53例多发性骨髓瘤细胞遗传学研究

为了探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)及部分分子细胞遗传学特点,应用常规R显带方法,对53例MM患者进行染色体核型分析,并对其中20例患者采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术进行分子细胞遗传学分析。结果显示:53例MM患者染色体异常检出率为32.1%,其中涉及3种及3种以上染色体异常的占82.4%,染色体众数从44到90条不等。染色体核型异常涉及所有24条染色体,其中涉及1q21扩增、13q14缺失,17p13缺失及14q32易位中至少1种染色体异常的占70.6%,同时发现t(11;16)(p11;p13)等一些不常见的结构异常;还有一些在急慢性白血病中经常见到的异常。FISH检测结果显示:12例染色体核型正常的MM患者中有3例FISH检测阳性;8例染色体核型异常的患者中有5例FISH检测阳性。结论:大部分MM患者染色体异常核型比较复杂,具有明显的异质性;FISH分析可提高异常的检出率,但有局限性;常规细胞遗传学检测与FISH技术相结合可提高染色体异常的识别能力,有助于进一步认识和掌握MM细胞遗传学的特点,为临床诊断及治疗MM提供帮助。     

多发性骨髓瘤细胞遗传学异常的研究进展

分子细胞遗传学技术的进步推动了多发性骨髓瘤的细胞遗传学研究,发现了该病遗传学改 变的一些特点和规律,并发现某些遗传学改变与疾病发病机制、疾病临床表现等有密切关系。这些发现不 仅有利于该病发病机制的研究,也为临床预后评估、指导治疗提供参考,同时为开发新疗法提供线索。     

分子细胞遗传学技术在多发性骨髓瘤研究中的应用

多发性骨髓瘤是骨髓浆细胞恶性增生性疾病,细胞遗传学异常表现为独特的分子生物学改变.在研究中,由于MM细胞增殖率低等原因导致研究进展相对缓慢.但随着分子细胞遗传学技术进步,其在推动MM的研究中发挥了重要作用.     

多发性骨髓瘤细胞遗传学异常的研究进展

分子细胞遗传学技术的进步推动了多发性骨髓瘤的细胞遗传学研究，发现了该病遗传学改变的一些特点和规律，并发现某些遗传学改变与疾病发病机制、疾病临床表现等有密切关系。这些发现不仅有利于该病发病机制的研究，也为临床预后评估、指导治疗提供参考，同时为开发新疗法提供线索。     

多发性骨髓瘤遗传学研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一种骨髓浆细胞恶性肿瘤,来源于后生发中心的B细胞,常具有复杂的染色体异常。免疫球蛋白重链基因位点的易位为早期遗传学异常,引起易位伴随区域的癌基因的失调(11q13区域的cyclin D1,4p16.3区域的FGFR3/MMSET,16q23区域的c-maf和6p21区域的cyclin D3)以及13号染色单体的丢失或肿瘤抑制基因位点13q14的缺失,该缺失提示预后不良。其它的分子学异常包括继发的变化和癌基因的活化(N-RAS和K-RAS的突变,c-Myc的改变等),这通常和疾病的进展相关。这些研究不仅为临床预后评估、指导治疗提供参考,更为开发新疗法提供线索。     

多发性骨髓瘤分子细胞遗传学异常的研究

目的探讨多发性骨髓瘤（MM）的分子细胞遗传学异常。方法应用CD138单克隆抗体磁珠分选系统纯化23例初治MM患者的骨髓浆细胞，结合一组探针和间期荧光原位杂交技术检测MM患者13q14缺失、p53缺失以及IgH基因重排的发生率。结果23例MM患者中，10例（43．5％）13q14缺失。阳性率为79％-96％；11例（47．8％）IgH基因重排；7例（30．4％）有13q14缺失和IgH基因重排；所有病例均未检测到p53基因缺失。结论13q14缺失及IgH基因重排在MM患者中的发生率较高；13q14的缺失和IgH基因重排的发生率同疾病进展、预后的关系有待进一步研究。     

多发性骨髓瘤分子细胞遗传学异常相关性研究

目的：探讨多发性骨髓瘤（MM）的遗传学特征。方法对61例MM患者实验室检查资料进行回顾性分析。采用骨髓24 h短期培养和R显带技术对其中31例MM患者进行染色体核型分析,10例患者采用间期FISH方法检测IgH基因。结果61例患者骨髓涂片中骨髓瘤细胞比例0.19～0.94。31例患者中有25例具有足够可供分析的中期分裂象,19例（71.3％）检出异常克隆,其中14q32为最具特征的结构异常,8q24,11q13,13q14和17p13为重要的结构异常;6例检测到IgH基因断裂重排。结论骨髓形态学涂片分析结合实验室检查指标可诊断 MM,而染色体核型检测有助于深入了解MM的发病机制,从而为该病的早期诊断、治疗和预后评估提供一定的理论依据。     

初治多发性骨髓瘤患者细胞遗传学异常流行病学的多中心回顾性研究

目的了解我国初诊多发性骨髓瘤(MM)患者细胞遗传学异常(CA)的构成和频率,基于2018年更新的危险分层标准(mSMART3.0)分析双打击MM(DHMM)及三打击MM(THMM)的发生率。方法纳入全国5个中心的初诊MM患者,磁珠分选CD138细胞或浆细胞比例≥50%的骨髓标本行初诊间期FISH(iFISH)检测CA的基线结果,分析原发CA(pCA)、继发CA(sCA)、高危(HR)CA和DHMM/THMM的发生率,并分析不同CA组合的情况。结果共纳入初诊MM患者1015例,IgH重排、del(13q)/13q14、1q21扩增、del(17p)发生率分别为54.0%、46.4%、46.1%、9.9%。其中,1q21扩增拷贝数=3、≥4的发生率分别为35.8%、12.7%。454例患者具有完整CA基线结果,pCA中t(4;14)、t(11;14)和t(14;16)发生率分别为14.1%、11.2%和4.8%;44.3%患者携带≥2种CA,包括2种CA(28.0%)、3种CA(13.4%)和≥4种CA(2.9%);83.3%的1q扩增患者伴其他CA,以del(13q)/13q14最常见(61.1%),IgH重排次之(31.5%);95.0%的del(17p)患者伴其他CA,以del(13q)/13q14最常见(75.2%),1q21扩增次之(49.5%);68.6%的IgH重排患者伴其他CA,以del(13q)/13q14和1q21扩增最常见(均为61.9%);根据2016年国际骨髓瘤工作组的定义,57.7%患者携带HRCA;依据2018年mSMART 3.0的定义,DHMM(HRCA=2)和THMM(HRCA≥3)患者分别占14.3%和2.9%。结论更新了我国初诊MM患者的CA谱,发现基于CA的HR MM占初诊MM患者的比例近58%,并首次报道DHMM和THMM的发生率约为17%。     

骨髓涂片荧光原位杂交法在检测多发性骨髓瘤细胞8号染色体遗传学异常的应用

本研究旨在建立骨髓涂片间期荧光原位杂交（I-FISH）的实验方法,为检测多发性骨髓瘤（MM）分子细胞遗传学提供新方法。以骨髓涂片为载体,通过一系列的处理,固定及消化后,用8号染色体着丝粒探针行I-FISH分子细胞遗传学的检测,并比较该方法与常规I-FISH结果的差异。结果表明：两种方法分析非恶性血液病标本的各个信号比例无统计学差异（P〉0．05）。骨髓涂片I-FISH研究中,19例MM患者中8例（42．1％）有8号染色体异常,其中8号染色体单体（-8）5例（26．3％）,8号染色体三倍体（＋8）3例（15．8％）。结论：骨髓涂片I-FISH具有操作简便、经济、准确的特点,可用于MM分子遗传学异常的研究。     

多发性骨髓瘤血管新生的体外研究

探讨多发性骨髓瘤细胞系培养上清液对人骨髓来源内皮细胞系(HBMEC)的增殖、迁移及血管新生的作用。用含2％胎牛血清(FBS)的RPMI 1640培养液培养骨髓瘤细胞系获得上清液,将此培养液培养HBMEC,研究其时HBMEC的增殖及迁移的影响,并将此液放入含有携带HBMEC微珠的三维纤维蛋白中,研究其对血管新生的影响。结果表明,与含2％FBS的RPMI 1640培养液比较,骨髓瘤细胞系培养液对HBMEC的增殖有明显促进作用(P<0.001),并促进HBMEC的迁移,诱导毛细血管管腔的形成(长度及宽度)(P<0.001)。结论:骨髓瘤细胞系可能通过分泌某些细胞因子促进HBMEC增殖、迁移及血管新生。     

骨髓增生异常综合征患者细胞遗传学特征分析

本研究探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者中染色体异常核型在MDS亚型中的分布及其数目异常和结构异常特点。常规培养骨髓细胞,采用G显带技术对染色体核型进行分析。结果表明,127例患者中异常核型比例为42．5％（54／127）,其中各亚型异常发生率MDS．RA为30％（3／10）,MDS．RCMD为35．9％（23／64）,MDS．RAS为22．2％（2／9）,MDS-RAEB-Ⅰ为45％（9／20）,MDS-RAEB-Ⅱ为66．7％（14／21）,5q-综合征100％（3／3）。54例异常核型中仅数目异常者21例,仅有结构异常者14例,同时有结构异常和数目异常者19例。常见染色体异常依次为复杂核型（11．02％,14／127）,单纯＋8（10．24％,13／127）,-7／7q-（3．9％,5／127）,1q＋（3．15％,4／127）,-X／-Y（3．15％,4／127）,20q-（2．36％,3／127）,5q-（2．36％,3／127）。MDS-RAEB（包括RAEB-Ⅰ和RAEB-Ⅱ）患者中复杂核型发生率为31．71％（13／41）,明显高于非RAEB（包括RA、RCMD、RAS、5q-综合征）患者中复杂核型发生率为1．16％（1／86）（P〈0．05）。平衡易位核型发生率为1．57％（2／127）,明显低于非平衡易位发生率为40．94％（52／127）（P〈0．05）,2例平衡易位患者均为MDS-RAEB。结论：MDS是一组高度异质性的克隆性疾病,染色体异常比较复杂,存在多种重现性异常;平衡易位较少见,仅存在于RAEB患者中;RAEB患者复杂异常核型发生率较高,本研究中伴dup（1）（q21q32）重现性异常核型所占比例较高。     

多发性骨髓瘤血清蛋白电泳分析及临床意义的研究

目的 对65例多发性骨髓瘤(MM)进行血清电泳分析，找出MM的型别分布，指导MM的诊断。方法 仪器及试剂选用美国Helena公司，对多发性骨髓瘤患者进行血清电泳分析。结果 在65例患者中，59例血清蛋白电泳图谱中出现M蛋白。有19例尿本周氏蛋白阳性。血清免疫固定电泳结果显示，其中IgG型40例，IgAl7例，IgM2例。轻链κ型中IgG型有25例，IgA型有8例，IgM型有l例;λ型IgG型有15例，IgA有9例，IgM有l例。电泳分析结果表示，IgG型MM占67．8％，比例最多，其次为IgA型，占28．8％。而IgM型最少，占3．4％。结论 电泳分析方法能快速、准确地进行MM分型，对MM的诊断、病情判断、治疗及预后均有重要意义。     

免疫表型结合间期原位杂交法检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常

本研究旨在建立骨髓涂片荧光免疫表型结合间期原位杂交技术（FICTION），为检测多发性骨髓瘤（MM）患者的分子细胞遗传学提供新方法。以骨髓涂片为载体，通过标记FITC的抗CD138抗体筛选浆细胞（PC），比较筛选的PC比例与形态学检测的PC比例之间的差异。同时采用8号染色体着丝粒探针行间期荧光原位杂交技术，检测PC的8号染色体异常情况。结果表明：骨髓涂片上荧光抗体筛选的PC比例与骨髓形态学检测的PC比例相比无统计学差异（P〉0．05），9例患者中4例（44％）有8号染色体异常，其中8号染色体单体（-8）3例（33％），8号染色体三倍体（＋8）1例（11％）。结论：骨髓涂片FICTION技术具有简便、特异、准确的特点，可用于MM分子遗传学异常的研究。     

多发性骨髓瘤血液流变学的临床研究

目的探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者血液流变学改变及血浆置换对多发性骨髓瘤患者高粘滞血症的疗效.方法用全自动血液粘度快测仪检测全血粘度(200s-1、30s-1、3s-1)、全血还原粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数,用常规方法检测血沉、球蛋白,对7例球蛋白＞35g/L患者行血浆置换.结果多发性骨髓瘤患者全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数,血沉、球蛋白显著增高,血浆置换能降低球蛋白、血粘度.结论多发性骨髓瘤患者高球蛋白血症是导致高粘滞血症的基础.     

55例多发性骨髓瘤的临床病理学研究

目的：通过对多发性骨髓瘤的病理学及免疫表型的研究，探讨其组织学分型、免疫表达与预后的关系。方法：对55例多发性骨髓瘤做病理组织观察、免疫球蛋白标记、并与预后随访结果进行对比分析。结果：多发性骨髓瘤的瘤细胞分化程度、分布模式、网织纤维增生情况在病理学诊断中有重要意义；免疫球蛋白轻链表达以λ轻链为主(95％)，重链以IgG为主(30％)；免疫学表达与临床血清免疫分型有一定相关性，但其与预后的关系有待进一步研究。     

人多发性骨髓瘤细胞系与初治多发性骨髓瘤遗传学异常的比较研究

本研究采用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测人多发性骨髓瘤细胞系（human multiple myeloma cell lines,HMCL）和初治多发性骨髓瘤（MM）的分子遗传学异常并进行比较分析,以帮助筛选浆细胞肿瘤高危遗传学异常,为多发性骨髓瘤MM的危险度分层提供依据,并为利用HMCL进行MM研究提供遗传学资料。选用13q14（RB-1）、14q32（IGHC/IGHV）、1q12（CEP1）、17p13（TP53）荧光探针应用直接法检测7株HMCL,用CD138免疫磁珠分选（magnetic-activated cell sorting,MACS）联合FISH方法检测85例初治MM患者作为对照。对于存在14q32异常的患者进行IGH/CCND1、IGH/FGFR3、IGH/MAF双色双融合探针杂交以检测t（11;14）（q13;q32）、t（4;14）（p16;q32）、（14;16）（q32;q23）。结果显示：7株HMCL中RB-1/D13S19缺失6株（85.7%）,P53缺失5株（71%）,1q21扩增6株（85.7%）;5株（71.4%）HMCL存在IGH异常,IGH/CCND1阳性细胞系1株,IGH/FGFR3阳性细胞系2株,IGH/MAF阳性细胞系3株;其中KMS11细胞系同时存在IGH/FGFR3和IGH/MAF两种异常。85例初治MM细胞遗传学总体检出率为85.9%,38例（44.7%）伴有RB-1缺失,17例（20%）出现p53缺失,45例（52.9%）伴有1q21扩增,53例（62.4%）存在IGH异常,其中IGH/CCND1阳性23例（27.1%）,IGH/FGFR3阳性21例（24.7%）,IGH/MAF阳性3例（3.5%）。与初治MM相比较,HMCL的抑癌基因p53缺失率和IGH/MAF明显升高（p=0.008,p=0.005）,而其他分子遗传学异常检出率未达统计学差异。结论：HMCL作为浆细胞肿瘤恶性程度最高的形式,积累了大量的遗传学异常,p53缺失是其显著特征。绝大多数HMCL来源于疾病晚期的髓外浆细胞肿瘤细胞或者浆细胞白血病,提示p53缺失是这部分极高危浆细胞肿瘤患者的特征。