基于UPLC含量测定的不同厂家穿心莲胶囊质量评价

目的:建立同时测定穿心莲胶囊中穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯含量的方法,并对不同厂家产品的质量进行评价。方法:采用双波长超高效液相色谱法测定穿心莲胶囊中穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯的含量。色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL·min~(-1),柱温为30℃,检测波长为225 nm(穿心莲内酯)、254 nm(脱水穿心莲内酯)。结果:在建立的检测条件下,穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯均能达到基线分离,两者的进样量线性范围分别为0.082 6～2.064 8(r=0.999 9)、0.040 8～1.019 7μg(r=0.999 9);平均加样回收率分别为98.7%、100.7%(RSD分别为1.0%、1.8%,n=9)。27批穿心莲胶囊样品中,穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯的含量分别为0.94～7.50、5.62～10.12 mg/粒。结论:建立的方法操作简便、快速,可用于穿心莲胶囊的质量控制及评价。     

穿心莲内酯的研究进展

穿心莲内酯为二萜内酯类化合物,结构复杂,人工合成困难,国内均从植物中提取.提取分离方法有醇提法、水提法、微波和超声波辅助提取法.其具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗肿瘤、治疗心脑血管疾病等多种药理作用.利用Micllael加成、羟基上的反应、分子内环化、分子内酯环化等反应进行结构修饰取得了新的研究进展.随着对其药理作用及其机制以及结构修饰的深入研究,将极大地促进穿心莲内酯类新药的研究和开发.     

广东等五省穿心莲药材中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量比较

目的通过比较不同产地穿心莲药材中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量,寻找穿心莲药材最适宜的栽培地区。方法收集全国5个省9个不同产地25个穿心莲样品,按2010版《中国药典》一部穿心莲项下方法进行检测与分析。结果不同产地及批次穿心莲样品中总内酯的含量在1.03%~6.98%之间;穿心莲不同部位总内酯的含量:叶在3.43%~6.98%之间,茎在0.93%~1.33%之间,全草在1.99%~4.41%之间;不同采集方式穿心莲样品总内酯含量:自采样品含量在3.20%~4.41%之间,产地供应商提供的样品含量在1.99%~3.36%之间。结论穿心莲不同产地、不同采集方式及不同部位的含量均存在着显著差异,选择适宜的产地建立基地、适时采收及加工对穿心莲药材的质量控制意义重大。     

HPLC法测定穿心莲内酯分散片中穿心莲内酯的含量

目的:采用HPLC法对穿心莲内酯分散片中穿心莲内酯的含量测定。方法:使用C18色谱柱;流动相:甲醇-水(60∶40)盐酸调pH至4·5;检测波长:225nm;流速1·0ml/min,结果在范围内线性关系良好(r=0·9999)。结论:本品检测方法简便可靠,分离度较好,结果稳定,可用于穿心莲内酯分散片的质量控制。     

流动注射分析测定穿心莲片中脱水穿心莲内酯的含量

目的 :为穿心莲片 (穿心莲 )建立一种简便快速的分析方法。方法 :采用流动注射分析法测定脱水穿心莲内酯含量 ,检测波长为 5 4 0nm。结果 :脱水穿心莲内酯在 0 .2～ 1mg·mL-1范围内线性关系良好 ,平均回收率为 10 1.7% ,RSD为0 .7%。进样频率为 12 0样·h-1。结论 :本法简便易行 ,稳定性好 ,可作为该制剂的含量测定方法。     

穿心莲浸膏胶囊中脱水穿心莲内酯的含量测定

穿心莲浸膏胶囊是九惠制药厂生产的抗菌消炎药,用于细菌性痢疾、急性肠胃炎、扁桃体炎、咽喉炎、上呼吸道感染等疾病。本文采用HPLC法测定了穿心莲浸膏胶囊中有效成分脱水穿心莲内酯的含量,以此作为该产品质量控制的指标。1 仪器与试剂1.1 仪器 HP-1050高效液相色谱仪;1050DAD二极管阵列式紫外检测器;超声波清洗     

RP-HPLC法测定不同产地穿心莲叶中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯含量的研究

为科学评价穿心莲药材的质量,采用反相高效液相色谱法测定穿心莲中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的含量.色谱柱为Merck-Lichrospher RP-C18柱(4.6mm×250mm,5μⅠ),流动相为甲醇-水(6040);检测波长226nm(用于检测穿心莲内酯),254nm(用于检测脱水穿心莲内酯);流速0.8ml/min;柱温35℃;并对色谱峰纯度、色谱峰一致性进行了比较.穿心莲和脱水穿心莲内酯的加样回收率100.9%,98 2%,RSD分别为3.2%,3.4%(n=6).结果表明,广东湛江和饶平所产的穿心莲药材叶中的上述两成分含量较高,质量较好.     

穿心莲质量控制的再评价

穿苡莲叶质量评价的主要指标应该是穿苡莲内酯，由于该成分随贮存时间延长或处理不当而降低，导致市场商品穿心内酯含量很低。中国药典规定的药用部分，采收时间及质量控制指标均有不当之处，执行中发现新采收穿心莲叶因穿心莲内酯含理高反而不合格，造成误导。建议新版药典作适当修订，药用部分改为叶，采收时间改为开花期，含量测定指标改为穿心莲内酯。     

HPLC法测定喉康散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的:建立喉康散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量的测定方法。方法:以甲醇-水(52∶48)为流动相,Dikma C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,检测波长分别为225与254 nm,流速为1.0 mL/min。结果:穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯分别在浓度为0.0247～0.395 mg/mL、0.0244～0.390 mg/mL范围内呈现良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率分别为98.81%,RSD为1.785%(n=6)。结论:该方法简便、快速,分离度好,其他成分无干扰,测定结果准确可靠,可用于喉康散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定。     

不同采收及加工方式对穿心莲药材质量的影响

通过考察穿心莲的生长期、产地加工、营养器官和全草分段等因素对药材质量的影响,为穿心莲优质药材的生产提供科学依据。采用"一测多评"法,同步测定78份样品中穿心莲内酯(andrographolide,AD)、新穿心莲内酯(neoandrographolide,NAD)、14-去氧穿心莲内酯(14-deoxyandrographolide,14-DAD)和脱水穿心莲内酯(dehydroandrographolide,DHAD)的含量,并分别采用直观分析、聚类分析和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)等统计学方法进行数据分析和挖掘。结果表明:穿心莲按照快速生长期(Ⅰ期)、枝叶茂盛期(Ⅱ期)、花蕾期(Ⅲ期)、花盛期(Ⅳ期)、盛果期(Ⅴ期)和果期后期(Ⅵ期)6个生长期来划分,4种二萜内酯总量(TC)在Ⅰ~Ⅲ期内较为稳定,Ⅳ期开始下降,Ⅴ期下降最为迅速,Ⅵ期降至最低,因此穿心莲药材的采收期以花蕾期为最佳。产地加工时,尽管晒干和阴干对TC的影响较小,但与晒干比较,阴干样品中AD含量降低,DHAD和NAD含量升高,即阴干过程可以导致AD的分解和转化。因此,在天气条件允许的情况下,产地加工尽量采用晒干法进行干燥。AD,DHAD和TC在穿心莲不同全草分段和营养器官的分布分别为:全草上部>全草中部≈全草>全草下部,叶>全草>茎,且4种二萜内酯在叶和全草中的含量远高于茎,建议药材采收时以全草的上部和中部或含叶以上部位为佳,以保证其叶的占比要求。     

穿心莲质量标准研究

目的对穿心莲药材的有效成分进行定性定量鉴别,对水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及重金属含量进行定量测定,进一步完善穿心莲药材的质量标准。方法采用薄层色谱法对穿心莲中的穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯进行定性鉴别,高效液相色谱法进行定量测定,常规检查项目按2010年版《中华人民共和国药典》(一部)附录Ⅸ A杂质检查法、Ⅸ H水分测定法中的烘干法、附录Ⅸ K灰分测定法、附录Ⅹ A浸出物测定法及Ⅸ E重金属检查法测定。结果10批穿心莲样品中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯及醇溶性浸出物含量均符合我国药典规定的标准。结论所建立的方法简便、准确,能作为质量标准以控制穿心莲药材的质量。     

穿心莲药材薄层色谱鉴别方法研究

目的研究穿心莲薄层色谱鉴别方法,用薄层色谱法评价不同产地穿心莲药材质量,及白云山穿心莲GAP基地药材质量。方法采用乙醇提取,预制硅胶G板,以氯仿-甲醇-甲酸(7∶3∶0.5)为展开剂,喷以10%的硫酸溶液,在105℃下加热至斑点显色清晰。结果与药典原方法比较,该方法得到斑点多,斑点分离好、包容信息量大。结论用该方法可评价不同产地穿心莲药材质量,突出白云山穿心莲GAP基地药材内在特点。     

穿心莲药材不同提取方式的合理性评价

目的:比较不同穿心莲提取液中有效成分含量、指纹图谱和药效学活性。方法:采用减压提取法(VAE)、超声提取法(UAE)和传统提取法(HRE)制备提取液,利用HPLC对不同穿心莲提取物进行微观组分指纹图谱分析,流动相乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B)梯度洗脱(0~20 min,10%~30%A;20~30 min,30%~35%A;30~40 min,35%~60%A;40~50 min,60%~85%A;50~60 min,85%~100%A),检测波长254 nm,结合DPPH自由基反应体系,考察不同工艺提取液的抗氧清除能力。结果:VAE对穿心莲药材中药效成分(穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯)提取效率显著高于传统方法。3种提取液的指纹图谱均含有17个特征峰,VAE,HRE及UAE的相似度分别为0.957,0.911,0.905。清除DPPH自由基能力强弱顺序为VAE>UAE>HRE,当质量浓度为20 g·L-1时,DPPH清除率分别为44.85%,25.29%,16.58%。结论:穿心莲不同工艺提取液中药效成分不存在显著性差异。与传统提取法相比,VAE具有提取时间短、效率高、无污染等优点。VAE液对DPPH自由基清除效果优于HRE液和UAE液。     

HPLC测定穿心莲配伍绵茵陈后2种内酯成分含量的变化

目的:考察穿心莲与绵茵陈配伍后对穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量变化的影响.方法:采用RP-HPLC,Innersil ODS-3色谱柱(4.6 mm×250mm,5.0μm),流动相乙腈-水梯度洗脱,流速1.2 mL· min-1,波长检测程序(0～10 min,225 nm;10～20 min,254 nm),柱温35℃.结果:穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯质量浓度分别在19.66～314.6(r=0.9995),4.32 ～69.12 g·L-1(r =0.999 5)与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为99.7％,99.9％,RSD均＜2.3％.结论:穿心莲与绵茵陈配伍后水煎液中2种内酯类成分含量显著增加.     

穿心莲制剂指纹图谱及其制备过程药效相关性研究

工艺设计赋予产品质量内涵,探讨穿心莲制剂制备过程中化学指纹图谱变化及其与药效活性间的相关性,构建关键工艺环节与质量属性的桥梁。参照穿心莲制剂制备过程(提取-浓缩-干燥-制粒),HPLC指纹图谱测试各中间体微观组分物质基础差异,聚类分析结果提示提取环节对穿心莲制剂质量内涵变异影响较大;DPPH抗氧化、脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞抗炎活性建模测定各中间体药效活性,均不断下降,分别绘制关键工艺参数与药效活性间曲线方程,结果均表明传统高温处理过程,不利于其临床疗效的发挥。利用偏最小二乘法对色谱-药效活性数据构建谱效模型方程,经验证,该方程能准确预测指纹信息与药效活性关系,便于后续质量属性评价及为进一步全过程质量控制提供科学依据。     

Analysis on Isozyme and Diterpene Lactones Variability during Ontogenesis of Andrographis paniculata

Objective To understand the relationship between isozyme activities and diterpene lactone biosynthesis of Andrographis paniculata. Methods Plants were collected during ontogeny from seeding to seed maturity, and separated into leaves and stems for determination. Morphological and yield parameters were used to describe plant growing states. Isozyme changes were tested by polyacrylamide gel electrophoresis. HPLC was used to develop the fingerprints as well as to determine the diterpene lactone content. Results Significant increases were observed in the activities of isozymes, such as aspartate aminotransferase(AST), malate dehydrogenase(MDH), peroxidase(POD), and catalase(CAT), around the early stage of bud in leaves, and the activities of these four kinds of isozymes increased gradually as time progressed in stems. The content changes of diterpene lactones in leaves and stem were various. In the leaves, andrographolide(1) was recorded the highest [(23.63 ± 1.06) mg/g] at the early stage of bud, whereas deoxyandrographolide(2) was the lowest [(6.78 ± 0.27) mg/g] at this period and it reached the highest level at the seeding stage [(26.05 ± 1.04) mg/g]. Dehydroandrographolide(3) and neoandrographolide(4) fluctuated during growing stages. Meanwhile, the HPLC fingerprint showed that the content changes of two unknown compounds were related to that of dehydroandrographolide in leaves. In stems, andrographolide had increased gradually until the bud stage [(8.26 ± 0.33)mg/g], and other three diterpene lactones showed a trend of fluctuation. The yield of total diterpene lactones in aerial part reached the highest at the first flowering stage(806.71 mg/plant). Conclusion These results lay the foundation for the future research on the relationship of isozymes and diterpene lactones, and for determining the most favorable time for harvesting A. paniculata.     

规范化种植穿心莲药材HPLC指纹图谱研究

 目的 为规范化种植穿心莲药材质量研究提供新的基础研究资料。方法 RP-HPLC建立穿心莲指纹图谱,并进行不同种植基地(产地)与商品药材、不同生长期、不同药用部位指纹图谱的比较,采用计算机辅助的相似度评价软件进行相似度评价。结果 在选定的色谱条件下,226 nm检测波长下的15个峰构成穿心莲药材的指纹特征,各批次样品指纹图谱均具有上述特征,但特征峰的相对含量分布差异导致色谱概貌存在一定差异。计算机辅助相似度评价,5个规范化种植基地产穿心莲药材指纹特征相互间较为吻合,具有较好的一致性,商品药材则差异较大。不同生长期药材指纹图谱也具有较好的一致性,多数特征峰含量呈现随生长期而增加的动态累积过程,不同部位则特征峰的含量分布叶中大大高于茎。结论 实行规范化种植对于保证药材质量的稳定性具有重要的意义,所建立的方法可较全面地反映穿心莲药材多成分特征,并进行药材质量评价。     

穿心莲指纹图谱和不同产地质量研究

目的:建立穿心莲药材有效的质量评价方法.方法:通过建立HPLC指纹图谱和有效成分的含量测定,对来自10个不同产地的穿心莲药材进行分析.色谱条件为Alltima C18色谱柱(4.6m×250mm, 5μm),流动相为乙腈-水系统,梯度洗脱,流速1.0mL·min-1,指纹图谱检测波长为215nm,穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量测定的检测波长分别为225nm和254nm.结果:得到分离度、重现性均较好的穿心莲药材HPLC指纹图谱,标示了10个共有色谱峰,对10批来自不同产地穿心莲样品的色谱指纹图谱进行了相似度评价;应用HPLC-DAD测定了不同产地穿心莲样品中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量,结果显示,穿心莲药材中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯总量介于1.09%～4.47%.结论:该方法简便准确,灵敏度高、重复性好,可以作为穿心莲药材的质量控制方法,此方法已被<香港中药材标准>采用.建议HPLC指纹图谱用于穿心莲药材的质量控制,穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的总量不得低于1.0%.     

ASE-改良QuEChERS-GC-MS/MS测定穿心莲中76种农药残留

目的:建立了ASE提取,改良Qu ECh ERS净化,GC-MS/MS测定穿心莲中76种农药残留的分析方法。方法:样品经乙腈采用快速溶剂萃取仪提取,用改良的Qu ECh ERS方法净化,采用气相色谱-串联质谱检测,并采用基质匹配标准曲线法进行定量分析。结果:76种农药在10~500μg·L~(-1)线性良好(r0.995),3水平回收率在63.0%~128.1%,RSD均15%,方法检出限在1.12~11.33μg·kg~(-1)。结论:该方法简便、快速、准确、灵敏、节省有机溶剂,能够满足农药多残留检测的实际需求。