基于糖尿病骨质疏松细胞模型探究ELAVL1对破骨细胞铁死亡的调控作用

目的 探究胚胎致死性异常视觉样蛋白1（ELAVL1）是否通过破骨细胞死亡调控糖尿病骨质疏松症（DOP）。方法 选取2021年1月—2023年2月长沙市中心医院就诊的50例DOP患者和50例糖尿病但不伴随骨质疏松的患者作为研究对象,分别作为DOP组和对照组。比较两组患者血清ELAVL1、GPX4、Nrf2、ACSL4水平差异,分析ELAVL1与铁死亡相关基因（GPX4、Nrf2、ACSL4）的相关性。采用50 ng/mL RANKL孵育小鼠骨髓源性巨噬细胞RAW264.7以诱导破骨分化。对DOP组进行亚分组,以患者血清ELAVL1含量的平均值（14.94 ng/mL）为标准,分为ELAVL1低表达组（血清ELAVL1<14.94 ng/mL,28例）及ELAVL1高表达组（血清ELAVL1> 14.94 ng/mL,22例）。将破骨细胞分为对照组、高糖组、高糖+sh-NC组、高糖+sh-ELAVL1组,比较各组ELAVL1、GPX4、核因子红细胞系2相关因子2（Nrf2）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ACSL4）、活性氧、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、总铁含量、铁离子（Fe²⁺）表达量、线粒体膜电位。结果 ELAVL1高表达组与ELAVL1低表达组性别构成、年龄、糖尿病病程、BMI比较,差异均无统计学意义（P >0.05）。ELAVL1高表达组T-score值低于ELAVL1低表达组（P <0.05）,血清β-CTX、血清PINP高于ELAVL1低表达组（P <0.05）。DOP组血清GPX4、Nrf2比对照组低（P <0.05）,ACSL4比对照组高（P <0.05）。经Pearson相关性分析结果表明,DOP患者血清ELAVL1表达与ACSL4呈正相关（r =0.689,P <0.05）,与GPX4、Nrf2呈负相关（r =-0.312和-0.447,均P <0.05）,血清ELAVL1与ACSL4呈正相关（r =0.689,P <0.05）,血清ELAVL1与GPX4呈负相关（r =-0.559,P <0.05）,血清ELAVL1与Nrf2呈负相关（r =-0.669,P <0.05）。高糖组GPX4、Nrf2 mRNA较对照组降低（P <0.05）,ELAVL1、ACSL3 mRNA较对照组升高（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组GPX4、Nrf2 mRNA较高糖+sh-NC组升高（P <0.05）,ELAVL1、ACSL3 mRNA较高糖+sh-NC组降低（P <0.05）。高糖组GPX4、Nrf2蛋白较对照组降低,ELAVL1、ACSL4蛋白较对照组升高（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组GPX4、Nrf2蛋白较高糖+sh-NC组升高（P <0.05）,ELAVL1、ACSL4蛋白较高糖+sh-NC组降低（P <0.05）。高糖组总铁含量及Fe²⁺表达量较对照组升高（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组较高糖+sh-NC组降低（P <0.05）。高糖组MDA较对照组高（P <0.05）,GSH较对照组低（P <0.05）,高糖+sh-ELAVL1组MDA较高糖+sh-NC组低,GSH较高糖+sh-NC组高（P <0.05）。结论 高糖条件诱导破骨细胞铁死亡,ELAVL1与DOP铁死亡有关,敲低ELAVL1可抑制高糖诱导的破骨细胞铁死亡。     

SIRT3/FOXO3通路在肺癌A549细胞放疗抵抗中的作用机制研究

目的 探讨沉默信息调节因子3（SIRT3）/叉头转录因子O3（FOXO3）通路在肺癌A549细胞放疗抵抗中的作用。方法 体外培养肺癌A549细胞，设置对照组（A549细胞）、放疗组（A549细胞+X射线照射）、SIRT3抑制剂（3-TYP）组（A549细胞+50 μmol/L 3-TYP）、X射线+3-TYP组（A549细胞+X射线照射+50 μmol/L 3-TYP）。采用CCK-8法检测各组A549细胞增殖情况；流式细胞分析仪检测各组A549细胞凋亡情况和细胞周期分布；Western blotting检测A549细胞中SIRT3、FOXO3、Bcl-2、Bax蛋白相对表达量。结果 各组A549细胞培养24 h、48 h、72 h的OD值比较，经重复测量设计的方差分析：①不同时间点的A549细胞OD值比较，差异有统计学意义（P <0.05）；②不同组间的A549细胞OD值比较，差异有统计学意义（P <0.05）；③各组A549细胞OD值变化趋势比较，差异无统计学意义（P >0.05）。放疗组、X射线+3-TYP组A549细胞凋亡率较对照组升高（P <0.05），3-TYP组较对照组降低（P <0.05），3-TYP组、X射线+3-TYP组较放疗组降低（P <0.05），X射线+3-TYP组较3-TYP组升高（P <0.05）。放疗组、X射线+3-TYP组G0/G1期A549细胞较对照组增加（P <0.05），S、G2/M期A549细胞较对照组减少（P <0.05）；3-TYP组G0/G1期A549细胞较对照组降低（P <0.05），S、G2/M期A549细胞较对照组增加（P <0.05）；3-TYP组、X射线+3-TYP组G0/G1期A549细胞较放疗组减少（P <0.05），S、G2/M期A549细胞较放疗组增加（P <0.05）；X射线+3-TYP组G0/G1期A549细胞较3-TYP组增加（P <0.05），S、G2/M期A549细胞较3-TYP组减少（P <0.05）。放疗组、X射线+3-TYP组A549细胞SIRT3、FOXO3、Bax蛋白相对表达量较对照组升高（P <0.05），Bcl-2蛋白相对表达量较对照组降低（P <0.05）；3-TYP组A549细胞SIRT3、FOXO3、Bax蛋白相对表达量较对照组降低（P <0.05），Bcl-2蛋白相对表达量较对照组升高（P <0.05）；3-TYP组、X射线+3-TYP组A549细胞SIRT3、FOXO3、Bax蛋白相对表达量较放疗组降低（P <0.05），Bcl-2蛋白相对表达量较放疗组升高（P <0.05）；X射线+3-TYP组A549细胞中SIRT3、FOXO3、Bax蛋白相对表达量较3-TYP组升高（P <0.05），Bcl-2蛋白相对表达量较3-TYP组降低（P <0.05）。结论 肺癌A549细胞发生放疗抵抗可能与SIRT3/FOXO3通路受抑制有关。     

血管紧张素Ⅱ1型受体在氧化三甲胺促进ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化中的作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）在氧化三甲胺（TMAO）促动脉粥样硬化中的作用。方法 用分子对接预测TMAO与AT1R可能的相互作用。将21只6周龄ApoE^-/-小鼠随机分为对照组、TMAO组、TMAO+替米沙坦组,每组7只。TMAO组在饲料中加1%胆碱复制高TMAO血症模型。TMAO+替米沙坦组采用替米沙坦10 mg/（kg·d）灌胃治疗。12周后采血,采用高效液相色谱串联质谱法测定血浆TMAO含量;油红O染色确定主动脉根部斑块面积;免疫组织化学法检测斑块内炎症因子单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）和白细胞介素-6（IL-6）的浸润;构建AT1R表达质粒,转染293T细胞,加入TMAO（200 μmol/L）或TMAO（200 μmol/L）+替米沙坦（1 μmol/L）作用0、5、10、15、30和60 min,检测AT1R下游信号通路ERK、PKC磷酸化活化情况。结果 分子对接预测到TMAO与AT1R之间的存在直接结合位点。3组小鼠主动脉根部斑块面积占比、斑块内MCP-1和IL-6表达比较,差异有统计学意义（P <0.05）;TMAO组较对照组主动脉根部斑块面积占比增加（P <0.05）,斑块内MCP-1和IL-6表达升高（P <0.05）,而替米沙坦组较TMAO组主动脉根部斑块面积占比下降（P <0.05）,斑块内MCP-1和IL-6表达降低（P <0.05）。3组主动脉组织的AT1R、p-ERK1/2、p-PKC蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;TMAO组较对照组升高（P <0.05）,而替米沙坦组较TMAO组下降（P <0.05）。在转染AT1R质粒的293T细胞中,TMAO组（200 μmol/L）不同时间点的p-ERK1/2、p-PKC蛋白相对表达量比较,差异有统计学意义（P <0.05）;与0 min比较,作用15和30 min时p-ERK1/2蛋白相对表达量升高（P <0.05）,作用10和15 min时p-PKC蛋白相对表达量升高（P <0.05）。而替米沙坦（1 μmol/L）作用后,各个时间点的p-ERK1/2和p-PKC蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 TMAO加重ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化机制可能包含了其对AT1R的作用。     

GPR30对大鼠椎间盘退行性病变的作用及其机制研究

目的 探讨G蛋白偶联受体30（GPR30）通过Nrf2/ARE信号通路抑制白细胞介素1β（IL-1β）诱导的大鼠椎间盘髓核细胞的凋亡、炎症反应和氧化应激。方法 使用IL-1β处理大鼠椎间盘髓核细胞复制体外椎间盘退变模型,将椎间盘髓核细胞分为空白对照（Control）组、IL-1β组、IL-1β+过表达GPR30阴性对照质粒（oe-NC）组、IL-1β+过表达GPR30质粒（oe-GPR30）组、IL-1β + oe-GPR30+干扰Nrf2表达阴性对照质粒（si-NC）组、IL-1β + oe-GPR30+干扰Nrf2表达质粒（si-Nrf2）组,IL-1β的处理浓度为10 ng/mL。实时荧光定量聚合酶链反应检测GPR30 mRNA表达;Western boltting检测GPR30、抗重组与合成蛋白（Nrf2）和抗醌NADH脱氢酶（NQO1）和抗血红素加氧酶1（HO-1）蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况;酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和IL-6水平;使用ELISA法检测活性氧（ROS）、分光光度法检测超氧化物歧化酶（SOD）水平,比色法检测丙二醛（MDA）水平。结果 IL-1β组髓核细胞GRP30 mRNA、蛋白相对表达量较Control组降低（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高（P <0.05）。IL-1β组髓核细胞核中Nrf2蛋白相对表达量较Control组升高（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高（P <0.05）。IL-1β组Nrf2、HO-1及NQO1蛋白相对表达量较Control组降低（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高（P <0.05）。IL-1β组髓核细胞Nrf2蛋白相对表达量较Control组降低（P <0.05）,IL-1β+ oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组升高（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组降低（P <0.05）。IL-1β组髓核细胞凋亡率较Control组升高（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组降低（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组较IL-1β + oe-GPR30+si-NC组升高（P <0.05）。IL-1β组TNF-α、IL-6水平较Control组升高（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30组较IL-1β + oe-NC组降低（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组升高（P <0.05）。IL-1β组ROS、MDA水平较Control组升高（P <0.05）,SOD水平较Control组降低（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30组ROS、MDA水平较IL-1β + oe-NC组降低,SOD水平较IL-1β + oe-NC组升高（P <0.05）,IL-1β + oe-GPR30 + si-Nrf2组ROS、MDA水平较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组升高,SOD水平较IL-1β + oe-GPR30 + si-NC组降低（P <0.05）。结论 上调GPR30表达激活Nrf2/ARE信号通路,能抑制IL-1β诱导的髓核细胞凋亡、炎症和氧化应激反应。     

早产儿脑损伤的危险因素分析

目的 探讨早产儿脑损伤的危险因素。方法 选取2016年9月—2019年1月出生且生后就诊于大连医科大学附属第二医院新生儿重症监护病房的204例胎龄≥196 d的早产儿。将早产儿分为脑损伤组和非脑损伤组。比较两组早产儿的基本资料、胎儿期因素、新生儿期因素，比较两组产妇的产科资料。结果 脑损伤组胎龄、出生体重较非脑损伤组低（P <0.05）。两组产妇有无患妊娠期高血压疾病、妊娠期糖尿病、妊娠期感染比较，差异有统计学意义（P <0.05）。两组有无未足月胎膜早破> 18 h、脐带异常、多胎妊娠比较，差异有统计学意义（P <0.05）。两组有无新生儿窒息、新生儿弥散性血管内凝血（DIC）、新生儿生后感染、肺源性呼吸衰竭、机械通气及需要输血比较，差异有统计学意义（P <0.05）。脑损伤组血红蛋白、红细胞压积较非脑损伤组高，游离甲状腺素较非脑损伤组低（P <0.05）。多因素回归分析显示，胎龄< 34周［R=2.561（95% CI：1.025，6.402），P <0.05］、血红蛋白浓度偏高［R=1.078（95% CI：1.040，1.118），P <0.05］、新生儿生后感染［R=4.047（95% CI：1.293，12.836），P <0.05］、新生儿窒息［R=8.385（95% CI：1.282，54.825），P <0.05］、DIC［R=22.005（95% CI：2.220，218.163），P <0.05］、妊娠期糖尿病［OR=3.102（95% CI：1.274，7.553），P <0.05］、妊娠期感染［R=4.401（95% CI：1.133，17.102），P <0.05］、机械通气［R=6.979（95% CI：1.425，34.173），P <0.05］是早产儿脑损伤的危险因素。结论 引起早产儿脑损伤的危险因素繁多。新生儿胎龄< 34周、血红蛋白浓度偏高、感染、窒息、DIC、机械通气、妊娠期糖尿病、妊娠期感染是早产儿脑损伤的独立危险因素。其中，DIC对早产儿脑损伤影响最大。     

右美托咪定对脓毒症小鼠认知功能及HSP70表达的影响

目的 探讨右美托咪定（Dex）对脓毒症小鼠认知功能及热休克蛋白70（HSP70）表达的影响，为其脑保护机制的研究提供参考。方法 将80只C57BL/6小鼠随机分为对照组（CON组）、单纯Dex组（Dex组）、脓毒血症组（LPS组）和Dex +脓毒血症组（D + L组），每组20只。首先，Dex组和D + L组腹腔注射Dex 25 μg/kg，CON组和LPS组腹腔注射等剂量的生理盐水；30 min后LPS组和D + L组腹腔注射5 mg/kg脂多糖（LPS）复制脓毒血症模型，CON组和Dex组腹腔注射等剂量的生理盐水。采用Morris水迷宫实验评估小鼠学习记忆能力，酶联免疫吸附试验检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平，化学比色法检测海马组织过氧化物歧化酶（SOD）活性和谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）水平，苏木精-伊红染色观察海马CA1区病理变化，免疫组织化学染色和实时荧光定量聚合酶链反应检测海马HSP70蛋白、mRNA表达。结果 各组小鼠第1、2、3、4、5天逃避潜伏期比较，经重复测量设计的方差分析，结果 ①不同时间点的逃避潜伏期比较，差异有统计学意义（P <0.05）；②各组小鼠的逃避潜伏期比较，差异有统计学意义（P <0.05），LPS组较CON组延长，D + L组较LPS组缩短；③各组小鼠逃避潜伏期变化趋势比较，差异有统计学意义（P <0.05）。各组小鼠游泳速度比较，差异无统计学意义（P >0.05）。LPS组目标象限停留时间短于CON组（P <0.05），D + L组长于LPS组（P <0.05）；LPS组穿越平台次数少于CON组（P <0.05）；D + L组多于LPS组（P <0.05）。LPS组血清TNF-α、IL-1β水平较CON组升高（P <0.05），D + L组较LPS组降低（P <0.05）。LPS组GSH、SOD水平较CON组降低（P <0.05），MDA水平较CON组升高（P <0.05），D + L组GSH、SOD水平较LPS组升高（P <0.05），MDA水平较LPS组下降（P <0.05）。LPS组HSP70蛋白阳性表达率较CON组升高（P <0.05），D + L组较LPS组升高（P <0.05），Dex组与CON组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。LPS组HSP70 mRNA相对表达量较CON组升高（P <0.05），D + L组较LPS组升高（P <0.05）；Dex组与CON组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。结论 Dex能够降低脓毒症小鼠体内炎症和氧化应激水平，改善认知功能，其机制可能与上调HSP70表达有关。     

基于microRNA-92a-3p靶向SIRT1调控氧糖剥夺再灌注诱导脑微血管内皮细胞炎症反应的作用机制研究

目的 探讨基于microRNA-92a-3p（miR-92a-3p）靶向调控SIRT1氧糖剥夺再灌注（OGD/R）诱导小鼠脑微血管内皮细胞（bEnd.3）炎症反应的作用机制。方法 实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）测定miR-92a-3p、SIRT1、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）mRNA的表达；Western blotting明确SIRT1、核转录因子-κB（NF-κB）p65、磷酸化NF-κB（p-NF-κB）p65、TNF-α和IL-1β蛋白的表达；双荧光素酶报告基因验证miR-92a-3p与SIRT1靶向关系；划痕实验检测bEnd.3细胞的迁移能力。结果 OGD/R组miR-92a-3p相对表达量较对照组升高（P <0.05）。M_SIRT1 WT+mimics+TK组荧光素酶活性较M_SIRT1 WT+mimics NC+TK组低（P <0.05）。OGD/R组SIRT1蛋白和mRNA相对表达量较对照组降低（P <0.05），OGD+92a抑制剂组较OGD+92a抑制剂内参组升高（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组NF-κBp65/p-NF-κBp65蛋白较模拟物内参组高，SIRT1蛋白和mRNA表达较模拟物内参组低（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组IL-1β、TNF-α蛋白和mRNA相对表达量较模拟物内参组高（P <0.05）。miR-92a-3p模拟物组伤口愈合率较模拟物内参组低（P <0.05）。结论 miR-92a-3p通过靶向抑制SIRT1表达，促进OGD/R诱导的脑微血管内皮细胞炎症反应。     

CTRP9对远端缺血预处理心肌梗死模型大鼠心肌缺血再灌注致脑损伤的保护作用及其机制研究

目的 探讨CTRP9对远端缺血预处理心肌梗死模型大鼠心肌缺血再灌注致脑损伤的保护作用。方法 选取40只雄性SD大鼠，随机分为4组：假手术组（NS组）、心肌缺血再灌注组（NIR组）、缺血预处理组（NIPost组）及缺血预处理+ CTRP9抑制剂组（NIPostI组），每组10只。采用苏木精-伊红染色观察大鼠脑组织病理学变化，免疫组织化学法检测大鼠脑组织凋亡因子、炎症因子的表达，TUNEL法检测大鼠脑组织细胞凋亡，Western blotting检测大鼠心肌组织p-AMPK/t-AMPK、LC3Ⅰ/Ⅱ及P62蛋白的表达。结果 ①HE染色结果显示，NS组皮层的神经元胞浆十分丰富，核呈圆形，碱染后呈蓝色，分布均匀且排列整齐；NIR组神经元结构受损，分布不均匀，胞浆出现空泡，胞核固缩，碱染后出现了淡红色；NIPost组细胞结构大多恢复正常，大部分神经元包膜完整，胞核清晰可见；NIPostI组经CTRP9抑制剂干预后，预处理的保护效应消失。②NIR组、NIPost组及NIPostI组脑组织Bax、IL-6、IL-8表达水平高于NS组（P <0.05），Bcl-2、IL-10表达水平低于NS组（P <0.05）；NIPost组较NIR组Bax、IL-6、IL-8表达水平降低（P <0.05），Bcl-2、IL-10表达水平升高（P <0.05）；NIPostI组较NIPost组Bax IL-6、IL-8表达水平升高（P <0.05），Bcl-2、IL-10表达水平降低（P <0.05）。③NIR组、NIPost组和NIPostI组脑组织凋亡细胞多于NS组（P <0.05）；NIPost组和NIPostI组较NIR组凋亡细胞减少（P <0.05）。NIPost组和NIPostI组比较，差异无统计学意义（P >0.05）。④NIR组、NIPost组及NIPostI组心肌组织p-AMPK/t-AMPK蛋白相对表达量低于NS组（P <0.05），LC3Ⅰ/Ⅱ和P62蛋白相对表达量高于NS组（P <0.05）；NIPost组较NIR组p-AMPK/t-AMPK蛋白相对表达量升高（P <0.05），LC3Ⅰ/Ⅱ和P62蛋白相对表达量降低（P <0.05）；NIPostI组较NIPost组p-AMPK/t-AMPK蛋白相对表达量降低（P <0.05），LC3Ⅰ/Ⅱ和P62蛋白相对表达量升高（P <0.05）。结论 远端缺血预处理可缓解大鼠心肌缺血再灌注所致脑损伤。CTRP9可通过激活AMPK信号通路，参与远端缺血预处理对心肌缺血再灌注所致脑损伤的保护过程。CTRP9水平升高有益于防治心肌梗死。     

Nrf2调控小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除中的作用机制

目的 探讨核因子红系相关因子2（Nrf2）介导的小胶质细胞功能转化在脑出血后血肿清除和功能恢复中的作用机制。方法 通过注射Ⅳ型胶原酶复制小鼠脑出血模型。C57BL/6小鼠34只,随机分为对照组、脑出血组、脑出血+红曲素组、脑出血+血脂康组;雄性Nrf2基因敲除小鼠（Nrf2^-/-）C57BL/6小鼠8只,为脑出血+Nrf2^-/-组。采用改良Garcia评分评价神经功能;检测血红蛋白水平;采用Western blotting测定Nrf2、CD80、CD206、促炎因子肿瘤坏死因子（TNF-α）、髓样细胞上表达的I型受体（Trem1）和抗炎因子脑源性神经营养因子（BDNF）、髓样细胞上表达的Ⅱ型受体（Trem2）表达,采用免疫荧光测定Nrf2、CD80、CD206、Trem1和Trem2;采用Pearson法对Trem1、Trem2与改良Garcia评分,Trem2与血红蛋白进行相关性分析。结果 与脑出血组比较,脑出血+红曲素组及脑出血+血脂康组的血红蛋白水平降低（P <0.05）,改良Garcia评分增加（P <0.05）,Trem2、CD206、BDNF相对表达量增加（P <0.05）,Trem1、CD80、TNF-α相对表达量下降（P <0.05）;脑出血+Nrf2^-/-组血红蛋白水平升高（P <0.05）,改良Garcia评分降低（P <0.05）,Trem2、CD206、BDNF相对表达量降低（P <0.05）,Trem1、CD80、TNF-α相对表达量升高（P <0.05）。Trem1蛋白表达与改良Garcia评分呈负相关（r =-0.956,P <0.05）,Trem2蛋白表达与改良Garcia评分呈正相关（r =0.936,P <0.05）。Trem2蛋白表达与血红蛋白呈负相关（r =-0.473,P <0.05）。结论 Nrf2可通过调控小胶质细胞的功能转化,影响脑出血后血肿清除;Nrf2激动剂——红曲素及血脂康可通过上调Trem2、CD206、BDNF的表达强化小胶质细胞的吞噬功能,促进血肿产物的清除并促进神经修复;同时可下调Trem1及CD80、TNF-α的表达,抑制小胶质细胞的炎症反应,减轻出血后血肿及神经毒性而发挥神经保护作用。     

老年胃肠道肿瘤切除术患者术后认知功能障碍的危险因素分析

目的 筛选老年胃肠道肿瘤切除术患者术后认知功能障碍（POCD）的相关危险因素。方法 选取2018年6月—2020年6月中南大学湘雅三医院在全身麻醉下行择期胃肠道肿瘤切除术的老年患者221例。使用简易精神状态量表（MMSE）评估认知功能。根据患者是否发生POCD分为POCD组和非POCD组;根据患者发生POCD严重程度分为轻度POCD组、重度POCD组和非POCD组。分别记录各组患者术前、术中和术后的临床资料,并用单因素和多因素Logistic回归分析危险因素。结果 POCD组吸烟率及饮酒率高于非POCD组（P <0.05）,POCD组与非POCD组年龄、性别构成、BMI、ASA状况、受教育程度、术前MMSE评分和病史比较,差异均无统计学意义（P >0.05）。POCD组术前K⁺水平和术后30 d EQ-5D评分较非POCD组低（P <0.05）,POCD组术后1 d疼痛［静息/活动视觉模拟评分法（VAS）评分≥ 4分］发生率、术中失血量≥1 000 ml发生率、术后入ICU支持治疗率较非POCD组高（P <0.05）,POCD组与非POCD组术前握力、术前白细胞（WBC）、术前血红蛋白、术前Alb、手术时间、是否选择TAP、术中保温差异、非甾体类药物和右美托咪定治疗史比较,差异无统计学意义（P >0.05）。重度POCD、轻度POCD与非POCD组患者术前高血压病发生率、ICU支持治疗率、术前WBC≥10×10⁹/L发生率、术中失血量≥500 ml发生率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,POCD组较非POCD组患者高。单因素Logistic回归分析显示,术后1 d静息状态下VAS评分≥4分、术后1 d活动状态下VAS评分≥4分、饮酒和术中失血量≥1 000 ml是早期POCD的危险因素（P <0.05）。术后1 d静息状态下VAS评分≥4分、术后1 d活动状态下VAS评分≥4分、术前WBC水平≥10×10⁹/L和术中失血量≥500 ml,是重度POCD的危险因素（P <0.05）。多因素一般Logistic回归分析结果表明,术后1 d静息状态下VAS评分≥ 4分［R=6.445（95% CI：2.621,15.845）,P <0.05］、术后1 d活动状态下VAS评分≥4分［R=6.037（95% CI：2.996,12.164）,P <0.05］、饮酒［R=2.320（95% CI：1.091,4.937）,P <0.05］和术中失血量≥1 000 ml［R=11.631（95% CI：1.172,115.464）,P <0.05］是早期POCD的危险因素。术后1 d静息状态下VAS评分≥ 4分［R=9.583（95% CI：3.086,29.762）,P <0.05］、术后1天活动状态下VAS评分≥ 4分［R=7.655（95% CI：2.576,22.743）,P <0.05］、术前WBC水平≥10×10⁹/L［R=11.952（95% CI：1.686,84.758）,P <0.05］、术中失血量≥500 ml［R=7.235（95% CI：1.943,26.942）,P <0.05］和高血压病史［R=2.753（95% CI：1.103,6.866）,P <0.05］是重度POCD的危险因素。结论 术后第1天VAS评分高、饮酒和术中失血量>1 000 ml是老年胃肠道肿瘤切除术患者发生早期POCD的危险因素。术后第1天VAS评分高、术前WBC>10×10⁹/L、术中失血量>500 ml和合并高血压病是老年胃肠道肿瘤切除术患者发生重度POCD的危险因素。     

中药呆聪液对老龄痴呆大鼠模型脑组织M1,M3受体mRNA水平影响的研究

目的探讨呆聪液对痴呆大鼠模型脑内M1、M3受体基因表达的影响。方法选用22月龄的老龄大鼠，用海人酸破坏脑基底核法，造成学习和记忆功能障碍的痴呆动物模型，通过水迷宫法和反转录聚合酶链反应（RT-PCR）观察了呆聪液时痴呆模型大鼠学习记忆能力和脑内M1，M3受体基因表达的影响。结果老龄痴呆模型大鼠学习记忆能力下降，脑内M1，M3基因表达增强呆驱液中剂量组和高剂量组与痴呆模型组比较，差异有显著性（P〈0．05），都能明显提高学习记忆能力．提高脑内M1，M3受体mRNA含量，并有一定的量效关系。结论呆聪液能改善老龄痴呆大鼠的学习和记忆功能并提高M1，M3受体基因的表达。     

3M测试片法与SN方法检测食品大肠菌群结果的比较

目的观察3MPetrifilm测试片法对食品大肠菌群的检测效果，评价在实际工作中的应用价值。方法采用sN标准大肠菌群固体培养基测定法和3MPetfifilm大肠菌群测试片法对试验菌种和样品进行检测，比较两种方法的检测结果。结果菌种试验和样品试验中，两种方法的检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论3MPetrifilm大肠菌群测试片法作为简便易行的新方法可用于检测食品中的大肠菌群。     

急性原粒细胞白血病部分分化型(M2b)组化特点的探讨

目的利用各种细胞组织化学染色的特点,综合分析来鉴别诊断M2b.方法对M2b患者的骨髓片进行组化染色,观察其阳性率、积分以及阳性物表现出来的形状.结果M2b患者的异常中幼粒细胞大致可以分为空泡型和核旁淡染区型两种,其中核旁淡染区型细胞行组化染色后,在P0X、SB、CE、AE、NBE染色中有其特异的团块状反应;空泡型异常中幼粒细胞,在POX、SB、CE中表现为强阳性反应,并且P0X、SB的阳性率、积分在所有白血病中仅次于M3,CE的阳性率一定大于50%.AE、NBE、PAS、ACP这几种组化染色的观察,对M2b有辅助诊断作用.结论对于M2b的诊断,不仅有其特异的形态学特征、免疫学标记、细胞遗传学、分子生物学,作为基础的组化染色对鉴别诊断M2b仍具有相当重要的意义.     

M蛋白检测在诊断多发性骨髓瘤中的临床应用价值

目的探讨M蛋白定量分析在多发性骨髓瘤（MM）的诊断和治疗中的应用。方法回顾性分析49例MM患者的临床资料与M蛋白之间的关系,并进行统计学分析。结果初治时IgG、IgA型及轻链型M蛋白的量与血红蛋白、血小板计数均呈负相关,M蛋白的量与初治时患者的骨质破坏程度无明显相关;肾功能不全的发生率IgG型低于IgA型及轻链型,三者之间相比差异有统计学意义（p〈0.05）;化疗2个疗程后M蛋白的下降与初治时M蛋白的量无明显相关。结论M蛋白是MM诊断和临床分期的重要指标,也是评价治疗是否有效的标准之一。     

T790M的突变富集PCR检测方法和克隆演化假设

3背景·吉非替尼在临床部分非小细胞肺癌（nonsmall cell lungcancer，NSCLC）患者中取得了较好的疗效．但几乎所有的患者最终将发生耐药。     

原发性高血压中医证型与血管紧张素原 M235T基因多态性相关性

目的探讨原发性高血压（essential hypertension,EH）不同中医证型与血管紧张素原（angiotensino-gen,AGT）M235T基因多态性的相关性。方法选择EH患者120例,辨证分型分别为肝火亢盛型、阴虚阳亢型、阴阳两虚型、痰湿壅盛型,并选取正常人30例作为对照组,采用聚合酶链反应（polymerase chain reac-tion,PCR）检测AGTM235T基因多态性。结果 EH组MM、MT基因型频率和M等位基因频率显著低于健康对照组（P〈0.05）,而TT基因型频率和T等位基因频率显著高于健康对照组（P〈0.05）;EH肝火亢盛型AGTM235T基因TT型频率及等位基因T频率显著高于健康对照组（P〈0.05）;EH组各证型基因型频率和等位基因频率比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 EH肝火亢盛型可能与AGTM235T基因TT型有关联。     

笑肌、颧大肌、颧小肌的测量

目的探讨与笑相关的笑肌、颧大肌、颧小肌的解剖学规律 ,为颜面部整形美容提供解剖学依据。方法选取正常成年尸体 3 0例 ,解剖观察笑肌、颧大肌、颧小肌的形态 ,并测量其长度与夹角。结果颧大肌起自颧骨前面 ,止于口角皮肤 ,颧小肌起自颧骨 ,止于鼻唇沟下部附近皮肤 ,笑肌起自腮腺咬肌筋膜 ,止于口角皮肤 ;颧大肌、颧小肌、笑肌长依次为 5 5 .2± 2 .3mm、5 2 .3± 1 .8mm、5 0 .1± 1 .6mm ;笑肌、颧大肌、颧小肌长径与口裂间以及笑肌与颧大肌间的夹角依次为 8.9± 1 .1、3 2 .6± 1 .8、40 .1± 2 .5、2 4.6±2 .7度。结论为临床颜面部整形美容提供了解剖学依据     

颈椎单开门OsteoMed M3钉板内固定椎管扩大成形术螺钉不同角度固定的拔出实验

摘要：目的研究在颈椎单开门OsteoMed M3钉板内固定椎管扩大成形术中螺钉不同角度固定的拔出力大小。方法6具
颈椎标本随机编号分别行后路单开门OsteoMed M3钉板内固定,在关节突关节侧行螺钉固定时按序按组分别采用螺钉
固定角度垂直于侧块皮质0°、外倾30°及外倾45°位组,使用ElectroForce测试仪测试螺钉的最大拔出力。结果外倾0°
组、30°组和45°组最大拔出阻力平均为（81.60±7.33）N、（150.05±15.57）N和（160.08±17.77）N。外倾0°组拔出力小于外倾
30°及外倾45°位组（P<0.05）,而外倾30°及外倾45°位组之间拔出力无统计学差异（P>0.05）。结论颈椎单开门OsteoMed
M3钉板内固定椎管扩大成形术中螺钉外倾30°以上角度固定抗拔出能力高。     

M1型、M2型巨噬细胞极化相关因子在重度慢性牙周炎患者牙龈组织中的表达及其临床意义

目的 探讨M1型、M2型巨噬细胞极化相关因子在重度慢性牙周炎（CP）患者牙龈组织中的表达及其临床意义。方法 选取2018年10月—2021年6月柳州市人民医院收治的168例CP患者。根据病情严重程度分为轻度组、中度组和重度组，分别有27例、72例和69例。另选取同期该院53例牙龈组织健康者作为对照组。通过实时荧光定量聚合酶链反应检测研究对象牙龈组织中M1型巨噬细胞极化相关因子诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、信号传导及转录激活因子1(STAT1)及M2型巨噬细胞极化相关因子精氨酸酶1(Arg1)、STAT6的表达。分析不同人群牙龈组织中M1型、M2型巨噬细胞极化相关因子mRNA相对表达量，分析CP患者病情严重程度的影响因素，分析M1型、M2型巨噬细胞极化相关因子对CP患者病情严重程度的诊断效能。结果 轻度组、中度组和重度组牙龈组织中iNOS、STATl、Arg1、STAT6 mRNA相对表达量较对照组高，中度组和重度组较轻度组高，重度组较中度组高。轻中度组与重度组性别、年龄、体质量指数、高血压、糖尿病、冠心病、高脂血症、吸烟史、饮酒史、偏侧咀嚼、巴氏刷牙、刷牙≥2次/d、刷牙≥3 min...     

30例儿童急性粒细胞白血病M2亚型细胞遗传学分析

目的了解儿童急性粒细胞白血病(AML)M2亚型遗传学特征.方法初步分析30例儿童AML-M2的染色体核型变化.结果 30例儿童AML-M2染色体核型中伴t(8;21)(q22;q22)组占46.67%(14/30),正常核型组占36.67%(11/30),其它异常核型组占16.66%(5/30),其中有1例为罕见的伴t(8;21)(q22;q22)的亚四倍体核型.结论证实了t(8;21)易位染色体为儿童AML-M2亚型较为特征性的遗传学变化.