿童ALL65例免疫分型体会

目的:分析儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的免疫表型特点。方法:用玻片法单克隆抗体对65例儿童ALL进行免疫分型。结果:T细胞系ALL占27.2%,B细胞系ALL占63.1%,TB急性混合细胞白血病(MAL)占9.2%,其中伴髓系抗原表达率7.7%。结论:免疫分型对于ALL的分型诊断而言,可以认为是金标准。     

bcr/abl基因在慢性粒细胞性白血病中的发病作用及bcr/abl反义基因治疗

慢性粒细胞性白血病(CML)最有效治疗手段为骨髓移植(BMT)。但异体BMT供髓者缺乏，且有发生移植物抗宿主病的危险。自体BMT常因骨髓净化不彻底导致复发。所以探讨CML细胞生物学行为改变的原因，是探索CML病因进而力争治愈CML的关键。 　　1　bcr/abl表达产物及功能 　　90%以上CML患者骨髓全部造血细胞内出现Ph1染色体，由位于9号染色体q34.11的c-abl基因与位于22号染色体q11.21的c-sis基因相互易位，形成t(9;22)(q34.11;q11.21)所致。22号染色体上断裂点集中在约5 800 bp的区域内，称M-bcr。CML中bcr/abl融合方式有2种：bcr第3及第2外显子分别与abl第2外显子融合成b3a2及b2a2型，二者差75 bp，均表达210 000的蛋白，即p210bcr/abl (p210)。此外还有bla2型(p185)，主要见于ALL。     

ES探针荧光原位杂交法检测bcr/abl融合基因

目的探讨应用ES型bcr/abl探针(双色单融合)荧光原位杂交技术(FISH)在检测bcr/abl融合基因中的价值。方法慢性髓细胞性白血病(CML)初诊或复诊患者30例(骨髓标本43份),行普通染色体核型分析和ES型bcr/abl探针荧光原位杂交分析。结果 43份骨髓标本,6份未做骨髓培养,6份培养失败,在其余31份培养成功的标本中,找到Ph1染色体9份,另有1份标本多次检查都发现存在21p+染色体异常;43份骨髓都经FISH检测,13份标本发现bcr/abl融合基因。结论 ES型bcr/abl探针对CML初诊病例的bcr/abl融合基因有较高的检出率;对复发病例,不仅能辅助诊断CML,而且在监测白血病微小残留病灶、判断疾病的进展上均有较高的灵敏度。     

急性白血病(AL)免疫表型与形态学变化关系的研究

目的 探讨急性白血病(AL)免疫表型与形态学的变化关系,提高急性白血病的分型诊断准确率. 方法 对340例AL患者的骨髓细胞及外周血细胞分别进行染色、细胞化学分析,并对其中骨髓细胞选用单克隆抗体,用流式细胞检测.对细胞形态( FAB)分型与免疫表型相比较,找出相关性及特异性诊断标志. 结果 FAB法与免疫表型诊断,符合者312例,占88.82%;不符合者 38例,占11.18%,其中含18例符合型白血病,占5.39%. 结论 在AL中应该以形态学为基础,免疫学做辅助手段,进行综合分析,从而提高诊断准确率;当细胞形态学和免疫表型不符合时,应该结合临床治疗、染色体、基因情况等方法 加以综合分析,进行确诊;免疫表型有助于混合型及转化型白血病的诊断和鉴别诊断.     

血小板显著增多为首发表现的慢性髓细胞白血病2例并文献复习

目的探讨以血小板显著增多为首发表现的慢性粒细胞白血病（CML）的临床及分子生物学特点。方法应用细胞涂片观察形态学;RT-PCR检测bcr/abl融合基因;常规染色体检测细胞遗传学变化。结果血小板显著增多为首发表现的CML是一组具有独特临床和生物学特点的疾病,表达bcr/abl融合基因,可进一步向CML加速期、急变期演变,应早期进行积极干预。结论对血小板显著增多的患者应及时进行Ph染色体及bcr/abl融合基因表达水平的检测,及早鉴别原发性血小板增多症（ET）及慢性粒细胞性白血病（CML）,避免误诊、误治。     

流式细胞术检测成人急性白血病免疫表型特点分析

目的:1.探讨免疫分型对成人急性白血病(AL)的诊断价值;2.分析成人急性白血病免疫表型特点及免疫亚型分布情况.方法:采用流式细胞仪结合单克隆抗体双色直接免疫荧光标记方法检测75例急性白血病免疫表型;用瑞氏染色及细胞化学判断骨髓形态学结果.结果:1.75例AL中6例形态学与免疫分型不相符占8%.2.ANLL主要表达CyMPO和CD33,ALL主要表达CD79a、CD20.3.AML组中CyMPO阳性表达率远高于ALL组,差异显著(P＜0.01),CD117在Ly -AML组中阳性表达率远高于Ly- -AML组(P＜0.01).结论:1.白血病免疫分型是对形态学分型的补充和修正,对于B-ALL、T-ALL、Mo及HAL诊断必可少.2.MPO是髓系特异标志,CD117与Ly -AML发生密切相关.