TNF—α拮抗胰岛素样生长因子—1对人α1（Ⅰ）胶原启动子？…

目的：探讨ＴＮＦ－α对胰岛素样生长因子－１（ＩＧＦ－１）激活人α１（Ⅰ）胶原启动子的作用。方法：构建含不同长短α１（Ⅰ）胶原启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶（ＣＡＴ）报告基因的重组体ｐＣＯＬＨ１ ０．２７,ｐＣＯＬＨ１ ２．５用脂质体法瞬时转染至ＮＩＨ３Ｔ３细胞的人皮肤成纤维细胞中,加入ＩＧＦ－１或（和）ＴＮＦ－α,测定ＣＡＴ活性。结果;１００ｎｇ／ｍｌ ＩＧＦ－１可使转染至ＮＩＨ３Ｔ３细胞的ｐＣＯ     

转化生长因子β及受体在增生和癌变的细支气管肺泡细胞中的分布

用免疫组织化学方法检测转化生长因子（ＴＧＦ）β三型及其受体（ＴβＲ－Ⅰ）在细支气管肺泡细胞增生（ＢＡＨ）和细支气管肺泡细胞癌（ＢＡＣ）中的分布情况。结果示，大部分ＢＡＣ和ＢＡＨ病例均有一种以上ＴＧＦ－β亚型和ＴβＲ－Ⅰ表达；ＢＡＣ的ＴＧＦ－β１和ＴＧＦ－β３阳性率明显高于ＢＡＨ；有二种以上ＴＧＦ－β表达的ＢＡＣ病例，其淋巴结转移发生率更高。提示增生和癌变的细支气管肺泡细胞均可合成和分泌ＴＧＦ－β和ＴβＲ－Ⅰ，且ＴＧＦ－β对ＢＡＣ的发展起一定作用     

人Aγ-珠蛋白基因-173 T→C突变对启动子功能的影响

目的　研究人Ａγ珠蛋白基因－ １７３ Ｔ→Ｃ突变对反式作用因子与启动子的结合及对启动子活性的影响。方法　采用电泳迁移改变分析和荧光素酶报告基因瞬时转染分析。结果　Ａγ珠蛋白基因－ １７３ Ｔ→Ｃ突变使ＧＡＴＡ１ 与突变启动子片段（－ ２０１～－ １５８）的结合降低了９６％ （Ｐ＜ ００１）,并且使Ｏｃｔ１ 与相同的ＤＮＡ 片段的结合降低５５％ （Ｐ＜ ００５）。在ＭＥＬＧＭ９７９ 细胞中,突变启动子活性是正常启动子的２ 倍（Ｐ＜ ００５）;在Ｋ５６２ 和Ｈｅｌａ 细胞中,突变和正常启动子活性基本相同。结论　Ａγ启动子－ １７３ Ｔ→Ｃ突变导致ＧＡＴＡ１ 与突变启动子片段结合显著减少,提示在成年期该转录因子可能是Ａγ珠蛋白基因的负调控因子;－ １７３ Ｔ→Ｃ突变可能仅在成年期红系细胞环境中才能增强Ａγ珠蛋白基因启动子活性     

碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子-β_1在人胎儿内耳的定位表达

利用免疫组织化学技术对胎龄为９．５～２９周的１０例人胎儿内耳中碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）和转化生长因子－β（ＴＧＦ－β１）的表达情况进行研究。免疫组织化学染色采用ＬＳＡＢ方法并参考Ｓｈｉ等火棉胶包埋人颞骨切片免疫组化染色技术。结果发现：ｂＦＧＦ及ＴＧＦ－β１在全部胎儿的内耳中均有表达。ｂＦＧＦ在Ｃｏｒｔｉ＇ｓ器、前庭斑和壶腹嵴的感觉上皮有较强的表达，但在９．５周的Ｃｏｒｔｉ＇ｓ器始基一部细胞群染色相对较深而下部细胞群相对稍浅。分化成熟后的毛细胞及支持细胞均维持较强的表达。ＴＧＦ－β１在各…     

TGFβ1对胃腺癌细胞SGC—79001,Bcl—2表达的影响

研究转化生长因子β１对胃癌细胞Ｂｃｌ－２的表达的影响。方法：ＴＧＦβ１作用于人胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１，４８Ｈ后收集细胞爬片。用抗Ｂｃｌ－２ｍＡｂ和免疫组织化学ＳＡＢＣ法及图像分析技术分析Ｂｃｌ－２。结果；ＴＧＦβ１作用的胃腺癌细胞Ｂｃｌ－２表达量１     

环孢素A联合雷公藤单体T_4对人肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原合成及Ⅳ型胶原α1、转化生长因子β1mRNA表达的影响

目的探讨环孢素Ａ（ＣsＡ）、雷公藤单体Ｔ４单独或联合使用对肾小球系膜基质合成的影响及可能机制。方法用ＥＬＩＳＡ法测定人系膜细胞培养上清Ⅳ型胶原含量,用ＲＴ－ＰＣＲ法测定人肾小球系膜细胞Ⅳ型胶原α１ｍＲαＮＡ（Ｃｏｌｌα１（Ⅳ）ｍＲＮＡ）、转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）ｍＲＮＡ的表达。结果ＣｓＡ可双向调节人系膜细胞Ⅳ型胶原的合成,ＣｓＡ１．０ｕｇ／ｍｌ为促进作用,ＣｓＡ０．０１～０．１ｕｇ／ｍｌ为抑制效应。Ｔ４剂量依赖性促进Ⅳ型胶原产生。两药联合应用具有协同效应,小剂量ＣｓＡ和Ｔ４联合在获得较强免疫抑制作用的同时促胶原生成作用较弱。ＣｓＡ１．０ｕｇ／ｍｌ和Ｔ４１０ｎｇ／ｍｌ均可上调人系膜细胞Ｃｏｌｌβ１（Ⅳ）、ＴＧＦβ１ｍＲＮＡ表达,两者变化趋势基本一致。结论ＣｓＡ和Ｔ４均参与调节基质合成,两药小剂量联合促胶原生成作用减轻,这一作用可能由ＴＧＦβ１介导发生于转录水平。     

基因转移人TGF-β1在NIH/3T3细胞中表达鉴定

目的：研究转移人转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）在真核细胞系中蛋白表达。方法：借助真核质粒表达载体,将人ＴＧＦ－β１转移入小鼠成纤维细胞株（ＮＨ／３Ｔ３）细胞中,经Ｇ４１８筛选,克隆扩增,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ、ＰＣＲ、ＰＴ－ＰＧＲ鉴定,并经水貂肺上皮细胞（ＣＣＬ－６４）生长抑制法,对克隆细胞分泌ＴＧＦ－β１蛋白进行活性检测。结果：证实了重组人ＴＧＦ－β１基因在ＮＩ     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移？…

目的 观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突关细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法 从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭ－ＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＧＣ１）并转导Ａｄ－ＬａｃＺ（Ｄｃ２）或Ａｄ－ＴＧＦβ１（ＤＣ３）,每组５×１０＾５个细胞注入Ｇ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别     

贮脂细胞TGF-1反义基因转移及对细胞外基质合成的抑制作用

目的探讨ＴＧＦβ１在肝纤维化贮脂细胞激活和细胞外基质产生中的作用。以及对细胞外基质基因的表达和自身ｍＲＮＡ表达的作用。方法将ＴＧＦβ１的基因序列反向插入逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ,构建反义ＴＧＦβ１的逆转录病毒载体ｐＬＡＴＳＮ,用ＰＡ３１７包装细胞包装,获得高滴度的逆转录病毒。将携有反义ＴＧＦβ１ｃＤＮＡ的逆转录病毒载体ｐＬＡＴＳＮ导入人的贮脂细胞株ＬＩ９０内,选择稳定转染的贮脂细胞株培养,应用ＰＣＲ、ＲＴＰＣＲ检测反义基因的表达,用ＥＬＩＳＡ、免疫组织化学和原位杂交等方法检测ＴＧＦβ１和细胞外基质的产生。结果贮脂细胞株ＬＩ９０内有反义ＴＧＦβ１的表达,且其合成分泌ＴＧＦβ１和细胞外基质如ＦＮ、ＣｏｌＡ１降低。结论反义ＴＧＦβ１ＲＮＡ可以抑制贮脂细胞的激活和内源性ＴＧＦβ１和细胞外基质的产生,为抗纤维化基因治疗提供理论基础     

大鼠浅Ⅱ度烫伤愈合渗出液细胞中生长因子mRNA的表达动态

为探讨生长因子在浅Ⅱ度烫伤愈合中的作用提供基础资料，从分子水平研究了烫伤愈合渗出液细胞中生长因子ｍＲＮＡ的表达动态。在ＳＤ大鼠背部埋入海绵，于热烫伤浅Ⅱ度后６ｈ和１、３、７、１０、１４ｄ分别取渗出液细胞，提取细胞总ＲＮＡ，用逆转录聚合酶链反应方法，以βａｃｔｉｎ为内对照，计算ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦ和ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达量的变化。结果表明：伤后６ｈ，ＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ均有表达；伤后３ｄＴＧＦα、ＴＧＦβ１、ＰＤＧＦ均出现表达峰，表达水平明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；伤后１０ｄＴＧＦβ１、ｂＦＧＦ出现表达峰，表达水平也明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。这提示它们在烫伤愈合的不同时期协同发挥效应。     

大鼠肾脏系膜细胞转染人TGF-β1基因可增强MMP-2表达

目的　研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）表达的影响。方法　采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦβ１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ,经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定其转染成功否;又分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．酶谱分析法检测阳性表达人ＴＧＦβ１的ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白及酶活性变化。结果　成功获得稳定过表达人ＴＧＦβ１的大鼠ＭｓＣ克隆（ＭＴＧ１）,该细胞克隆的ＭＭＰ２ｍＲＮＡ．蛋白表达及其酶活性均获增强。结论　ＴＧＦβ１可增强ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白表达,并提高其酶活性,这为进一步阐明ＴＧＦβ１在肾小球硬化发生机制中的作用提供了重要的实验手段和依据。     

瘢痕组织中转化生长因子β的免疫组化定位

目的：比较转化生长因子（ＴＧＦ）β１、β２、β３在瘢痕增生病理过程中的地位以及了解它们在瘢痕中的组织学定位。方法：利用免疫组化技术，分别比较３型ＴＧＦβ在增生期和成熟期瘢痕组织中的表达。结果：ＴＧＦβ１在增生期瘢痕大量的成纤维细胞、慢性炎症细胞、血管内皮细胞中持续高水平表达，远远高于在成熟期瘢痕中的表达水平；另外，ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３在瘢痕组织中的表达水平远远不如ＴＧＦβ１。结论：增生期瘢痕组织中大量的成纤维细胞、慢性炎症细胞、血管内皮细胞持续高水平表达的ＴＧＦβ１可能是引起瘢痕持续增生的重要因素；ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３的作用则远逊于ＴＧＦβ     

转化生长因子β1基因修饰的小鼠树突状细胞在移植体内的迁移与生存

目的观察β型转化生长因子（ＴＧＦβ１）基因修饰的Ｂ１０小鼠骨髓树突状细胞（ＤＣ）在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移和存活,以探讨ＤＣ生物学特性与移植耐受性的关系。方法从Ｂ１０小鼠骨髓分离ＤＣ前体细胞,在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子＋β型转化生长因子（ＧＭＣＳＦ＋ＴＧＦβ）条件下培养增殖（ＤＣ１）,并转导ＡｄＬａｃＺ（ＤＣ２）或ＡｄＴＧＦβ１（ＤＣ３）。每组５×１０５个细胞注入Ｃ３Ｈ小鼠后掌皮下,分别于第１、２、７及１４天取淋巴器官,以免疫组织化学方法检测ＩＡｂ阳性细胞的分布及数量。结果各组ＤＣ在Ｃ３Ｈ小鼠体内的迁移及分布均相似,即ＩＡｂ阳性细胞首先出现在窝淋巴结被膜下,继而迁入脾的Ｔ细胞依赖区和边缘区,第７天脾内阳性细胞数达顶峰。与ＤＣ１组相比,ＤＣ２在脾内的阳性细胞数减少,ＤＣ３阳性细胞数在各时间点都为最高。结论ＤＣ经转导ＡｄＬａｃＺ,可增加其免疫活性,使宿主加速排斥反应;而转导ＡｄＴＧＦβ１可使ＴＧＦβＤＣ表达ＴＧＦβ１,维持ＤＣ于功能不成熟状态,从而提高宿主的耐受性。     

低密度脂蛋白对肾小珠系膜细胞,TGF—β和FN mRNA表达的影响

目的：观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭＳＣ）生长及转化生长因子β（ＴＧＦ－β）和纤维连接蛋白（ＦＮ）基因表达的影响。方法：体外培养的ＭＳＣ培养液中加入ＬＤＬ共同孵育,采用＾３Ｈ－ＴｄＲ渗入法检测ＭＳＣ增殖情况,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＴＧＦ－β ｍＲＮＡ、ＦＮ ｍＲＮＡ的表达,应用斑点杂交法检测抗ＴＧＦ－抗体对ＦＮ ｍＲＮＡ表达的影响。结果（１）ＬＤＬ刺激ＭＳ     

TNF,IFN,MHCⅠ类分子基因“正反馈”式放大表达的重组腺病毒载体

目的：为使外源性 Ｔ Ｎ Ｆ, Ｉ Ｆ Ｎ 基因和内源性主要组织相容性复合物Ⅰ类（ Ｍ Ｈ ＣⅠ）分子基因表达呈现“正反馈”式放大效 应,构建在 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子调控、 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ连接下协同表达 Ｔ Ｎ Ｆα和 Ｉ Ｆ Ｎβ基因的重组腺病毒载体。方法和结果：从ｐ Ｇ Ｌ３ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｆ及ｐ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ中切下 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ和 Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,先后插入ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ Ｓｋ （＋ ）, 构建成ｐ Ｂ Ｌ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ。回收 Ｔ Ｎ Ｆα Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,连入 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｌｉｎｋ１ 中,构建成 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｃ Ｍ Ｖ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（＋ ）。回收 Ｂ７ｐｒｏ Ｔ Ｎ Ｆ Ｉ Ｒ Ｅ Ｓ Ｉ Ｆ Ｎβ基因片段,连入缺失 Ｅ１ 和 Ｅ３ 区及启动子的 Ａｄ ＢｇｌⅡ中, 构建成 Ｈ Ｌ Ａ Ｂ７ 启动子驱动表达的 Ａｄ Ｂ７ Ｔ Ｎ Ｉ Ｒ Ｉ Ｆ（－ ）。结论：此两种载体为“正反馈”式放大肿瘤免疫原性提供一条新途径。     

转化生长因子大黄酸对肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白功能的影响

目的 对人肾小球系膜细胞葡萄糖转运蛋白－１（ＧＬＵＴ１）进行鉴定。研究ＧＬＵＴ１的作用特点,ＴＧＦ－β１对其影响以及大黄酸的干预作用。方法 分别用ＲＴ－ＰＣＲ,免疫荧光染色,流式细胞仪和［＾３Ｈ］－２脱氧葡萄糖摄入率,对系膜细胞ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡ表达,蛋白质分布和功能进行鉴定。观察不同浓度ＴＧＦ－β１在加或不加大黄酸的情况下对系膜细胞葡萄糖摄入以及ＧＬＵＴ１ｍＲＮＡ表达的影响。结果 人类肾小球系膜     

急性白血病患者血清及骨髓TGF—γ1及其Ⅰ,Ⅱ型受体水平 …

目的 探讨转化生长因子－β１（ＴＧＦ－β１）及其Ⅰ、Ⅱ型受体（ＴＧＦＲ１,ＴＧＦＲ２）对白血病预后的意义,方法 采用ＳＡＢＣ免疫组织化学方法观察ＴＧＦ－β１及ＴＧＦＲ１,ＴＧＦＲ２在急性白血病患者的表达情况,。并用ＥＬＩＳＡ法测定白血病患者血清及骨髓ＴＧＦ－β１水平。结果 白血病细胞ＴＧＦ－β１表达水平与对照组比较差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。初 患者的ＴＧＦＲ１及ＴＧＦＲ２表达水平非常显著低于对     

感染日本血吸虫小鼠CD4^＋,CD8^＋T细胞凋亡相关基因转录水平

探讨日本血吸虫感染过程中，宿主ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋细胞凋亡的相关基因ＴＧ－β在转录水平上的变化。方法：用地高辛标记的探针作原位杂交，观察促凋亡基因ＴＧＦ－β在ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋细胞的ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的表达随感染时间的延长而升高，感染后１０周起ＣＤ４＾＋Ｔ细胞ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的表达明显高于ＣＤ８＾＋细胞，差异有显著性意义。结论在日本血吸虫感染过程中，ＣＤ４＾＋细胞凋亡比率超过ＣＤ８＾＋细胞     

亚性疟原虫多价重组疫苗的研制及其免疫活性的初步鉴定

为了探讨Ｔ、Ｂ淋巴细胞双重激活表位的重组复合症疾抗原的免疫原性和保护作用，作者设计合成了编码亚性疟原虫红内期３个保护性抗原位点和２个外源性Ｔ细胞激活位点的复合基因ＨＧＦＣ，并构建了多连体复合基因ＨＧＦＣＡＣ。两种复合基因分别与表达载体ｐＷＲ４５０－１重组，并在大肠杆菌中表现出含外源蛋白和β－半乳糖苷酶部分氨基酸的融俣蛋白，表达量为３５％。     

测定TGF—β1生物活性^3H—TdR细胞生长抑制法和MTT法比较研究

目的：探讨检测转化生长因子－β１（ＴＧＦ－１）灵敏可靠的方法。方法；用水貂肺上皮细胞（ＣＣＬ－６４）作为抑制细胞，分别采用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和ＭＴＴ法。对照ＴＧＦ－β１标准含量，计算出细胞生长抑制剂，比较两法灵敏性和稳定性。结果：ＣＣＬ－６４细胞生长抑制与ＴＧＦ－β１是负相关；回归系数假设检验两种检验方法有显著差异；＾３Ｈ－ＴｄＲ法误差率比ＭＴＴ法小。结论：＾３Ｈ－ＴｄＲ法测定ＴＧＦ－β１活性较