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蚯蚓纤溶酶的分离纯化及其部分酶学性质的研究 总被引:12,自引:1,他引:12
以野生环毛蚓(Pheretima)为材料,经匀浆抽提、热变性、硫酸铵分步沉淀、Sephadex G-75凝胶过滤和DEAE—纤维素离子交换柱层析等纯化步骤,得到纯度较高的蚯蚓纤溶酶(EFE),具有强烈的溶解血纤维蛋白的作用。同时对酪蛋白和BAEE也具有较强的水解作用,但对ATEE无水解活性。实验表明蚯蚓纤溶酶能被苯甲磺酰氟强烈抑制,说明该酶是丝氨酸蛋白酶、属胰蛋白酶类。金属离子Na^ 、K^ 、Mg^2 对此酶有一定的抑制作用,Hg^2 对EFE有强烈抑制作用,而Ca^2 可提高此酶活力。 相似文献
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豆豉纤溶酶的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
豆豉纤溶酶是从我国豆豉中分离得到的一种蛋白酶,具有良好的溶解血栓作用。文章综述了豆豉纤溶酶产生菌的菌种特性,酶的理化性质、发酵工艺、分离纯化、酶活测定、分子生物学及溶栓实验方面的研究现状,并对其应用和发展前景做了展望。 相似文献
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一种具有纤溶活性的蛋白酶的分离纯化及性质 总被引:11,自引:0,他引:11
目的分离纯化BacillussubtilisJin2 1发酵产生的具有纤溶活性的蛋白酶 ,并对其性质进行研究。方法通过硫酸铵分级盐析 ,SerineSepharose 2B和SephacrylS— 2 0 0色谱柱进行分离纯化 ,用SDS PAGE测定纯度 ,SDS PAGE和凝胶层析测定相对分子质量 ,纤维蛋白平板法测定酶活力。结果分离得到了电泳纯的酶 ,该酶的相对分子质量为 2 8kD ,等电点约为 8 6 ,最适 pH为 7 5 ,最适温度为 4 0℃ ,在 4 0℃以下较稳定 ,超过 5 0℃时酶活力开始下降 ;金属离子Mn2 + 对酶有明显的激活作用 ,而Zn2 + 对酶有抑制作用 ,二异丙基磷酰氟 (DFP)和苯甲基磺酰氟 (PMSF)完全抑制酶活性。结论该酶是一种丝氨酸蛋白酶 ,与纳豆激酶相似 ,有望开发成为一种新型口服溶栓药物 相似文献
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双胸蚓纤溶酶的分离纯化及性质研究 总被引:9,自引:2,他引:7
通过选择性热变性、大豆胰蛋白酶抑制剂-Sepharose4B亲和层析,DEAE-纤维素离子交换层析和Arg-Sepharose4B亲和层析,从双胸蚓中分离纯化得到具有强烈纤溶活性的酶组分。 相似文献
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纳豆激酶的纤溶活性及其机理研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究纳豆激酶的抗血栓作用 ,探讨其主要作用机理。方法通过药理实验方法观察纳豆激酶对体内急性血栓形成 ,以及对血液凝固系统全血凝血时间、凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间和血液中纤维蛋白原含量变化的影响。结果纳豆激酶提取物可对抗小鼠体内血栓形成 ,对内外源性凝血途径均有影响 ,同时有直接的溶栓作用。结论纳豆激酶具有较强的纤溶活性。 相似文献
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组织纤溶酶原激活物的分离纯化 总被引:1,自引:0,他引:1
用亲和层析法从猪心组织分离纯化纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen activator,t-PA),以纤维蛋白-sepharose-4B 和 lys-sepharose-4B 两种亲和胶,从5 kg 新鲜猪心组织中分离出 t-PA1.46mg,比活性为235000 IU/mg,得率为34%,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定为一条带,分子量为68000。 相似文献
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以筛选得的纤溶酶产生菌——枯草芽孢杆菌HGD107进行15L发酵罐生产豆豉纤溶酶,产物经离心、D392型树脂脱色、盐析、超滤等操作纯化,制得冻干豆豉纤溶酶产品,其比活力为530.6u/mg,纯化倍数11,活性回收率65.7%。 相似文献
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长白山白眉蝮蛇蛇毒纤溶酶的纯化 总被引:9,自引:1,他引:8
从长白山白眉蝮蛇蛇毒中纯化具有溶栓功效的纤溶酶。方法:用 DEAE Sephadex A50离子交换、Sephadex G75凝胶过滤层析和 DEAE Sephadex A 50三步柱层析分离方法,对长白山白眉蝮蛇蛇毒进行分离纯化,得到了一种纤溶酶活性组分。结果:经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱表征该酶为单一蛋白,其分子量为 23.367 kD。结论:为进一步研究其结构和功能提供了可靠依据。 相似文献
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以威廉环毛蚓为原料,用循环工艺纯化。纯品蚓激酶经股静脉注射实验性局灶脑梗塞大鼠,并与尿激酶比较,观察其对脑梗塞模型大鼠的药效。从脑片染色结果及给药后不同时间点大鼠血液中纤溶酶原激活剂和其抑制剂的含量变化显示用该工艺纯化的蚓激酶有较好的溶栓作用。 相似文献
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蝮蛇毒纤溶酶的分离纯化及性质研究 总被引:2,自引:2,他引:0
目的 :寻找一种分离纯化蝮蛇毒纤溶酶的工艺并研究其理化性质。方法 :采用DEAE SepharoseCL 6B和HeparinCL 6B层析方法 ,从蝮蛇毒中分离纯化纤溶酶。结果 :蝮蛇毒纤溶酶经HPLC为单一峰 ,等电聚焦电泳为一条带 ,其等电点为 4.5 5 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测得分子量为 2 9.4kD。该酶对热不稳定 ,在 pH6~ 9时稳定 ,氨基酸组成分析表明含酸性氨基酸较多。结论 :用此工艺可制得高纯度的蝮蛇毒纤溶酶。 相似文献
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运用阴离子交换色谱和凝胶过滤色谱从蝮蛇毒中分离出活化C蛋白样酶(APCL)。经SDS-PAGE和凝胶过滤色谱检测纯度,表明该蛋白为单一组分。SDS-PAGE测得分子量为15.3k,等电聚焦法测得等电点为4.80。酶学动力学研究表明APCL水解显色肽反应的Km为3.16×10-5mol/L、Vmax为1.16×10-4mol·L-1·min-1。 相似文献