131I标记精氨酸-精氨酸-亮氨酸多肽在荷瘤小鼠体内的分布与显像

目的 设计、合成含精氨酸-精氨酸-亮氨酸(RRL)多肽序列,研究131I标记RRL小分子环肽在荷前列腺癌BALB/c裸鼠体内的分布与显像研究.方法 通过固相法合成包含RRL序列的10环肽(YCGGRRLGGC).在多肽序列的两个半胱氨酸之间形成二硫键以维持序列的稳定性.通过高效液相色谱法(HPLC)分析、纯化合成的多肽,并进行电喷雾离子质谱(ESI-MS)分析.通过氯胺-T法进行RRL多肽的131I标记,建立荷PC3前列腺癌BALB/c裸鼠模型,分别进行体内分布和肿瘤显像研究.结果 RRL多肽序列被成功合成,HPLC后目标产品纯度99.56%.质谱分析结果显示产物相对分子量为1040 kD,与RRL多肽理论分子量一致.RRL多肽131I标记率60%左右,放射化学纯度96.5%.动物体内肿瘤对131I标记的RRL多肽的摄取在注射后明显高于对照肽.注射后3h小鼠甲状腺(未封闭)及腹腔放射性聚集明显,肿瘤部位见少量放射性聚集,在注射后24h小鼠肿瘤及膀胱明显放射性聚集.结论 RRL10环肽的设计是成功的,应用氯胺T法对其131I标记是可行的.肿瘤对131I标记化合物的特异性摄取预示着RRL10环肽在肿瘤显像、治疗中拥有很好的应用前景.     

^131I标记精氨酸-精氨酸-亮氨酸多肽在荷瘤小鼠体内的分布与显像

目的设计、合成含精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）多肽序列,研究^131I标记RRL小分子环肽在荷前列腺癌BALB/c裸鼠体内的分布与显像研究。方法通过固相法合成包含RRL序列的10环肽（YCGGRRLGGC）。在多肽序列的两个半胱氨酸之间形成二硫键以维持序列的稳定性。通过高效液相色谱法（HPLC）分析、纯化合成的多肽,并进行电喷雾离子质谱（ESI-MS）分析。通过氯胺-T法进行RRL多肽的^131I标记,建立荷PC3前列腺癌BALB/c裸鼠模型,分别进行体内分布和肿瘤显像研究。结果RRL多肽序列被成功合成,HPLC后目标产品纯度99.56%。质谱分析结果显示产物相对分子量为1040kD,与RRL多肽理论分子量一致。RRL多肽^131I标记率60%左右,放射化学纯度96.5%。动物体内肿瘤对^131I标记的RRL多肽的摄取在注射后明显高于对照肽。注射后3h小鼠甲状腺（未封闭）及腹腔放射性聚集明显,肿瘤部位见少量放射性聚集,在注射后24h小鼠肿瘤及膀胱明显放射性聚集。结论RRL10环肽的设计是成功的,应用氯胺T法对其^131I标记是可行的。肿瘤对131I标记化合物的特异性摄取预示着RRL10环肽在肿瘤显像、治疗中拥有很好的应用前景。     

放射性碘标记鹅脱氧胆酸的肝胆转运及其短期生物动力学

鹅脱氧胆酸(CDCA)已用以消除胆石。若有适当浓度的放射性碘化CDCA被转运到胆汁中,则可作为肝胆扫描剂使用。作者介绍了在3小时过程中,[~(125)I]-CDCA在实验动物体内的分布及扫描结果。用氯氨T法标记放射性碘CDCA,以硅胶薄层层析分离混合物,其展开剂为氯仿:甲醇:水(9:1:0.1),经放射层析扫描仪定位后,刮下对应于碘标记的CDCA的放射活性带,加乙醇振荡,洗脱,再离心提取。该法可获80.5±7.2%的标记率,未洗脱前之标记率为85.4±2.1%,留在薄层板上未反应的碘化物放射性仅为10.6±3.5%。本法可为基础     

131I标记RGD环肽在荷瘤小鼠体内分布与显像研究

目的 研究131I标记含精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸的小分子环形肽(cRGD肽)在荷瘤小鼠体内的分布与显像,探讨131I-cRGD肽作为肿瘤诊治药物的可能性.方法 利用氯胺T法对cRGD肽行131I标记,建立荷黑色素瘤B16动物模型,分别进行体内分布实验、非标记cRGD肽竞争抑制实验及肿瘤显像研究.结果用统计软件SPSS 12.0进行分析.结果 131I-cRGD肽的标记率达90%,放射化学纯度达99%;荷瘤小鼠体内分布实验显示给药后在血液、肾脏、膀胱有较高的放射性分布,小肠、肝脏、肌肉呈低水平放射性分布,24 h 肿瘤/肌肉(T/M)放射性比值=6.34, 肿瘤/血液(T/B)放射性比值=1.1.显像结果示静脉注射131I-cRGD肽后1 h肿瘤开始显影,随时间的延长,影像逐渐清晰,24 h时肿瘤显像最清晰.用非标记cRGD肽进行阻断实验,肿瘤的放射性摄取为(0.969±0.151)%/g,与非阻断组(1.40±0.136)%/g比较具有显著性差异.结论 应用氯胺T法可以成功完成131I-cRGD肽标记;尾静脉注射131I-cRGD肽后,肿瘤表现为放射性浓聚,肿瘤对131I-cRGD肽的摄取可被非标记的cRGD肽抑制,表明131I-cRGD肽可与肿瘤新生血管αvβ3受体特异性结合,有望成为一种新型的肿瘤诊治药物.     

125I-3,3'-二碘甲腺原氨酸标记物的制备和鉴定

目的建立3，3＇-二碘甲腺原氨酸（3，3＇T2）的^125 I标记方法，并对标记产物进行鉴定。方法用氯胺T法以^125I标记3，3’T2；用Sephadex LH-20柱层析和下行纸层析纯化分离；以3，3’-T2纯品作为标准，通过下行纸层析、放射自显影、茚三酮显色等方法对标记产物进行鉴定。结果3，3＇-T2的^125 I标记率为26．57％，放化纯度为95．24％，比放射性为116μCi/μg，经Sephadex LH-20柱分离出现2个峰；标记产物下行纸层析分离后经放射自显影鉴定可见^125 I-rT3、^125I-3，3＇-T2、游离^125I，计算其Rf值分别为0．33、0．46、0．74；经下行纸层析、放射自显影、茚三酮显色的联合应用及标准品的对照证明Rf值0．46位置的物质就是^125I-3，3’T2。结论成功建立了3，3＇T2^125。I标记方法。     

^125I标记碳纳米材料石墨烯及其稳定性研究

目的研究放射性核素^125I标记聚乙二醇修饰的碳纳米石墨烯材料（Graphene-PEG 18kDa）的可行性及其标记产物的稳定性。方法采用氯氨一T法标记石墨烯材料（GP-18）．Millipore超滤离心管对产品进行分离纯化,并测定^125I-GP-18的标记率;纸层析法测定放射化学纯度;将^125I-GP-J8,按1：20的比例分别加入到生理盐水、血清中,置于37℃、4℃、室温条件下,测定放置2h、4h、24h、48h后标记物的放化纯度以评价其体外稳定性。结果^125I标记GP．18的标记率为（56．93±2．85）％,^125I-GP-18的放射化学纯度（97．93±0．70）％．放射性比活度为52．81MBq／mg。4aC生理盐水中放置48h的放射化学纯度仍可达（93．48±1．20）％,但在37屯血清中放置2h放化纯降为（71．94士5．47）％（P〈0．01）。结论可用^125I标记碳纳米材料石墨烯,所得产物放射化学纯度及放射性比活度高,但在37℃血清中稳定性欠佳,其结构有待进一步改进。     

测定人肌红蛋白的快速而敏感的放射免疫法

肌红蛋白是骨髂肌和心肌的一个主要成分。在挤压伤、心肌梗塞、烧伤等情况下,血液和尿中的肌红蛋白含量增高。用敏感的放射免疫法测定血液或尿中的肌红蛋白,对诊断心肌梗塞很有价值。但以往文献报导的放射免疫测定所需的时间长达5～24小时,不如诊断心肌梗死的酶谱分析那样快速。作者用~(125)I标记的酯,即N-琥珀酰亚胺基-3-(4-羟基,5-〔~(125)I〕碘苯基)丙酸酯,来标记纯化的肌红蛋白,所得标记物的专一性活性比用改良氯胺T法提高约二倍。使用普通的商品抗肌红蛋白血清,并用分子量6000的聚乙二醇沉淀抗原抗体复合物,在1小时之内就可以完成整个测定。测定方法将100微升样品、对照或标准液分别与等体积的抗肌红蛋白血清稀释液以及200微升     

蛋白质和多肽的放射性标记方法研究进展

蛋白质和多肽的放射性标记广泛用于药代动力学研究,医学影像检查,抗体标记,二维电泳等方面,在医学和药学领域是一种重要的技术。     

放射性131Ⅰ对甲状腺功能亢进伴白细胞减少患者的影响

目的 探讨放射性131 Ⅰ治疗伴有白细胞减少的甲状腺功能亢进患者对白细胞的影响.方法 使用放射性131 Ⅰ治疗45例伴有白细胞减少的甲状腺功能亢进患者,观察治疗前及治疗后7d、3个月外周血白细胞、粒细胞、淋巴细胞及单核细胞计数的变化.结果 治疗前[白细胞(3.44±1.56)×109/L,粒细胞计数(2.12±1.25)×109/L]、治疗7d[白细胞计数(7.21 ±2.01) ×109/L,粒细胞计数(5.24±1.24)×109/L]、治疗3个月[白细胞计数(5.64±1.78)×109/L,粒细胞计数(3.68±1.32)×109/L]患者白细胞、粒细胞计数比较差异均有统计学意义(F =86.49,P=0.00;F=14.87,P=0.00),且治疗7d、3个月均显著高于治疗前,差异均有统计学意义(P均＜0.01);淋巴细胞治疗7d呈明显减低(P＜0.01),治疗后3个月上升至治疗前水平;单核细胞计数治疗前、后均无明显变化,差异均无统计学意义.结论 放射性131 Ⅰ在伴有白细胞减少的甲状腺功能亢进患者中不会导致白细胞计数减少,反而可在放射性131 Ⅰ治疗后1周内获得白细胞计数的升高,并于治疗后较长时期内维持在正常范围.     

检测免疫复合物的胶固素结合—聚乙二醇沉淀试验

本文报导用放射标记的牛胶固素作为配体,在含钙的条件下,使与待检血清中可能存在的免疫复合物上的C_3bi结合,再用聚乙二醇(PEG)沉淀法分离已与C_3bi结合的配体,根据放射性强度推算免疫复合物的含量。并与G_q结合法进行对比,证明本法简单而敏感。本法具体步骤如下:①从牛血清中提取胶固素:根据Lachmann法用酵母菌重复吸附与洗脱两次而制得,加入40%甘油置-30℃保存。②用氯胺T或乳过氧化物酶法制备~(125)I标记胶     

药物对CBB和BCA蛋白质检测方法的干扰作用

实验室常用的体液微量蛋白质检测方法有biuret法[1]、Lowry法[2]、CBB法[3]和BCA法[4]，其中CBB和BCA法因灵敏度高和澡作简单而文对广泛应用，但易产生干扰作用[3－6]，尤其是药物对bCA的干扰作用十分显著[7]。为此，我们观察了几种临床常用药物对CBB和BCA蛋白质测定方法的干扰作用，现将实验结果报告如下。l材料和方法1．l实验药物的来源及配制硫酸阿托品、肾上腺素、尼克酞肢、烟酸、条破、青霉素G、氨等青霉素、咖啡因、氯丙学、磷酸可待因、盐酸本海拉明、盐酸麻黄素、盐酸利多卡因、盐酸普鲁卡因和维生素C，共15种临床常用药…     

99mTc-K237的制备及其在小鼠体内分布和显像

目的 探索99mTc标记多肽K237的方法 ,研究标记物的稳定性及其在小鼠体内的分布.方法 采用99mTc直接标记多肽K237.正常小鼠尾静脉注射99mTc-K237后不同时间处死,取血液及主要脏器,测定其每克组织百分注射剂量率(%ID/g).经尾静脉将99mTc-K237注入荷人肺癌A549裸鼠,于注射后不同时间显像.结果 99mTc-K237的标记率和放化纯均＞95%,其与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的最高特异性结合率为40.36%.99mTc-K237在生理盐水和正常人血清中放置24 h后,其放化纯分别为(89.1±1.4)%和(88.3±1.1)% (t=1.56,P＞0.05).静脉注射99mTc-K237后24 h内,小鼠血液放射性清除迅速,放射性主要聚集在肾脏并经其清除,其他组织器官的放射性随时间逐渐降低.99mTc-K237荷人肺癌A549裸鼠显像示肿瘤组织摄取高,肿瘤与对侧正常组织放射性计数比值(T/NT)最高可达3.97±0.31.结论 99mTc-K237易于制备,具有较理想且符合实际的动物体内动力学表现.     

I125-IL2-(Gly4 Ser)2-PE38小鼠体内分布及药代动力学检测

肿瘤靶向治疗是当今医学、生物学领域最热门的课题之一, I125-IL2-(Gly4Ser)2-PE38是利用基因工程技术制备的新型靶向毒素,体外试验表明,它对多种肿瘤细胞有抑制作用。本实验用氯胺-T法对已表达及纯化后的I125-IL2-(Gly4Ser)2- PE38进行I125标记,用放射示踪动力法[1]研究其在小鼠体内的药代动力学过程,并观察其在小鼠体内的分布规律,为进一步研究提供资料。1材料Na125I购自中国原子能科学研究院, I125-IL2-(Gly4Ser)2-PE38蛋白自制,氯胺-T溶液,偏重亚硫酸(Na2S2O5), SephadexG-25(Pharmacia产品)。昆明小鼠35只,体重18~22 g(购…     

荷瘤裸鼠放射自显影受体辨别的实验研究

背景应用放射性核素标记小分子肽类配体进行肿瘤受体显像,针对肿瘤组织所表达的高密度αvβ3受体,发展放射性标记的含RGD序列的高选择性αvβ3受体拮抗剂,是目前肿瘤受体显像研究的热点.目的以实验动物为基础,探讨放射性核素标记小分子环形多肽RGD-4CY实现肿瘤αvβ3受体显像的可行性.设计完全随机的实验对照.地点和对象实验在解放军第三军医大学西南医院核医学中心完成研究对象为25只正常小鼠和15只荷人QBC939胆管癌裸鼠,由解放军第三军医大学实验动物中心提供,4～6周龄,体质量15～20g.干预采用Iodogen法标记、SEP-PAK C1 s柱分离纯化制备125I-RGD-4CY.取25只正常小鼠与15只荷人QBC939胆管癌裸鼠,经尾静脉注射125I-RGD-4CY 0.1 mL(370 kBq),分别于注射后10,30,60,120和240 min各取5只与3只处死,测定体内放射性的生物分布.取3只荷瘤裸鼠各注射0.1 mL(3.7MBq)125I-RGD-4CY,1 h后处死并行全身放射自显影.主要观察指标125I-RGD-4CY的放射化学纯度;125I-RGD-4CY的体内分布及动力学特点,肿瘤(T)与非肿瘤组织(NT)放射性比值;自显影图像中瘤体及正常组织的放射性分布.结果125I-RGD-4CY的放射化学纯度为99%.正常小鼠血液放射性清除和肝脏放射性下降迅速,肠道无明显增加,主要通过肾脏排泄,肌肉和肺的放射性120 min时分别仅为肝脏的32%与44%(t值为3.33与3.64,P＜0.05).荷瘤裸鼠各时相肿瘤的放射性均高于肌肉、肠道与肺(t值为3.18～13.24,P＜0.05～0.01),240min时T/NT值分别为26,8.7与26.放射自显影示肿瘤放射性浓聚影最强,肺、颈部及其他软组织呈低水平分布.结论放射性核素标记RGD-4CY有望成为一有效的肿瘤αvβ3受体显像剂.     

免疫组织化学技术在切片中的应用

免疫组织化学是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质）,对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法等。     

蛋白质的铕标记技术

蛋白质的Eu~(3+)标记是TR-FIA 法的关键技术之一。本文综合论述了螫合剂及其用量、抗原和抗体的标记方法、标记率的计算、标记物的使用和保存等问题。     

125I放射性粒子植入治疗胸部恶性肿瘤病人的护理

[目的]探讨125I放射性粒子植入治疗胸部恶性肿瘤术后的防护护理.[方法]采取距离、屏蔽、时间防护,配合放射防护知识教育和心理护理,对行125I放射性粒子植入治疗的病人实施防护护理.125I放射性粒子植入治疗术后1个月、3个月、6个月对医护人员、陪护家属进行体检和放射剂量监测.[结果]无一例出现放射性疾病.[结论]125I放射性粒子植入治疗胸部恶性肿瘤安全、可靠.     

多因素护理行为在甲亢性心脏病病人放射性~(131)I治疗中的应用

[目的]探讨多因素护理行为在甲亢性心脏病病人放射性131I治疗中的应用效果。[方法]69例甲亢性心脏病病人行131I治疗时给予严密的病情观察及心理护理、疾病知识指导、用药指导、健康教育等多因素的护理措施。[结果]69例甲亢性心脏病病人均顺利完成放射性131I治疗,无心力衰竭或甲亢危象等并发症发生。在治疗24个月后,52例治愈,11例缓解,总有效率91.3%。[结论]细致耐心的专业化多因素护理行为是甲亢性心脏病病人顺利进行放射性131I治疗并保证较高的有效率和治愈率的重要保障。     

热乙醇法从组分Ⅳ沉淀制备白蛋白

采用Cohn氏6法[1]低温乙醇工艺分离人血浆制备白蛋白过程中,约有10%的白蛋白残留在组分Ⅳ(FⅣ)沉淀中[2].提取FⅣ中的白蛋白的工艺已有多个学者提出,其中EJ Wye等[3]提出经典工艺,其主要工艺路线是通过热乙醇处理后,再用酒精低温法纯化白蛋白.其后W.Schneider[4]提出采用热乙醇法从人血浆制备白蛋白.     

量子点技术在生物医学领域的应用进展

生命科学的高速发展对我们提出了大量新的课题 ,目前集中在核酸、多肽、蛋白质等生物大分子的分析中。在生物医学领域里 ,研究和应用高灵敏度的非同位素检测方法一直是各国学者共同努力的方向。生物大分子检测的主要方法之一是标记分析法 ,由于大多数生物大分子自身可分析的特性较弱 ,要获得高灵敏度的检测 ,必须借助于外来标记物获得可分析的信号。常用的非同位素检测方法主要有 :酶联免疫法、化学发光法、电化学发光法及荧光分析法等。其中发光标记是最主要的方法之一 ,其检测灵敏度很大程度上取决于标记物的发光强度和稳定性。生物技术与…