青蒿琥酯对日本血吸虫童虫体内四种酶活性的影响

小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第7d起灌服青蒿琥酯300mg/kg·次,每周1次,共4次.于每次给药后的第3、第5d收集童虫,制成匀浆,作薄层淀粉胶电泳,胶中有关同工酶经底物显色,作酶活性定性观察.另设相应时间的不给药对照组.观察发现:该药对苹果酸脱氢酶(MDH)、6-磷酸甘露糖酶(MPI)和酸性磷酸酶(ACPH)有明显抑制作用.对磷酸葡萄糖异构酶(PGI)的活性影响不明显.提示青篙琥酯对日本血吸虫童虫的能量代谢和肠壁对红细胞的消化有抑制作用.     

青蒿琥酯对日本血吸虫作用的研究小鼠体内不同发育阶段虫体对青蒿琥酯的敏感性

目的观察小鼠体内不同发育阶段日本血吸虫童虫与成虫对青蒿琥酯的敏感性。方法用定量日本血吸虫尾蚴感染小鼠,感染2h,1、3、7、12、14、16、25、35d和42d分别一次性灌服500mg/kg青蒿琥酯。给药后4周解剖小鼠,采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率。结果青蒿琥酯对1、3、7、12、14、16、25、35、42d龄童虫或成虫的减虫率分别为16.9%、18.0%、71.3%、50.2%、36.9%、31.3%、45.3%、58.0%、26.4%,其中以7~35d龄虫对该药最敏感。结论青蒿琥酯对小鼠体内日本血吸虫不同发育阶段均有杀灭作用,对7~35d龄虫体杀灭效果更为明显。     

青蒿琥酯对日本血吸虫童虫超微结构影响的电镜观察

小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第7d开始，灌服青蒿琥酯300mg／kg·次，每wk1次，连续4次。在首次给药和第2次给药后的不同时间收集童虫作电镜观察。结果：首次给药后4h，扫描电镜见虫体表皮肿胀；8－12h后表皮褶嵴消失、糜烂；第1d即发现死亡虫体。以后几次给药，病变加重，虫体大部分死亡。透射电镜见皮层细胞肿胀、肌层坏死及溶解、肠腔上皮破坏和脱落。实验表明该药对日本血吸虫童虫有直接损害作用。     

青蒿琥酯对日本血吸虫作用的研究Ⅰ小鼠体内不同发育阶段虫体对青蒿琥酯的敏感性

目的观察小鼠体内不同发育阶段日本血吸虫童虫与成虫对青蒿琥酯的敏感性.方法用定量日本血吸虫尾蚴感染小鼠,感染2 h,1、3、7、12、14、16、25、35 d和42 d分别一次性灌服500 mg/kg青蒿琥酯.给药后4周解剖小鼠,采用门静脉灌注法收集虫体,计算减虫率.结果青蒿琥酯对1、3、7、12、14、16、25、35、42 d龄童虫或成虫的减虫率分别为16.9%、18.0%、71.3%、50.2%、36.9%、31.3%、45.3%、58.0%、26.4%,其中以7～35 d龄虫对该药最敏感.结论青蒿琥酯对小鼠体内日本血吸虫不同发育阶段均有杀灭作用,对7～35 d龄虫体杀灭效果更为明显.     

青蒿琥酯对日本血吸虫生殖作用的影响

目的观察青蒿琥酯对日本血吸虫成虫生殖的影响。方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第20d灌服青蒿琥酯300mg/kg,给药后3周解剖小鼠,用灌注法收集成虫,计算减虫率;取肝右叶做石蜡切片,观察虫卵肉芽肿;剩余肝脏溶解后计数虫卵;收集无损虫体进行体外培养,观察虫卵形态,并计数产卵量;取完好的虫体做石蜡切片,HE染色后镜下观察生殖器官的发育。结果给药组小鼠体内雌虫产卵量与对照组存在显著的差异,体外培养结果与体内产卵结果相一致。给药组小鼠体内的雌虫的卵巢发育缓慢,比对照组的小,且卵巢内多为未成熟的卵细胞。结论青蒿琥酯能抑制雌虫卵巢的发育,降低或抑制雌虫的产卵量,具有抗日本血吸虫雌虫生殖的作用,能有效的减轻血吸虫病的病情和控制传播。     

青蒿琥酯预防感染日本血吸虫的研究

我国日本血吸虫病流行在湖沼区和大山区仍较严重 ,寻找有效和简便的方法预防血吸虫感染与发病 ,已被列为国家重点科研课题。青蒿琥酯是桂林制药厂发明和生产的抗疟新药[1 ] ,已在亚洲、非洲及拉丁美洲疟疾流行区广泛使用[2 ] ;浙江省医学科学院寄生虫病研究所在筛选预防血吸虫病药物时 ,发现青蒿琥酯对血吸虫童虫有明显杀灭作用[3 ] 。 1991年以来 ,桂林制药厂和该所等单位协作 ,对青蒿琥酯用于预防血吸虫病进行了实验研究、临床试验和现场应用 ,收到了显著效果[4] 。该药已由卫生部于 1996年 4月批准上市。现就近年应用结果作一简述。1　实…     

青蒿琥酯预防日本血吸虫再感染临床观察

目的观察青蒿琥酯对日本血吸虫再感染的预防效果。方法志愿者分成3组,服药Ⅰ组服用青蒿琥酯6mg/kg,每周1次,连服4周;服药Ⅱ组于第1、3周服用青蒿琥酯6mg/kg,每周2次;对照组服用外观与青蒿琥酯相同的安慰剂。3组人员均于实验第4周末用吡喹酮40mg/kg驱虫处理,实验第8周末采用改良加藤法粪检观察早期治疗效果,第12周末评估预防再感染的效果。结果早期治疗阶段,服药Ⅰ组、服药Ⅱ组的粪检阳性率与实验前比较差异有统计学意义（P均〈0.05）;预防再感染阶段,服药Ⅰ组、服药Ⅱ组与实验前相比,粪检阳性率均显著下降（P均〈0.05）;而对照组粪检阳性率在实验前后无明显差异。结论青蒿琥酯具有较好的早期治疗和预防血吸虫再感染的效果,剂量6mg/kg,每周服药1次,连续4周的服药方式较好。     

青蒿琥酯对防汛人群预防日本血吸虫感染的效果

[目的 ]评价大规模应用青蒿琥酯预防性治疗接触疫水的人群预防血吸虫感染的效果。 [方法 ]在防汛中对 170 31人在接触疫水后第 7天开始口服青蒿琥酯 ,每周 1次 ,每次 30 0 m g,连服 3wk,记录副反应。距末次服药平均 17d后开始查病 ,部分于两个月后随访。 [结果 ]全组无急性血吸虫病发生 ,EL ISA阳性 2 0 4例 (1.2 0 % ) ,COPT>3%者 195例 (1.14% ) ,仅数例有肝功能变化。服药副反应发生率低 ,绝大多数不需特殊处理。 [结论 ]青蒿琥酯预防血吸虫病具有高效、安全及方便等优点 ,是目前比较理想的预防药 ,可推广使用。     

青蒿琥酯治疗小鼠日本血吸虫病的血清学研究

目的观察青蒿琥酯对日本血吸虫感染小鼠的治疗作用及血清IgG的动态变化，探讨血清抗体与体外杀童虫效果的相关性。方法用日本血吸虫感染C57／BL6小鼠，在感染后8、15、22和29d分别一次性灌服300mg／kg青蒿琥酯，对照组小鼠灌服1％羧甲基纤维素钠。最后一次给药后7d剖杀小鼠，计算成虫数和虫卵数，以ELISA法检测小鼠血清中日本血吸虫特异性IgG抗体的水平，观察接受青蒿琥酯治疗的小鼠血清与巨噬细胞体外协同杀伤日本血吸虫童虫的效应。结果青蒿琥酯治疗组小鼠未检获成虫和虫卵；血清中日本血吸虫尾蚴抗原特异的IgG抗体水平在感染后21d达高峰，此后下降；成虫抗原特异的IgG抗体水平呈上升态势，二者与对照组比较差异均无显著性；青蒿琥酯治疗小鼠血清中虫卵抗原特异的IgG抗体呈低水平状态，显著低于对照组。青蒿琥酯治疗组小鼠血清和对照组小鼠血清均具有较强的体外杀童虫效果。结论青蒿琥酯对日本血吸虫感染的小鼠具有显著的治疗效果，其血清与巨噬细胞在体外具有协同杀伤童虫的作用。     

现场应用青蒿琥酯预防日本血吸虫感染的效果

目的： 观察现场应用青蒿琥酯预防日本血吸虫感染的效果。方法： １９９７ 年７ ～９ 月, 分别在望江县杨河试区及贵池市沙山试区选择易感人群５６２ 例与２１８ 例, 将受试者随机分为两组, 按双盲法分服青蒿琥酯和安慰剂, 剂量均为６ ｍｇ／ｋｇ 顿服, 受试者在接触疫水后２ ｗｋ 开始服药, 每２ ｗｋ １ 次, 连服４ 次, 接受全程试验者末次服药后４ ｗｋ , 用尼龙绢集卵法加改良加藤法进行效果评价。结果： 杨河试区服药组２７３ 例中２ 例孵化阳性,阳性率为０７ ％ ; 对照组２８９ 例粪检阳性１１ 例, 阳性率为３８ ％ , Ｅ Ｐ Ｇ 为２６４０ ±１４９ 个。沙山试区服药组１０７例粪检均为阴性, 对照组１１１ 例粪检阳性７ 例, 感染率为６３ ％ , Ｅ Ｐ Ｇ 为１４２３ ±２１４ 个。两试区青蒿琥酯预防血吸虫感染的保护率分别为８０９ ％ 与１００ ％ 。结论： 口服青蒿琥酯能有效地预防日本血吸虫感染。     

BTW5对体外培养日本血吸虫成虫及童虫的杀灭效果

目的观察BTW5对体外培养的日本血吸虫成虫和童虫的杀灭效果。方法小鼠感染日本血吸虫尾蚴18 d后用肝门静脉灌注法收集童虫,感染5周后用同法收集雌、雄成虫,分别体外培养于DMEM培养液中,加入不同浓度BTW5连续培养3 d,观察虫体死亡及活力降低情况,并设空白对照组。对虫体进行盐酸卡红染色,观察其损伤情况。结果在含不同浓度BTW5的DMEM培养液中,日本血吸虫成虫及童虫的死亡率与活力降低率均显著高于对照组(P均<0.05)。盐酸卡红染色直观显示BTW5对雌雄虫的体表和肠管有损伤作用,另外对雌虫的卵巢也有损伤。结论BTW5具有体外杀灭日本血吸虫成虫和童虫的作用。     

日本血吸虫腺苷脱氨酶基因的克隆和融合表达

目的 克隆和表达日本血吸虫（Sj）腺苷脱氨酶（ADA）编码基因，分析该基因的系统发育及预测其编码蛋白的空间结构。 方法 根据表达序列标签（EST）测序的结果设计引物，PCR法从含有SjADA基因的cDNA克隆中扩增得到该编码基因片段，亚克隆入原核表达载体pET32中表达，表达的融合蛋白用螯合琼脂糖凝胶FF亲和层析纯化。采用 MrBayes算法构建系统发育进化树，用自动蛋白注释工具(DS GeneAtlas)软件模拟SjADA的蛋白空间结构。结果 获得SjADA基因全长为1 059 bp的编码序列，并克隆、表达和纯化了重组蛋白（SjADA）。生物信息学分析显示，该基因与曼氏血吸虫的同源基因之间的序列一致性仅25%，属于不同的亚家族。其空间结构与PDB模板1A4M的一致性为41%，具有相似的二级结构和相应的活性位点残基。 结论 获得了SjADA重组蛋白。提示日本血吸虫嘌呤补救合成代谢途径与曼氏血吸虫有差异。     

日本血吸虫感染对小鼠肝脏脂代谢影响机制的初步研究北大核心CSCD

目的探讨日本血吸虫感染对小鼠肝脏肝细胞脂质沉积的影响及作用机制。方法10只Balb/c小鼠随机分为正常组、感染组,每组5只,感染组小鼠经皮肤感染日本血吸虫尾蚴(15±1)条/只,饲养6周。HE染色观察肝脏病理改变,油红O染色观察肝脏脂质沉积,外周血检测肝功能和血脂水平,实时定量PCR检测肝脏脂代谢相关基因表达水平。可溶性虫卵抗原SEA刺激LO2肝细胞系,Nile red染色观察细胞脂质变化情况,实时定量PCR检测LO2细胞脂质合成相关基因表达水平。结果与正常组比,小鼠感染日本血吸虫后,肝脏出现明显的虫卵肉芽肿和纤维化,外周血中的ALT、AST含量显著升高(t_(ALT)=6.432,P<0.01;t_(AST)=3.259,P<0.05)。感染后肝脏中脂滴明显减少;外周血TG、CHOL的水平显著降低(t_(TG)=7.154,P<0.01;t_(CHOL)=8.749,P<0.001);肝脏中脂质合成相关基因Acly、Accs、Fasn表达水平明显降低(t_(Acly)=3.765,P<0.05;t_(Accs)=2.859,P<0.05;t_(Fasn)=3.888,P<0.05),脂质转运相关基因CD36以及脂质氧化分解相关基因Cpt 1表达水平明显升高(t_(CD36)=8.250,P<0.01;t_(Cpt1)=1.297,P<0.05);细胞水平结果显示,SEA组与DMEM组比,SEA刺激后LO2细胞脂质含量明显减少,脂质合成相关基因SREBP-1C、ACLY、ACC、FASN以及甘油三酯合成相关基因DGAT和GPAT的表达水平显著降低(均P<0.05)。结论日本血吸虫感染通过抑制肝细胞脂质合成和促进脂质分解下调肝脏脂质沉积水平。     

不同阶段日本血吸虫对吡喹酮敏感性的研究

目的探索成虫、尾蚴、毛蚴、虫卵等不同阶段日本血吸虫对吡喹酮的敏感性.方法于血吸虫病非流行季节,在江西、湖北、湖南6个村,采用吡喹酮40 mg/kg顿服治疗粪检阳性者363例,以观察日本血吸虫成虫对吡喹酮的敏感性.采集阳性粪便收集虫卵,孵化毛蚴,感染钉螺收集尾蚴.观察尾蚴在10-5、6×10-7、4×10-7、10-7mol/L4种浓度吡喹酮溶液中断尾率.毛蚴在5×10-6、10-6、5×10-7、10-7 mol/L 4种浓度吡喹酮溶液中的形态改变.以及虫卵在5×10-6、10-6、5×10-7、10-7mol/L 4种浓度吡喹酮溶液浸泡24 h后的孵出率.结果治疗6～7周后复查334例,319例阴性,阴转率95.5%,2次治疗阴转率达100%.尾蚴在10-5mol/L吡喹酮溶液中出现强烈挛缩、断尾,40 min断尾率为96.6%～100%.毛蚴在5×10-7mol/L吡喹酮溶液中发生形态改变,5 min形态改变率92.3%～100%.虫卵在5×10-6mol/L吡喹酮溶液中浸泡24 h后孵出率为0.结论与曼氏血吸虫相比较,日本血吸虫成虫、尾蚴、毛蚴和虫卵对吡喹酮更为敏感.     

重组日本血吸虫铁蛋白的表达纯化及诱导小鼠保护性免疫研究

目的　表达、纯化重组日本血吸虫铁蛋白 ,观察其免疫小鼠后抗日本血吸虫的免疫保护作用。方法　用基因重组技术 ,将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆至表达载体 pGMC上 ;在IPTG诱导下 ,重组日本血吸虫铁蛋白得到高效表达 ;用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白 ;用SDS -PAGE和Western -blot鉴定表达纯化产物 ;用纯化的重组铁蛋白免疫小鼠三次 ,分别在 0、2、4周进行。第 6周每鼠经腹部感染 4 0± 1条日本血吸虫尾蚴。 4 2天后剖杀冲虫 ,计数虫数及肝卵数。结果　纯化的重组铁蛋白分子量为 4 0kD ,具有较好的免疫原性 ,能被日本血吸虫感染兔血清识别。与对照组相比 ,纯化重组铁蛋白免疫小鼠组的减虫率为 2 4 5 % ,减卵率为 4 5 8%。结论　重组日本血吸虫铁蛋白不仅在大肠杆菌中得到高效表达 ,而且纯化的铁蛋白分子能诱导抗日本血吸虫病的保护性免疫。     

蒿甲醚和青蒿琥酯对感染曼氏血吸虫小鼠治疗作用的初步研究

目的了解蒿甲醚和青蒿琥酯对小鼠曼氏血吸虫作用的效果.方法将小鼠随机分成12个实验组及1个对照组,以皮下注射的方法,每鼠接种约80条尾蚴,接种尾蚴46 d后,分别以蒿甲醚或青蒿琥酯灌胃治疗,第1天,分别以400、300、200 mg/kg的剂量1次灌胃;第2～7天,则每天分别按以上剂量的半量灌胃,7 d灌胃的总剂量分别为1 600、1 200、800 mg/kg.总量1剂组,在第7天,分别按1 600、1 200、800 mg/kg剂量1次灌胃.另设感染阳性对照组,不加治疗. 结果蒿甲醚7日疗法1 600、1 200、800 mg/kg剂量组减虫率分别为53.0%、49.0%和53.0%,减雌率为78.0%～82.0%,总量1剂组效果与7日疗法基本相同.青蒿琥酯7日疗法相应剂量减虫率分别为16.0%、37.0%和49.0%.结论蒿甲醚和青蒿琥酯对小鼠曼氏血吸虫具有一定的杀虫效果,蒿甲醚在疗效和毒性方面稍佳.