嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸代谢相关酶基因表达的影响

目的探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸代谢酶的影响。方法将50只雄性Wis-tar大鼠随机分为对照组、海洛因组、海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组。采用real-timePCR的方法检测大鼠脑皮质中腺苷脱氨酶(ADA)、黄嘌呤氧化酶(XO)、次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、腺嘌呤磷酸核糖转移酶(APRT)和腺苷激酶(AK)mRNA的表达水平。结果海洛因组ADA、XO的mRNA比对照组明显升高(P0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组与海洛因组相比明显降低(P0.05)。海洛因组HGPRT、APRT和AK的mRNA比对照组明显降低(P0.05),而海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组与海洛因组相比有不同程度升高,以HGPRT的升高程度尤为显著(P0.05)。海洛因+AMP+GMP组、海洛因+AMP组、海洛因+GMP组的各项指标差异无显著性。结论海洛因在大鼠基因水平上促进嘌呤核苷酸的分解代谢,降低合成代谢,而补偿嘌呤核苷酸可以抑制或拮抗海洛因的上述作用。     

嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠垂体嘌呤核苷酸代谢关键酶基因表达的影响

目的研究嘌呤核苷酸对海洛因依赖及戒断大鼠垂体嘌呤核苷酸分解代谢关键酶腺苷脱氨酶(ADA)、嘌呤核苷酸补救合成关键酶次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)基因表达的影响,阐明海洛因对垂体嘌呤核苷酸代谢的损害及嘌呤核苷酸补偿的对抗作用。方法建立海洛因依赖及戒断大鼠模型,80只建模成功的雄性Wistar大鼠随机分成对照组(生理盐水)、核苷酸组(不给海洛因)、海洛因组、海洛因+核苷酸组(同时给药)、海洛因戒断3d组、海洛因戒断9d组、核苷酸3d组(海洛因停药后给核苷酸3d)及核苷酸9d组(海洛因停药后给核苷酸9d)(每组10只)。检测垂体组织内ADA及HGPRT基因表达的情况。结果与对照组比较,海洛因组、戒断3d组大鼠垂体ADA mRNA水平有所增高,但差异均无显著性(P>0.05)。垂体组织核苷酸组HGPRT mRNA水平高于对照组(P<0.05),其他各组与对照组比较,差异均无显著性(P>0.05)。结论海洛因有增强大鼠垂体组织ADA基因表达,减弱HGPRT的基因表达作用,但作用不显著;补偿嘌呤核苷酸保持海洛因依赖大鼠垂体ADA和HGPRT基因表达的相对稳定。     

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑中嘌呤核苷酸含量的影响及机制研究

目的探讨外源性补偿嘌呤核苷酸对海洛因依赖大鼠嘌呤核苷酸含量的影响。方法将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、海洛因组、海洛因＋嘌呤核苷酸组（HAG）。各组采用高效液相色谱法检测大鼠脑中GMP、AMP、GTP、ATP含量。结果海洛因组与对照组比较AMP、GTP含量明显降低（P〈0．01）,GMP、ATP含量改变不明显。补偿嘌呤核苷酸后,AMP含量比海洛因组升高明显（P〈0．01）。结论海洛因成瘾大鼠脑中存在嘌呤核苷酸缺失的现象,外源性补偿嘌呤核苷酸能够代偿体内嘌呤核苷酸缺失的状态。     

海洛因给药大鼠血浆尿酸含量变化及腺苷的影响

目的观察海洛因给药及戒断对大鼠血浆尿酸含量的影响,探讨腺苷影响机制。方法建立海洛因给药及戒断模型,生化自动分析仪检测尿酸。结果与对照组相比,海洛因给药组血浆尿酸含量显著升高(P<0.05);停止海洛因给药后,血浆尿酸水平下降。与海洛因给药组相比,其中停海洛因但短期给予腺苷(海洛因给药9天、停药后给腺苷3天组)血浆尿酸水平显著下降(P<0.001)。而长期给予腺苷(海洛因给药9天、停药后给腺苷9天组)尿酸水平升高,但无统计学差异(P>0.05)。结论海洛因可以引起嘌呤核苷酸分解代谢加强,短期给予腺苷有助于逆转该作用。     

海洛因对C6细胞嘌呤核苷酸分解代谢基因表达的影响

目的研究海洛因对C6胶质瘤细胞嘌呤核苷酸分解代谢关键酶基因表达的影响。方法海洛因作用于C6胶质瘤细胞12h、24h、48h、72h后,提取细胞总RNA,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测嘌呤核苷酸分解代谢的关键酶腺苷脱氨酶（ADA）和黄嘌呤氧化酶（XO）基因表达的变化,以β-actin为内标准。结果在转录物水平,浓度为20μg/ml的海洛因作用于C6细胞24h和48h时与对照组相比ADA、XO基因表达明显增强（P〈0.05）。结论在转录物水平海洛因能一定程度增强C6细胞嘌呤核苷酸分解代谢关键酶基因的表达,从而促进嘌呤核苷酸分解代谢。     

嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中TPH和GTPCH基因表达的影响

目的研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)、GTP环水化酶1(GTP cyclohydrolase1,GTPCH)基因表达的影响。方法剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,50只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C)、海洛因组(H)、海洛因补偿AMP+GMP组(HAG)、海洛因补偿AMP组(HA)、海洛因补偿GMP组(HG),每组10只。Real-timePCR法测定各组大鼠脑组织中TPH和GTPCH1基因的表达。结果与C组比较,H组大鼠脑组织中TPH基因表达下降71%(P0.05);与H组比较,HAG,HA和HG组大鼠脑组织中TPH基因表达分别升高60%,100%和150%(P0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中,GTPCH基因表达下降43%(P0.05);与H组比较,HAG,HA和HG组大鼠脑组织中GTPCH基因表达均有所升高,但差异不显著(P0.05)。结论海洛因给药使大鼠脑组织中TPH,GTPCH基因表达下调;嘌呤核苷酸补偿可以减弱海洛因对TPH和GTPCH基因表达的影响。     

酒精依赖对机体组织中腺苷脱氨酶含量的研究

目的探讨酒精依赖对大鼠机体组织腺苷脱氨酶(ADA)含量的影响。方法 40只大鼠随机分为对照组(10只)和酒精依赖组(30只),应用腺苷脱氨酶检测试剂盒检测各组大鼠脑顶叶、脾、肝脏、小肠、肌肉中ADA含量。结果与对照组比较,酒精依赖组脑组织和小肠中ADA(30、60d)差异无统计学意义(P0.05),90d组ADA含量明显升高(P0.05);酒精依赖组脾中ADA含量均高于对照组,但差异无统计学意义(P0.05);酒精依赖组肝脏中ADA含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);酒精依赖组肌肉中ADA(30、60、90d)与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),但90d组有升高趋势。结论酒精依赖使机体组织中ADA含量增高,促进嘌呤核苷酸分解代谢。     

海洛因成瘾对大鼠海马CA3区NR1、NR2A亚基表达的影响

目的 观察海洛因依赖大鼠海马CA3区NMDA受体NR1、NR2A亚基的表达。方法 将40只SD大鼠随机分成海洛因依赖组、海洛因+MK801组、海洛因戒断组及对照组,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术半定量检测海马NMDA受体NR1、NR2A亚基mRNA的表达。结果 与对照组比较,海洛因依赖组、海洛因戒断组和海洛因+MK801组的NR1表达明显升高(P<0.05),且海洛因依赖组NR1的表达明显高于海洛因戒断组和海洛因+MK801组,海洛因戒断组与海洛因+MK801组的NR1表达差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,海洛因+MK801组NR2A的表达降低(P<0.05),海洛因戒断组NR2A表达升高(P<0.05),依赖组NR2A的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 海洛因依赖可使大鼠海马CA3区NR1的表达明显上调。海洛因戒断的大鼠海马CA3区NR2A表达上调,使用MK801干预的大鼠海马CA3区NR2A表达下调。     

海洛因对大鼠部分血浆生化指标影响的评估

目的 研究海洛因依赖大鼠血浆肾功能的变化。方法 建立海洛因依赖及戒断大鼠模型，40只wistar大鼠随机分成对照组、3d给药组、9d给药组、3d戒断组及9d戒断组，检测血液生化指标尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、尿酸URIC）。结果 与对照组相比，海洛因给药后URIC的浓度显著升高（P〈0．01）.戒断3d组中仅血浆BUN显著下降（P〈0．01）.与海洛因给药9天组相比，戒断3d组中BUN和URIC显著下降（P〈0．01），CREA也明显降低（P〈0．05）；戒断9d组中URIC浓度显著下降（P〈0．01）.结论 海洛因早期对肾功能损害较轻，在肾脏代偿范围内。     

大鼠海马CA2区GDNF mRNA表达与吗啡依赖和吗啡的关系

【目的】观察吗啡戒断大鼠侧脑室胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)反义寡脱氧核苷酸注射后对海马GDNF mRNA表达的影响。【方法】SD大鼠侧脑室立体定位,皮下注射吗啡建立吗啡依赖大鼠模型,侧脑室微注射GDNF有义和反义寡脱氧核苷酸,纳洛酮催促戒断,应用原位杂交方法检测海马GDNF mRNA的表达。【结果】侧脑室注射GDNF反义寡脱氧核苷酸能显著抑制大鼠吗啡戒断症状评分(P<0.05)。吗啡依赖大鼠海马CA2区GDNF mRNA表达较对照组显著增加(P<0.05),CA1和CA3区变化不明显;吗啡依赖大鼠纳洛酮(4mg/kg,ip)催促戒断后海马CA1、CA2和CA3区GDNF mRNA表达较依赖组有增加趋势,但均没有显著差异(P>0.05);吗啡依赖大鼠纳洛酮激发前24h侧脑室注射GDNF反义寡脱氧核苷酸能显著抑制吗啡依赖大鼠依赖和戒断后CA2区GDNF mRNA表达的增加(P<0.05),而CA1和CA3区与戒断组大鼠相应区域相比没有差异;吗啡依赖大鼠纳洛酮激发前24h侧脑室注射GDNF有义寡脱氧核苷酸与戒断组大鼠相比海马CA1、CA2和CA3区GDNF mRNA表达均没有显著性差异(P>0.05)。【结论】在转录水平,海马CA2区GDNF表达的变化在吗啡依赖和戒断中可能起重要作用。     

激光氧液对戊四氮诱导癫痫反复发作大鼠海马谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的影响

目的 探讨激光氧液(LOF)对戊四氮(PTZ)诱导癫痫反复发作大鼠海马谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量变化的影响.方法 SD大鼠200只随机分为模型糖水组(PTZ+GS组)、模型激光氧液组(PTZ+LOF组)、盐水糖水组(NS+GS组)、盐水激光氧液组(NS+LOF组)和空白组(Sham组)五个亚组,选择处理后当天(0 d)、3 d、7 d、10 d和14 d时间点进行观察,应用高效液相方法检测海马组织Glu和GABA含量.结果 PTZ+LOF组大鼠经过激光氧液治疗后7~14 d惊厥发生率显著下降,在第14天时比治疗前下降50%,同PTZ+GS组比较在治疗7~14 d时两者表达差异均有统计学意义(P<0.05).PTZ+GS组和PTZ+LOF组发作后海马组织Glu的含量较NS+GS组、NS+LOF组和Sham组有显著增高(P<0.05),PTZ+LOF组各时间点Glu含量较PTZ+GS组下降(P<0.05),以3 d下降趋势明显;GABA含量在PTZ+GS组和PTZ+LOF组各时间点浓度也大于NS+GS组、NS+LOF组和Sham组(P<0.05),点燃大鼠经LOF治疗后海马中GABA含量较PTZ+GS组明显升高,其中在7 d、10 d、14 d三个时间点上较PTZ+GS组差异有统计学意义(P<0.05).结论 LOF能够降低大鼠癫痫发作后异常增加的Glu含量,升高GABA含量.     

海洛因对雌性大鼠肽类性激素影响的研究

目的研究海洛因对雌性大鼠血浆FSH、LH、PRL的影响。方法以剂量递增法大鼠腹腔注射海洛因,放免分析法检测血浆——催乳素(PRL)、黄体生成素(LH)及卵泡刺激素(FSH)的水平。结果与对照组相比,海洛因给药组(3d、9d)血浆PRL、LH显著降低(P<0.05);停药后3d、9d组血浆PRL、LH水平仍明显低于对照组(P<0.05),但与给药9d组比较,停药9d组血浆PRL、LH水平虽有回升,但无统计学差异(P>0.05)。血浆的FSH水平在给药组(3d、9d)、停药组(3d、9d)均无明显改变(P>0.05)。结论海洛因使雌性大鼠血浆LH、PRL的水平显著降低,且短期停用海洛因尚不能恢复到正常,对FSH水平无显著影响。     

基质金属蛋白酶-9及组织抑制因子-1在老年犬持续性心房颤动心房组织中表达

目的探讨基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinase,MMP）-9及组织抑制因子（tissueinhibitorsofmetalloproteinase,TIMP）-1在老年犬持续性心房颤动（房颤）心房肌组织中表达变化及其与心房颤动及纤维化发生的关系。方法健康比格犬18只随机分为成年、老年窦性心律组各5只、成年、老年持续性房颤组各4只。采用Masson三色法染色,计算胶原容积分数以测定纤维化程度,采用RT-PCR检测左心房MMP-9及TIMP-1的mRNA水平表达情况,采用蛋白质印迹法测定其蛋白水平表达情况。结果与成年窦性心律组比较,其余3组心房肌组织纤维化程度明显增高（P〈0．01）;TIMP-1mRNA表达水平下降（P〈0．05）,MMP-9蛋白表达水平升高（P〈0．01）,TIMP-1蛋白表达水平下降（P％0．01）;老年窦性心律组及老年持续性房颤组MMP-9mRNA表达水平较成年窦性心率组升高（P〈0．05）;与成年持续性房颤组比较,老年持续性房颤组纤维化程度增加,胶原容积分数明显增高（P％0．05）,TIMP-l蛋白表达水平下降（P〈0．01）。结论心房组织中MMP9和TIMP1基因表达失衡可能是影响胶原代谢、造成增龄性心房颤动时心房肌纤维化的分子机制之一,与增龄性心房颤动的发生和持续有关。     

血液灌流串联血液透析与美沙酮脱毒的前瞻性临床研究

目的观察血液灌流串联血液透析对海洛因成瘾者短期脱毒的疗效。方法选取35例海洛因成瘾患者,随机分为血液净化组(16例)和药物组(19例)。血液净化组患者接受血液灌流串联血液透析治疗3次,每天1次;药物组患者采用美沙酮10 d递减疗法。观察两组患者治疗前和治疗后第1,2,3,5,7,10,14,21,30 d的戒断症状,用戒断症状评分量表(the short opiate withdrawal scale,SOWS)评分,用放射免疫法测定血和尿中吗啡的浓度。结果整个治疗过程中,血液净化组和药物组SOWS评分分别为(4.3±3.8)分和(10.1±4.5)分,差异有统计学意义(P<0.01),从第2 d开始,血液净化组的戒断症状均轻于药物组,差异均有统计学意义(均P<0.05);两组问血吗啡浓度的差异无统计学意义(P>0.05),但对两组问同一天的血吗啡浓度值比较,从第3 d至第7 d,差异均有统计学意义(均P<0.05);两组问尿吗啡浓度的差异有统计学意义(P<0.05),从第3 d开始,血液净化组的尿吗啡平均浓度都低于药物组(均P<0.05)。结论血液灌流串联血液透析是一种安全有效的脱毒方法,短期疗效优于美沙酮。     

高频重复经颅磁刺激对脑缺血后海马BDNF、VEGF和Nestin表达的影响

目的:研究高频重复经颅磁刺激(rTMS)对脑缺血大鼠缺血侧海马BDNF、VEGF和Nestin表达的影响。方法:SD雄性成年大鼠16只,随机分为模型组、rTMS组、rTMS+生理盐水(NS)组和rTMS+H89组各4只,rTMS+NS组和rTMS+H89组分别侧脑室注射NS和H89,4组均建立大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,除模型组外均给予7 d 20 Hz rTMS治疗,应用Western Blot方法检测缺血侧海马pCREB、BDNF、VEGF和Nestin表达。结果:rTMS组pCREB、BDNF、VEGF和Nestin表达较模型组均增加(P<0.05),rTMS+H89组pCREB、BDNF、VEGF和Nestin表达较rTMS+NS组均减少(P<0.05)。结论:高频rTMS能使脑缺血后海马区BDNF、VEGF表达增加,并进一步促进Nestin表达,PKA-CREB通路的调节可能是其机制之一。     

不同液体早期复苏在感染性休克患者的临床研究

目的:评价不同液体早期复苏对感染性休克患者EGDT达标、血乳酸清除率、APACHEⅡ评分和28d病死率的影响。方法:选取2005-10-2010-10收住ICU的感染性休克患者作为研究对象,随机分为高渗氯化钠羟乙基淀粉40溶液组(霍姆组)、3%高渗氯化钠组(高钠组)、羟乙基淀粉130/0.4氯化钠溶液组(万汶组)、生理盐水组(NS组)。分别经中心静脉通路输入相应的复苏液体,配合林格液对患者进行包括6h早期液体复苏在内的早期目标指导性治疗(EGDT)。分别记录各组患者在液体复苏前及复苏0、1、3和6h的心率(HR)、MAP、CVP、24h血乳酸值,并计算24h血乳酸清除率。观察EGDT达标情况、升压药物使用情况、复苏前及复苏72h的APACHEⅡ评分变化以及28d病死率。结果:①共收集符合条件标准的病例51例:霍姆组12例、高钠组10例、万汶组14例、NS组15例。各组患者的性别、年龄、MAP、CVP、HR、APACHEⅡ评分、血乳酸值比较,差异无统计学意义(均P>0.05);②研究液体用量在各组间比较,霍姆组与高钠组比较,差异无统计学意义;NS组、万汶组各自与其他3组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);复苏液体总量在各组间比较,NS组与其他3组比较,万汶组与霍姆组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);高钠组与霍姆组、高钠组和万汶组比较,差异均无统计学意义;林格液量在各组间比较,差异均无统计学意义;③随复苏时间延长,MAP逐渐升高,HR逐渐减慢,MAP、HR在不同时间点各组间比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。随复苏时间延长,CVP逐渐升高,在复苏1h、3h和6h时,霍姆组CVP均高于NS组,差异有统计学意义(均P<0.05);且在复苏1h时,霍姆组CVP高于万汶组,差异有统计学意义(P<0.01),高钠组CVP显著高于NS组(P<0.05);④复苏24h血乳酸值及其清除率在各组间比较,以及复苏后72hAPACHEⅡ评分在各组间比较,差异无统计学意义(均P>0.05);⑤各组患者使用升压药例数、使用升压药>3d例数及EGDT达标例数比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。感染性休克患者的整体病死率为45.10%(23/51),28d病死率在各组间比较,差异无统计学意义。结论:在感染性休克的早期液体复苏中,应用霍姆有利于提高CVP,但对需要应用升压药时间、EGDT达标、乳酸清除率、APACHEⅡ评分以及28d病死率并无无显著影响;对某些需限制性液体管理的患者,使用高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液或高渗盐水可以减少补液总量。