补阳还五汤治疗大鼠气虚血瘀型脑缺血的代谢组学研究

目的：探讨补阳还五汤对气虚血瘀型脑缺血大鼠生物代谢途径的影响。方法：将30只大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组(3.49 g/kg)。模型组和补阳还五汤组采用荧光微球诱导多发性脑梗死合并睡眠剥夺,建立气虚血瘀型脑缺血动物模型,并分别给予蒸馏水或补阳还五汤灌胃。假手术组给予蒸馏水灌胃,不睡眠剥夺和微球注射。记录各组大鼠的体质量。实验结束后,处死大鼠,采血分析。酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清中血栓素B₂(TXB₂)和6-酮基-前列环素1α(6-keto-PGF_1α)水平。采用液质联用的代谢组学方法检测血清样品。结果：与假手术组比较,模型组大鼠平均体质量明显降低,TXB₂/6-keto-PGF_1α比值升高(均P<0.05);与模型组比较,补阳还五汤组大鼠平均体质量升高,药物干预可降低TXB₂/6-keto-PGF_1α比值(P<0.05)。代谢组学结果显示,假手术组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),补阳...     

高分辨非靶代谢组学方法研究臻通集胶囊对高脂血症模型大鼠的影响

目的：通过高分辨非靶代谢组学方法探讨臻通集胶囊对高脂血症模型大鼠的作用特点和机制。方法：无特定病原体级SD大鼠40只,随机取6只作为对照组,给予正常饲料,其余所有大鼠给予高脂饲料喂养,连续4周造模成功后,分为模型组和给药组。高、中、低剂量给药组大鼠分别灌胃给予臻通集胶囊0.432、0.216、0.108 g·kg^–1,每日1次,连续给药8周。末次给药后将动物麻醉,腹主动脉采血,离心分离血清,全自动生化仪检测血清中血脂水平。取部分肝组织用于高分辨非靶代谢组学的研究。结果：臻通集胶囊给药后,高、中剂量组大鼠的三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白,高剂量大鼠的高密度脂蛋白较模型组明显降低,且差异具有统计学意义。与对照组比较,模型组大鼠共检测出138个差异代谢物;与模型组比较,给药组大鼠共检测出123个差异代谢物,正离子模式的72个差异代谢物有24个在给药后得到了纠正,负离子模式的51个差异代谢物有9个在给药后得到了纠正。代谢过程涉及多个信号通路,主要包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、环磷酸鸟苷酸依赖性蛋白激酶(cGMP-PKG)、叉头框蛋白O (FoxO)、蛋白质消化和...     

穿山龙提取物抗急性痛风性关节炎的尿液代谢组学分析

目的:对急性痛风性关节炎大鼠给予穿山龙提取物后的尿液代谢组学进行研究,寻找相关的潜在生物标志物及相关代谢通路。方法:采用尿酸钠(MSU)诱导的急性痛风性关节炎大鼠模型,将SD大鼠40只随机分为空白组、穿山龙提取物组、模型组、穿山龙提取物干预组,每组10只。给药组灌胃给予穿山龙提取物,给药剂量0. 48 g·kg~(-1),每天1次,连续5 d,于末次给药后,收集大鼠尿液,运用UPLC-Q-TOF/MS结合模式识别方法分析,采用正、负离子扫描模式下电喷雾离子源,数据采集范围m/z 100～1 500,采用全扫描方式。结果:鉴别出了12个共同的潜在生物标志物,分别为肌氨酸,二甲基甘氨酸,脱氧胞苷,尿酸,5-HT,L-胱硫醚,4-吡哆酸,脱氧尿苷,褪黑激素,5-甲氧基色胺,富马酸和胞苷。与空白组比较,穿山龙提取物组中这12个潜在生物标志物均明显下调;与模型组比较,在穿山龙提取物干预组的潜在生物标志物中,有10个上调,2个下调,穿山龙提取物对肌氨酸,尿酸,L-胱硫醚,4-吡哆酸,脱氧尿苷,5-甲氧基色胺,胞苷,二甲基甘氨酸,褪黑激素,富马酸这10个标志物均表现出了纠正异常表达的趋势;与急性痛风性关节炎相关性最强的代谢通路为半胱氨酸和甲硫氨酸代谢、色氨酸代谢。结论:穿山龙提取物可能是通过促进半胱氨酸和甲硫氨酸代谢中胱硫醚向半胱氨酸的转化水平,上调色氨酸代谢中褪黑激素,实现对痛风性关节炎的防治作用。     

塞络通胶囊对局灶型脑缺血/再灌注大鼠线粒体动力学的影响

观察塞络通胶囊对局灶性脑缺血再灌注的保护作用机制。采用大鼠90 min中脑动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型。蛋白免疫印迹法检测线粒体分裂融合基因Drp1,Opa1表达。透射电镜观察线粒体超微结构变化。HE染色观察病理学形态变化,免疫组织化学法检测Drp1,Opa1表达。结果显示,塞络通胶囊(33,16.5 mg·kg^-1,ig)可抑制缺血侧皮层区线粒体分裂融合异常,抑制线粒体分裂基因Drp1表达,促进线粒体融合基因Opa1表达,最终减轻缺血再灌注带来的能量代谢紊乱。塞络通胶囊可抑制缺血周边区线粒体动力学异常、维持线粒体正常形态,说明维持线粒体动力学正常可能是中药塞络通胶囊促进缺血脑区自修复功能的作用机制。     

基于代谢组学研究黄芩对干酵母热证模型的影响及苦寒性效关系

目的 基于代谢组学研究黄芩对干酵母诱导的热病证候模型的影响,揭示黄芩的苦寒性效关系。方法 实验分对照组、模型组、黄芩高和低剂量（生药12、3 g/kg）组。除对照组外,其他3组sc干酵母悬液（10 mL/kg）;黄芩组分别于造模后4、8 h分别ig给予黄芩水提取液各1次,对照组和模型组ig同体积蒸馏水。以热证的生物标志物及其变化规律为切入点,应用代谢组学、UPLC/ESI-TOF-MS法、主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘-判别分析（OPLS-DA）法等技术,研究干酵母诱导的热病证候的代谢特性及黄芩的干预作用,进而探讨中药性味与药效的相关性。结果 确定了30个热证特异性生物标志物,鉴定其中1个离子结构为L-苯丙氨酰-L-羟脯氨酸,并与脯氨酸和苯丙氨酸代谢通路等代谢途径相关。黄芩高、低剂量组各对13个离子具有明显的回调作用。结论 从热病证候代谢物组的整体及生物标志物的变化,揭示了黄芩干预热病证候的作用及其苦寒性效关系。     

肾上腺素致慢性血瘀证大鼠模型的血浆代谢组学研究

目的：应用代谢组学方法探讨肾上腺素致大鼠慢性血瘀证模型的生物学机制。方法：采用小剂量连续皮下注射肾上腺素的方法构建慢性血瘀证模型,通过血液流变学和血小板聚集进行模型判断,应用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS)检测大鼠血浆代谢物,通过数据分析筛选潜在生物标志物及代谢途径。结果：与正常组比较,血瘀证模型组大鼠全血黏度在不同切变率下均显著升高(P<0.01),血小板聚集率显著增加(P<0.01),代谢组实验结果显示血瘀证模型组在牛磺去氧胆酸、硫酸吲哚酚、苯硫酸酯和α-亚麻酸等17种差异代谢物上与正常组区分明显。结论：肾上腺素致慢性血瘀证大鼠体内的胆汁酸代谢、甘油磷脂代谢、色氨酸代谢和能量代谢均受到较为明显的干扰。     

中医药治疗痛风的代谢组学研究进展

从痛风的生物标志物、中医证候的物质基础以及中医药对痛风的调控作用3个方面综述基于代谢组学技术的痛风代谢产物的研究进展,并进一步探讨痛风的发病机制和治疗方法。     

脾胃湿热证大鼠模型的尿液代谢组学分析

目的 以脾胃湿热证模型大鼠为研究对象,基于尿液代谢组学寻找潜在生物标志物及相关代谢通路,从内源性小分子代谢物层面探究脾胃湿热证候本质。方法 将16只SD大鼠随机分为正常组及模型组,正常组给予普通饲料喂养,模型组在此基础上每日增加200 g·L^-1蜂蜜水自由饮用,猪油与白酒隔日交替灌服,共喂养17 d,第10天起每日相同时间将大鼠置于温度30~34 ℃、相对湿度95%的环境中2 h,共7 d,建立脾胃湿热证大鼠模型,并通过观察一般体征,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血浆胃动素（MTL）、胃泌素（GT）含量及胃肠组织病理学检查对模型进行评价;利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法（UPLC-Q-TOF-MS）进行尿液代谢组学分析,检测条件为ACQUITY? UPLC BEH C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）,流动相0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸乙腈溶液（B）梯度洗脱（0~3 min,1%~18%B;3~8 min,18%~40%B;8~10 min,40%~100%B）,流速0.4 mL·min^-1,电喷雾离子源（ESI）,正、负离子模式检测,扫描范围m/z 50~1 000。利用单变量与多变量统计分析筛选组间差异离子,根据精确相对分子质量计算其元素组成,将碎片离子信息与人类代谢组数据库（HMDB）等数据库匹配以鉴定生物标志物。通过京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库获得代谢物的生物信息,采用MetaboAnalyst 5.0软件分析其相关代谢通路。结果 与正常组比较,模型组肛温显著上升（P<0.01）,血浆MTL和GT水平均明显下降（P<0.05,P<0.01）,胃及结肠组织出现充血、出血及炎性浸润等病理性变化;尿液代谢组学研究发现L-组氨酸、柠檬酸、异柠檬酸等25个差异代谢物可作为脾胃湿热证的生物标志物,其中13个代谢物为内源性物质的Ⅱ相代谢产物（葡萄糖醛酸结合物、硫酸结合物和乙酰基结合物）,涉及组氨酸代谢、三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢等代谢通路。结论 脾胃湿热证主要引起组氨酸代谢、三羧酸循环、乙醛酸和二羧酸代谢3条代谢通路的紊乱,以及内源性代谢物的活性/失活状态失衡,可能涉及机体免疫应答、物质及能量代谢、炎症反应和肠道菌群等方面,可为脾胃湿热证模型的建立和应用提供依据。     

通络醒脑泡腾片抗痴呆的尿液代谢组学研究

通络醒脑泡腾片(TLXNET)是源自古方芎归汤加减而来的专利处方,具有改善认知功能的作用,然而关于它对Aβ_25-35海马注射痴呆模型大鼠的尿液代谢产物影响及抗痴呆作用并不明确。该实验以Aβ_25-35海马注射痴呆大鼠模型为研究对象,采用代谢组学技术研究空白大鼠、Aβ_25-35海马注射痴呆模型大鼠和通络醒脑泡腾片干预大鼠尿液中代谢物组时量的轨迹变化和对应关系,确定其特征性代谢标志物,并基于此标志物的代谢轨迹变化阐明通络醒脑泡腾片的抗痴呆作用。实验结果初步确定了吲哚-5,6-醌、4-羟基苯基丙酮酸(4-HPPA)、皮质醇和3-硫代乳酸等4个特征性代谢标志物,它们主要参与体内多巴胺神经系统、糖皮质激素及能量代谢途径,且通络醒脑泡腾片对4个内源性生物标记物代谢轨迹的扰动具有明显的回调作用。该实验表明Aβ_25-35海马注射痴呆大鼠模型有明确的尿液代谢特征性内源性生物标志物,通络醒脑泡腾片可以通过回调其代谢轨迹的扰动而达到抗痴呆的作用。     

基于代谢组学研究黄连-黄芩药对治疗脑缺血大鼠的作用机制

运用代谢组学方法研究黄连-黄芩药对对脑缺血模型大鼠代谢的作用机制。采用线栓法致大脑中动脉阻塞复制缺血再灌脑损伤大鼠模型(MCAO)。通过超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)的方法、Markerlynx软件、以及主成分分析法和偏最小二乘判别法分析正常大鼠、脑缺血模型大鼠以及分别给予黄连(HL)、黄芩(HQ)和黄连-黄芩药对(LQ)干预后大鼠尿液样本中的内源性代谢物的差异,结合内源性代谢物的一级及二级碎片离子的精确信息,检索并鉴定可能的生物标志物,进而在MetPA数据库中构建代谢通路。结果在脑缺血模型大鼠的尿液中发现并鉴定出了20种生物标志物,并对其相对含量及代谢途径进行分析。主要涉及神经递质调节、氨基酸代谢、能量代谢、脂质代谢等。这些代谢通路在脑缺血模型大鼠的体内发生紊乱,主成分分析表明,正常与脑缺血模型得到明显区分,而给予HL,HQ,LQ后可以使之向着正常状态转变。此研究对脑缺血大鼠代谢组及黄连-黄芩药对干预的作用机制进行阐释,体现代谢组学可反映生物体的生理及代谢状态,能较好地体现药对是中医遣方用药的特色优势,具有内在的组合变化规律以及中医药的整体观、系统观以及多成分协同或拮抗作用的特点。     

复方丹参片对急性脑缺血大鼠药理作用的探讨

目的观察复方丹参片对急性脑缺血大鼠的治疗效果,探讨其对急性脑缺血大鼠的保护作用和机制。方法采用Longa改良栓线法制备大鼠大脑中动脉缺血模型。实验大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血塞通胶囊组、复方丹参片组5组,术后后正常组、假手术组、模型组予蒸馏水灌胃。血塞通胶囊组予血塞通胶囊灌胃,复方丹参片组予复方丹参片灌胃。分别在24h,3d,7d等时间点对以上5组进行神经功能缺损评分。断头取脑,TTC染色观察脑梗死面积,免疫组织化学方法及积分光密度值观察梗死周围区脑组织血管新生因子蛋白的表达。结果复方丹参片可明显改善急性脑缺血大鼠的行为学评分,减少梗死面积百分率,显著增加大鼠脑内血管新生因子蛋白的表达,促进急性脑缺血大鼠脑缺血组织侧支循环的建立。结论复方丹参片增强急性脑缺血大鼠梗死灶周围血管生长因子的表达,促进了梗死灶周围的血管新生。     

舒血宁在急性脑缺血治疗中的临床疗效观察

目的：探讨舒血宁注射液治疗急性脑缺血的临床疗效。方法：将64例发病3 d以内的急性脑缺血患者按随机数字表法分为治疗组33例,对照组31例,两组患者均按急性脑缺血的常规综合治疗,治疗组加用舒血宁注射液,对照组加用依达拉奉注射液。观察指标为神经功能缺损评分。结果：两组患者神经功能缺损评分自第7天开始差异有显著意义,P〈0.05,14 d后神经功能缺损得分比较差异有极显著差异（P〈0.01）。结论：两种脑神经保护剂在治疗急性脑缺血上均有较好的疗效,两者相比舒血宁注射液效果更明显。     

利水通络口服液对急性脑缺血大鼠脑组织病理形态的影响

目的：研究利水通络口服液对急性脑缺血大鼠脑组织病理形态的影响及其作用机理。方法：以急性不完全性脑缺血大鼠为模型，将50只普通级Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、刹水通络口服液高剂量组、刹水通络口服液低剂量组。分别灌胃取材后，测定大鼠脑组织病理形态学变化。结果：病理组织学观察结果表明，急性脑缺血模型组出现了较严重的脑组织水肿和神经细胞病变，利水通络口服液高、低剂量组在改善神经细胞病变方面效果显著（P〈0．05）。结论：急性脑缺血大鼠脑组织病理形态改变明显，说明其为脑梗塞急性期的病理生理基础之一；利水通络口服液对急性脑缺血大鼠脑组织病理形态有较强的改善作用，其作用机制可能与降低脑含水量有关。     

大鼠脑缺血不同时间脑能量代谢的变化研究

目的:研究大鼠脑缺血不同时间脑能量代谢的变化。方法:复制大鼠永久性局灶性大脑中动脉缺血模型,测定缺血6,24,72,168,336 h脑组织乳酸(Lac)和丙酮酸(Pyru)的含量,Na+,K+-ATPase和Ca2+,Mg2+-ATPase活性。结果:在各个不同时间点,各检测指标与假手术组比较均具有显著性,P<0.05,P<0.01。结论:在缺血336 h内观测脑组织中能量代谢相关指标,可以用于评价药物对脑缺血的保护作用。     

脑络欣通胶囊对脑缺血再灌注模型大鼠血小板聚集及血栓形成的影响

目的:观察脑络欣通胶囊对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠血小板聚集和血栓形成的影响。方法:雄性SD大鼠,随机分为假手术组10只,造模组60只,线栓法制备大脑中动脉闭塞缺血-再灌注(MCAO/R)模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组,阿司匹林组(0.010 g·kg-1),脑络欣通高、中、低剂量组(4.500,2.250,1.125 g·kg-1)。透射电子显微镜观察海马神经元超微结构变化,检测各组血清中血栓素B2(TXB2),6-酮前列腺素F1α(6-keto-PGF1α),血小板聚集率及体内血栓形成时间。结果:与假手术组比较,模型组损伤大鼠的神经元的病理形态损坏严重,大鼠血清中TXB2水平明显升高,6-keto-PGF1α水平明显降低,模型组大鼠血小板在1,2,5 min的聚集率和最大聚集率明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,脑络欣通胶囊低、中、高剂量组损伤大鼠的神经元的病理形态学均有明显改善,明显降低大鼠血清中TXB2水平,明显升高6-keto-PGF1α水平,1,2 min时,脑络欣通3个剂量组均明显降低大鼠血小板的聚集率,5 min时,低、高剂量组均明显降低大鼠血小板聚集率,低、中剂量组5 min内的最大聚集率,脑络欣通胶囊低、中剂量组大鼠体内血栓形成时间显著延长(P0.05,P0.01)。结论:脑络欣通胶囊具有抑制脑缺血再灌注损伤模型大鼠血小板的聚集和血栓形成,对缺血性脑血管疾病具有一定的保护作用。     

红花提取物对大鼠急性实验性脑缺血的保护作用

目的：观察改进生产工艺后的红花提取物对大鼠急性实验性脑缺血的保护作用。方法：采用大鼠双侧颈总动脉结扎,造成造成急性实验性不完全性脑缺血模型,观察该品对动物脑指数、脑含水量和毛细血管通透性的影响,并观察脑组织病理变化。结果：改进工艺后的红花提取物0.84、1.67、3.33 g生药/kg组脑含水量明显减少（P〈0.05或P〈0.01）;脑组织内伊文思兰含量明显减少（P〈0.05或P〈0.01）;组织形态观察提示,该提取物0.84、1.67、3.33 g生药/kg组神经细胞受累数或程度明显小于手术模型组,胞核深染或核仁消失现象均较轻。结论：改进生产工艺后的红花提取物对大鼠急性实验性脑缺血具有保护作用。     

银杏酮酯对动物急性脑缺血保护作用

本实验研究了银杏酮酯（GBE50）对大鼠、家犬急性脑缺血的影响。结果表明：GBE50能明显改善大鼠阻断双侧颈总动脉后引起的EEG缺血性变化。且能显著对抗狗脑缺血引起的CBF减少，CVR增加，可明显降低脑缺血引起的LDH释放增加，由此改善脑循环．对急性脑缺血有较好的保护作用。GBE50对家兔血液流变学参数的影响的实验表明GBE50有预防血栓形成和促进血栓溶解作用。     

天舒胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨天舒胶囊对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法:雄性SD大鼠80只,随机分成假手术组、模型组、天舒胶囊低剂量组(0.6 g·kg-1)、天舒胶囊高剂量组(1.2 g·kg-1).口服给药5d后采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)90 min再灌注24 h模型.观察天舒胶囊对脑缺血再灌注大鼠神经缺失症状、脑组织含水量、脑梗死体积及脑组织病理形态学的影响.检测各组大鼠神经细胞凋亡和血清磷酸肌酸激酶脑型同工酶(CK-BB)水平.结果:与模型组比较,天舒胶囊明显降低脑梗死体积(低、高剂量脑梗死体积分别为29.11％,27.85％);血清CK-BB水平(低、高剂量分别为9.95,9.87 U·L-1)也明显降低(P＜0.01),神经缺失症状和脑组织病理损害,神经细胞凋亡减少(P ＜0.01),脑组织含水量(低、高剂量分别为79.03％,78.89％)降低(P＜0.05).结论:天舒胶囊对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其通过降低血清CK-BB水平、减少神经细胞凋亡,保护脑缺血再灌注损伤.     

局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的代谢组学研究

目的利用基于硅烷基衍生化反应的气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）的代谢组学测定方法,获得局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的血浆代谢物指纹图谱,初步揭示局灶性脑缺血再灌注损伤的生物标志物,为脑缺血药物筛选提供新的方法。方法通过硅烷基化反应,将生物样品中的氨基酸、脂肪酸、有机酸、糖类和固醇类物质制成热稳定性强、易挥发的硅烷酯或醚,通过优化色谱条件对大鼠血浆中内源性代谢物进行分析测定。结果利用已建立的GC-MS测定方法,获得了大鼠血浆代谢物指纹图谱,并鉴定了其中29个主要色谱共有峰,并通过主成分分析方法比较正常和模型组的指纹图谱差异。结论通过正常组和模型组大鼠血浆代谢物指纹图谱的比较分析,发现与脑缺血相关的生物标志物。     

贝加灵喷雾剂对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用

目的: 研究贝加灵喷雾剂对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法: SD大鼠随机分为假手术组、模型组、贝加灵高、中、低剂量组、尼莫地平组、空白乳剂组。贝加灵高、中、低剂量组(2.66,1.33,0.66 mg ·kg^-1)鼻腔给药,尼莫地平组(0.4 mg ·kg^-1)尾静脉注射给药,5 d后,采用血管内栓线阻断法建立大鼠局灶性脑缺血模型,继续给药2 d,观察大鼠神经功能缺损情况,测定各组大鼠脑组织含水量,利用紫外分光光度法测定大鼠局灶性缺血脑损伤血清中超氧歧化酶(SOD)活力、脑组织中Ca²⁺-ATP酶含量。结果: 与模型组比较,贝加灵高、中、低剂量组神经功能评分(1.06±0.80),(1.00±0.84),(0.89±0.94)分,极显著性降低(P<0.01);高、中剂量组脑组织含水量(79.33±1.46)%,(79.34±1.01)%,极显著性降低(P<0.01),低剂量组含水量(79.72±1.87)%显著性降低(P<0.05);血清中SOD活力(177.622±5.224),(160.350±41.139),(167.279±6.450)U ·mL^-1,脑组织Ca²⁺-ATP酶含量(3.444±3.730),(3.192±1.298),(2.866±0.156)U ·mg^-1,均显著性降低(P<0.05)。结论: 贝加灵喷雾剂对大鼠局灶性脑缺血损伤有一定修复保护作用,可能通过抗自由基和改善能量代谢发挥这一作用。