不同激素对银杏愈伤组织黄酮积累的影响

目的研究不同激素对银杏愈伤组织的影响,探讨黄酮积累的最佳培养基。方法以银杏种子胚为材料,正交试验法确定2,4-二氯苯氧乙酸、萘乙酸、6-苄基腺嘌呤与呋喃氨基嘌呤这4种激素对银杏愈伤组织诱导及黄酮积累量的影响。结果萘乙酸、6-苄基腺嘌呤与呋喃氨基嘌呤对银杏种子胚愈伤诱导率与黄酮积累影响显著。最佳愈伤组织诱导激素组合为1.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、1.0 mg/L萘乙酸、0.1 mg/L 6-苄基腺嘌呤与0.5 mg/L呋喃氨基嘌呤;最佳黄酮积累激素组合为3.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸、1.0 mg/L萘乙酸、0.5 mg/L 6-苄基腺嘌呤与0.5 mg/L呋喃氨基嘌呤。结论该条件下银杏愈伤诱导率和黄酮产量较理想,可用于银杏愈伤积累黄酮的培养。     

不同激素对蒙古黄芪愈伤组织诱导的影响

以蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao无菌芽的下胚轴为外植体,分别接种在不同激素组合的MS培养基中.结果表明最适合黄芪愈伤组织诱导的激素组合为MS 2,4-D2.0(mg·L-1) 6-BA0.5(mg·L-1)和MS NAA3.0(mg·L-1) 6-BA0.5(mg·L-1),诱导率均达到100%,综合考虑愈伤组织质地以及后期试验目的,最终确定增殖培养基为MS NAA3.0(mg·L-1) 6-BA0.5(mg·L-1).黄芪愈伤组织生长曲线呈现S型,在第9天进入快速增长期,最佳继代时间在24d左右.     

外源激素配比对药用植物锁阳愈伤组织诱导的影响

目的 筛选最佳激素组合,提高锁阳组织培养效率.方法 以锁阳肉质茎维管组织作为外植体,以MS为基本培养基,基于正交实验设计研究三种外源激素配比(NAA、2,4-D和6-BA)以及蔗糖和琼脂浓度对锁阳愈伤组织诱导的影响.结果 NAA、2,4-D和6-BA三种激素对锁阳愈伤组织诱导均有显著影响,不同激素之间对出愈率的作用效应大小为2,4-D ＞NAA＞6-BA,诱导锁阳愈伤组织最佳激素配比为MS+NAA (1.0mg/L)+2,4-D (1.5mg/L)+6-BA(2.0mg/L).培养基中琼脂浓度和蔗糖浓度对锁阳愈伤组织诱导率有一定影响,蔗糖浓度以30g/L,琼脂浓度以4.5g/L时愈伤组织诱导率最高.结论 锁阳愈伤组织诱导最适培养基为MS+NAA (1.0mg/L)+2,4-D (1.5mg/L)+6-BA (2.0mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(4.5 g/L).     

不同激素组合对唐古特大黄愈伤组织的影响

目的通过研究不同激素对唐古特大黄愈伤组织的影响,探讨培养唐古特大黄愈伤组织最佳培养基。方法选用唐古特大黄种子萌发的无菌苗为材料,诱导愈伤组织,研究2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),6-苄基氨基乙酸(6-BA),萘乙酸(NAA)3种激素组合对唐古特大黄愈伤组织诱导及愈伤组织蒽醌产量的影响。结果 2,4-D对愈伤诱导起主导性作用,2 mg/L的2,4-D最有利于愈伤组织的形成,但更高质量浓度的2,4-D会影响诱导效果。2 mg/L的6-BA有利于愈伤组织的快速诱导。对于愈伤组织中的蒽醌产量,2,4-D在2 mg/L时效果最好,6-BA无明显作用,1.0 mg/L以上质量浓度的NAA对2,4-D有增效作用。结论唐古特大黄愈伤组织的最佳培养基是MS培养基(MS)+2,4-D(2 mg/L)+6-BA(2 mg/L)+NAA(1 mg/L),在此培养基上,愈伤组织的生长速率和蒽醌的产量都有较佳的表现。     

肉苁蓉不同外植体愈伤组织诱导比较

肉苁蓉不同外植体花器、肉质茎、幼芽、鳞片等愈伤组织诱导比较结果表明：子房、茎块的愈伤组织诱导率高、时间短、且愈伤组织的质地较好。愈伤组织的增殖继代培养的初步研究表明：以B5为在本培养基,附加1mg/L IBA和2mg/L 6-BA效果较好。     

不同激素对冬凌草花瓣愈伤组织的诱导及其次生代谢产物的影响

目的:研究不同激素对冬凌草花瓣愈伤诱导及次生代谢产物含量的影响。方法:以冬凌草花瓣为外植体,在1/2 MS附加不同激素配比的培养基上诱导愈伤组织,HPLC法测定冬凌草甲素、乙素的含量,研究不同处理对愈伤组织诱导及次生代谢产物的影响。结果:当NAA的浓度过高时将会引起冬凌草花瓣愈伤组织的褐化。在一定浓度范围的6-BA可以促进冬凌草花瓣愈伤组织中冬凌草乙素的生物合成。1/2 MS+6-BA 2.0 mg·L-1+2,4-D 0.5 mg·L-1为冬凌草花瓣愈伤组织诱导最佳培养基。结论:不同激素对冬凌草花瓣愈伤组织的诱导及冬凌草乙素的含量影响不同,为进一步研究冬凌草愈伤组织的培养提供了依据。     

激素对菘蓝器官分化及愈伤组织诱导的影响

目的研究激素对菘蓝器官分化及愈伤组织形成能力的影响。方法以菘蓝无菌苗的子叶和胚轴为外植体,采用含有不同植物激素配比的培养基培养菘蓝不同外植体,分析在不同激素配比的条件下诱导形成愈伤组织和分化不定根、不定芽的能力。结果在NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.1 mg/L(14d)、NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0 mg/L(14d)、NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.1 mg/L(28d)三个条件下子叶的愈伤组织诱导率可达到100%;NAA(0 mg/L～0.1 mg/L)+6-BA1.0 mg/L的激素组合不定芽诱导率可达75%以上;生根培养以1/2MS培养基附加NAA 0.1 mg/L可使不定芽生根率可达100%。结论合适的激素组合,能促进菘蓝愈伤组织的形成和器官的分化。。     

番红花体细胞愈伤组织诱导的研究

本文报道了以番红花不同部位为外植体,采用正交试验法筛选最佳培养基,提高体细胞愈伤组织的诱导频率及愈伤组织继代培养的研究结果.     

外源激素对浙贝母愈伤组织诱导与不定芽分化的影响

目的 探究外源激素对浙贝母组织培养的影响并进行组织形态学观察。方法 以浙贝母鳞茎为外植体,接种于附加不同外源激素组合的MS固体培养基上,研究外源激素对浙贝母愈伤组织诱导、增殖及不定芽分化的影响。结果 浙贝母鳞茎作为外植体,适合愈伤组织诱导培养基为MS+KT 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,诱导率为64.2%;在增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+TDZ 0.15 mg/L中,愈伤组织增殖效果最好;而最佳不定芽分化培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+TDZ 0.15 mg/L,发生率为85.6%;在增殖培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L中,不定芽的增殖效果最好。结论 确定了浙贝母愈伤组织诱导、增殖及分化的培养条件,建立了浙贝母愈伤组织及不定芽的诱导增殖体系,为进一步开展脱毒苗培育和新品种选育奠定基础。     

激素对党参愈伤组织和芽的影响

以党参的带腋芽和不带腋芽的茎段作外植体，以MS培养基为基本培养基，分别以NAA和6-BA两种激素作单因子试验。结果显示：（1）最适宜诱导愈伤组织的培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋1．5mg／LNAA；（2）MS＋0．8mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA促进腋芽生长效果最佳。高浓度的6-BA配合高浓度的NAA出愈率高、愈伤组织致密；而适当的6-BA配合低浓度的NAA则利于腋芽生长。     

外源激素处理对远志种子萌发及幼苗生长的影响

目的:研究不同浓度吲哚乙酸(IAA),吲哚丁酸(IBA),6-苄氨基嘌呤(6-BA)和赤霉素(GA_3)4种外源激素对药用植物远志种子萌发和幼苗生长的影响。方法:采用不同浓度的4种外源激素对远志种子进行适度浸泡处理,以蒸馏水为对照,测定其发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,发芽结束后测量株高、根长、鲜重及干重。结果:不同浓度GA_3溶液处理与蒸馏水对照组相比对远志种子的萌发及幼苗生长均具有促进作用;10,20,30 mg·L~(-1)IAA,20,30 mg·L~(-1)IBA和20,30 mg·L~(-1)6-BA对远志种子的萌发有不同程度的促进作用;当IAA,IBA,6-BA≥40 mg·L~(-1)及IBA,6-BA≤10 mg·L~(-1)时,对远志种子的发芽率有不同程度的抑制作用;对外源激素处理后的远志种子幼苗生长状况中,IAA,IBA和6-BA表现出不同程度的抑制。总体效果为GA_3IAAIBA6-BA。其中以150 mg·L~(-1)GA_3处理效果最好,发芽率、活力指数分别是对照组的1.17倍和2.13倍,并对种子的幼苗根伸长、幼苗鲜重增加等早期生长有明显影响,种子发芽整齐,出苗一致。结论:通过研究不同外源激素浸种对远志种子萌发及幼苗生长的影响,筛选出对其有促进作用的外源激素,可为远志的种苗培育、人工栽培提供一定的理论基础及数据参考。     

远志花粉活力与柱头可授性分析

目的:研究远志花粉活力和柱头可授性,以期为远志的有性繁殖和杂交育种工作研究提供科学依据。方法:用I2-KI法,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法测定不同开花天数(开花前一天、第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第6天、第7天、第8天)的远志花粉活力变化,并比较2种染色方法对远志花粉活力的染色效果。用I2-KI法分别测定1 d中不同时间段的远志花粉活力、不同贮藏方法(湿法保存的花朵和干法保存的花朵)的远志花粉活力及不同贮藏条件(4,26,-20,-80℃)条件下贮藏不同时间(2,4,8,24,48,72 h)远志花粉活力。用联苯胺-过氧化氢法测定其柱头可授性。结果:(1)远志的花粉活力随着散粉时间的延长而逐渐降低,在开花后第4天花粉活力最高;(2)在一天8:00~18:00中,10:00~16:00的花粉活力较强;(3)干燥花粉在-20℃贮藏的条件下能延长花粉的贮藏时间;(4)开花后第5天柱头可授性最强。结论:可以采集花后第4天的花粉对花后第5天的柱头进行人工授粉杂交,为远志良种选育提供理论依据。     

钠盐胁迫对远志种子萌发特性的影响

目的:通过研究不同钠盐胁迫下远志种子的萌发特性,为盐碱地中远志的前期育苗提供参考,提高远志的产量,促进盐碱地的高效利用。方法:采用单盐NaCl,Na_2CO_3,Na_2SO_4和混合盐NaCl+Na_2SO_4,NaCl+Na_2CO_3,Na_2CO_3+Na_2SO_4,NaCl+Na_2CO_3+Na_2SO_4不同钠盐溶液对远志种子的发芽过程进行胁迫,以蒸馏水为对照,每天统计并记录发芽数,计算发芽率,发芽势,发芽指数和活力指数,发芽结束后测量株高,根长,鲜重及干重。结果:当NaCl浓度≥150 mmol·L~(-1),混合盐Na+(NaCl+Na_2SO_4)浓度≥50 mmol·L~(-1),混合盐Na+(NaCl+Na_2CO_3)浓度≥100 mmol·L~(-1),混合盐Na+(Na_2CO_3+Na_2SO_4)浓度≥25 mmol·L~(-1),混合盐Na+(NaCl+Na_2CO_3+Na_2SO_4)浓度≥50 mmol·L~(-1)时,处理组的发芽率显著低于蒸馏水组(P0.05),显著抑制远志种子的发芽。当Na_2CO_3浓度≥5 mmol·L~(-1)时,种子的发芽率与蒸馏水组相比显著降低(P0.05),显著抑制远志种子的发芽,且随着浓度的增大,抑制作用逐渐增强。结论:低浓度的NaCl,Na_2SO_4,NaCl+Na_2SO_4,NaCl+Na_2CO_3,Na_2CO_3+Na_2SO_4,NaCl+Na_2CO_3+Na_2SO_4盐溶液对远志种子的萌发无影响,随着浓度的增大,对远志种子的发芽有显著的抑制作用。单盐Na_2CO_3溶液对种子发芽的抑制作用最强,Na_2CO_3≥5 mmol·L~(-1)时对远志种子的萌发具有显著的抑制作用,且随着胁迫浓度的增大,抑制作用逐渐增强。     

光质、光强对远志种子萌发和幼苗生理特性的影响

目的:通过不同光质、光强对种子萌发、幼苗生理特性和总酚、总黄酮含量影响的研究,为远志的前期育苗提供参考,为增加远志中总酚、总黄酮的含量提供理论依据。方法:用不同的光质、光强干预远志种子的发芽和幼苗的生长,测定种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、幼苗的株高、根长、干重、鲜重及总酚、总黄酮含量。结果:红光下远志种子的发芽指标及幼苗的生长指标均显著高于白光,白光下的幼苗总黄酮含量最高,红光下总酚含量最高。不同光照强度对远志种子的发芽率、发芽势、发芽指数无影响,300,500μmol·m~(-2)·s~(-1)的光强促进远志幼苗的生长,100μmol·m~(-2)·s~(-1)光强下总黄酮含量最高,300μmol·m~(-2)·s~(-1)光强下总酚含量最高。结论:不同光质、光强对种子发芽和幼苗生长的影响表明,红光能够促进远志种子的萌发和远志幼苗的生长,白光促进总黄酮的生成,红光促进总酚的生成。光照强度对远志种子的萌发无影响,500μmol·m~(-2)·s~(-1)的光照强度更适宜于远志幼苗的生长,100μmol·m~(-2)·s~(-1)的光强有利于总黄酮的生成,300μmol·m~(-2)·s~(-1)的光强有利于总酚的生成。研究表明,光质光强对远志幼苗生长和总酚总黄酮含量的影响,可能与远志种子及幼苗内的激素含量有关,但具体过程还有待进一步验证。     

H2O2对远志愈伤组织中总酚总黄酮含量及相关酶活性的影响

目的:研究远志愈伤组织在加有不同浓度H_2O_2的MS培养基上总酚总黄酮含量变化及抗氧化酶活性变化,从细胞水平探讨其适应H_2O_2环境胁迫的生理机制。方法:以远志愈伤组织为实验材料,H_2O_2浓度设置为0,5,10,15,20 mmol·L~(-1)5个梯度加至MS培养基中,分别在培养5,10,15,20,25 d后取样测定愈伤组织总酚、总黄酮含量及抗氧化酶活性。结果:H_2O_2浓度在5 mmol·L~(-1)下远志愈伤组织15 d时总酚、总黄酮含量最高。当远志愈伤组织培养5 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时的超氧化物歧化酶(SOD)活性最高。培养25 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时的过氧化物酶(POD)活性最高。培养25 d,外源H_2O_2浓度为15 mmol·L~(-1)时的过氧化氢酶(CAT)活性最高。结论:远志愈伤组织具有适应一定浓度H_2O_2环境胁迫的能力,在其受到H_2O_2环境胁迫时,远志愈伤组织能通过调节自身的次生代谢物、保护酶系统来缓解带来的伤害。对次生代谢物总酚、总黄酮的含量在5～10 mmol·L~(-1)时有显著促进作用;在5 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时可显著提高SOD活性;在25 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时可显著提高POD活性;在25 d,外源H_2O_2浓度为15 mmol·L~(-1)时可显著提高CAT活性。     

栽培远志中次级代谢物含量变化的影响因素分析

产地与生长年限均为栽培中药中次级代谢物含量变化的主要影响因素。该研究通过建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱及采用多元统计的方法,分析生长年限与产地对栽培远志中次级代谢物含量变化的影响。结果显示:(1)产地因素对栽培远志中次级代谢物含量变化的影响大于生长年限;(2)蔗糖酯类和低聚糖酯类受产地因素影响较大,tenuifoliside B与tenuifoliside C在安国远志中含量较高,3,6'-disinapoyl sucrose,tenuifoliose S,tenuifoliose L及tenuifoliose V则在汾阳远志中含量较高;(3)产地与生长年限均不是口山酮类成分含量变化的主导因素;(4)皂苷类成分受生长年限的因素影响较大,多数皂苷类次级代谢物含量随着生长年限延长有升高趋势。栽培远志中不同次级代谢物受产地与生长年限影响的程度不完全相同,本研究有助于栽培远志的良种选育及远志药材商品规格等级标准的修订。     

PEG-6000引发对人工诱导老化的远志种子发芽活力影响

目的:分析不同浓度聚乙二醇6000(PEG-6000)溶液对人工诱导老化远志种子4种发芽指标的影响(发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数),阐明远志种子在贮存过程中的衰老规律及PEG引发处理对远志老化种子的影响。方法:以远志种子为试验材料,在高温(45±1)℃,高湿(100%相对湿度)和密闭条件下,人工模拟老化种子条件,对远志种子进行不同程度的老化处理,随后用不同浓度PEG-6000溶液(10%,20%,30%PEG-6000)对已老化的种子进行引发处理。结果:远志老化种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数随处理时间的延长呈逐渐降低趋势,老化60 h以上的远志种子不再发芽;20%PEG-6000溶液对远志老化种子发芽指标具有促进作用,接近正常种子的发芽指标;10%,30%PEG-6000溶液对远志老化种子发芽指标也有一定的引发效果,但引发效果较差。20%PEG-6000溶液引发能促进老化36 h远志幼苗株高、根长、地上部分生物量和地下部分生物量的增加。结论:该研究表明不同浓度PEG-6000溶液处理对远志老化种子有一定修复作用,可以提高其种子活力,但适宜浓度因种子老化时间不同而存在差异,可为种子引发技术在远志种子贮藏上的应用提供基础数据。     

3种药用植物根际土壤水浸液对远志种子及其幼苗的化感作用

目的:探究地黄、半夏和菘蓝3种药用植物根际土壤水浸液对于远志种子萌发和幼苗生长的化感作用,筛选出适合与远志进行轮作的倒茬品种,为解决远志的连作障碍问题提供一定的科学依据。方法:采用生物测定方法,研究地黄、半夏和菘蓝3种药用植物根际土壤水浸液在0.3,0.6,0.9 g·mL~(-1)质量浓度下对于远志种子萌发和幼苗生长的影响。结果:地黄、半夏根际土壤水浸液对远志种子最终发芽率、发芽势、发芽指数均基本表现出低促高抑的浓度效应,而菘蓝根际土壤水浸液则具有显著的化感抑制作用;3种根际土壤水浸液对远志幼苗生长指标均表现出显著的化感抑制作用,其中,地黄根际土壤水浸液与其余两种水浸液相比对于远志幼苗的株高和根长的抑制作用最小;0.3 g·mL~(-1)地黄土壤水浸液处理下,远志幼苗的光合色素含量、脯氨酸(Pro)含量、可溶性糖含量最高,可溶性蛋白含量较高,H_2O_2含量较低;0.9 g·mL~(-1)地黄土壤水浸液处理下,远志幼苗的过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性最高,过氧化氢酶(CAT)活性较低、丙二醛(MDA)含量最低。结论:综合以上实验数据和化感综合效应分析,地黄根际土壤水浸液在一定程度上对于远志种子的萌发具有促进作用,且奠定了幼苗抗逆生化的基础,所以3种药用植物中,地黄更适合与远志进行轮作。     

远志bZIP基因家族的鉴定及表达分析

目的 鉴定远志Polygala tenuifolia bZIP基因,为远志抗逆性改良及次生代谢调控研究提供参考。方法 基于远志三代全长转录组数据库,采用生物信息学方法对远志bZIP基因家族成员进行鉴定和分析,并利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术分析其在不同组织及处理中的表达特性。结果 共鉴定得到27个含有特征性保守结构域的PtbZIP基因,编码蛋白质的氨基酸数量为143 aa（PtbZIP24）～846 aa（PtbZIP9）,相对分子质量范围为16201.52～92932.30,等电点（pI）介于4.59～9.69,其中25个家族成员为不稳定蛋白,所有家族成员均为亲水性蛋白。蛋白二级结构主要由α螺旋和无规卷曲构成,均无信号肽,存在多种互作现象。进化树分析将27个PtbZIP蛋白分为A、B、C、D、F、G、I、S 8个亚组,其中G亚组含有PtbZIP家族成员数量最多（共有8个）,占总数的29.63%,没有PtbZIP基因被归类到E和K组。PtbZIP家族基因的密码子偏好性较弱,适应性较弱。表达模式分析显示,PtbZIP4/15在叶中的表达量最高,茎和根次之;PtbZIP8/24在茎中的表达量最高,叶和根次之;PtbZIP1/17的表达量为根＞叶＞茎;其余21个的表达模式均为根＞茎＞叶。qPCR结果表明,PtbZIP26基因受脱落酸、壳聚糖的诱导,且能显著应答干旱和盐胁迫。结论 鉴定了远志bZIP家族基因及其分子特征,为进一步研究PtbZIP基因在调控远志发育及次生代谢物合成方面的生物学功能奠定基础。     

从农艺性状及化学成分测定分析远志药材商品品规和良种选育的合理性

通过对18份具有不同农艺性状特征的远志样品进行农艺性状(株高、根直径、根长、第一侧根分叉高度、侧根数、根重)分析,并采用HPLC对18份远志样品的3个指标性化学成分(细叶远志皂苷、远志酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖)进行含量测定,最后通过散点图分析6个农艺性状与3个指标性化学成分的相关性。研究发现18份远志样品中的3个指标性化学成分含量与远志根直径均无明显相关性,且细叶远志皂苷含量与其余5个农艺性状也无明显相关性;远志酮Ⅲ在主根长较短、第一侧根分叉高度较短,侧根数较多的远志样品中含量较高;3,6'-二芥子酰基蔗糖在主根长较长的远志样品中含量较高。可见现行远志药材商品规格标准及等级划分与良种选育方法,并不符合优等药材其体内指标性化学成分含量较高的药典标准,所以急需制订出具有科学数据支撑的远志商品规格等级标准及良种选育方法。