谷胱甘肽S-转移酶基因缺失与肿瘤易感性

现多认为肿瘤是在致癌物和致突变物等有害物质作用下,引起的一种多阶段进行性多基因紊乱疾病。但人群共同暴露于环境,仅部分人群易感瘤、携带易感基因可能是其的主要原因,寻找肿瘤易感基因并应用于人群筛查,对高危险人群进行早期预防,是肿瘤一级预防的重要措施;由于谷胱甘肽S－转移酶（glutathione S-transferase,EC.2.5.1.18,简称GSTs)是参与机体毒物代谢,解毒的一组重要同工酶,在致癌物代谢方面有重要作用,研究表明GSTs活性及其基因多肽性与多种肿瘤发生易感性增高相关,其是否是某些肿瘤的易感基因？需在大量以人群为基础的流行病学研究的基础上,上才得出结论。     

谷胱甘肽S-转移酶在原发性肝癌中的表达

目的：为了解谷胱甘肽S－转移酶及其同工酶在原发性肝癌患者中的表达情况。方法：采用免疫组化方法对不同分化程度肝癌组织32例和肝硬化组织11例行GSTs和GST－π表达的研究，并以γ-GT作为对照；同时对128例不同肝病患者血清中GSTs活性作检测。结果：GSTs、GST－π及γ－GT的表达与肿瘤的分化程度有关，分化越差，阳性率越低，反之亦然；GST－π在分化良好组阳性表达率明显高于肝为后肝硬化组（P＜0．05）；血清GSTs活性检测肝癌组与正常对照组相比没有显著性差异（P＞0．05）。结论：GST－π是优于γ-GT的肝癌标志酶，尤其在分化程度良好的肝癌，对临床区分肝癌的分化程度有一定的意义。     

谷胱甘肽S—转移酶pi基因与逆转录病毒载体的重组体构建

为了在细胞水平上研究谷胱甘肽Ｓ－转移酶基因的表达活性对化学致癌诱导细胞转化作用的的影响及探讨肿瘤基因预防的可能性，作为第一步，本实验的构建了ＧＳＴ－ｐｉ ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ｐＸＴ１的重组体。     

肺癌患者谷胱甘肽S-转移酶P1基因Ile105Val多态性分析

目的:分析肺癌患者谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)基因Ile105Val单核苷酸多态性.方法:采用病例-对照研究方法,以聚合酶链反应-限制性片段长度多态(PCR-RFLP)技术,检测121例正常对照和121例肺癌患者GSTP1基因Ile105Val多态性基因型分布,并比较各基因型与肺癌易感性的关系.结果:肺癌患者中,携带GSTP1突变等位基因的基因型Ile/Val Val/Val的频率为51.2%,高于对照组的33.1%(P=0.004);至少携带一个Val等位基因的个体发生肺癌风险是Ile/Ile基因型个体的2.13倍(95%CI1.27～3.58),且病理分型分析显示风险增加主要在鳞癌组.经吸烟分层后,仅增加吸烟者的风险.结论:GSTP1基因Ile105Val多态可能与中国人肺癌易感性有关,可用于对肺癌易感个体的预警和预防.     

谷胱甘肽S转移酶M1基因缺失与乳腺癌易患性的关系

目的 :探讨谷胱甘肽 S转移酶 ( glutathione S- transferase GST)基因缺失与乳腺癌易患性的关系。方法 :应用多重聚合酶链反应 ( polym erase chain reaction,多重 PCR)方法对 4 2例乳腺癌患者和 10 8例健康人外周血细胞进行 GSTM1 基因检测。结果 :乳腺癌组 GSTM1 基因缺失率为 5 7.1% ,对照组为 4 8.1% ,两组之间差异无显著性(χ2 =0 .98,P>0 .0 5 )。结论 :GSTM1 基因缺失与乳腺癌的发生无显著性关系     

胃癌与谷胱甘肽S-转移酶M1基因缺失相关性的研究

目的　探讨GSTM 1基因缺失与胃癌的关系。方法　应用PCR技术对皖南地区 88例汉族健康人和 32例胃癌患者的GSTM 1基因进行检测。结果　 32例胃癌患者中GSTM1基因缺失者 2 5例 ,GSTM1 (- / - )基因型频率为 78.1 % ;88例健康人中GSTM1基因缺失者 50例 ,GSTM 1 (- / - )基因型频率为 56 .8% ,两组差异具有显著性 (χ2 =4.55 ,P <0 .0 5)。结论　GSTM 1基因缺失与胃癌发生存在相关性     

日本血吸虫26ku谷胱甘肽硫—转移酶基因的克隆及分析

目的 扩增日本血吸虫２６ｋｕ谷胱甘肽硫－转移酶（Ｓｊ２６ＧＳＴ）基因片段,构建其重组原核载体,以研制ＳｊＧＳＴ重组克隆。方法 根据已知基因序列设计一对引物,运用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增Ｓｊ２６ＧＳＴ目的基因ｃＤＮＡ片段,将其克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（ＫＳ）质粒中,并经酶切、ＰＣＲ和测序鉴定。结果 获得ＧＳＴ－ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（ＫＳ）重组克隆。结论 本实验获得Ｓｊ２６ＧＳＴ重组克隆,为进一步研     

HepG2 细胞谷胱甘肽含量和谷胱甘肽转移酶活力的诱导

目的：建立一种具有较高ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力的肝细胞系。方法：将ＨｅｐＧ２细胞在０．１,０．３,０．５ｍｇ／Ｌ浓度的ＣＤＤＰ间歇作用下传代１２个月后得到三种稳定的ＣＤＤＰ耐药细胞系ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．３,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．５细胞的ＧＳＨ含量和ＧＳＴ活力,结果用显著性ｔ检验方法作统计学处理。结果：诱导刺激后的子代ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０．１,ＨｅｐＧ２／ＣＤＤＰ０     

河南汉族人群谷胱甘肽S-转移酶T1基因遗传多态性研究

目的探讨河南汉族人群谷胱甘肽S-转移酶T1基因的多态性（GSTT1）分布。方法提取216例河南汉族人群外周血有核细胞基因组DNA,采用聚合酶链反应（PCR）方法对研究对象GSTT1基因进行分型。结果河南汉族人群GSTT1基因的缺失率为44.9%,其中男性该基因缺失率为43.3%,女性该基因缺失率为46.9%。结论GSTT1基因在河南汉族人群中呈多态性分布;河南汉族人群GSTT1基因缺失频率在性别间无显著性差异;河南汉族人群GSTT1基因缺失频率与中国其他地区和日本人无显著性差异,显著高于欧洲和美国人群。     

谷胱甘肽S－转移酶pi基因与逆转录病毒载体的重组体构建

为了在细胞水平上研究谷胱甘肽Ｓ－转移酶ｐｉ（ＧＳＴ－ｐｉ）基因的表达活性对化学致癌物诱导细胞转化作用的影响及探讨肿瘤基因预防的可能性，作为第一步，本实验构建了ＧＳＴ－ｐｉｃＤＮＡ与逆转录病毒载体ｐＸＴ_１的重组体。     

GSTP1第5外显子多态性与COPD关系研究

目的研究谷胱甘肽S转移酶P1基因(GSTP1)第5外显子遗传多态(A/G)与中国西南汉族人群慢性阻塞性肺疾病(COPD)的相关性.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态分析法(PCR-RFLP),检测91例COPD患者与87例健康对照者GSTP1第5外显子各种基因型和等位基因频率,并分析其与COPD两种临床表型、肺损伤CT改变的关系.结果GSTP1第5外显子各种基因型频率及等位基因频率在COPD组与对照组间的分布差异无显著性(P>0.05),Ile105的频率在肺气肿型(红喘型)中显著高于支气管炎型(紫肿型)(P<0.05),携有Ile105的患者,其CT肺气肿损伤评分显著高于携有Ile105的患者(P<0.05).结论GSTP1第5外显子遗传多态(A/G)可能与中国西南汉族人群COPD易感性无关,但可能与COPD的临床表型、肺实质损伤有关.     

Studies on Expression of P1 Protamine Gene in Rat and Mouse Testis

Protamine is a kind small,basic protein rich in arginine residues and found to be complexed with DNA in spermatozoa. We have cloned a 150 bp cDNA encoding the rat protamine (rP) by RT-PCR technique.Dig-labelled cDNA for rP was used for Northern blot analysis to study the expression of P1 protamine gene in rat and mouse.P1 protamine mRNA was detected only in rat testis,no hybridization signals were de-tected in rat brain and lever.In addition,the presence of P1 protamine mRNA was detected not only in rat testis,but also in mouse testis.Dig-labelled cDNA for mouse protamine 1 (mP1) was used to study the expression of mP1 gene during the process of sexual maturation of mouse.7-8 d after birth,no mP1 mRNA could be detected.At d 24-26,mP1 mRNA was detectable migrating as a homogeneous band at 580 nu-cleotides,whereas in sexually mature animals,a heterogeneous mixture of RNAs ranging from 450-580 bases in length was observed.Histological studies revealed that in the testis of 7-8-day-old mouse, spermatogenesis has developed to the sperma-tocyte stage, whereas round spermatids (Rs) were present in the testis of the mice with 24-26 d age and elongating spermatids(Es)were present in the testis of sexually mature animals. Electrophoresis of total nuclear basic proteins(TNBP)revealed that the Rs could possess the somatic histones,while Es was found to have protamine and less histone.These results indicate that the P1 protamine gene is tissues-specifically ex-pressed and the P1 protamine is showing to be conservative in evolution.During the process of sexual maturation,along with morphological changes,mP1 gene was tran-scribed in Rs and translated in Es.The mechanism of protamine gene expression was discussed.     

Study of Rat Osteoblasts Transfected by Transforming Growth Factor β1 Gene

Summary: In order to investigate the effect of TGFβ1 gene transfer on the biological characteristics,the effects of gene transfer and supernatant of transfected osteoblasts on the proliferation and ALP activity of osteoblasts were detected by 3H-TdR and MTT. Our results showed that TGFβ1 gene transfer had no effect on the biological characteristics and the activated supernatant of transfected os-teoblasts stimulated proliferation and inhibited ALP activity of osteoblasts. TGFβ1 gene transfer could promote the expression of TGFβ1 and the biological characteristics of transfected osteoblasts were sta-ble, which might be helpful for gene therapy of bone defects in vivo.     

CArG调控元件辐射诱导活性的研究

目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性.方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMV IE basal gene promoter构成的嵌合调控元件插入到pGL3-Basic质粒,构建荧光素酶报告质粒.利用脂质体将该报告质粒瞬时转染肿瘤细胞株HeLa、A549、HepG2,给予不同剂量137Cs γ射线照射,36 h后检测荧光素酶活性,观察该调控序列的放射诱导活性.结果该CArG调控元件在低剂量放射线的诱导下能明显增强下游基因的表达,在3 Gy的γ射线照射下诱导活性最强.结论人工合成的CArG调控元件在低剂量的放射线作用下能有效诱导下游基因的表达,在肿瘤的放射-基因治疗中具有较强的应用潜力.     

CArG调控元件辐射诱导活性的研究

目的构建含有人工合成CArG调控元件的荧光素酶报告基因重组质粒,研究该元件在多种肿瘤细胞中不同剂量放射线照射下的放射诱导活性。方法将含有9个串联的CCATATAAGG结构的CArG增强子与CMVIEbasalgenepromoter构成的嵌合调控元件插入到pGL3Basic质粒,构建荧光素酶报告质粒。利用脂质体将该报告质粒瞬时转染肿瘤细胞株HeLa、A549、HepG2,给予不同剂量137Csγ射线照射,36h后检测荧光素酶活性,观察该调控序列的放射诱导活性。结果该CArG调控元件在低剂量放射线的诱导下能明显增强下游基因的表达,在3Gy的γ射线照射下诱导活性最强。结论人工合成的CArG调控元件在低剂量的放射线作用下能有效诱导下游基因的表达,在肿瘤的放射-基因治疗中具有较强的应用潜力。     

Study on the Specific Gene Expression during Spermatogenesis of Rat

Testicular spermatogenic cells possess the characteristics of selectable geneexpression during the germ cell differential process. There is a property oftransitional expression of the gene types during spermatogenesis[1 ] .For example,when structure genetic expression of testicular somatic cells was terminated,thespecific gene expressions of the testicular germ cell were activated[2 ] . Therefore,differential process of germ cells of differentdevelopmental stage is performed underthe programme…     

大鼠心肌组织中细胞间粘附分子-1基因部分CDS克隆

目的：克隆大鼠心肌组织中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因。方法：采用RT—PCR法,从大鼠缺血性损伤的心肌组织mRNA中扩增出ICAM—1基因部分CDS区片段,克隆人T载体,筛选阳性克隆,酶切鉴定,最后测序鉴定。结果：经RT—PCR法扩增出的特异性产物与预期扩增的片段长度110bp相符,DNA测序结果与GenBank提供的已知序列比较,所克隆的ICAM-1基因片段与目的扩增的序列完全相同,与ICAM-1基因100％同源。结论：采用RT—PCR和T载体技术获得了大鼠心肌组织中ICAM-1基因克隆。     

ras基因P~(53)基因与胰腺癌研究近况

癌基因ras、抑癌基因P53在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。本文就其在胰腺癌中的研究和应用作一综述 ,以便寻求胰腺癌诊断、估计预后的新手段     

Yeast One-hybrid System Used to Identify the Binding Proteins for Rat Glutathione S-transferase P Enhancer I

INTRODUCTIONRat glutathione S-transferase P (GST-P) which is absent from the normal hepatocytes,is specifically induced at an early stage of chemical hepatocarcinogenesis[1-4]. It appearsto be a reliable marker for hepatocellular carcinogenesis in rat[5].…     

谷胱甘肽S-转移酶P1基因多态性与胃癌发展的相关性研究

目的分析谷胱甘肽S-转移酶（glutathione-S-transferase GSTs）P1基因多态性与胃癌发展的相关性,探讨高风险GSTP1-Val等位基因在氧自由基致胃癌中的作用。方法以血液样本、胃癌细胞和相应正常胃黏膜细胞样本为实验材料,采用放射免疫分析法（RIA）测定血浆谷胱甘肽S-转移酶P（GSTP）的含量和活性改变;多聚酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测外周血DNA GSTP1的多态性。结果胃癌、肠上皮化生和不典型增生两种癌前病变组织中GSTP染色的阳性率分别为78.00%（39/50）、48.00%（24/50）和74.00%（37/50）,与正常胃黏膜比较差异有统计学意义（P〈0.05）;GSTP在胃癌时升高[（27.5±24.5）μg/L],明显高于正常人组[（7.1±2.3）μg/L],两组比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）;GSTP在癌前病变组[（16.8±12.3）μg/L]高于正常人组（P〈0.01）;GSTP含量与肿瘤的分化程度呈正相关（r=0.914,P〈0.01）;高分化及中分化管状腺癌的阳性率分别为72.73%（8/11）和100.00%（21/21）,高于低分化管状腺癌（58.33%）,分化程度与GSTP表达呈正相关（r=0.732,P〈0.01）。Val 105的酶代替具有Lle 105的酶对多环芳烃二醇环氧化作用的效力高7倍,说明携带Val等位基因的个体患胃癌危险性明显高于非携带Val等位基因个体。结论 GSTP是机体损伤解毒的酶,它与肿瘤的发生、发展有关,是肿瘤早期诊断有价值的标志酶;GSTP1基因多态性与胃癌发展相关。携带GSTP1 Val等位基因的个体胃癌发病风险增高。