HESW对体外人体胃腺癌细胞生物学效应的实验研究

本组用国产碎石机引发的高能冲击波（ＨＥＳＷ）处理人体胃腺癌细胞株（ＳＧＣ－７９０１）细胞悬液后，发现其细胞活性，细胞生长速度和集落形成力均有所下降，且与ＨＥＳＷ的次数和电压的高低有明显的相关性，表明ＨＥＳＷ对人体胃腺癌有即刻的毒性作用，还能抑制该肿瘤细胞的生长。电压越高，冲击次数越多，对肿瘤细胞生长的抑制作用越显著。     

HIGH DENSITY CULTIVATION OF GENETICALLY-ENGINEERED CHO CELL LINES WITH MICROCARRIER CULTURE SYSTEMS

ＨＩＧＨＤＥＮＳＩＴＹＣＵＬＴＩＶＡＴＩＯＮＯＦＧＥＮＥＴＩＣＡＬＬＹ－ＥＮＧＩＮＥＥＲＥＤＣＨＯＣＥＬＬＬＩＮＥＳＷＩＴＨＭＩＣＲＯＣＡＲＲＩＥＲＣＵＬＴＵＲＥＳＹＳＴＥＭＳ￥ＸｉａｏＣｈｅｎｇｚｕ；（肖成祖）；ＨｕａｎｇＺｉｃａｉ（黄子才）；Ｌｉ...     

ESWL致6种血清酶升高的意义

作者于１９９１年４月至６月在狗的实验中，观察了体外冲击波（ＥＳＷｓ）对肾形态学的影响，以及肾和外周静脉血中ＡＫＰ，ＬＤＨ，ＣＰＫ，ＳＧＰＴ，ｒ－ＧＴ及ＳＧＯＴ酶活性的变化，并对这６种血清酶活性升高的临床意义作了探讨。     

胃癌耐药细胞株耐药谱的体外实验

观察胃癌细胞与抗肿瘤药作用后对不同药物耐的耐受情况，方法：胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１在体外分别与长春新碱（ＶＣＲ），５氟尿嘧啶（５－Ｆｕ），阿霉素（ＡＤＭ）及氨甲喋呤（ＭＴＸ）作用，获得ＳＧＣ７９０１／ＶＣＲ，ＳＧＣ７９０１／ＡＤＭ，ＳＧＣ７９０１／５－Ｆｕ及ＳＧＣ７９０１／ＭＴＸ４个耐药细胞株。体外细胞毒性实验观察它们对ＶＣＲ，ＡＤＭ，５－Ｆｕ，ＭＴＸ，顺铂（ＣＤＤＰ）以及丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）的敏     

蛛网膜下腔出血与内皮素和降钙基因相关肽的关系研究

目的：探讨蛛网膜下腔出血（ＳＡＨ）后血液、脑脊液中内皮素（ＥＴ）、降钙基因相关肽（ＣＧＲＰ）含量变化及与血管痉挛（ＣＶＳ）的关系。方法：用放免法检测３２例不同时期、不同病因、不同病情ＳＡＨ患者血液、ＣＳＦ中ＥＴ、ＣＧＲＰ含量变化并与对照组比较。结果：ＳＡＨ后血浆、ＣＳＦ中ＥＴ对照组明显升高,Ｐ〈０．０５。ＣＧＲＰ则明显低于对照组,Ｐ〈０．０１。ＥＴ升高和ＣＧＲＰ降低与病情程度、病后时间有关,与引起ＳＡＨ的原因无关。结论：ＥＴ和ＣＧＲＰ的变化与ＳＡＨ后脑血管痉挛有关,可作为ＳＡＨ后血管痉挛（ＣＶＳ）的一种观察指标。     

A STUDY ON DETECTION OF SERUM FASTING TOTAL BILE ACID AND CHOLOYGLYCIN IN NEONATE FOR CHOLESTASIS

ＡＳＴＵＤＹＯＮＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＳＥＲＵＭＦＡＳＴＩＮＧＴＯＴＡＬＢＩＬＥＡＣＩＤＡＮＤＣＨＯＬＯＹＧＬＹＣＩＮＩＮＮＥＯＮＡＴＥＦＯＲＣＨＯＬＥＳＴＡＳＩＳＧｕｏＷｅｎ（郭文）；ＷｕＭｉｎｇｃｈａｎｇ（吴明昌）；ＰｅｉＸｕｅｙｉ（裴学义）；Ｇ...     

消化系肿瘤细胞EGF受体放射分析与EGF的生长调节研究

为研究表皮生长因子（ＥＧＦ）受体功能性表达在消化系肿瘤细胞生长调节上的意义，建立了ＥＧＦ受体放射法，Ｌｉｎｄｍｏ生物活性分数分析显示自标记＾１２５Ｉ－ＥＧＦ具有高的生物活性，温度、时间效应分析确立４℃，３ｈ为最佳受体分析条件，一组消化系肿瘤细胞ＳＧＣ７９０１，ＫＡＴＯⅢ，ＭＫＮ４５，ＳＭＭＣ７７２１，ＨＴ２９的ＥＧＦ受体数目分别为（１．２３±０．４６）×１０＾５，（２．１３±０．６１）×１０＾５，     

依拉普利对冠心病患者心肌缺血、血管内皮功能及其活性物质、高胰岛素血症等的作用

本文测定６０例冠心病（ＣＨＤ）患者及２５例正常人的循环内皮细胞（ＣＥＣ）、一氧化氮（ＮＯ）、内皮素（ＥＴ）、空腹及餐后２ｈ血糖（ＢＧ）、胰岛素（ＩＳ）、心电图（ＥＣＧ）．并将依拉普利组（ｎ＝３０）与常规治疗组（ｎ＝３０）比较。结果显示ＣＨＤ组ＣＥＣ．ＥＴ，空腹ＩＳ及餐后２ｈＩＳ，ＢＧ均显著高于正常人，ＮＯ显著低于正常人，依拉普利组治疗后其ＣＥＣ．ＥＴ、ＢＧ．ＩＳ下降，ＮＯ上升，ＥＣＧ改善均较常规治疗组明显。提示ＣＨＤ患者存在着明显血管内皮功能（ＶＥＣ）损伤及血管活性物质失衡和搪耐量减损（ＩＧＴ）高胰岛素血症（ＨＩＳ）．依拉普利对上述各项指标有良好的改善作用。     

IMMUNOSUPPRESSIVE STATUS OF THE SPLEEN IN PATIENTS WITH ADVANCED GASTRIC CANCER

ＩＭＭＵＮＯＳＵＰＰＲＥＳＳＩＶＥＳＴＡＴＵＳＯＦＴＨＥＳＰＬＥＥＮＩＮＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＡＤＶＡＮＣＥＤＧＡＳＴＲＩＣＣＡＮＣＥＲＺｈｕＺｈｅｎｇｇａｎｇ（朱正纲），ＬｉｎＹａｈａｈｅｎ（林言箴），ＹｉｎＨａｏｒａｎ（君浩然），ＺｈｕＳｈｏｕ...     

冠心病患者内皮素前列环素白细胞白介素-2的变化及悦宁定的干预作用

通过对４５ 例冠心病（ＣＨＤ）患者外周血循环内皮素（ＥＴ）、前列环素（ＰＧＩ２）代谢产物６－酮类固醇－前列腺素Ｆ１ａ（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ）和白细胞（Ｗ ＢＣ）、嗜中性粒细胞（ＰＭＮ）、白细胞介素－２（ＩＬ－２）的测定,以了解ＣＨＤ 患者内皮细胞（ＥＣ）的损伤及功能变化,并悦宁定（ｅｎａｌａｐｒｉｌ）治疗组与对照组比较。结果显示：ＣＨＤ 患者ＥＴ、ＷＢＣ、ＰＭＮ 明显高于正常;６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ则明显低于正常;ＩＬ－２在急性心肌梗塞（ＡＭＩ）早期明显低于正常,均与病情严重程度相一致。通过ｅｎａｌａｐｒｉｌ治疗后,上述指标明显改善,提示：ｅｎａｌａｐｒｉｌ对ＣＨＤ 患者ＶＥＣ损伤有较好的保护和治疗作用     

高能冲击波治疗膀胱肿瘤的实验研究

用高能冲击波治疗由Ｎ－甲基亚硝基脲诱导的大鼠膀胱肿瘤的实验研究，病理和电镜观察显示单次高能冲击波对膀胱肿瘤细胞无影响，连续两次高能冲击波处理后，４８小时起出现肿瘤细胞坏死，随时间延长，肿瘤坏死增加。高能冲击波主要引起肿瘤细胞内线粒体肿胀等改变，从而导致细胞坏死，流式细胞仪检查示高能冲击波必理后Ｓ期细胞数明显下降。结果表明连续两次高能冲击波处理对膀胱肿瘤细胞确实存在直接和间接毒性作用。     

The inhibitory effect of high energy shock waves on bladder tumor cell line BIU-87 in vitro]

The cytotoxic effect of high energy shock waves (HESW) on bladder tumor cell line BIU-87 in vitro was evaluated by using the lithotripter Dornier HM3 with voltage 15 kV, impulsation 0, 400 and 800 respectively, water bath 35-37 degrees C and impulse rate 60/min. Cell viability and clonogenicity were decreased, but the cell doubling times were prolonged with the increasing number of HESW impulsation. Both cell growth curves and 3H-thymidine incorporation assay showed the temporary inhibition on the growth of tumor cells, which were viable after HESW. After a period of time, these tumor cells would recover their normal growth ability. For the group received 800 HESW impulses, the first passage of cell growth curve decreased temporarily 24 hours after HESW impulsation. These results indicate that HESW do show a cytotoxic effect on tumor cells in vitro, including acute and chronic lethal effect and temporary growth inhibition. The cytotoxic effect of HESW is positively proportional to the number of impulsation at the condition of definite working voltage.     

Suppressive effect of high energy shock waves on tumor cells.

Suppressive effect on tumor cells of high energy shock waves (HESW) has aroused the interest of physicians in recent years. We assessed experimentally the cytotoxic effects of HESW on tumor cells both in vitro and in vivo and determined whether a Chinese domestic lithotriptor is capable of generating effective HESW, which has the potential to break tumor cells, reduce cell viability, retard cell growth, delay doubling time, impair cell attachment and cell clonogenicity. In nude rats, HESW was able to delay tumor growth and reduce tumor size without evidence of metastasis. The nature of HESW in the induction of cell damage and its clinical application need to be further investigated.

     

吡罗昔康对人γδT细胞和消化系统肿瘤细胞的作用比较

目的:探讨吡罗昔康对人γδT细胞杀伤消化系统肿瘤细胞株的影响。方法:用异戊烯焦磷酸法体外扩增人外周血γδT细胞。用不同浓度的吡罗昔康诱导γδT细胞和消化系统肿瘤SGC-7901、SW-1990、SW-480、SW-1116、LOVO细胞株,用MTT法检测吡罗昔康对这些细胞的抑制率和用乳酸脱氢酶法测定γδT细胞的杀伤活性,用流式细胞术检测诱导前后的γδT细胞和SGC-7901、SW-1990、SW-480、SW-1116和LOVO细胞凋亡百分率。结果:γδT细胞培养10d时从扩增前4.21%增加到70.35%。吡罗昔康各种浓度对SGC-7901、SW-1990、SW-480、SW-1116和LOVO细胞株抑制率明显高于γδT细胞。0.01~0.04mmol/L吡罗昔康诱导24h后的γδT细胞对5种肿瘤细胞的杀伤活性最高,浓度超过0.04mmol/L时杀伤活性呈下降趋势;SGC-7901、SW-1990、SW-480、SW-1116和LOVO细胞经不同浓度的吡罗昔康诱导24h后γδT细胞对其的杀伤活性与对照组比较无明显变化。0.16mmol/L吡罗昔康诱导24h对SGC-7901、SW-1990、SW-480、SW-1116和LOVO细胞株的凋亡率分别为12.26%、13.46%、14.59%、25.64%和39.36%,显著高于γδT细胞(8.16%)。结论:吡罗昔康在临床常规使用的药物浓度时可增强γδT细胞杀伤肿瘤细胞作用,超过这一浓度可明显抑制γδT细胞和肿瘤细胞的增殖能力和杀伤活性及增加细胞的凋亡率;吡罗昔康对肿瘤细胞株的抑制率明显高于γδT细胞。这一结果为临床吡罗昔康预防消化道肿瘤的用量提供了实验依据。     

高能冲击波对正常人体细胞遗传物质的影响

本实验通过将正常人体外周血淋巴细胞经ＨＥＳＷ处理后培养９６小时制片，观察染色体损伤指标（染色体畸变率，异常细胞率），以期了解国产ＪＴ－Ⅱ型水槽式碎石机对正常人体细胞遗传物质染色体力影响情况。实验结果表明ＨＥＳＷ对正常人体细胞遗传物质有影响，且与接受冲击被处理次数，标本距Ｆ＿２的距离成正相关     

microRNA-212对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响

目的：研究人microRNA-212（miR-212）对胃癌细胞系SGC7901迁移和侵袭能力的影响。方法：通过化学方法合成人成熟型miR-212抑制基因i-miR-212,分别以25、50、75、100 nmol/L浓度通过脂质体转染方法转染SGC7901细胞,同时设空白组和无序列对照组。采用Real-time PCR、细胞计数和Transwell小室等实验方法,分别检测各组细胞miR-212的表达、miR-212对细胞增殖的影响及miR-212对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果：各浓度i-miR-212转染SGC7901细胞后,miR-212表达均降低,以50 nmol/L i-miR-212转染组最佳,较无序列对照组降低约94.60%;50 nmol/L i-miR-212转染组与无序列对照组在细胞计数上差异有统计学意义（P＜0.01）。在细胞侵袭实验中50 nmol/L i-miR-212转染组透膜细胞明显多于无序列对照组（P＜0.01）,在迁移实验中i-miR-212转染组（50 nmol/L）的透膜细胞明显多于无序列对照组（P＜0.01）。结论：转染成熟型人i-miR-212能使胃癌细胞系SGC7901细胞中miR-212的表达明显下降,并能显著促进胃癌细胞系SGC7901的增殖、迁移及侵袭能力,表明miR-212与胃癌肿瘤细胞的转移具有相关性。     

血管内皮生长因子-C在胃癌中的表达及其反义基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响

目的:探讨胃癌组织中血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达与肿瘤新生淋巴管形成的关系。观察以pCI-neo为载体的反义血管内皮生长因子-C(Anti-VEGF-C)转染的人胃癌细胞SGC-7901中VEGF-C蛋白的表达,及其对人胃癌细胞生长的抑制作用。方法:取72例胃癌标本的癌旁组织,通过RT-PCR检测VEGF-C的mRNA表达;免疫组化检测VEGFR-3,计算出微淋巴管的密度并行相关统计分析。以脂质体转染法转染既往试验合成的重组质粒pCI-neo-anti VEGF-C到体外培养的人胃癌细胞株,以未转染组为对照,用免疫组化和Western blot分析VEGF-C基因及蛋白的表达,最后用MTT法及流式细胞仪分析其对细胞生长的抑制作用。结果:淋巴结转移阳性组中VEGF-C mRNA阳性表达85.7%,高于阴性组的20.0%(P<0.05);VEGF-C mRNA表达阳性组淋巴管密度6.36±1.66,阴性组3.95±1.52(P<0.05);淋巴结转移阳性组淋巴管密度6.65±1.57,阴性组3.75±1.47(P<0.05)。重组质粒pCI-neo-anti VEGF-C转染体外培养的人胃癌细胞株后,免疫组化和Western blot均显示pCI-neo-anti VEGF-C转染组无VEGF-C mRNA及其蛋白的表达,MTT检测表明pCI-neo-anti VEGF-C转染组活细胞数较其它各组均低(P<0.05)。结论:VEGF-C能促进癌旁微淋巴管增生、提高胃癌侵袭力;反义VEGF-C转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901VEGF-C mRNA,减少其VEGF-C蛋白的表达,抑制其体外生长。     

VEGF165表达载体的构建及其对人胃癌生长的作用

目的构建血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF165）真核表达载体,研究其对胃癌生成的作用. 方法用DNA重组方法,将编码VEGF165的全长cDNA克隆于pcDNA3载体中,构建VEGF165 mRNA真核表达载体;用阳性脂质体介导的基因转染技术,将重组体转入人胃癌细胞（SGC-7901）省系;观察转染细胞的细胞周期、增殖能力及致瘤生长情况等生物学指标. 结果斑点杂交、间接免疫荧光等分析显示,正义VEGF基因转染技术可使VEGF的表达得到明显地加强. 与未转染细胞相比,转染细胞的G2/M期细胞增加(0.44)而S期细胞减少(0.17),克隆形成率(9.0%)明显高于未转染细胞(4.0%). 瘤细胞接种裸鼠后33 d,过表达VEGF人胃癌细胞所致的移植瘤体积（2351±638) mm3明显大于未转染细胞所致的移植瘤体积（1534±363) mm3. 结论 VEGF可以通过加强肿瘤组织血管生成而促进肿瘤的生长,另外,VEGF的表达可能与细胞增殖能力有关.     

HIF-1α基因转染人胃腺癌SGC7901细胞对裸鼠移植瘤的影响及机制

目的 探讨低氧诱导因子(HIF)-1α基因转染人胃腺癌SGC7901对裸鼠移植瘤血管生成及EphA2表达的影响及其可能机制.方法 采用HIF-1α基因重组质粒pGCsi-shHIF-1α,转染胃腺癌SGC7901细胞并接种裸鼠(SGC7901/shRNA,实验组),建立裸鼠皮下人胃腺癌移植瘤模型,动态观测裸鼠肿瘤体积和质量;设SGC7901(未转染组)、转染空质粒的SGC7901(SGC7901/Neo,空载体组)为对照.观察移植瘤生长情况,8周后,获取移植瘤模型瘤组织,称取湿重,免疫组化SP法检测移植瘤组织的微血管密度,Western blot检测上皮细胞激酶A2(EphA2)表达.结果 与未转染组比较,空载体组瘤体积、质量改变不明显,HIF-1α转染的实验组的瘤体积、质量明显降低;HIF-1α转染的实验组诱导血管增生、形成血管生成拟态和EphA2蛋白表达较未转染组组、空载体组明显降低(P<0.05,P<0.01).结论 HIF-1α基因转染可明显抑制裸鼠人胃腺癌移植瘤的生长,该作用可能与其抑制肿瘤血管新生、形成血管拟态及EphA2蛋白表达有关.