老年痴呆症模型小鼠蛋白磷酸化与短期丰富环境刺激的影响

背景：丰富环境刺激可提高对神经可塑性、学习记忆很重要的CAMKII、CREB蛋白的转录。目的：探讨短期丰富环境刺激对老年痴呆模型小鼠海马CAMKII和CREB蛋白磷酸化的影响。方法：实验分3组：长期环境组（以APP/PS1转基因C57/BL6小鼠作为老年痴呆症动物模型,从小鼠6月龄时开始进行长期的丰富环境刺激）、对照组（未进行长期环境刺激的APP/PS1转基因C57/BL6小鼠）与野生型组（非转基因的野生型C57/BL6小鼠）。在3组小鼠18月龄时,每组又随机分为基线组和刺激后两个亚组,对刺激后亚组施以为期1d的短期丰富环境刺激。结果与结论：野生型组的刺激后亚组海马CREB磷酸化水平显著高于基线亚组（P〈0.05）,CAMKII的磷酸化水平也有所升高;丰富环境组的刺激后亚组海马CAMKII磷酸化水平稍高于基线亚组,CREB磷酸化水平的区别不明显;对照组两个亚组海马的CAMKII和CREB磷酸化水平无明显区别。说明短期丰富环境刺激仅提高了丰富环境刺激后老年痴呆症小鼠的CAMKII磷酸化水平,但显著提高了野生型小鼠的CAMKII和CREB磷酸化水平。     

环磷酸腺苷效应元件结合蛋白/脑源性神经营养因子信号通路在调心方改善APP/PS1小鼠学习记忆中的作用

目的通过观察APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠海马环磷酸腺苷效应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BDNF)信号通路的变化,探讨调心方对APP/PS1双转基因AD小鼠学习记忆的影响机制。方法将3月龄APP/PS1雄性小鼠54只随机分为模型组(n=18)、多奈哌齐组(n=18)和调心方组(n=18);另设同月龄同品系的C57/BL6雄性小鼠18只为对照组。各给药组给予相应药物。给药12周后,每组采用Morris水迷宫进行行为学测试,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)法检测海马CREB mRNA和BDNF mRNA表达的变化,Western blotting法检测海马磷酸化CREB(p-CREB)、BDNF蛋白表达的变化。结果与模型组比较,调心方组逃避潜伏期显著缩短(P0.001),在原平台所在象限停留的时间百分比增加(P0.05),海马CREB mRNA、BDNF mRNA表达较模型组均增加(P0.05),海马p-CREB、BDNF蛋白表达较模型组明显增加(P0.01)。结论调心方可有效改善APP/PS1双转基因AD小鼠的空间学习记忆,可能与上调CREB/BDNF信号通路有关。     

基于αCaMKⅡ-CREB-BDNF信号通路研究调心方对APP/PS1双转基因AD小鼠学习记忆和突触可塑性的影响

目的:观察调心方对APP/PS1双转基因AD小鼠海马CA1区长时程增强(LTP)、海马区α钙/钙调素依赖激酶Ⅱ(αCaMKⅡ)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)、脑源性神经营养因子(BDNF)、突触后致密物95(PSD-95)mRNA和蛋白表达的影响,从αCaMKⅡ-CREB-BDNF信号通路的角度探讨调心方改善APP/PS1双转基因AD小鼠学习记忆和突触可塑性的作用机制。方法:选择54只3月龄APP/PS1雄性小鼠,采用随机数字表法分为模型组、调心方组、多奈哌齐组,每组18只,另设同月龄同品系18只C57/BL6雄性野生型小鼠为正常组。参照药理试验中动物与人体间的等效剂量换算标准进行折算,多奈哌齐组和调心方组均按照人的等效剂量(体质量:60 kg)折算出药物剂量。正常组和模型组给予等量的生理盐水,剂量10 mL/(kg·d);多奈哌齐组给予盐酸多奈哌齐灌胃,剂量为0.05 mg/(kg·d),调心方组给予调心方颗粒灌胃,剂量为0.057 g/(kg·d);4组小鼠于3月龄时进行灌胃给药处理,1次/d,连续灌胃3个月。采用电生理技术在离体海马脑片上诱导4组小鼠海马CA1区LTP;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测4组小鼠海马αCaMKⅡ、CREB、BDNF、PSD-95 mRNA表达情况;采用免疫印迹(WB)法检测4组小鼠海马p-αCaMKⅡ、p-CREB、BDNF、PSD-95蛋白表达情况。结果:①电生理结果:在0.1～0.7 mA刺激强度下,4组小鼠海马I/O曲线斜率无明显差异,差异无统计学意义(P0.05)。在20～250 ms刺激间隔下,4组小鼠的PPF易化无明显差异,差异无统计学意义(P0.05)。在第50～60 min稳定期内,与模型组比较,调心方组小鼠诱导的LTP中fEPSP斜率明显提高(P0.05)。②RT-qPCR结果:与正常组比较,模型组小鼠海马αCaMKⅡ、CREB、BDNF和PSD-95 mRNA表达均明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,调心方组小鼠海马αCaMKⅡ、CREB、BDNF和PSD-95 mRNA表达均明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。③Western blot法检测结果:与正常组比较,模型组小鼠海马p-αCaMKⅡ、p-CREB、BDNF和PSD-95蛋白表达均明显减少,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,调心方组小鼠海马的p-αCaMKⅡ、p-CREB、BDNF和PSD-95的蛋白表达均明显增加,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:调心方能够改善APP/PS1双转基因AD小鼠海马CA1区LTP、提高PSD-95 mRNA和蛋白的表达,从而改善APP/PS1双转基因AD小鼠学习记忆功能和突触可塑性,其作用机制可能与其上调海马αCaMKⅡ-CREB-BDNF信号通路水平有关。     

电针百会对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力及Tau蛋白磷酸化的影响

目的:基于Tau蛋白磷酸化探讨电针百会对APP/PS1转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的影响及其可能机制。方法:30只4月龄雌性APP/PS1转基因小鼠随机分为模型组、百会组和非穴组,10只同窝阴性野生小鼠为野生组;百会组电针百会穴,非穴组电针非穴,干预28d。采用Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力;尼氏染色观察小鼠海马神经元形态结构变化;蛋白免疫印记杂交技术(Western blot)检测小鼠海马组织在Ser-396位点上Tau蛋白磷酸化水平。结果:与模型组相比,百会组可改善小鼠的学习记忆能力(P0.05),减轻海马神经元形态结构的损伤,降低海马组织中Ser-396位点上Tau蛋白磷酸化水平(P0.05),非穴组与模型组相比无显著性差异(P0.05)。结论:电针百会能够改善APP/PS1转基因痴呆模型小鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制Tau蛋白磷酸化有关。     

APP/PS1转基因AD小鼠脑内淀粉样斑块与铁沉积的磁敏感成像研究

目的 应用三维增强磁敏感成像(3D-enhanced susceptibility weighted angiography,ESWAN)技术检测APPswe/PSEN1de9基因突变型小鼠(购自美国Jackson Laboratory,简称为APP/PS1转基因小鼠)脑不同部位的平均相位值(mean phase value,MPV),并探讨其与铁蛋白及淀粉样斑块分布的相关性。材料与方法 APP/PS1转基因小鼠及野生型对照组小鼠行T1WI、T2WI和ESWAN序列扫描,测量小鼠脑皮质区、海马区及丘脑区MPV。对鼠脑组织进行铁蛋白和Aβ蛋白的免疫组化染色,并分别计数感兴趣区内染色斑块数量和面积所占百分比。对感兴趣区MPV与斑块数量、斑块面积百分比采用Pearson检验进行相关分析。结果 APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠皮质区(t=-2.201,P=0.045)和海马区(t=-2.524,P=0.024)的MPV值差异均具有统计学意义。APP/PS1转基因小鼠与对照组小鼠丘脑区的MPV差异不具有统计学意义(t=-2.094,P=0.055)。APP/PS1转基因小鼠每组中的MPV与铁蛋白斑块数量与范围分别具有显著相关性(P0.05);淀粉样斑块与铁蛋白的数量与范围分别具有相关性(P0.05)。结论 APP/PS1转基因小鼠脑内MPV与脑内铁沉积具有显著相关性。APP/PS1转基因小鼠脑内皮质区、海马区及丘脑区的铁沉积持续进行,并且与淀粉样斑块的形成具有相关性。     

高强度间歇运动训练上调APP/PS1转基因阿尔兹海默病小鼠海马线粒体自噬的研究

目的:观察高强度间歇运动训练干预是否能改善APP/PS1转基因AD小鼠病理表现,并探讨线粒体自噬在其间的生物学效应。方法:8月龄雄性APP/PS1转基因小鼠分为转基因模型安静组(SED-Tg)和转基因模型+高强度间歇运动训练组(HIIT-Tg),C57BL/6野生型小鼠纳入野生型安静组(SED-Wt)。HIIT-Tg组动物进行12周高强度间歇运动训练。避暗被动回避实验检测学习记忆能力,JC-1荧光探针检测海马线粒体膜电位,二氯荧光素探针检测海马线粒体ROS,Western Blot法检测脑海马Aβ-42、BDNF、AMPK、PINK1、Parkin、Bnip3蛋白表达。结果:(1)SED-Tg组与SED-Wt组比较,逃避潜伏期、线粒体膜电位、BDNF、AMPK、PINK1、Parkin和Bnip3蛋白表达显著降低(P<0.05—0.01),线粒体ROS产生速率和Aβ-42蛋白表达显著升高(P<0.01)。(2)HIIT-Tg组与SED-Tg组比较,逃避潜伏期、线粒体膜电位、BDNF、AMPK、PINK1和Parkin蛋白表达显著升高(P<0.01),线粒体ROS产生速...     

二苯乙烯苷对不同时程APP转基因拟痴呆小鼠脑内ERK蛋白表达及磷酸化的影响

目的 为探讨细胞信号转导异常在阿尔茨海默病(AD)的作用,以及中药有效成分二苯乙烯苷(TSG)防治AD的药理机制,观察不同时程APP转基因拟痴呆小鼠脑内ERK蛋白的表达和磷酸化改变,以及药物的干预作用.方法 拟AD动物模型为4～16月龄APP695V717I转基因小鼠.4月龄起灌胃给予TSG 6个月.另一批未处理的APP转基因小鼠饲养至10月龄开始灌胃给予TSG 6个月.同背景同月龄C57BL/6J小鼠为正常对照组.细胞外信号调节激酶112(ERK1/2)蛋白的表达和磷酸化改变检测应用Western blotting.结果 早期4月龄APP转基因小鼠海马/皮层被激活的磷酸化ERK1/2蛋白(p-ERK1/2)与对照组相比已明显降低;10月龄APP转基因小鼠皮层p-ERK蛋白表达进一步降低,而海马p-ERK蛋白表达与对照组相比虽显著降低但差异已明显减小;TSG各剂量组均能明显提高海马/皮层p-ERK蛋白表达;16月龄APP转基因小鼠海马/皮层p-ERK蛋白表达与对照组相比均明显升高,TSG给药组能一定程度地减少p-ERK蛋白表达的增高.总的ERK1/2蛋白表达在4、10、16月龄对照组、APP转基因模型组和各给药组小鼠脑内,均无明显变化.结论 ERK1/2作为MAPK信号转导通路的重要成分,其蛋白表达在不同时程APP695V717I转基因小鼠脑内无明显改变;但被激活的ERK1/2其磷酸化水平在APP转基因小鼠脑内明显改变,将影响信号转导功能,并进一步导致脑内功能障碍及病理损伤.TSG可调节p-ERK1/2至正常水平,对维持正常的细胞信号转导功能、防治AD等神经退行性疾病具有良好的应用前景.     

APP/PSl双转基因阿尔海默病小鼠的繁殖及基因型鉴定

目的:繁殖和基因鉴定APP/PS1双转基因阿尔海默病(AD)小鼠。方法:将雄性纯合子APP/PS1双转基因AD小鼠与阴性纯合子(野生型)雌鼠进行交配。PCR鉴定APP/PS1双转基因AD传代小鼠的基因表型。结果:50只APP/PS1双转基因AD传代小鼠基因组DNA中31只小鼠基因组DNA扩增出300 bp的APP条带和600 b P的PS1条带。APP/PS1双转基因AD小鼠的饲养和繁殖获得成功,获得了较多的成功转入APP/PS1基因的纯合子小鼠。结论:正确饲养繁殖及利用PCR对AD模型鼠的繁殖小鼠进行基因鉴定,是有效获得APP/PS1双转基因纯合子小鼠的有效途径,为临床更好的研究认知障碍提供有效的AD动物模型。     

APP/PS1小鼠不同时期灰质体积变化与Aβ沉积和学习记忆功能的相关性分析

目的:分析阿尔兹海默病(AD)双转基因APP/PS1模型小鼠大脑灰质体积变化与其学习记忆能力和相关脑区β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积的相关性,以期为探明AD动物模型的病理特征提供可靠的行为学和影像学依据。方法:共纳入野生组(WT)和APP/PS1组2组小鼠,每组36只。WT组小鼠选用C57-BL/6小鼠,APP/PS1组选用APP/PS1双转基因小鼠,2组均分别由2、6、12不同月龄小鼠组成,每组每个月龄小鼠12只。通过Morris水迷宫测试(定位航行实验和空间探索实验)检测2组小鼠空间记忆学习能力和空间记忆提取能力;采用磁共振T2加权成像(MRI T2WI)扫描检测小鼠大脑双侧内嗅皮质和海马的灰质体积变化情况;分离和制备2组不同月龄小鼠大脑石蜡切片,采用Thioflavine-s(Th-s)荧光染色检测2组小鼠大脑双侧内嗅皮质和海马的Aβ沉积情况;采用Pearson相关分析法分析2组小鼠不同时期的灰质体积变化与其学习记忆能力和对应脑区Aβ沉积的相关性。结果:①Morris水迷宫测试结果:与WT组比较,APP/PS1组2月龄小鼠行为学结果无明显区别,差异无统计学意义(P0.05);APP/PS1组6、12月龄小鼠逃避潜伏期明显增加、穿越平台次数明显减少,差异具有统计学意义(P0.05)。②MRI T2WI扫描结果:与WT组比较,APP/PS1组2月龄小鼠灰质体积无明显变化,差异无统计学意义(P0.05);APP/PS1组6月龄小鼠内嗅皮质体积明显缩小,APP/PS1组12月龄小鼠内嗅皮质和海马体积均明显缩小,差异具有统计学意义(P0.05)。③Th-s荧光染色检测结果:WT组、APP/PS1组2月龄小鼠均未检测出Aβ沉积;与WT组比较,APP/PS1组小鼠6月龄内嗅皮质和海马可检测到少量Aβ沉积,而12月龄时内嗅皮质和海马则可检测出大量致密Aβ斑块,差异具有统计学意义(P0.05)。④相关性分析结果:APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与逃避潜伏期呈明显负相关关系(r=-0.729,P0.001;r=-0.643,P0.001);APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与穿越平台次数呈明显正相关关系(r=0.705,P0.001;r=0.719,P0.001);APP/PS1组小鼠内嗅皮质和海马体积变化与Aβ沉积呈明显负相关关系(r=-0.865,P0.001;r=-0.885,P0.001)。结论:APP/PS1转基因小鼠可能于6月龄时就发生学习记忆功能障碍,且随时间渐进性加重;这种学习记忆功能障碍可能与大脑内嗅皮质和海马体积萎缩有关;而Aβ过度沉积可能是导致大脑灰质体积萎缩的因素之一。     

光刺激对痴呆小鼠海马长时程增强及β淀粉样 蛋白含量的影响

目的:观察光刺激对3x Tg阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马长时程增强(LTP)及β淀粉样蛋白(Aβ)的影响。方法:4～6月3x Tg AD小鼠20只随机分为光刺激(PS)组,未刺激(NS)组,同背景野生型小鼠10只为对照组。PS组小鼠接受2 Hz光刺激4周,其余2组正常环境饲养。4周后断头取脑,制作离体脑片,诱导海马LTP,并检测小鼠海马组织内Aβ蛋白含量。结果:NS组小鼠LTP明显受抑,海马组织内Aβ含量较对照组明显升高(P<0.05)。PS组小鼠较NS组小鼠海马Aβ蛋白水平明显降低(P<0.05),LTP明显增强(P<0.05)。结论:光刺激增强3x Tg AD模型小鼠海马LTP,降低海马Aβ含量。     

电针百会穴对APP/PS1双转基因痴呆模型小鼠18F-FDGPET/CT成像及学习记忆的影响

目的:观察电针百会穴对APP/PS1双转基因小鼠葡萄糖代谢水平以及学习记忆的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病的作用机制。方法:将30只雌性12月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、百会组和非穴组,每组10只,另取10只同窝阴性野生小鼠为野生组。百会组电针百会穴,非穴组电针非穴,每次30min,每天1次,每周5天,共治疗4周,野生组和模型组不干预。采用正电子发射断层扫描技术(PET)观察各组小鼠大脑18F-FDG摄取率的水平;Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆。结果:与模型组相比,百会组小鼠逃避潜伏期缩短(P0.05),跨越平台次数增加(P0.01);非穴组小鼠逃避潜伏期与模型组相比无显著性差异(P0.05);百会组小鼠18F-FDG摄取率高于野生组、模型组以及非穴组。结论:电针百会穴可改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆功能,其作用机制可能是通过改善小鼠脑内葡萄糖代谢从而发挥神经保护作用。     

APP/PS1转基因AD小鼠磁共振波谱及行为学的对照观察

目的 探讨氢质子磁共振波谱(1H-MRS)成像对APP/PS1转基因AD小鼠代谢变化的显示及其早期诊断价值.方法 35只APP/PS1AD小鼠(实验组)和20只同源野生型小鼠(对照组)在6、9月龄时接受Morris水迷宫测试及1H-MRS成像.1H-MRS测量小鼠大脑海马区N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌醇(mI)和肌酸(Cr)的峰下面积,计算NAA/Cr和mI/Cr比值并进行两样本均数t检验.结果 与对照组比较, 实验组小鼠6月龄时mI/Cr比值明显升高(t=2.904,P＜0.05),NAA/Cr比值明显降低(t=-7.535,P＜0.05).免疫组化检查显示海马区出现Aβ沉积斑块,周围包绕活化的胶质细胞;而行为学差异在9月龄时才有统计学意义(P＜0.05),表现为小鼠学习和记忆方面的损害.结论 1H-MRS是早期评价AD的高敏感性、高特异性的方法,mI、NAA的变化早于行为学改变.     

APP/PS1阿尔茨海默病转基因动物模型前联合异常改变

背景:阿尔茨海默病研究大多主要集中在淀粉样β蛋白和神经元死亡之间的关系,但是对白质损害研究却鲜有报道.目的:观察APP/PS1阿尔茨海默病转基因动物模型前联合病理改变特点.设计、时间及地点:以组织学改变为依据,分组对照观察,于2007-09/2008-09在华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科实验室完成.材料:雌性转基因APP/PS1小鼠(表达人突变的PS1(M1146L)基因和APP(KM670/671NL,V7171)基因,对照组老鼠选用的是没有淀粉样蛋白沉积的雌性PS1小鼠.分为年轻组(2月龄,包括8只APP/PS1,7只PS1)和老年组(24月龄,包括6只APP/PS1,7只PS1).方法:利用刚果红和免疫组织化学方法观测该AD转基因模型脑内淀粉样改变;采用氯化金髓鞘染色方法和轴突免疫组织化学染色,利用吸光度方法对前联合轴突密度和髓鞘化程度的染色进行相对吸光度定量分析.主要观察指标:①细胞内和细胞外淀粉样β蛋白的染色.②在冠状位前联合的平均面积大小测量.③前联合处轴突密度和髓鞘化程度定量相对吸光度值.结果:在老年组APP/PS1小鼠,大量的刚果红阳性染色出现在皮质,海马以及丘脑,前联合也出现阳性染色;细胞内淀粉样β蛋白仅出现在年轻组APP/PS1的皮质结构中.在老年组PS1组小鼠,前联合的表面积大小比年轻组PS1和老年组APP/PS1组小鼠都有显著的增长.老年组包括APP/PS1和PS1组轴突的染色都有显著的下降,髓鞘化程度比年轻组有增高趋势.不同表型分析显示,轴突密度和髓鞘化程度在年轻组APP/PS1和PS1组相当;老年APP/PS1组轴突密度比PS1组有显著的下降,老年组APP/PS1小鼠髓鞘化程度与PS1无显著差别.结论:随着年龄的增长,APP/PS1阿尔茨海默病转基因小鼠模型前联合存在着轴突的丢失,髓鞘相对保持完整.淀粉样β蛋白对轴突有直接的毒性作用.     

阿尔茨海默病转基因小鼠早期记忆功能障碍与氧化应激损伤关系的实验研究

目的 观察转APP/PS1基因阿尔茨海默病(AD)小鼠(APP/PS1小鼠)早期空间学习记忆功能及相关氧化应激反应指标的变化,并探讨它们之间的相关性.方法 应用Morris水迷宫评定APP/PS1小鼠及相应野生型(WT)小鼠的空间学习记忆功能,采用ELISA方法检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及丙二醛(MDA)和蛋白质羰基的含量,并进行相关性分析.结果 2组小鼠的空间学习能力无明显差异(P＞0.05),而APP/PS1小鼠在目标象限(定位航行实验中平台所置第二象限)中航行时间占总时间的百分比(29.02±4.27)%较WT小鼠(47.39±6.01)%显著下降(t=0.000,P＜0.05),APP/PS1小鼠在目标象限中航行路程占总路程的百分比(28.85±3.77)%较WT小鼠(46.70±5.60)%也显著下降(t=0.000,P＜0.05),提示APP/PS1小鼠的空间记忆功能较WT小鼠显著下降.2组小鼠脑组织中的MDA含量、SOD和GSH-PX活性均无明显差异(P均＞0.05),而APP/PS1小鼠脑组织中的蛋白质羰基含量(2.67±0.19)较WT小鼠(2.38±0.15)显著增加(t=0.0088,P＜0.05).相关性分析表明:APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行时间百分比呈显著负性相关(r=-0.639,P＜0.05),APP/PS1小鼠蛋白质羰基含量与目标象限航行路程百分比呈显著负性相关(r=-0.636,P＜0.05).结论 APP/PS1小鼠早期空间记忆功能损害与脑组织中的蛋白质羰基含量升高呈负性相关,提示氧化应激导致的蛋白质羰基化在AD早期记忆损害发病过程中具有重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the spatial learning and memory ability,the changes of indicators of oxidative stress,and their relationship in transgenic APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease(APP/PS1 mice). Methods The spatial learning and memory ability were assessed by Morris water maze test,and the activity or content of SOD, GSH-PX, MDA, and protein carbonyl in brain tissues were measured by ELISA in the APP/PS1 and wild type (WT) mice. Furthermore, the relationship between the learning and memory performances and the indicators of oxidative stress was examined. Results No significant difference in the spatial learning was observed between the APP/PS1 and WT mice (P ＜0. 05). The spatial memory which was measured as the percentage of time traveling in the targeted quadrant to the total traveling time was significantlydeclined in the APP/PS1 mice(29. 02 ± 4. 27) % as compared with the WT mice(47. 39 ± 6. 01) %(t =0. 000 ,P ＜0. 05). The percentage of length of traveling in the targeted quadrant to the total length traveled was significantly lower in the APP/PS1 mice(28. 85 ±3.77)% compared with the WT mice(46. 70 ±5.60)% (t =0. 000,P ＜0. 05). These findings indicated that the spatial learning and memory ability of APP/PS1 mice was significantly decreased compared to WT mice. There was no significant difference in activity or content of SOD,GSH-PX,and MDA in brain tissues between the APP/PS1 and WT mice (P ＜ 0. 05), while the content of protein carbonyl was significantly elevated in the APP/PS1 mice (2. 67 ±0. 19) than in the WT mice (2. 38 ±0. 15)(t = 0. 008, P ＜ 0. 05). Correlation analysis revealed that the elevated protein carbonyl was negatively correlated with the percentage of length traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 639, P ＜ 0. 05) and the percentage of time traveled in the targeted quadrant(r = - 0. 636 ,P ＜ 0. 05). Conclusion The spatial memory impairment was negatively correlated with the elevated protein carbonyl in the APP/PS1 mice, suggesting that protein carbonylation caused by oxidative stress might play an important role in the development of memory impairment in the early stage of Alzheimer's disease.     

黄连解毒汤对APP/PS1双转基因AD小鼠海马区病理形态学及脑内β-APP基因mRNA的影响

目的:探讨黄连解毒汤(HLJDD)对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)模型小鼠海马CA1区的病理形态学及脑内β-淀粉样前体蛋白(β-APP)基因mRNA的影响。方法:选用3月龄的APP/PS1双转基因AD小鼠模型50只,随机分为对照组、安理申组、HLJDD大剂量组、HLJDD中剂量组、HLJDD小剂量组各10只,分别给予安理申或不同剂量HLJDD灌胃治疗6个月,对照组不予治疗,记录并比较各组死亡率;分别于6月龄和10月龄时采用HE染色观察各组海马CA1区神经细胞形态,采用改良甲醇刚果红染色观察各组老年斑形成情况;于末次灌胃治疗后,通过实时荧光定量PCR检测各组脑内β-APPmRNA水平。结果:各组小鼠死亡率差异无统计学意义;10月龄HLJDD各剂量组海马CA1区神经损伤情况较对照组明显减轻,老年斑数量少于对照组(P0.05);HLJDD各剂量组β-APPmRNA水平低于对照组(P0.05),其中以中剂量组水平降低最明显(P0.01)。结论:HLJDD能保护海马神经细胞。     

Memantine improves spatial learning in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease

Memantine, a low- to moderate-affinity uncompetitive N-methyl-D-aspartate receptor antagonist, has been shown to improve learning and memory in several pharmacological models of Alzheimer's disease (AD). In the present study, the effect of memantine on locomotor activity, social behavior, and spatial learning was assessed in a transgenic mouse model of AD. Eight-month-old male C57BL/6J mice carrying mutated human APP and PS1 genes (APP/PS1) and their nontransgenic (NT) litter mates were administered a therapeutic dose of memantine (30 mg/kg/day p.o.) for 2 to 3 weeks. At this age, APP/PS1 mice show elevated levels of beta-amyloid peptides in several brain regions. APP/PS1 mice exhibited less exploratory rearing and increased aggressive behavior compared with NT mice. In the water maze test for spatial learning, APP/PS1 mice had longer escape latencies to both hidden and visible platforms, but they did not differ from NT mice in their swimming speed. Memantine significantly improved the acquisition of the water maze in APP/PS1 mice without affecting swimming speed. Memantine did not affect either locomotor activity or aggressive behavior in either genotype. These data indicate that memantine improves hippocampus-based spatial learning in a transgenic mouse model of AD without producing nonspecific effects on locomotion/exploratory activity.     

人源化抗Aβ抗体治疗APP／PS1转基因鼠的实验研究

目的：初步探讨人源化抗Aβ抗体对APP/PS1转基因鼠被动免疫治疗效果。方法选取36只APP/PS1转基因鼠,随机分为3组,每组各12只,分别予腹腔注射人源化抗Aβ抗体、鼠源性单克隆抗体、磷酸盐缓冲液（PBS）,观察3组小鼠脑内淀粉样斑块积聚情况,测试其学习记忆能力,同时检测血清及脑内TNF-α含量。结果人源化抗Aβ抗体组、鼠源性单克隆抗体组小鼠空间辨别学习记忆能力均优于PBS对照组（P＜0．05）,人源化抗Aβ抗体组与鼠源性单克隆抗体组间比较差异无统计学意义（P＞0．05）;治疗后人源化抗Aβ抗体组与鼠源性单克隆抗体组小鼠大脑皮质、海马区棕色斑块沉积明显形态变小、数量变少、范围分散。人源化抗Aβ抗体组与鼠源性单克隆抗体组脑内TNF-α含量均较PBS对照组明显减少（P＜0．05）。结论人源化抗Aβ抗体治疗转基因小鼠后明显改善其学习记忆能力,同时使其脑内TNF-α含量减少。     

阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠对挥发性吸入麻醉药药物敏感性的变化

目的:研究阿尔茨海默病APPswe/PS1dE9双转基因小鼠对挥发性吸入麻醉药药物敏感性的变化.方法:C57BL/6J雌鼠与C3H/HeJ雄鼠交配得到F1代.再将F1代与3月龄的APPswe/PSldE9双转基因小鼠交配得到F2代.F2代小鼠提取鼠尾DNA,PCR扩增目的基因并鉴定.选8月龄F2代同窝小鼠根据是否含APP和PSI基因分为转基因组和野生对照组,用夹尾法分别测定两组异氟醚、七氟醚和地氟醚3种挥发性吸入麻醉剂的最低肺泡有效浓度(MAC值).结果:繁育F2代小鼠12只,其中转基因组7只,野生对照组5只.转基因组小鼠3种挥发性吸入麻醉剂MAC值分别为异氟醚1.129 ±0.160,七氟醚1.900±0.153,地氟醚5.614±0.363,均较野生对照组低,但是无统计学差异(P>0.05).结论:APP/PSI双转基因对8月龄小鼠异氟醚、七氟醚、地氟醚3种挥发性吸入麻醉剂的MAC值无明显影响.