HPLC-MS/MS快速测定远志中远志(口山)酮Ⅲ和 3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量

目的: 建立一种远志中远志(口山)酮Ⅲ和3,6'-二芥子酰基蔗糖含量的HPLC-MS/MS分析方法. 方法: 采用ZORBAX Eclipse plus C₁₈色谱柱,(4.6 mm×100 mm, 3.5 μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水 (28:72),流速0.3 mL·min^-1,进样量10 μL,柱温20 ℃.质谱条件:电喷雾负离子化模式,多反应监测模式 (MRM),检测离子对分别为m/z 567.2~345.1 (远志(口山)酮Ⅲ),m/z 753.3~205.1 (3,6'-二芥子酰基蔗糖). 结果: 两种成分的线性关系良好,分析过程只需6 min.远志(口山)酮Ⅲ的日内精密度和日间精密度的RSD分别为2.2%,2.5%,回收率为96.1%~101.7%(RSD 2.4%);3,6'-二芥子酰基蔗糖的日内精密度和日间精密度的RSD分别为2.3%,2.4%,回收率为95.7%~101.4% (RSD 2.0%). 结论: 该方法快速、灵敏、选择性好,适合远志中远志(口山)酮Ⅲ和3,6'-二芥子酰基蔗糖的定量分析.     

华南远志和远志HPLC指纹图谱研究

目的建立华南远志、远志HPLC指纹图谱,结合主成分分析筛选两者共有的化学成分群,并测定其共有特征成分3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量。方法 PhenomenexLuna(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相:乙腈-0.5%醋酸铵溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长316 nm,柱温30℃。结果从华南远志和远志的指纹图谱中分别确定28、33个共有峰,经主成分分析得到二者主要共同成分有7个;华南远志和远志中3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量分别为(1.63±1.15),(3.51±1.34) mg·g-1。结论该方法可为华南远志和远志的药效活性成分筛选提供参考。     

HPLC法同时测定复方金思维中3种有效成分的含量

目的建立复方金思维中松果菊苷、毛蕊花糖苷、3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法对制剂中的松果菊苷、毛蕊花糖苷、3,6'-二芥子酰基蔗糖进行定量测定。结果松果菊苷、毛蕊花糖苷、3,6'-二芥子酰基蔗糖分别在2.5~50.0μg/m L、1.3~25.9μg/m L、2.0~40.7μg/m L范围内与峰面积线性关系良好,3种成分样品回收率分别为101.37%、99.86%和98.44%,RSD均在3.00%以内。结论所建立的方法简便,重复性良好,可用于金思维复方中松果菊苷、毛蕊花糖苷、3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量测定。     

HPLC-MS测定小儿安神补脑颗粒中8个成分的含量

目的:建立高效液相色谱-串联质谱法同时测定小儿安神补脑颗粒中8个成分的含量测定方法。方法:采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈(A)-10 mol·L~(-1)乙酸铵(B)水溶液,梯度洗脱;进样量10μL。质谱条件采用电喷雾离子源,正负离子同时检测,扫描方式为选择离子扫描模式。结果:甘草苷,毛蕊异黄酮葡萄糖苷,甘草酸铵,柚皮苷,3,6'-二芥子酰基蔗糖,橙皮苷,新橙皮苷和黄芪甲苷线性范围分别在0.019 5~2.5 mg·L~(-1)(r=0.999 1),0.078 1~5 mg·L~(-1)(r=0.999 2),0.078 1~5 mg·L~(-1)(r=0.999 8),0.312 5~50 mg·L~(-1)(r=0.999 9),0.019 5~2.5 mg·L~(-1)(r=0.999 2),0.078 1~10 mg·L~(-1)(r=0.999 0),0.312 5~20 mg·L~(-1)(r=0.999 4),0.019 5~1.25 mg·L~(-1)(r=0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均2%;平均回收率在95.07%~97.79%,RSD均2%;甘草苷,毛蕊异黄酮葡萄糖苷,甘草酸铵,柚皮苷,3,6'-二芥子酰基蔗糖,橙皮苷,新橙皮苷和黄芪甲苷样品含量测定结果依次为187.5~188.1,330.0~331.0,312.1~319.5,1 509.0~1 510.2,172.2~173.0,180.0~181.0,639.0~639.8,37.5~38.2μg·g-1。结论:该方法简单、准确、灵敏、重复性好,可用于小儿安神补脑颗粒的质量评价与控制。     

小儿健脾颗粒质量标准建立研究

目的 建立小儿健脾颗粒（Xiao’er Jianpi Granules,XJG）的定性、定量分析方法。方法 采用TLC法,以“整体鉴别”新模式为基础,建立了一样多测（炒莱菔子、甘草及陈皮）及一板多鉴（炒莱菔子、甘草）的鉴别方法。采用HPLC法,采用Kromasil C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,3.5μm）,以0.1%三氟乙酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱,进样量5μL,柱温30℃,体积流量1 mL/min,检测波长252 nm（甘草酸）、275 nm（甘草苷）、283 nm（芸香柚皮苷、橙皮苷）、326 nm(3,6′-二芥子酰基蔗糖、芥子碱硫氰酸盐)。结果 建立的TLC鉴别方法,斑点清晰,能专属的鉴别处方中白术、陈皮、山药、炒莱菔子、焦山楂、甘草;建立了芥子碱硫氰酸盐、3,6′-二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、芸香柚皮苷、甘草苷、甘草酸含量测定方法,6个成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 9）,精密度、稳定性及重复性良好,加样回收率为97.8%～101.6%;4批样品中芥子碱硫氰酸盐、3,6′-二芥子酰基蔗糖、橙皮苷、芸香柚皮苷、甘草苷、甘草酸的质量浓度分别为0....     

远志HPLC多指标指纹图谱研究

目的:建立远志药材多指标成分的HPLC指纹图谱。方法:Kromasil 100-5 ODS-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为0.05%磷酸乙腈溶液-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1.0 m L/min;检测波长为315 nm切换215 nm;柱温35℃。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004 A版)"计算相似度,SPSS软件对10个对照指纹峰进行聚类分析。结果:方法精密度、稳定性、重复性良好,对照品对照指认西伯利亚远志糖脂A5、3,6'-二芥子酰基蔗糖、远志酮Ⅲ、远志皂苷B、远志皂苷元等10个共有峰;16批样品相似度大于0.91;3,6'-二芥子酰基蔗糖和远志酸为主差异成分。结论:该方法操作简便准确,多指标鉴别专属性强,建立的HPLC指纹图谱可为远志药材的质量评价提供支持。     

基于3,6'-二芥子酰基蔗糖在记忆障碍模型大鼠体内表征的 单体、远志及其经典方开心散药代动力学

目的:建立RP-HPLC测定大鼠血清中3,6′-二芥子酰基蔗糖浓度的方法,研究3,6′-二芥子酰基蔗糖、远志及开心散中3,6′-二芥子酰基蔗糖在记忆障碍模型大鼠体内的药动学特点,评价远志药材中其他成分和复方中其他配伍对3,6′-二芥子酰基蔗糖药动学的影响.方法:大鼠腹腔注射东莨菪碱致记忆障碍模型,分别灌胃给予3,6′-二芥子酰基蔗糖对照品、远志水提物和开心散水提物,腹主动脉采血,离心,取血清适量,加0.1 mmol磷酸二氢钾-乙腈沉淀蛋白,取上清液氮气吹干,水溶解,过滤,用HPLC分析,以C18为固定相,流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液梯度洗脱,在330 nm检测3,6′-二芥子酰基蔗糖血药浓度,Kinetics 4.4软件处理数据.结果:3,6′-二芥子酰基蔗糖血清在0.052 ～2.08 mg·L-1线性关系良好,血浆中最低定量限为52μg·L-1.记忆障碍模型大鼠灌胃给予3,6′-二芥子酰基蔗糖对照品、远志水提物和开心散水提物后的药-时曲线均使用非房室模型处理,主要药动学参数AUC0-∞,Cmax在3,6′-二芥子酰基蔗糖对照品、远志提取物和开心散各组间均有差异(P＜0.05).结论:建立的RP-HPLC测定法,专属、准确、灵敏,适用于3,6′-二芥子酰基蔗糖在大鼠体内的药动学研究.口服开心散全方和远志提取物后3,6′-二芥子酰基蔗糖呈现双峰吸收,达峰时间均为15,150 min,口服开心散全方的3,6′-二芥子酰基蔗糖AUC值是单味药远志的1.60倍,T1/2是单味药远志的1.57倍,表明通过复方配伍,可在提高生物利用度、加速吸收、延长有效血药浓度时间诸方面,调节其药动学特性,从而更有利于发挥其药效作用.     

HPLC同时测定不同产地远志饮片中6种寡糖酯类成分

目的建立HPLC同时测定陕西、河南、山西(太原和沂州地区)、山东和河北省产的远志中6种寡糖酯类成分的方法。方法远志甲醇提取液分析的色谱柱为Kromasil C18(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B),梯度洗脱;检测波长330 nm。结果 3,6'-二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖A5、球腺糖A、tenuifoliside A、tenuifoliside B、tenuifoliside C的线性范围依次为0.109~4.36μg、0.044 3~1.77μg、0.012 2~0.488μg、0.055 0~2.20μg、0.030 7~1.23μg、0.014 2~0.568μg,平均加样回收率为97.2%~100.3%。结论 6个不同产地远志饮片中3,6'-二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖A5、球腺糖A、tenuifoliside A、tenuifoliside B、tenuifoliside C的含有量分别为0.442%~0.867%、0.090%~0.272%、0.044 1%~0.080 5%、0.216%~0.283%、0.101%~0.124%和0.037 4%~0.081 8%.     

远志筒与根的HPLC指纹图谱及化学差异性分析

目的:对远志筒与根的HPLC指纹图谱及化学差异性进行分析。方法:对不同批次远志药材样品进行细叶远志皂苷、远志酮Ⅲ和3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量测定,优化现有指纹图谱方法,对其进行相似度分析并结合多元统计分析进行综合比较。结果:不同批次远志样品间指纹图谱的相似度较高(均大于0.9),聚类分析与主成分分析发现,远志筒与根可以明显区分,而远志酮Ⅲ与3,6'-二芥子酰基蔗糖含量的高低对分类影响较大。散点图结果显示,不同批次远志药材样品间细叶远志皂苷的含量差异较大;筒中远志酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量变化范围较窄,而根中远志酮Ⅲ含量变化范围较大。堆积图结果表明,不能单以某种成分含量的高低来评价药材质量。结论:远志筒与根中3,6'-二芥子酰基蔗糖的含量差异较大。今后应根据临床的不同治疗作用,选择远志不同部位入药,提高临床用药的准确性。     

水杨酸和茉莉酸甲酯对远志愈伤组织生长和相关酶活性及化学成分的影响

目的研究水杨酸(salicylic acid,SA)和茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对远志愈伤组织生长和相关酶活性及化学成分的影响。方法以远志继代愈伤组织为材料,加入SA(0、4、8、12、16、20、24、28、32mg/L)和MeJA(0、100、200、400、600、800、1 000μmol/L)不同浓度下暗培养30 d后,测定远志愈伤组织生长量、丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶活性、总酚、总黄酮含量及远志酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖含量。结果 MeJA对远志愈伤组织的生长具有抑制作用,12 mg/L水杨酸(SA)对远志愈伤组织的生长具有促进作用。SA和MeJA对远志愈伤组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性及丙二醛(MDA)含量均具有促进作用,且随着SA和MeJA浓度的增大,SOD、CAT、POD活性先上升后下降,MDA含量持续上升。SA质量浓度为20 mg/L时,CAT、SOD活性达到最大值,分别为248.45、4 451.06U/mg,SA质量浓度为16 mg/L时,POD活性达到最大值,为7.22 U/mg;SA质量浓度为32 mg/L时,MDA含量达到最大值,为25.09 nmol/mg;MeJA浓度为600μmol/L时,CAT、SOD、POD活性达到最大值,分别为273.30、1 451.06、15.27 U/mg;MeJA浓度为1 000μmol/L时,MDA含量达到最大值,为27.10 nmol/mg。SA对远志愈伤组织中总黄酮的积累具有抑制作用,对总酚无显著影响;MeJA对远志愈伤组织中总酚、总黄酮的积累具有促进作用,MeJA浓度为600μmol/L时,总黄酮含量最高;MeJA浓度为400μmol/L时,总酚含量最高。SA和MeJA均对远志愈伤组织中远志酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖的积累具有促进作用,SA浓度为32 mg/L时,远志酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖含量最高;MeJA浓度为1 000μmol/L时远志酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖含量最高。结论 MeJA对远志愈伤组织生长具有抑制作用,12 mg/L的SA对其具有促进作用。SA和MeJA对SOD、POD、CAT活性,MDA含量及远志酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖的积累均具有促进作用。SA对远志愈伤组织中总黄酮的积累具有抑制作用,对总酚无显著影响,MeJA对远志愈伤组织中总酚、总黄酮的积累具有促进作用。     

紫草化学成分

目的:对紫草的主要化学成分进行研究。方法:利用硅胶、聚酰胺、羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20)等色谱技术进行分离纯化。根据化合物的理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果:从紫草中分离得到10个化合物,分别鉴定为熊果酸(ursolic acid,1),没食子酸(gallic acid,2),柚皮素(naringenin,3),去氧紫草素(deoxyshikonin,4),紫草素(shikonin,5),5-羟基-2-乙氧基-1,4-萘醌(5-hydroxynaphthalene-2-ethoxy-1,4-dione,6),4,4'-二羟基-3,5-二甲氧基联苄(4,4'-dihydroxy-3,5-dimethoxybibenzyl,7),2',3-二羟基-4,5-二甲氧基联苄(2',3-dihydroxy-4,5-dimethoxybibenzyl,8),异槲皮素苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyrano-side,9),山柰酚-4'-O-甲醚(kaempferol-4'-O-methylether,10)。结论:化合物1~3,6~10为首次从该植物中分离得到。     

不同产地葛根与粉葛的HPLC指纹图谱及其多成分化学模式识别分析

目的:建立葛根与粉葛的HPLC特征图谱,结合化学模式识别方法对不同产区的葛根与粉葛进行区分,并鉴别葛根产区,为科学评价和有效控制二者的质量提供参考。方法:利用HPLC检测23批葛根或粉葛药材,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)软件进行相似度评价,建立共有模式。以其色谱峰信息为数据来源,利用3种化学模式识别方法综合分析葛根和粉葛药材的质量。结果:除了样品S22(陕西产地)之外,不同产区的葛根和粉葛的相似度均 0.9;说明葛根与粉葛药材的相似度良好,采用特征图谱相似度评价方法无法区分葛根与粉葛药材。利用主成分分析只能鉴别葛根与粉葛;偏最小二乘法-判别分析其模型解释度96.4%,预测度74.6%,能够区分葛根与粉葛,并能区分葛根的产区;系统聚类分析与偏最小二乘法-判别分析结果较为一致。结论:利用化学模式识别方法可快速区分葛根与粉葛,鉴别葛根产区,适用于葛根与粉葛的药材质量评价。     

太子参分解代谢关键酶8'羟化酶基因的克隆及生物信息学分析

ABA 8'羟化酶是脱落酸(abscisic acid,ABA)分解代谢中的关键酶基因之一。采用同源检索的方法从太子参转录组数据库中获得7个ABA 8'羟化酶(abscisic acid 8'-hydroxylase)基因家族成员,对各家族成员进行转录分析组数据以及ABA 8'羟化酶关键基因ABA8ox1编码区(coding sequence,CDS)的克隆与生物信息学分析。ABA8ox1基因CDS全长1 401 bp,编码480个氨基酸残基,等电点为8.55,相对分子质量为53 k Da,跨膜分析显示其为膜蛋白,1~21个氨基酸残基位于胞内,22~466个氨基酸残基位于胞外。转录组数据分析及定量PCR技术共同证明ABA8ox1在块根的韧皮部及须根中有较高的表达。多序列比对及聚类分析显示与其他植物CYP707A蛋白具有较高的同源性,且与模式植物拟南芥中ABA分解关键基因At CYP707A1和At CYP707A3聚为一类。该研究为太子参块根膨大及对逆境胁迫响应的分子机制奠定基础。     

当归、黄芪和党参国家科技成果的研究分析

目的了解国内当归、黄芪和党参3种中药国家科技成果研究的基本现状,揭示其文献和研究内容等方面的特征,为今后相关研究提供借鉴。方法采用内容分析法,借助计算机的分类、统计功能,按成果的基本情况、成果的研究内容、成果的评价与应用等项目进行分类、统计分析。结果3种中药国家科技成果,甘肃、河北、山东等地排在前列,成果主要由高校、医院、科研院所等部门承担,成果课题的来源主要为地方计划和自选课题,成果研究内容主要分布在药物疗效、药物制剂、栽培、贮藏加工等领域。结论国家科技成果数据库（知网版）中,3种中药国家科技成果增幅缓慢,成果以应用技术研究为主,成果转化率低,数据库中一些成果项目的数据缺失较严重。     

百部生品、蜜炙品入药对小儿百部止咳糖浆功效的影响

目的:探讨百部生品、蜜炙品分别入小儿百部止咳糖浆复方后止咳活性及其治疗小鼠肺炎作用的差异。方法:采用柠檬酸豚鼠引咳模型,研究不同剂量生百部复方、蜜炙百部复方的止咳差异。以脂多糖刺激小鼠肺炎模型及合胞病毒小鼠肺炎模型,研究分别口服给予生百部复方、蜜炙百部复方后小鼠肺泡灌洗液中白细胞介素-4(IL-4),IL~(-1)0,γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量变化,并对其肺组织进行病理切片比较。结果:与同剂量生百部复方组相比,蜜炙百部复方中、高剂量组止咳作用显著增强;与生百部复方高剂量组比较,蜜炙百部复方高剂量组肺炎模型中肺组织炎症细胞浸润显著降低,IFN-γ/IL-4显著回调。结论:临床使用百部止咳及治疗呼吸道疾病时建议以蜜炙百部入药,以更好地发挥疗效。     

黄芪、丹参、三七中多糖提取工艺考察

目的考察黄芪、丹参、三七醇提药渣中粗多糖提取工艺。方法采用正交试验,考察不同溶剂用量、提取时间、提取次数对多糖得率的影响,优选提取工艺;考察采用不同药液浓度、醇沉液浓度、沉淀时间所得多糖总量与纯度,优选沉淀工艺。结果优选出的多糖提取工艺为以10倍量水提取2次,每次1.5 h;优选出的沉淀工艺为药液浓度为1 g原药材/mL,醇沉浓度为80%,沉淀时间为4 h。结论优选出的工艺比较适合工业化生产的要求,具体的工艺技术参数将在中试研究中确定。     

人参和西洋参的红外光谱鉴别

对人参和西洋参的石油醚、乙醚和水提取物进行红外光谱测定,结果显示:人参和西洋参分别具有独特而稳定的红外光谱特征,根据其光谱特征可准确地予以鉴别。     

附子甘草配伍研究进展

附子和甘草均为常用中药,临床上配伍应用非常广泛.将从"减毒"和"增效"2个方面综述近年来附子、甘草配伍研究所取得的进展.对近年研究成果的综合和分析提示,甘草所含的三萜皂苷和黄酮类化合物是其对附子发挥"减毒增效"作用的主要物质基础.附子配伍甘草减毒的机制可概括为煎煮过程、用药过程两个环节;而二者配伍的增效作用则主要表现为各自有效成分之间的协同作用.然而,二者配伍的具体物质基础和机制仍不完全清楚,甚至有相左的研究结果出现,因此还需要进一步深入研究.     

白芍总苷在佐剂性关节炎大鼠与正常大鼠体内的药动学差异

目的:比较白芍总苷在佐剂性关节炎大鼠与正常大鼠体内药动学参数的差异,为临床合理用药提供参考。方法:采用大鼠右后足垫皮下注射完全弗氏佐剂建立大鼠佐剂性关节炎模型,应用RP-HPLC测定模型大鼠和正常大鼠灌胃给予白芍总苷后不同时间点的芍药苷的血药浓度,运用PKSolver V2.0软件计算药动学参数。结果:高、中、低剂量(1.80,0.90,0.47 g·kg~(-1))给药时,模型组大鼠体内芍药苷的药峰浓度(C_(max))分别为(7.93±1.09),(4.81±1.06),(1.02±0.82)mg·L~(-1),达峰时间(T_(max))均为180 min;在正常大鼠体内,芍药苷的半衰期(t_(1/2))分别为(215.63±5.26),(213.16±4.18),(208.55±4.94)min;C_(max)分别为(52.39±2.49),(24.52±1.69),(5.79±0.52)mg·L~(-1),AUC_(0-t)分别为(12 564.08±467.37),(5 839.10±380.86),(1 439.95±144.39)mg·L~(-1)·min;T_(max)均为150 min。结论:在类风湿性关节炎状态下芍药苷的吸收速率减缓,C_(max),AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)均显著减小;类风湿性关节炎能影响白芍总苷在大鼠体内的药动学行为。     

青木香与其替代药材土木香对大鼠肾脏毒性的研究

目的：评价青木香和土木香的毒性,为临床土木香替代青木香提供实验数据。方法：灌胃给予大鼠2.5 g·kg^-1的青木香或2.5 g·kg^-1的土木香,共6个月,停药恢复1个月。分别于药后第3,6个月和停药后1个月,测定大鼠的血液学、血生化等指标,并对肾脏、肝脏、胃和膀胱进行病理学检查。结果：青木香组大鼠肾脏出现严重的肾小管萎缩、坏死,尿素氮在3,6个月以及恢复期时分别达到9.17,12.69, 14.71 mmol·L^-1,尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)值在恢复期时高达31.85 U·L^-1,病理检查发现肝、肾均有坏死现象,胃和膀胱均发生癌变。而同剂量土木香组大鼠的血液生化没有出现明显的改变,组织器官也未发现明显病理改变。结论：青木香具有强烈的毒性,能损害大鼠的肾脏和肝脏,并引起胃和膀胱的肿瘤,不能在临床上继续使用；土木香在本试验中末显示有明显的肝、肾毒性。