大鼠下丘脑大细胞分泌系统内一氧化氮合酶与催产素的共存

目的　为进一步阐明一氧化氮 (NO)与催产素 (OT)在下丘脑神经内分泌调节中的作用提供形态学资料。方法　用NADPH d组织化学方法 ,并结合免疫组织化学相结合技术 ,观察大鼠下丘脑大细胞分泌系统内一氧化氮合酶 (NOS)与OT免疫阳性神经元的分布与共存关系。结果　NOS与OT在下丘脑室旁核、视上核等下丘脑各大神经分泌核区内的分布基本类似 ,并呈部分共存关系。并且初次在第三脑室室周区内观察到NOS/OT双重反应阳性触液神经元。结论　研究结果提示NO与OT在有关下丘脑生殖与性行为的神经内分泌调节活动中起着重要的介质作用。     

大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及与催产素的共存

应用 NADPH-d组织化学方法观察了大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及其形态 ,并结合免疫组织化学技术研究了一氧化氮合酶与催产素在第三脑室触液神经元内的共存。结果显示 :在视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有一氧化氮合酶阳性触液神经元分布 ,呈自前向后 ,由腹侧部渐向背侧部过渡迁移的特征。一氧化氮合酶阳性触液神经元绝大部分为大细胞型标记神经元 ,胞体呈卵圆形、梭形、多角形与倒置梨形。它们位于脑室管膜内、室管膜下 ,或距室管膜有一定距离处 ,但有突起伸至第三脑室。第三脑室催产素免疫阳性触液神经元的形态及分布与一氧化氮合酶阳性触液神经元基本相似 ,两者高度共存。催产素 /一氧化氮合酶双标神经元 ,约占阳性细胞总数的 90 .9%。上述三种阳性触液神经元与邻近核团关系密切 ,尤其与室旁核之间有很多的阳性纤维互相交错。本研究结果表明 ,第三脑室有大量的一氧化氮合酶与催产素免疫阳性神经元分布 ,并且高度共存 ,从而建立了催产素的下丘脑 -脑脊液 -垂体神经体液调节环路的结构基础 ,对生殖与性行为起着重要的调控作用     

大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及催产素的共存

应用NADPH－d组织化学方法观察了大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及其形态，并结合免疫组织化学技术研究了一氧化氮合酶与催产素在第三脑室触液神经元内的共存。结果显示：在视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有一氧化氮合酶阳性触液神经元分布，呈自前向后，由腹侧部渐向背侧部过渡迁移的特征。一氧化氮合酶阳性触液神经元绝大部分为大细胞型标记神经元，胞体呈卵圆形、梭形、多角形与倒置梨形。它们位于脑室管膜内、室管膜下，或距室管膜有一定距离处，但有突起伸至第三脑室。第三脑室催产素免疫阳性触液神经元的形态及分布与一氧化氮合酶阳性触液神经元基本相似，两者高度共存。催产素／一氧化氮合酶双标神经元，约占阳性细胞总数的90.9%。上述三种阳性触液神经元与邻近核团关系密切，尤其与室旁核之间有很多的阳性纤维互相交错。本研究结果表明，第三脑室有大量的一氧化氮合酶与催产素免疫阳性神经元分布，并且高度共存，从而建立了催产素的下丘脑－脑脊液－垂体神经体液调节环路的结构基础，对生殖与性行为起着重要的调控作用。     

大鼠下丘脑内的一氧化氮合酶与雌激素受体双标神经元

目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)和雌激素受体(ER)在下丘脑诸核团的分布及共存,为揭示雌激素与一氧化氮之间的内在联系提供形态学依据。方法:采用NADPH-d组织化学法并结合免疫组织化学技术,观察雌性大鼠下丘脑内NOS阳性神经元、ER阳性神经元以及NOS/ER双染神经元的形态及分布。结果:NOS阳性神经元主要分布在下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区和室周核;ER阳性神经元在下丘脑诸核团的表达不及NOS阳性神经元广泛;NOS与ER双染神经元主要分布在下丘脑的室旁核、视上核、下丘脑外侧区及室周核;其他区域可见散在分布的双染神经元。结论:NOS与ER双染神经元主要集中分布在视上核的背内侧和背外侧部及室旁核小细胞部腹内侧区,在下丘脑外侧区分布较广但比较分散,室周核呈散在分布。     

原发性高血压进程中下丘脑内神经元型一氧化氮合酶和血管紧张素Ⅱ1型受体的共表达

目的:观察Wistar-Kyoto(WKY)大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)下丘脑室旁核(PVN)和视上核(SON)内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AT-1R)的共表达,以及加压素(AVP)和nNOS基因水平的表达差异.方法:应用免疫荧光双标染色结合RT-PCR技术.结果:SHR和WKY大鼠PVN和SON内都有大量的nNOS和AT-1R免疫阳性神经元分布并部分共存,但SHR组nNOS和AT-1R共存率明显高于对照组.与之一致,SHR组PVN和SON内nNOS和AVP mRNA含量都高于对照组.结论:在高血压发病进程中,NO发生代偿性增加,可部分负反馈抑制中枢肾素-血管紧张素系统,但这种抑制不能完全逆转过度激活的血管紧张素Ⅱ和AVP.     

小鼠下丘脑室旁核与第三脑室的相互关系Golgi浸染、免疫组织化学和透射电野观察

本工作应用多种方法对小鼠下丘脑室旁核(PVN)及其毗邻的第Ⅲ脑室壁进行观察,以了解PVN与脑室系统的相互关系。结果显示在室壁内有室管膜内神经元分布。PVN内侧区有一些接触脑脊液(CSF)的中小神经元,其树突插入室壁。PVN外侧区亦有些大细胞神经元发出长树突与室管膜接触或插入其内。免疫组化结果证实室管膜内有少数的加压素(VP)和催产素(OT)神经元存在,还有大量VP或OT免疫反应阳性的粗纤维穿入。电镜观察显示紧贴室管膜细胞有许多树突终末的断面,其中有些含多量神经分泌颗粒。并见有特殊的树—树突触形成。结果表明PVN与第Ⅲ脑室壁之间存在着结构上的密切联系,PVN内VP、OT神经元有可能直接排放分泌物入CSF。PVN与第Ⅲ脑室之间可能还存着局部调节环路。     

大鼠室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的构筑

利用黄递酶组织化学染色 ,观察鼠脑室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的构筑。结果显示室旁核内 NOS阳性神经元主要分为两种类型 :大型 NOS阳性神经元 ,占大部分 ,相对密集、成群分布于室旁核四个大细胞亚核即 :前连合核、内侧室旁核、外侧室旁核、室旁核后亚核 ;小型 NOS阳性神经元 ,占小部分 ,散在分布于大细胞亚核内或小细胞部 ,如室旁核前小细胞部、背外侧帽。结果提示 ,室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的形态与分布存在着差别 ,意味着具有多种相应的生理功能     

树、大鼠、豚鼠视交叉上核加压素免疫阳性神经元分布的差异性比较

目的 :观察加压素免疫阳性 (VP IR)神经元在树下丘脑视交叉上核中的分布并与其在大鼠豚鼠视交叉上核中的分布进行比较 ,探讨VP IR神经元分布的种属差异性。方法 :树、大鼠、豚鼠内固定后恒冷箱冰冻连续切片 ,免疫组织化学PAP法染色。结果 :三种动物的视交叉上核形状不同 ,VP IR神经元在三种动物视交叉上核中的分布位置、数量和密度不同 ,此外 ,在豚鼠两侧视交叉上核间以及第三脑室底部与视交叉正中背侧之间 ,还观察到一些散在分布的VP IR神经元 ,而树和大鼠相应区域却未见有VP IR神经元分布。结论 :VP IR神经元在视交叉上核中的分布有较大的种属差异性     

大鼠丘脑下部室管膜上皮细胞间加压素和催产素神经元的免疫组织化学观察

本文应用免疫组化PAP技术观察了位于大鼠丘脑下部第三脑室室管膜上皮细胞之间的加压素(VP)和催产素(OXT)神经元。在视前区第三脑室空周,见有较多的OXT神经元和较少的VP神经元紧贴室管膜分布,其突伸至室管膜下神经毡,有的穿行于室管膜上皮细胞之间并多与室管膜上皮细胞接触。在室旁核平面,比较远离脑室的VP、OXT神经元发出长突起行向第三脑室,有的穿过室管膜上皮伸至第三脑室腔(图3)。在上述二区域也发现个别OXT及VP神经元的胞体位于第三脑室侧壁及底壁的宝管膜上皮细胞之间。此外,在视上核前部及结节部,VP神经元的树突,大多伸向脑的腹侧面,有的树突似乎伸入了蛛网膜下腔。上述这两种肽能神经元与室管膜上皮的密切位置关系,可作为VP、OXT神经元具有感受脑脊液的变化或直接向脑脊液释放其分泌产物等设想的形态学基础。     

高血压合并糖尿病大鼠心肌毛细血管内皮细胞超微结构及eNOS的变化

目的:探讨高血压合并糖尿病(DM)对心肌毛细血管内皮细胞超微结构及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法:自发性高血压大鼠(SHR)及SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)结合高能量饲料诱导DM模型。分为4组:正常SD大鼠组(SD组)、SHR组、单纯DM组(DM组)与自发性高血压合并DM大鼠组(SHDM组)。电镜观察各组心肌毛细血管内皮细胞超微结构,免疫组化法测定各组eNOS在毛细血管内皮细胞的表达。结果:SHR、DM和SHDM组心肌毛细血管超微结构明显改变,包括内皮细胞水肿,细胞膜向管腔内呈指状突起,管腔狭窄、不规则等,这些现象在DM组与SHDM组更明显。与SD组比较,SHR组基底膜稍有增厚,但无显著性差异(31.31±4.19nmvs28.64±3.62nm,P>0.05),而DM组(46.58±5.32nm)和SHDM(51.50±4.62nm)组基底膜显著增厚(与SD及SHR组比较,均P<0.01)。SHDM组心肌组织eNOS表达显著低于SHR组及DM组。结论:高血压与DM共存时对心肌毛细血管内皮细胞超微结构及功能有协同损害作用。     

一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠视上核及室旁核的分布

目的：探讨自发性高血压大鼠视上核及室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的改变。方法：用ＮＡＤＰＨ－ｄｉ－ａｐｈｏｒａｅ组织化学方法,观察和比较了一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠视上核和室旁核的分布间下观察下捕脑视上核及室旁核的一氧化氮合酶阳性细胞形态、分布并进行计数。用图像分析仪测其灰度显差异。视上核及室旁核内的一氧化氮合酶阳性细胞灰度值在高血压组均明显高于对照组。提示这两上核内一氧化氮合酶     

大鼠翼腭神经节、耳神经节神经元一氧化氮合酶与神经肽Y的共存

目的：为进一步阐明一氧化氮(NO)与神经肽Y(NPY)在翼腭神经节、耳神经节支配机制中的作用提供形态学资料。方法：用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶(NADPH-d)组织化学方法与免疫组织化学方法结合技术观察翼腭神经节、耳神经节中一氧化氮合酶(NOS)与NPY阳性神经元分布及共存关系。结果：翼腭神经节、耳神经节中有NOS、NPY单标神经元和NOS-NPY双标神经元，以双标神经元最多，NPY单标神经元最少。3种神经元在神经节中无区域特异性的散在分布。两神经节中，各种神经元分布特点相似。结论：NO可能对翼腭神经节、耳神经节节后神经纤维末梢NPY的释放起重要作用。     

自发性高血压大鼠视网膜内含一氧化氮合酶神经元的研究

本实验用ＮＡＤＰＨ－黄递酶组织化学染色法观察了自发性高血压大鼠和京都种大鼠（ＷＫＹ，正常对照）视网膜内一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化。结果显示，ＮＯＳ阳性神经元位于内核层和视网膜节细胞层。ＳＨＲ组视网膜ＮＯＳ阳性细胞属无长突细胞和移位无长突细胞。偶见最怀的节细胞。ＮＯＳ阳性无长突细胞和节细胞胸质显强阳性反应，可较长而清晰的突起，ＮＯＳ阳性神经元的分布密度长，且在视网膜中央区（视神经盘附近）的分布密度     

一氧化氮合酶和一些神经递质（神经肽）在自发性高血压大鼠孤束核的分布

用ＮＡＤＰＨ－ｄｉａｐｈｏｒａｓｅ组织化学和免疫细胞化学方法，观察和比较了一氧化氮合酶、酪氨酸羟化酶、５－羟色胺、Ｐ物质和亮氨酸脑啡肽在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠孤束核的分布。结果显示，孤束核内一氧化氮合酶阳性细胞在高血压组少于对照组，有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。孤束核Ｐ物质和亮氨酸脑啡肽免疫阳性物在高血压组多于对照组；酪氨酸羟化酶免疫阳性物高血压组少于对照组；５－羟色胺免疫阳性物在两组的分布无明显差异。提示一氧化氮在孤束核是一种降压性局部神经调质，与其在心血管系统的降压作用一致。中枢Ｐ物质含量的异常增加可能是高血压发病的原因之一。孤束核脑啡肽含量的异常增加与高血压的形成有关，痛觉和高血压之间可能存在一些共同的发生机制。酪氨酸羟化酶在高血压组降低提示孤束核内酪氨酸羟化酶对维持正常血压发挥重要作用．孤束核内５－羟色胺与血压调节无关。     

一氧化氮合酶阳性神经元在肝硬化大鼠中缝核的分布

目的研究肝硬化大鼠中缝核内一氧化氮合酶阳性神经元分布的变化。方法用四氯化碳建立肝硬化动物模型,NADPH-d组织化学方法观察大鼠脑干中缝核内神经元的变化,图像分析仪对神经元的形态及数量进行分析。结果①NOS阳性神经元及纤维广泛分布于脑干中缝核内,特别是中缝背核,且上段多于下段;②肝硬化大鼠NOS阳性神经元脑干中缝核内分布与正常组基本一致,但阳性反应物的密集度明显增高。结论肝硬化后脑干中缝核一氧化氮合酶较正常明显增多,其分布与兴奋性氨基酸分布相互重叠,可以推测它与一些神经递质在脑内共存并激发神经毒作用。     

一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠脊髓中间带灰质的分布

目的 探讨自发性高血压大鼠脊髓中间带灰质内一氧化氮合酶阳性细胞和纤维的分布及其与自发性高血压的关系。方法 采用ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法,并以计算机图像分析系统对脊髓胸腰部中间外侧核本部区ＮＡＤＰＨ－ｄ染色强度（Ａ值）进行半定量分析。结果１．在脊髓中间带灰质区,一氧化氮合酶阳性神经细胞和纤维主要见于胸腰部中间外侧核本部区和中央管周围,在中介核区也有少量分布。胸腰部中间外侧核本部区染色阳性细胞成群分布,细胞群的大小、间距随节段而稍有不同。一氧化氮合酶阳性细胞分布模式在自发性高血压大鼠和正常鼠两组之间未发现明显差异。２．在脊髓Ｔ２、Ｔ５、Ｔ８、Ｔ１１、Ｌ１各节段中间外侧核本部区,一氧化氮合酶阳性物质的Ａ值,自发性高血压大鼠比正常大鼠低。统计结果显示,差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论 脊髓中间带灰质的交感神经节前     

去卵巢后雌性大鼠下丘脑视前区NOS阳性神经元形态学和突触素表达的变化

目的：为解释围绝经期的精神、神经症状提供实验依据。方法：采用免疫细胞化学方法显示去卵巢雌性大鼠下丘脑视前内侧区(MPA)和视前外侧区(LPA)内NOS阳性神经元，形态学改变以及突触素表达。结果：(1)去卵巢组和对照组大鼠的视前内、外区内可见大量NOS阳性神经元；(2)去卵巢动物的下丘脑内NOS阳性神经元突起长度比对照组的明显变短，分支明显变少；(3)去卵巢组动物下丘脑内突触素表达比对照组的明显减少。结论：大鼠去卵巢后，由于雌激素分泌减少，导致了NOS阳性神经元的突起减少和突触减少，结果NO介导的神经元信号传导失常，这些变化可能是引发围绝经期的精神、神经症状的原因之一。