脂联素对糖尿病大鼠肾功能的影响

目的 探讨脂联素在早期糖尿病肾病中的作用及其可能的作用机制.方法 建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病动物模型,随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、吡格列酮治疗组[15mg/( kg·d),PT组].每周测量体重,每两周测定血糖,于实验第8周末处死大鼠后测定血清脂联素水平、相关生化指标及肾功能指标,同时留取肾皮质液氮冻存与福尔马林固定,应用实时定量逆转录(RT)-PCR方法检测肾皮质脂联素受体、转化生长因子(TGF)-β1的mRNA水平,免疫组织化学法测定TGF-β1蛋白的表达情况.结果 与NC组相比,DM组大鼠血糖、血尿素氮、24h尿量及尿微量白蛋白、肾肥大指数明显升高(P＜0.01),血肌酐含量和血清脂联素水平明显下降(P＜0.01).与DM组比较,PT组仅在实验前期出现短暂的血糖降低,后期血糖水平差异无统计学意义,但PT组血清脂联素水平升高(P＜0.05),血尿素氮、24 h尿量及尿微量白蛋白、肾肥大指数等指标明显下降(P＜0.01).实时RT-PCR结果显示,与NC 组比较,DM组的脂联素mRNA表达量下降,而TGF-β1mRNA表达明显升高;与DM组相比,PT组脂联素mRNA水平升高(P＜0.05),而TGF-β1 mRNA表达明显受抑制(P＜0.01).结论 脂联素对糖尿病肾病具有重要作用,吡格列酮可以通过增加脂联素在肾脏的表达来抑制TGF-β1mRNA及蛋白的表达,从而对肾脏发挥独立的保护作用.     

吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉脂联素受体表达的影响

目的观察高脂血症大鼠主动脉脂联素受体(adiponectin receptors1/2,AdipoR1/2)的表达改变,探讨吡格列酮对高脂血症大鼠主动脉血管脂联素受体表达的影响。方法清洁级SD大鼠26只,随机分为正常饮食组(9只)和高脂饮食组(17只);高脂饮食组12周后检测空腹血脂,明确造模是否成功,随机分为模型组(8只)和吡格列酮组(9只),后者给予吡格列酮溶液(0.6mg/ml)连续灌胃4周,之后检测血脂水平及主动脉病理,ELISA法检测血清脂联素水平,荧光RT-PCR法检测主动脉脂联素受体AdipoR1和AdipoR2mRNA的表达,Western Bolt法检测脂联受体蛋白表达。结果高脂饲料喂养12周,高脂饮食组TG、TC、LDL水平明显升高(P0.01);给药四周后,吡格列酮组TG、TC水平明显降低(P0.01),模型组主动脉脂联素受体1/2mRNA和蛋白的表达明显下降(P0.01)。与模型组比较,吡格列酮组主动脉AdipoR(1P0.05)和AdipoR2(P0.01)mRNA的表达明显升高,主动脉脂联素受体蛋白的表达明显升高(P0.05),差异有统计学意义。结论脂联素及其受体下降可能介入高脂血症血管损伤,吡格列酮具有抗动脉粥样硬化作用,该作用可能与提高血清脂联素和主动脉血管脂联素受体表达有关。     

球型脂联素通过TGFβ_1/Smads通路对2型糖尿病大鼠肾病保护作用的探讨

目的探讨球型脂联素(gAd)对2型糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用,分析其是否通过转化生长因子β_1(TGF-β_1)/Smads通路起作用。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(NC组,n=18)、造模组(n=42),成功建立2型糖尿病肾脏病变模型的36只大鼠再随机分为2型糖尿病组(DM组,n=18)、gAd干预组(AD组,n=18)。分别于观察4周、8周、12周时测各组大鼠空腹血糖(FBG)、24 h尿白蛋白、尿肌酐和肾重/体重,观察肾脏病理改变,测TGF-β_1、Smad3、Smad7的mRNA和蛋白表达水平。结果在各时间段,DM组较NC组FBG、24 h尿白蛋白、尿肌酐、肾重/体重及TGF-β_1、Smad3表达升高,Smad7表达降低(P 0.05);AD组较DM组FBG、24 h尿白蛋白、尿肌酐、肾重/体重及TGF-β_1、Smad3表达降低,Smad7表达升高(P 0.05)。结论 gAd可通过降低TGF-β_1、Smad3表达,同时上调Smad7表达,延缓2型糖尿病肾病肾纤维化的进展。     

沉默信息调节因子1对早期2型糖尿病大鼠脂联素的调节作用

目的检测脂联素水平及沉默信息调节因子1(SIRT1)在早期糖尿病(DM)大鼠肝脏组织中的表达变化,探究SIRT1对脂联素的调控作用。方法 Sprague-Dawley大鼠42只,分为4组:正常对照组(n=10)、DM组(n=10)、DM+白藜芦醇(RES)组(n=11)和DM+尼克酰胺(NIA)组(n=11)。高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型DM大鼠模型。进行基础代谢和血清学检测,HE染色法观察肝脏病理结构变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测血清脂联素水平;Western blotting和逆转录-聚合酶链反应法检测肝组织SIRT1和脂联素受体(AdipoR)等表达变化。采用SPSS 19.0软件进行数据处理。组间比较采用方差分析及t检验。结果与DM组相比,空腹血糖(FBG)在DM+RES组显著降低(P0.05);总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)在DM+RES组显著降低(P0.01),在DM+NIA组显著升高(P0.05);甘油三酯(TG)在DM+RES组显著降低(P0.05);高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)在DM+RES组显著升高(P0.01)。与DM组相比较,DM+RES组的脂联素水平略有升高(P0.05),DM+NIA组血清脂联素水平显著降低(P0.05)。显微镜下,DM组大鼠肝脏可见不同程度炎细胞浸润、甚至变性,DM+RES组大鼠肝脏脂肪变性减轻,DM+NIA组大鼠肝脏肝细胞散在小泡性脂滴。与DM组相比较,DM+RES组AdipoR2和SIRT1蛋白表达显著增加(均P0.05),WISP-1蛋白表达显著降低(P0.05),而DM+NIA组AdipoR2和SIRT1蛋白表达显著降低。与DM组比较,AdipoR2和SIRT1 mRNA在DM+RES组表达显著增加(P0.01),WISP-1 mRNA表达显著降低(P0.01);而DM+NIA组AdipoR2表达显著降低(P0.05)。结论在早期DM肝损伤的发生发展过程中,SIRT1信号分子可能通过调节AdipoR的表达来调控脂联素的水平,参与DM内分泌系统的病理生理演变。     

替米沙坦和氯沙坦对胰岛素抵抗大鼠冠状动脉脂联素受体和胰岛素抵抗的影响

目的探讨替米沙坦和氯沙坦对胰岛素抵抗(IR)大鼠冠状动脉脂联素受体和IR的影响。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组(Con组)、胰岛素抵抗组(IR组)、替米沙坦干预组[TEL组,5 mg/(kg·d)]和氯沙坦干预组[LOS组,10 mg/(kg·d)]。测定并比较各组大鼠空腹血糖、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和空腹胰岛素、血清脂联素(APN),并计算胰岛素敏感指数(ISI)。检测冠状动脉APN、脂联素受体1(AdipoR1)和脂联素受体2(AdipoR2)mRNA和蛋白的表达。结果与IR组比较,TEL组和LOS组血清APN水平均增加(P0.05),且TEL组TG水平、空腹血糖和ISI低于IR组(P0.05)。IR组冠状动脉APN mRNA、AdipoR1 mRNA、AdipoR2 mRNA表达低于Con组(P0.05),TEL组和LOS组冠状动脉APN mRNA、AdipoR1 mRNA、AdipoR2 mRNA表达较IR组增高(P0.05)。与IR组比较,TEL组和LOS组冠状动脉APN、AdipoR1和AdipoR2表达增加(P0.05)。结论替米沙坦和氯沙坦均能增加IR大鼠血清APN水平,抑制冠状动脉APN、AdipoR1和AdipoR2表达的下降。     

尿脂联素与糖尿病肾病严重程度的相关性研究

目的 探讨尿脂联素与糖尿病肾病严重程度的相关性.方法 150例糖尿病患者根据尿微量白蛋白/肌酐(ACR)分为正常白蛋白尿组(ACR＜ 30 mg/g),微量白蛋白尿组(ACR30～300 mg/g),大量白蛋白尿组(ACR＞ 300 mg/g),每组均为50例.同时选取健康体检者30名作为对照组.应用全自动生化分析仪测定空腹血糖、HbA1c、肌酐、白蛋白、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDH-C)等生化指标.采用酶联免疫吸附法测定血、尿脂联素水平.结果 血、尿脂联素及HbA1c水平在对照组、正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组及大量白蛋白尿组中依次升高,差异均有统计学意义(F=62.46,65.26,5.37,P均＜0.05);血肌酐水平随尿白蛋白水平升高依次升高,微量白蛋白尿组及大量白蛋白尿组与对照组之间比较,差异有统计学意义(F=8.25,P＜0.05),微量白蛋白尿组及大量白蛋白尿组与正常白蛋白尿组之间比较无明显统计学意义(P＞0.05);估算的肾小球滤过率(eGFR)随尿白蛋白水平升高依次降低(F=54.67,P＜0.01).Pearson相关分析显示尿脂联素与血肌酐、ACR、血脂联素、HbA1c呈正相关(r=0.66,0.61,0.62,0.35,P均＜0.05),与eGFR呈负相关(r=-0.71,P＜0.01).多元逐步回归分析发现尿脂联素与血肌酐、HbA1c、ACR、eGFR及血脂联素相关(P均＜0.05).结论 尿脂联素与糖尿病肾病的严重程度呈正相关.     

非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏脂联素受体的表达

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝脏脂联素受体(AdipoR)mRNA的表达.方法 喂养高脂饲料建立NAFLD大鼠模型,分别于2、4、8、12周检测血清生化指标,并取肝组织测肝指数(肝湿重/体重),以RT-PCR法检测肝脏AdipoR1和AdipoR2 mRNA的表达,肝组织冰冻切片苏丹Ⅲ脂肪染色、石蜡切片苏木素-伊红常规染色和Masson三色纤维染色,镜下观察.结果 模型组大鼠2、4、8、12周肝脏AdipoR1 mRNA表达逐步上升,AdipoR2 mRNA表达逐步下降,两者分别于4周、2周开始显著差异于对照组(P均<0.01).模型组肝脏AdipoR2表达与肝指数(r=-0.431,P=0.006)、纤维化评分(r=-0.353,P=0.025)均呈显著负相关.结论 NAFLD大鼠肝脏AdipoR1 mRNA表达增加,AdipoR2 mRNA表达减少,提示肝脏AdipoR表达异常可能参与NAFLD的发病机制.     

脂联素受体在正常SD大鼠乳鼠心肌细胞的分布和表达

目的通过体外培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,研究脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)及T-钙黏蛋白(T-cadherin)三种脂联素受体在大鼠乳鼠心肌细胞上的分布和表达。方法采用酶消化法原代培养乳鼠心肌细胞,通过α-肌动蛋白免疫荧光法对原代培养的心肌细胞进行鉴定,并在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态。选用原代培养96h的单层心肌细胞进行实验,使用RT-PCR和细胞免疫组织化学方法检测AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均检测到了AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白表达,其中以AdipoR1和T-cad-herin的mRNA和蛋白表达量高,与AdipoR2的表达量相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论脂联素受体1、脂联素受体2和T-钙黏蛋白,三种脂联素受体在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均有表达,并以脂联素受体1和T-钙黏蛋白的表达为主,脂联素受体2表达量较少。     

辛伐他汀对糖尿病大鼠MMP-9表达的影响及对肾脏保护的研究

目的 观察辛伐他汀对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其对肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA表达和尿MMP-9排泄的影响.方法 将Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病组、辛伐他汀治疗组.检测各组第8周血糖、HbA1c、12 h尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿白蛋白(albumin,ALB)和尿MMP-9排泄率,第8周留取肾脏标本做电镜观察及采用逆转录PCR(RT-PCR)检测MMP-9mRNA.结果 ①第8周,糖尿病组及辛伐他汀治疗组尿ALB、RBP、MMP-9排泄率均高于正常对照组(P＜0.01),辛伐他汀治疗组较糖尿病组有明显减少(P＜0.01);尿MMP-9排泄率与尿ALB和RBP排泄率呈正相关关系.②第8周,与正常对照组相比,糖尿病组大鼠肾脏MMP-9mRNA表达明显上调(P＜0.01),而辛伐他汀治疗组MMP-9mRNA表达则较糖尿病组明显下降(P＜0.01).电镜下辛伐他汀治疗组肾脏病理改变较糖尿病组明显减轻,同正常对照组相比仅有少量病变.结论 辛伐他汀对糖尿病大鼠具有确切的肾脏保护作用,部分与其抑制肾脏MMP-9过度表达有关.     

1型糖尿病大鼠肾脏Ⅳ型胶原的表达及坎地沙坦的干预作用

目的 探讨1型糖尿病大鼠造模后肾脏Ⅳ型胶原的表达及肾小球病理形态改变及坎地沙坦的保护作用和机制.方法 雄性Wistar大鼠36只,随机分出正常对照组(NC组)12只,余24只腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,再随机分为糖尿病组(DM组)12只和坎地沙坦干预组(DMC组)12只;DM-C组给予坎地沙坦5 mg·kg-1·d-1灌胃.干预12 w后,检测各组大鼠的空腹血糖(FPG)、血压、24 h尿白蛋白排泄量(24 h UAE)、肌酐清除率(Ccr)、肾重指数(KI);光镜下观察肾小球病理形态改变,测定肾小球平均截面积(MGA)、肾小球平均体积(MGV)和肾小球系膜基质分数(MMF);免疫组化法检测肾小球Ⅳ型胶原的表达.结果 与NC组相比,DM组大鼠的FPG、24 h UAE、Ccr及KI均显著升高(P＜0.01),MGA、MGV及MMF显著增大(P＜0.01),肾小球Ⅳ型胶原的表达明显增加(P＜0.01);DMC组较DM组肾小球Ⅳ型胶原的表达明显减少(P＜0.01),FPG、24 h UAE、Ccr及KI均显著降低(P＜0.01),MGA、MGV及MMF显著减小(P＜0.01);三组间大鼠血压差异无统计学意义(P＞0.05).结论 糖尿病大鼠肾脏Ⅳ型胶原表达增加;坎地沙坦具有独立于降压以外的肾脏保护作用.     

脂联素及脂联素受体1的表达与糖尿病心肌病的关系

目的通过观察2型糖尿病(T2DM)大鼠脂联素(APN)及心肌脂联素受体1的表达情况,探讨其在T2DM心肌病发病过程中的作用。方法建立T2DM大鼠动物模型。采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清及心肌APN水平,并采用免疫组化的方法测定心肌脂联素受体1(Adipo R1)的蛋白表达。结果与对照组比较,T2DM组血清和心肌APN水平下降,心肌Adipo R1蛋白的表达水平降低,差异均有统计学意义(P0.05)。相关性分析显示,T2DM组大鼠血清APN与血清胰岛素、稳态模型胰岛素抵抗指数呈负相关(r=-0.613,P0.05;r=-0.637,P0.05),心肌Adipo R1蛋白表达量与心肌APN呈正相关(r=0.89,P0.05),与HOMA稳态模型(HOMA-IR)及空腹胰岛素水平(FINS)呈负相关(r=-0.697,P0.05;r=-0.593,P0.05)。结论糖尿病心肌病大鼠血清及心肌APN水平下降,心肌Adipo R1蛋白表达下降,胰岛素抵抗可能在糖尿病心肌病的发病过程中起到作用。     

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体对2型糖尿病大鼠内皮依赖性血管舒张功能的影响

目的 观察TNF相关的凋亡诱导配体（TRAIL）对T2DM大鼠主动脉内皮依赖性血管舒张功能的影响及其可能的机制. 方法 选取4周龄雄性SD大鼠,分为正常对照组（NC,n=10）与模型组（n=40）,随机将模型组分为T2DM亚组（n=10）与TRAIL亚组（TRAIL,n=10）.TRAIL干预6周后,检测各组FPG及FIns水平,计算ISI.检测NC组与TRAIL亚组血清TRAIL水平.观察大鼠离体主动脉内皮依赖性血管舒张反应,并检测主动脉一氧化氮（NO）含量、内皮型一氧化氮合酶活性（eNOS）.结果 与NC组比较,T2DM亚组FPG、FIns水平升高（P＜0.01）,ISI降低（P＜0.01）,血清TRAIL水平降低（P＜0.01）;血管内皮功能失调,乙酰胆碱（Ach）引起的血管最大舒张率降低（P＜0.01）,血管中NO含量及eNOS阳性表达降低（P＜0.01或P＜0.01）.TRAIL亚组血管Ach的舒张反应改善（P＜0.01）;血管中NO含量增加且eNOS阳性表达上调（P＜0.05或P＜0.01）;FPG、FIns降低,ISI提高（P＜0.01）. 结论 TRAIL改善T2DM大鼠内皮依赖性血管舒张功能的同时,可促进具有血管保护作用的NO生成.     

胰岛素通过脂联素受体2/过氧化酶增殖物激活受体-α通路改善2型糖尿病大鼠的肝脏脂质沉积

目的 探讨脂联素受体2(AdipoR2)/过氧化酶增殖物激活受体-α(PPAR-α)通路在胰岛素对2型糖尿病大鼠肝脏脂质沉积中的作用.方法使用高脂饮食诱导联合链脲佐菌素(STZ)处理的2型糖尿病大鼠模型.8周龄雄性清洁级SD大鼠42只,适应性喂养1周后,按随机数字表法分为3组:正常对照组(予常规饮食,n=12)、糖尿病...     

对氧磷脂酶-1和氧化低密度脂蛋白在2型糖尿病肾病中的作用

目的 探讨2型糖尿病（DM0对氧磷脂酶－1（PON－1）和氧化低密度脂蛋白（ox-LDL)与内皮细胞和血小板功能的关系,以及对糖尿病肾病（DN）发生、发展的影响。方法 用酚乙酸酯为底物的速率法测定91例2型DM患者血清PON－1,用ELISA法测定ox-LDL,同时测定血清一氧化氮（NO）、血管性假血友病因子（VWF）及血浆颗粒膜蛋白（GMP140）,并与正常人作对照,以24h尿白蛋白排泄率（UAER）将DM患者分成三组。结果 血清PON－1活性在2型DM三组中与对照组比较显著降低（P＜0．01）,血浆ox-LDL浓度则显著升高（P＜0．01）,二者在DM三组之间的差别有显著性（P＜0．05）。PON－1与尿白蛋白呈显著性负相关（P＜0．01）,ox-LDL则与之呈显著性正相关（P＜0．01）,二者之间呈负相关（P＜0．01）。PON－1与血NO呈正相关,与GMP 140呈显著负相关;ox-LDL与血NO呈负相关,与VWF、GMP140呈正相关,经Logistic回归分析,提示ox-LDL是DN的危险因子。结论 DM的高血糖和脂代谢紊乱造成的PON－1酶活性下降以及脂质过氧化物的堆积,使内皮细胞的完整性及功能受损,同时血小板的活化程度明显增强。它们的共同作用与DN的发生、发展密切相关。     

普罗布考对糖尿病大鼠大血管病变的影响

目的 探讨普罗布考对糖尿病大鼠大血管病变的影响及机制.方法 44只健康Sprague Dawley(SD)雄性大鼠随机分为对照组(NC组,n=8)、糖尿病组(DM组,n=18)、普罗布考干预组(PB组,n=18)3组,四氧嘧啶50 mg/kg行尾静脉注射制备糖尿病大鼠模型.糖尿病造模成功后PB组给予普罗布考170 mg...     

吡格列酮对2型糖尿病大鼠骨骼肌脂联素受体1表达的影响

目的观察吡格列酮对2型糖尿病大鼠血清脂联素以及骨骼肌脂联素受体1(AdipoR1)表达的影响,探讨吡格列酮对2型糖尿病胰岛素抵抗的改善作用及机制。方法 40只8周龄健康雌性SD大鼠,随机分为正常对照组(n=10)、糖尿病组(n=15)及吡格列酮组(n=15)。用高糖高脂饲料加小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,成模后吡格列酮组给予10 mg/(kg.d)吡格列酮灌胃,正常对照组和糖尿病组给予同体积生理盐水灌胃,共12周。3个月后股静脉取血,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清脂联素水平,留取大鼠骨骼肌,光、电镜观察骨骼肌结构,免疫组织化学染色法测定骨骼肌AdipoR1蛋白的表达。结果与正常对照组(1.73±0.32 mg/L)比较,糖尿病组血清脂联素(1.01±0.27 mg/L)水平显著降低,而吡格列酮组(1.34±0.43 mg/L)较糖尿病组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。骨骼肌AdipoR1免疫组织化学染色正常对照组着色深且广泛,糖尿病组较正常对照组染色浅,吡格列酮组较糖尿病组染色深,但较正常对照组浅。光镜及电镜结果显示大鼠骨骼肌结构未见明显异常。结论 2型糖尿病大鼠血清脂联素水平及骨骼肌AdipoR1表达降低并导致糖脂代谢紊乱及胰岛素抵抗。吡格列酮可上调血清脂联素及骨骼肌AdipoR1的表达,从而调节糖脂代谢,改善胰岛素抵抗。     

慢性间歇低氧对大鼠颏舌肌细胞线粒体功能的影响及脂联素的干预作用

目的 探讨慢性间歇低氧(CIH)对大鼠颏舌肌细胞线粒体功能的影响及脂联素干预作用.方法 健康雄性Wistar大鼠39只,采用随机数字表法分成健康对照(NC)组、CIH组、CIH脂联素干预组(CIH+Ad组),每组13只.NC组大鼠呼吸正常空气,CIH组与CIH+Ad组均接受CIH环境(CIH 8 h/d,共5周),CIH+Ad组加用经静脉脂联素注射10 μg/次,2次/周,共5周.于实验终止(第35天)时测定并比较各组大鼠血清脂联素浓度、颏舌肌线粒体膜电位、线粒体复合物Ⅰ活性、线粒体复合物Ⅳ活性.结果 CIH组血清脂联素浓度明显低于NC组[(1108±112)ng/ml,(2241±121)ng/ml,P＜0.01];CIH+Ad组高于CIH组[(1889±119)ng/ml]但低于NC组[(2241±121)ng/ml,均P＜0.01].CIH组颏舌肌线粒体膜电位相对值(1.82±0.11)明显低于NC组(2.09±0.14,P＜0.01),CIH+Ad组(1.98±0.09)较CIH组略高但低于NC组,差异均有统计学差异(均P＜0.05).CIH组线粒体复合物Ⅰ、Ⅳ浓度[(35.68±1.73)μmol·min-1·mg-1,(2.37±0.11)nmol·min-1·mg-1]最低,CIH+Ad组[(37.18±1.95)μmol·min-1·mg-1,(2.49±0.09)nmol·min-1·mg-1]及NC组[(39.02±1.38)μmol·min-1·mg-1,(2.81±0.12)nmol·min-1·mg-1]依次增高.NC组与CIH组比较差异有统计学意义(P＜0.01),CIH+Ad组与CIH组和NC组比较差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 CIH可致大鼠血清脂联素水平降低,并能显著损伤颏舌肌细胞线粒体功能,补充外源性脂联素能部分改善CIH对大鼠颏舌肌细胞线粒体功能的损伤,提示低脂联素血症可能参与CIH导致的颏舌肌能量代谢障碍.

Abstract：

Objective To investigate the effect of chronic intermittent hypoxia (CIH) on mitochondrial function in genioglossus cells of rats and intervention role of adiponectin (Ad). Methods Thirty-nine healthy male Wistar rats were randomly divided into 3 groups, normal control (NC) group, CIH group and CIH + Ad group with 13 rats in each. Rats in NC group were kept breathing normal air, while rats in both CIH and CIH + Ad groups experienced the same CIH environment ( CIH 8 h/day for successive 5 weeks). However, rats in CIH + Ad group was given intravenous Ad supplement at the dosage of 10 μg,twice a week for sucessive 5 weeks. At the end of experiment ( day 35 ), the levels of plasma adiponectin,mitochondrial membrane potential activities of respiratory chain complexes Ⅰ and Ⅳ in mitochondrion of genioglossus cells were compared among different groups. Results Serum Ad level was significantly lower in CIH group than that in NC group [(1108 ± 112) ng/ml vs (2241 ± 121) ng/ml, P＜0.01 ]. Serum Ad level in CIH + Ad group [ ( 1889 ± 119) ng/ml] was significantly higher than that in NC group but lower than that in CIH group ( all P ＜ 0. 01 ). Mitochondrial membrane potential was significantly lower in CIH group than that in NC group [ ( 1.82 ± 0. 11 ) vs (2. 09 ± 0. 14), P ＜ 0. 01 ]. Mitochondrial membrane potential in CIH + Ad group ( 1.98 ± 0. 09) was higher than that in CIH group but lower than that in NC group ( all P ＜ 0. 05 ). The concentrations of mitochondrial respiratory chain complexes Ⅰ and Ⅳ in CIH group ( 35.68 ± 1.73 ) μmol · min - 1 · mg- 1 and (2. 37 ± 0. 11 ) nmol · min - 1 ·mg - 1, respectively) were the lowest but became higher from CIH + Ad group [ (37. 18 ± 1.95) μ mol· min-1 · mg-1 and (2. 49 ±0.09) nmol · min-1 ·mg-1 ,respectively] to NC group (39.02 ± 1.38) μmol · min-1 · mg-1 and (2. 81±0. 12) nmol · min-1 ·mg-1 ,respectively), with a significant difference between NC and CIH groups ( P ＜ 0. 01 ), between CIH + Ad and CIH groups ( P ＜ 0. 05 ), as well as between CIH + Ad and NC groups (P ＜ 0. 05 ). Conclusion CIH could lead to hypoadiponectinemia and impaired mitochondrial function in genioglossus cells of rats. Since such changes could be partially improved by supplement of adiponectin, it was suggested that hypoadiponectinemia might be involved in CIH-induced impairment of genioglossus energy metabolism.     

替米沙坦对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的保护作用及其机制

目的 观察替米沙坦通过激活过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR γ)对非酒精性脂肪性肝炎大鼠的保护作用.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和干预组,每组10只.模型组和干预组给予高脂饲料喂养16周诱发脂肪性肝炎,其中干预组于高脂喂养12周后,给予替米沙坦(5 mg·kg-1·d-1)灌胃治疗4周.16周末处死大鼠,分别进行如下检测:(1)光学显微镜下观察肝脏病理变化;(2)检测血清ALT、AST、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)、肿瘤坏死因子α(TNF α)和脂联素水平,计算稳态模型的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);(3)用半定量逆转录-聚合酶链反应和Western blot检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR γ)mRNA和蛋白的表达水平.用SPSS 13.0统计软件处理,计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,多组间比较用单因素方差分析,组间比较用Student-Newman-Keuls q检验,等级资料组间比较用秩和检验,脂联素、TNF α与HOMA-IR的关联性用直线相关分析.结果 (1)模型组大鼠造模均成功,根据肝细胞脂肪变性占所获肝组织标本量的范围分为4度(F0～4),其中模型组大鼠肝细胞脂肪变程度达F3、F4的分别有1、9只.干预组脂肪变性程度达F1、F2、F3的大鼠分别有1、6、3只.对照组大鼠肝组织炎症活动度积分为0.模型组大鼠肝组织炎症活动度积分为2.67±0.27,与对照组比较,U=15,P＜0.01,差异有统计学意义.干预组炎症活动度积分为1.36±0.12,与模型组比较,U=24,P＜0.05,差异有统计学意义.(2)对照组ALT、AST、FBG、FINS、HOMA-IR、TNF α分别为(48.20±10.99)U/L、(153.00±45.06)U/L、(4.58±1.00)mmol/L、(10.48±1.46)μU/ml、2.13±0.29、(1.38±0.75)μg/L,模型组分别为(114.00±19.7)U/L、(265.33±52.10)U/L、(6.58±0.86)mmoL/L、(20.73±0.91)μ U/ml、6.23±0.10、(3.47±0.19)μg/L,干预组分别为(78.80±15.64)U/L、(211.83±65.51)U/L、(5.38±0.88)mmol/L、(15.02±1.22)μU/ml、3.59±0.29、(1.58±0.13)μg/L,与对照组比较,模型组血清ALT、AST、FINS、FBG、HOMA-IR、TNF α升高,q值分别为13.130、6.472、6.909、26.619、49.683、14.591,P值均＜0.01,差异有统计学意义.与模型组比较,干预组血清ALT、FINS、FBG、HOMA-IR、TNFα降低,q值分别为7.024、4.145、14.829、31.991、13.195,P值均＜0.01,差异有统计学意义.(3)对照组血清脂联素、肝组织PPARγ mRNA和蛋白的表达分别为(8.93±0.44)mg/L、1.19±0.35、0.93±0.44,干预组分别为(7.12±1.00)mg/L、0.79±0.15、0.58±1.00,模型组分别为(6.09±0.96)mg/L、0.57±0.09、0.36±0.96.对照组与模型组比较,q值分别为10.696、8.679、16.762,P值均＜0.05,差异均有统计学意义;干预组与模型组比较,q值分别为3.879、3.079、6.400,P值均＜0.05,差异均有统计学意义.相关分析显示,脂联素水平与HOMA-IR呈负相关(r=-0.891,P＜0.01),TNFα水平与HOMA-IR呈正相关(r=0.927,P＜0.01).结论 替米沙坦可能通过促进PPARγ的表达对NASH大鼠产生保护作用.     

脂滴自噬在丙型肝炎病毒核心蛋白下调沉默信息调节因子1诱导小鼠肝脂肪变性中的作用

目的研究脂滴自噬在HCV核心蛋白下调沉默信息调节因子1(SIRT1)诱导小鼠肝脂肪变性中的作用。方法小鼠随机分为两组,每组10只。实验组小鼠尾静脉注射HCV core重组表达载体。对照组小鼠尾静脉注射磷酸盐缓冲溶液。1个月后处死小鼠。检测肝功能、脂联素、血清和肝内甘油三酰(TG)、肝脏组织病理学检查肝脂肪变性程度。蛋白质免疫法检测肝脏SIRT1蛋白、脂联素受体(AdipoR)蛋白以及脂滴自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、脂肪分化相关蛋白(ADRP)、尾部作用蛋白(TIP-47)和P62蛋白的表达。计量资料采用t检验。结果与对照组相比,HCV组小鼠出现肝脂肪变性;肝脏TG含量明显增加[(80.9±20.1)比(45.8±10.5)μg/mg,t=4.964,P0.01];血清脂联素[(1.05±0.25)比(1.41±0.45)ng/mL,t=2.211,P0.05]水平下降;SIRT1蛋白水平(0.4±0.1比0.9±0.2,t=7.071,P0.01)和AdipoR2蛋白水平(0.4±0.1比0.8±0.2,t=5.656,P0.01)下降;LC3-Ⅱ蛋白(0.8±0.2比0.4±0.1,t=5.656,P0.01)、TIP-47蛋白(0.9±0.3比0.4±0.1,t=5.000,P0.01)和ADRP蛋白(0.8±0.3比0.4±0.1,t=4.000,P0.01)表达增加;而p62蛋白(0.7±0.2比0.8±0.3,t=0.877,P0.05)表达水平差异无统计学意义。结论 HCV核心蛋白下调SIRT1表达,下调脂联素及受体表达,引起不完全脂滴自噬导致肝脂肪变性。     

螺内酯对2型糖尿病大鼠肾脏紧张素转换酶2和细胞间黏附分子表达的影响

目的观察螺内酯对T2DM大鼠肾脏紧张素转换酶2（ACE2）和细胞间黏附分子（ICAM-1）表达的影响,以探讨其对糖尿病肾脏病变的保护作用。方法用高脂高糖饲料喂养大鼠2个月后,腹腔注射30mg／kg STZ制备糖尿病大鼠模型,分为正常对照（NC）组、糖尿病（DM）组、螺内酯治疗（R）组,检测第16周FBG、Cr、24hUAER、肾重／体重（×10^-3）;并用免疫组化和RT-PCR的方法检测16周后大鼠肾脏ACE2和ICAM-1表达的改变。结果第16周末DM、R组各项比较,差异无统计学意义（P〉0．05）,但均高于NC组（P均〈0．01）;R组ACE2水平高于DM组（P〈0．01）,ICAM-1水平低于DM组（P〈0．05）。结论螺内酯通过增加肾脏组织ACE2的表达、降低ICAM-1的表达而发挥保护肾脏的作用。