MK-801诱导出生早期大鼠精神分裂症模型的行为学研究

目的建立地卓西平马来酸盐(MK-801)慢性处理的出生早期大鼠精神分裂症(SZ)模型,探讨其神经行为学变化。方法 11只出生后6 d的SD仔鼠,腹腔注射0.3 mg/kg的MK-801(MK-801组),一天2次,连续注射2周;11只同龄的SD仔鼠腹腔注射等体积的生理盐水(NS组)。给药前称重1次,给药完毕后每隔2 d称重1次,直至实验结束。给药后1周,检测旷场和水迷宫等行为学的变化。结果与NS组比较,MK-801组大鼠体重显著降低(P<0.01),并至少持续至注射结束后4周。行为学检测结果显示,与NS组比较,MK-801组大鼠自发活动显著减少(P<0.01),其学习能力明显降低,学习速度减慢,空间记忆能力下降(P<0.05)。结论 MK-801诱导的出生早期SZ模型大鼠自发活动减少,能部分模拟SZ的阴性症状;其学习及记忆功能损害可以部分模拟SZ的认知功能损害症状。     

基于代谢组学分析精神分裂症不同证型的生物学标志物

目的 分析精神分裂症（schizophrenia, SZ）患者不同证型的代谢物差异性,研究其不同中医证型潜在标志物,为其辨证分型提供依据。方法 纳入2019年10月至2020年10月在湖南省脑科医院精神科住院的不同证型SZ患者53例,分为痰气郁结组（n=24）、阴虚火旺组（n=15）、心脾两虚组（n=14）;同时纳入20例健康者为对照组。使用阳性与阴性症状量表（positive and negative syndrome scale, PANSS）评定症状程度,采用超高效液相色谱-高分辨质谱联用（ultra-high performance liquid chromatography-high resolution mass spectrometry, UPLC-MS）技术分析SZ痰气郁结、阴虚火旺、心脾两虚证患者血浆代谢产物差异,进行多维统计分析,筛选差异代谢物。结果 与对照组比较,SZ患者差异代谢物主要涉及氨基酸及脂类等代谢通路。与阴虚火旺组比较,痰气郁结组3-羟基丁酸、天冬酰胺表达上调,心脾两虚组别胆酸、胆酸表达下调(P<0.05)。结论 SZ患者氨基酸及脂类的代谢存在异常...     

MK-801诱导的精神分裂症发育模型大鼠脑组织DA,DOPAC,Glu和GABA浓度的变化

目的:通过对MK-801诱导的精神分裂症（schizophrenia,SZ）发育模型大鼠和慢性给药模型大鼠脑组织多巴胺（dopamine,DA）、二羟苯乙酸（dihydroxy-phenyl acetic acid,DOPAC）、谷氨酸盐(glutamate,Glu)和γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric aci...     

MK-801诱导的精神分裂症发育模型大鼠脑组织DA,DOPAC,Glu和GABA浓度的变化

目的：通过对MK-801诱导的精神分裂症（schizophrenia,SZ）发育模型大鼠和慢性给药模型大鼠脑组织多巴胺（dopamine,DA）、二羟苯乙酸（dihydroxy-phenyl acetic acid,DOPAC）、谷氨酸盐（glutamate,Glu）和γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid,GABA）浓度的比较研究,探讨围产期N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate,NMDA）受体阻断致SZ的神经生化机制。方法：60只新生雄性SD大鼠于出生后6天按批次随机分为SZ发育模型组（MK-801F）、SZ慢性给药模型组（MK-801M）和正常对照组（Control）;SZ发育模型大鼠于出生后7~10d皮下注射MK-801（0.1mg/kg,Bid）,SZ慢性给药模型大鼠于出生后47~60d腹腔注射MK-801（0.2mg/kg,Qd）,对照组大鼠于相应时段注射0.9%的生理盐水。出生后第60天分批进行行为学测试,出生后第63天取各组大鼠大脑内侧前额叶皮质（medial prefrontal cortex,mPFC）和海马组织并匀浆,以高效液相色谱-库仑阵列电化学法检测组织匀浆中的DA,DOPAC,Glu和GABA水平,并计算分析DA和Glu的利用率。结果：SZ发育模型大鼠mPFC和海马DA及DOPAC的浓度较正常对照组明显降低（P〈0.05）;mPFC区GABA浓度和Glu利用率较正常对照组明显降低（P〈0.05）;mPFC区DA浓度较SZ慢性给药模型组明显降低（P〈0.05）;海马DOPAC浓度及DA利用率较SZ慢性给药模型组明显降低（分别P〈0.01,P〈0.05）。结论：SZ发育模型成年大鼠mPFC区DA,Glu和GABA系统功能减退,海马DA系统功能减退。     

代谢组学技术在代谢综合征诊疗中的应用进展

代谢综合征是一组以肥胖、血脂异常、血压升高及糖调节受损等临床表现为特征的症候群,其患病率逐年升高,严重影响人类健康.但目前尚缺乏早期综合诊断与预防代谢综合征的有效方法.代谢组学技术可通过对代谢产物的定性和定量分析反映生物体的代谢变化,对代谢综合征的诊断、鉴别诊断、早期预测、不同种族之间代谢差异研究以及治疗干预等均具有重...     

基于气相色谱-质谱的大鼠溃疡性结肠炎模型结肠组织代谢组学特征

目的 寻找溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜组织中UC相关的特异性标志物.方法 将16只健康大鼠分为UC模型组(12只)和正常对照组(4只),用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)建立UC大鼠模型,正常对照组大鼠正常喂养.UC模型组分别在造模后5、10、15 d各取4只大鼠与正常对照组病变部位的黏膜组织进行GC-MS检测,并采用主成分分析法、偏最小二乘-线性判别分析法、化学计量学方法进行分析,最后采用t检验并结合OPLS-DA模型第一主成分的VIP值(VIP＞1)来寻找差异性表达代谢物.结果 与正常对照组相比,UC模型组结肠组织的代谢谱有明显改变,共找到9种差异代谢产物(P＜0.05),分别是尿苷、腺嘌呤、胞嘧啶、甘氨酸、乳酸、牛磺酸、苏氨酸、甘露糖、β-丙氨酸.结论 UC大鼠和正常大鼠结肠组织间存在差异代谢组分,9种差异代谢物在临床上可作为UC早期诊疗的生物学标志物.     

基于气相色谱-质谱的肥胖抵抗大鼠尿液代谢组学研究

目的对肥胖抵抗大鼠尿液进行代谢组学分析,研究高糖高脂饮食对非肥胖型代谢紊乱的影响,探讨非肥胖型2型糖尿病的发病机制。方法建立肥胖抵抗大鼠模型,取静脉血,测其生化指标,同时对尿液进行气相色谱-质谱分析,得到的数据进行代谢组学分析。结果除羰基戊二酸(RSD=11.77%)外,其他14种代谢物的相对标准偏差(RSD)均在10%以内,R2Y和Q2值分别为0.929和0.905;与对照组相比,肥胖抵抗组大鼠尿液中能量代谢过程的相关代谢物羟基乙酸、苏氨酸、丝氨酸、丁二酸、延胡索酸、2,3-二羟基-丁酸、苹果酸、羰基戊二酸减少,同时与肠道菌群代谢相关的代谢物对羟基苯甲酸、葡萄糖醇、反式乌头酸、果糖、葡萄糖、肌醇含量也明显减少。结论饮食干预16周之后,肥胖抵抗组大鼠能量代谢过程中的主要代谢物发生异常,基于GC-MS的代谢组学分析方法能较为全面的反应能量代谢状况,发现差异代谢物,可用于非肥胖型2型糖尿病发病机制的研究。     

慢性心肌缺血模型小型猪血浆代谢组学分析

目的：研究慢性心肌缺血气虚血瘀证小型猪血浆代谢物谱群的变化,开展气虚血瘀证候学的研究。方法：通过在左冠状动脉前降支放置Ameroid缩窄环制备冠心病慢性心肌缺血小型猪模型,并结合宏观体征、冠状动脉造影和超声心动图等方法确立气虚血瘀证,采用气相色谱-质谱和模式识别技术,分析冠心病心肌缺血气虚血瘀证模型与假手术组小型猪12周血浆的代谢物及相应代谢物谱群的变化。结果：该方法制备的模型12周后确立为稳定的冠心病慢性心肌缺血气虚血瘀证模型。主成分分析法清晰地把模型组与假手术组小型猪分开;比较两组小型猪代谢谱发现,脂类代谢产物甘油、醋酸、二十三碳二炔酸和肌醇以及氨基酸类代谢物脯氨酸含量上升;氨基酸类代谢物丙氨酸、苯丙氨酸、尿素与糖类化合物d-葡萄糖、à-D-葡萄糖苷以及脂类化合物棕榈酸、丙酸、丁酸、硬脂酸等含量降低。结论：在气虚血瘀证早期,氨基酸、糖代谢与脂类代谢紊乱,三者相互作用,引起能量代谢中三羧酸循环平衡被破坏,柠檬酸含量下降。这些病理改变可能进一步加重冠心病气虚血瘀证,其中柠檬酸、葡萄糖、硬脂酸、棕榈酸、甘油、醋酸等化合物浓度变化较大,这些代谢物的变化模式有望成为临床诊疗冠心病气虚血瘀证的参考指标,并为研究证候的客观化提供新的思路。     

基于GC-MS代谢组学技术的狭叶柴胡解热作用研究

目的 采用GC-MS代谢组学技术研究狭叶柴胡的解热作用,并初步探讨其作用机制。方法 SD大鼠随机分为对照组,模型组,狭叶柴胡提取物高、中、低剂量（生药40、20、10 g/kg）组、阿司匹林（100 mg/kg）阳性对照组,干酵母诱导SD大鼠发热后分2次给药。造模后5～10 h每隔1 h观察大鼠的体温变化;采集造模后10 h大鼠血浆,进行GC-MS代谢组学分析,并寻找发热的潜在生物标志物。结果 阿司匹林具有很好的解热效果,在给药2 h后体温即与对照组无显著差异（P＞0.05）。不同剂量的狭叶柴胡提取物使发热大鼠的体温有不同程度的降低,解热作用与剂量相关;高剂量组起效较快,在第1次给药后1 h即与模型组有显著差异（P＜0.01）;中剂量组在第2次给药后1 h效果最好,体温与对照组相比无显著差异（P＞0.05）;低剂量组大鼠体温在各个时间点与模型组相比均无显著差异,体温曲线波动较大,表明药物在该剂量虽可干预体温的升高,但未产生明显效果。通过代谢组学技术指认了与发热相关的17个潜在生物标志物,且不同剂量狭叶柴胡提取物均能调节这些标志物的改变。结论 狭叶柴胡具有良好的解热作用且与剂量相关,其可能从酶抑制、神经递质、糖脂代谢、氨基酸及能量代谢等多层面协同发挥作用,具有多靶点性。     

代谢组学技术在毒理学研究中的应用进展

代谢组学是继基因组学、转录组学及蛋白质组学之后发展起来的一门组学学科,其研究对象是生命活动链条下游的代谢物的集合---代谢组。虽然已经经过了十几年的发展,但代谢组学在实验技术、数据分析及结果的注释各个环节都还有许多问题需要加以解决。任何外源性物质的作用都会导致生物体内代谢平衡的破坏,从而使得体内代谢物质发生变化。因此,利用代谢组学技术研究药物的毒理学性质自然就成为代谢组学的主要应用领域之一,也是应用最早的领域。代谢组学在先导化合物的早期毒性筛选、药物的临床前毒性以临床药物的毒性评价等方面都已经得到了广泛的应用,所研究的对象涵盖了人体、实验动物、细胞和斑马鱼等替代模型。代谢组学结果的深入阐释也在发展之中。本文对代谢组学技术及其在毒理学研究中的应用进展进行了综述。     

儿童病毒性肺炎风寒郁肺证代谢组学研究

目的?分析病毒性肺炎风寒郁肺证患儿的血清代谢指纹图谱,探讨中医证候的组学代谢物研究方法。方法?30例风寒郁肺证患儿、30例健康儿童血清进行气相色谱-质谱检测,通过在线分析平台XCMS Online预处理、NIST数据库和已有标准品进行验证、MetaboAnalyst确定差异性代谢物及代谢通路。结果?有机酸、氨基酸、脂类等差异性代谢物及代谢通路的确定,能够良好区分风寒郁肺证与健康儿童组。与健康儿童相比,风寒郁肺证患儿血清中丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、牛磺酸、赖氨酸等多种有机酸、氨基酸上调;氨基丁酸、乙醇酸、甘油、1-棕榈酸单甘油酯、胆固醇、葡萄糖等下调,主要涉及丙氨酸、甘氨酸、牛磺酸代谢、氨酰tRNA合成和赖氨酸降解等5条代谢通路异常。结论?病毒性肺炎风寒郁肺证存在差异代谢物及代谢通路,这可能与病毒感染导致的机体的多个能量代谢通路相关;代谢组学可为类似中医证候客观化研究提供借鉴。      

辛弗林对CUMS大鼠抑郁样行为和血清代谢组学的影响

目的 通过观察分析大鼠慢性应激引起的行为学和血清代谢组变化以及辛弗林抗抑郁的有效治疗,发现潜在的抗抑郁新药先导化合物和生物标志物。方法 将24只大鼠分为正常组、模型组和辛弗林组。模型组为6周慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠,用体质量变化、糖水偏好、开场实验作为抑郁评估指标,后2周辛弗林(Syn 20 mg/kg)干预治疗后采集大鼠血清进行气相色谱-质谱联用(GC-MS/MS)测定,研究CUMS大鼠血清内源性代谢物变化,以及辛弗林的干预作用,寻找其抗抑郁潜在的先导化合物和生物标志物,并找到相关靶向代谢通路。结果 辛弗林干预后,在增加CUMS大鼠体质量、提高糖水偏好率、增加开场运动总距离和理毛次数的同时,还能逆转CUMS大鼠血清中磷酸乙醇胺、苯甲酸、胆固醇、谷氨酸等14种代谢物的变化使其趋于正常组,并发现谷氨酰胺和谷氨酸的代谢、缬氨酸和异亮氨酸的生物合成等9条主要牵涉辛弗林的靶向代谢通路。结论 辛弗林可能通过调节谷氨酰胺和谷氨酸的代谢、缬氨酸和异亮氨酸的生物合成等生物学途径发挥对CUMS大鼠抑郁样行为的调正作用。      

MK-801对大鼠行为学及认知功能的影响

目的 观察非竞争性NMDA受体拮抗剂地卓西平马来酸盐(MK-801)对大鼠的行为活动和认知功能的影响.方法 实验组连续2周腹腔注射MK-801,对照组注射等容量生理盐水.分别评估注射后第1、5、10、14天大鼠的行为学改变;停药后第1、2、3、4天与停药后第12、13、14、15天分别进行Morris水迷宫实验,比较两组的定位航行和空间探索时间.结果 两组动物的运动量、共济失调、刻板行为评分均实验组高于对照组;停药后第1、2、3天,实验组大鼠逃逸时间高于对照组(P＜0.01),停药后第12、13、14天变化无统计学意义(P＞0.05);实验组大鼠在停药第4天空间探索时间低于对照组(P＜0.01),同时也低于停药后第15天(P＜0.01);第15天实验组与对照组之间的停留时间差异无统计学意义(P＞0.05).结纶 MK-801可诱发大鼠出现精神分裂症症状,且可致使大鼠的学习记忆功能下降,但此影响并非不可逆的.     

高脂血症大鼠病程进展的尿液代谢组学研究

目的 采用超高效液相色谱-飞行时间质谱代谢组学法动态观察高脂血症大鼠造模过程中尿液的代谢轮廓的改变,寻找高脂血症演进过程中的生物标志物.方法 将SD大鼠分成正常对照组和模型组,运用高脂乳剂灌胃法复制高脂血症大鼠模型,并收集不同时间点的尿样,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱仪检测并进行多元数据分析.结果 随着造模时间的延长,高脂血症大鼠血浆代谢轮廓呈现动态演变,与正常组相比,模型组3-羟基丁酸、乙酸乙酰、丙酮酸、肌酐、Ⅳ-氧化烟酰胺明显升高,而柠檬酸、马尿酸、牛磺酸以及3-吲哚硫酸、肌酸、乌头酸明显下降.结论 在高脂血症大鼠病程进展过程中,出现了能量代谢紊乱、炎症和氧化应激.该研究加深了对高脂血症发病机制的认识,为研发有效防控高脂血症策略提供科学依据.     

MK-801诱发的小鼠精神分裂症样症状与脑内Parvalbumin异常表达的关系

目的 以中等剂量的MK-801腹腔注射制作小鼠精神分裂症样模型,检测小鼠脑内钙结合蛋白Parvalbumin（小白蛋白,PV）的异常表达部位,探讨与已知精神分裂症相关脑区的关系,为深入研究精神分裂症的发病机制提供形态学和神经化学依据.方法 雄性成年昆明小鼠,随机分为生理盐水组和MK-801组.用Sams-Dodd刻板行为评分和一次性被动回避反应（OPAR）检测小鼠的行为学改变;用免疫组织化学染色法检测各组小鼠脑内PV蛋白的表达情况.结果 ① MK-801组小鼠刻板行为评分明显增高（P＜0.01）,记忆能力显著下降（P＜0.01）,符合精神分裂症样模型小鼠的表现.②MK-801组小鼠在前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区PV蛋白的表达明显减少.结论 隶属边缘系统的前额皮质、海马、纹状体、杏仁核及丘脑网状核等脑区内的PV阳性神经元数量的减少可能与精神分裂症的病理生理学机制密切相关.     

基于气相色谱质谱联用仪的糖尿病胃轻瘫大鼠血清代谢组学研究

目的:分析2型糖尿病胃轻瘫组大鼠与正常组大鼠血清分子代谢物代谢轮廓的变化?方法:应用气相色谱和质谱联用仪方法,通过偏最小二乘法-判别分析方法(partial least squares linear discriminant analysis,PLS-DA)和正交偏最小二乘法-判别分析方法(orthogonal partial least squares linear discriminant analysis,OPLS-DA),鉴别糖尿病胃羟瘫组和正常组间血清小分子代谢物的区别?结果:两组血清的多种氨基酸成分有显著差异,与正常组比较,糖尿病胃轻瘫组苏氨酸?丙氨酸?甘氨酸?肌酸及苯丙氨酸含量明显下降,尿酸含量明显上升?结论:甘氨酸?肌酸?苯丙氨酸等多种氨基酸含量的变化可能与糖尿病胃轻瘫的发病机制有关?     

基于LC-MS的代谢组学分析流程与技术方法

代谢组学是继基因组学、转录组学、蛋白质组学之后兴起的又一新的组学研究分支,但其研究技术方法一直以来都是影响代谢组学发展的瓶颈之一.超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术结合化学计量学比较好地实现了对大量样品和微量代谢物的快速定性、定量分析,极大地推动了代谢组学的发展.本文按照代谢组学分析流程综述了LC-MS与化...     

2型糖尿病患者尿液的代谢组学研究

目的 从代谢组学角度分析并寻找2型糖尿病（T2DM）患者可能的代谢标记物。方法 选取30例初诊、或有糖尿病史经药物治疗控制不理想且无并发症的T2DM 患者,另选取30例性别、年龄匹配的健康者为正常对照。收集清晨空腹中段尿,以气相色谱- 质谱联用（GC-MS）技术对尿液样本进行代谢图谱分析,正交偏最小二乘法判别研究尿液内源性化合物在两组间的差异。结果 T2DM 组和正常对照组尿液代谢谱明显分离。与正常对照组比较,T2DM 组尿液2,3,4- 三羟基丁酸、肌醇、D- 葡萄糖、D- 葡萄糖酸及尿素含量升高（P＜0.05 或0.01）,马尿酸含量减少（P＜0.01）。结论 代谢组学检查提示T2DM 患者尿液中代谢标志物为2,3,4- 三羟基丁酸、肌醇、马尿酸、D-葡萄糖、D- 葡萄糖酸及尿素,观察这些标志物含量的变化有助于T2DM 的临床诊断及发病机制研究。     

骨髓增生异常综合征中医证型与代谢组学的相关性研究

[目的]研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者不同中医证型血清中小分子代谢物质的表达差异,以探索代谢组学在MDS中医证候学研究中的应用.[方法]根据有关中医辨证标准对60例MDS患者进行中医辨证,分为脾肾阴虚蕴毒型和脾肾阳虚蕴毒型两组,采用代谢组学及智能计算等新型研究方法,对两组不同证型患者生化代谢物质的色谱-质谱图进行判别分析,构建MDS中医证型的生化代谢指纹谱.[结果]MDS患者的色谱峰表达低于正常人,对正常对照组与MDS组的色谱峰表达进行两样本均数比较,共得到20个色谱峰表达有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),应用代谢组学构建的MDS判别方程在与正常人进行判别时的自身验证总体准确率达到92％,交互验证总体准确率达到90％;脾肾阳虚蕴毒型组的色谱峰表达明显低于脾肾阴虚蕴毒型组,对两组的色谱峰表达进行两样本均数比较,共得到18个色谱峰表达,有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),运用代谢组学构建的中医证型判别方程在自身判别和交互判别中的总体准确率均为93.33％.[结论] MDS患者的中小分子代谢物质的表达明显低于正常人,脾肾阳虚蕴毒型组的代谢物质的表达明显低于脾肾阴虚蕴毒型组,通过代谢组学分析建立的判别方程具有优异的判别MDS、正常人的能力;揭示了MDS两组中医证型的代谢差异.