他克莫司治疗全身型重症肌无力的有效性及安全性评价

目的评估他克莫司在全身型重症肌无力患者中的疗效和安全性。方法回顾2011年6月～2017年1月广州中医药大学第一附属医院收治的重症肌无力患者的病历资料,纳入符合标准的患者。于2017年9月通过电话回访对他克莫司联合糖皮质激素治疗的患者与未使用他克莫司治疗的患者在重症肌无力日常生活量表评分(MG-activities of daily living,MG-ADL)、Osserman分型、重症肌无力相关的住院次数、危象发生次数、死亡人数方面进行疗效评价,并记录他克莫司相关的药物不良反应。结果共有231例全身型重症肌无力患者完成随访。他克莫司组的ADL评分差值(随访结束时评分-纳入时评分)显著大于对照组(P=0. 001);他克莫司组患者住院次数显著少于与对照组(P=0. 004)。两组患者在随访结束时Osserman分型、肌无力危象次数和死亡人数方面无显著差异(P均 0. 05)。他克莫司组有19例患者出现药物不良反应,对照组有30例患者出现药物不良反应,无严重的药物不良反应出现。结论他克莫司联合糖皮质激素治疗全身型重症肌无力与对照组相比在改善ADL评分及减少住院次数方面有显著优势并且具有较高的安全性。     

小剂量他克莫司添加治疗难治性全身型重症肌无力的疗效及对外周血CD19~+BAFF-R~+ B细胞的影响

目的探讨小剂量他克莫司添加治疗难治性全身型重症肌无力(MG)的疗效及可能机制。方法纳入临床确诊的18例难治性全身型MG患者(OssermanⅢ型2例,Ⅳ型1例,ⅡB型15例),其中男性5例、女性13例,平均年龄(40.9±9.1)岁,所有病例均给予他克莫司3 mg·d-1治疗6个月。采用美国MG基金会量表(MGFA)、徒手肌力量表(MMT)和日常生活量表(ADL)分别在治疗前和治疗后第1、2、3、4、5、6个月进行疗效评估。其中10例在治疗前和治疗后3和6个月时进行外周血CD19阳性(CD19+)和B细胞活化因子受体阳性(BAFF-R+)B细胞百分比检测。结果 6个月后,所有患者添加小剂量他克莫司治疗MGFA、ADL和MMT量表均较治疗前有明显改善(P0.001);与泼尼松联合治疗的15例患者泼尼松使用剂量明显减少(P0.05);10例患者CD19+BAFF-R+B细胞百分比检测明显下降(P0.001)。结论小剂量他克莫司添加治疗难治性全身型MG,可改善患者日常生活质量、减少泼尼松用量,其机制可能与外周血CD19+BAFFR+B细胞数量下降有关。     

他克莫司治疗重症肌无力的研究进展

重症肌无力(MG)是一种神经-肌肉接头传递功能障碍的获得性自身免疫性疾病。他克莫司已被推荐作为治疗MG的二线药物,文中对他克莫司在MG患者治疗中的研究进展做综述。     

免疫抑制剂对重症肌无力病人T淋巴细胞亚型的影响

目的观察重症肌无力(MG)病人细胞免疫的异常改变和免疫抑制剂对重症肌无力(MG)病人的临床疗效及对T淋巴细胞亚型的影响。方法用许氏评分法观察60例MG病人的病情严重程度和免疫抑制治疗2个月后的临床疗效;采用直接免疫荧光染色和流式细胞仪技术测定60例病人和60名志愿健康者周围血中T淋巴细胞亚型的百分率,并测定糖皮质激素或环磷酰胺免疫抑制治疗前及治疗后2个月T淋巴细胞亚型的变化。结果未治疗MG组外周血中CD8 T淋巴细胞的百分率较正常对照组显著下降(P<0.01);CD4 T淋巴细胞的百分率和CD4 /CD8 T细胞的比例较正常对照组均显著升高(P<0.01)。经激素或环磷酰胺治疗2个月后MG组随着临床症状的改善,外周血中总T细胞(CD3 )和CD8的百分率较治疗前均显著升高(P<0.01;P<0.05);CD4 T淋巴细胞的百分率和CD4 /CD8 T细胞的比例较治疗前均显著下降(P<0.01)。结论MG病人有T淋巴细胞亚型的变化,免疫抑制治疗对T淋巴细胞亚群有明显影响,提示T淋巴细胞亚型的测定可为激素、环磷酰胺等免疫疗法提供一个客观的实验室指标,为判断疾病的转归提供实验依据。     

重症肌无力患者外周血T淋巴细胞亚群凋亡的研究

目的探讨外周血T淋巴细胞亚群凋亡在重症肌无力(MG)免疫发病机制中的作用及临床意义。方法采用流式细胞术结合免疫荧光抗体法测定了45例MG患者和40例正常对照组外周血CD4~ T淋巴细胞、CD8~ T淋巴细胞百分数及其凋亡状况,并对24例MG患者在应用糖皮质激素治疗后外周血T淋巴细胞亚群凋亡状况进行了观察。结果MG患者组外周血CD8~ T淋巴细胞百分率较正常对照组明显降低,CD4~ /CD8~ 比值较正常对照组明显升高：MG患者组外周血CD4~ T淋巴细胞凋亡程度较正常对照组明显降低；MG患者外周血CD4~ T淋巴细胞凋亡程度与MG类型、预后密切相关：应用糖皮质激素治疗后MG患者外周血CD4~ T淋巴细胞凋亡程度明显增强。结论MG患者存在T淋巴细胞亚群的分布异常及CD4~ T淋巴细胞凋亡功能障碍,其凋亡程度可能与MG类型、预后密切相关,糖皮质激素对MG患者外周血CD4~ T淋巴细胞凋亡缺陷具有纠正作用。     

辅助性T细胞及其细胞因子在重症肌无力中的作用

目的探讨辅助性T细胞及其相关细胞因子在全身型MG患者急性期发病中的作用。方法采用流式细胞术检测33例全身型MG患者和34例健康对照组外周血中Tfh细胞亚群CXCR5~+CD4~+T、CD45RO~+CXCR5~+CD4~+T、CD45RA~+CXCR5~+CD4~+T、ICOS~+CXCR5~+CD4~+T和PD-1~+CXCR5~+CD4~+T细胞占CD4~+T细胞的比例。采用流式液相多重蛋白定量(cell based assay,CBA)技术检测MG组及对照组血清中IL-17A、IFN-γ、IL-4、IL-21的含量。应用ELISA技术检测MG组及对照组血清中IL-22的含量。根据QMGs(the quantitative myasthenia gravis score,QMGs)对纳入研究的MG患者进行评分,QMGs反映了MG患者的病情严重程度。结果 MG组外周血中的循环Tfh细胞(ICOS~+CXCR5~+CD4~+T和PD-1~+CXCR5~+CD4~+T)较对照组增高(P=0.016,P0.001),且PD-1~+CXCR5~+CD4~+T细胞与MG患者病情严重程度正相关(r=0.405,P=0.019)。MG组血清IL-21、IL-17A、IFN-γ的含量较对照组升高,有统计学意义(P=0.007,P=0.016,P=0.007);MG组血清IL-4的含量较对照组略有增多,IL-22含量较对照组略有减少,但均无统计学意义。MG组IL-4含量QMGs呈负相关,差异具有显著性(r=-0.393,P=0.024)。结论 MG急性期ICOS~+和PD-1~+的循环Tfh细胞可能促进MG发病;IL-21、IFN-γ、IL-17A同样可能促进MG发病;IL-4可能对MG有保护作用。     

Genistein联合小剂量他克莫司在胰腺移植排斥反应中的作用

背景：有实验表明CXCR3拮抗剂Genistein可减轻胰腺移植大鼠的急性排斥反应。 目的：观察Genistein联合小剂量他克莫司在胰腺移植抗排斥反应中的作用。 方法：以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,建立胰腺移植模型,随机分成5组：对照组(未进行药物治疗)、大剂量他克莫司组、小剂量他克莫司组、Genistein组、Genistein+小剂量他克莫司组。术后第7天行病理学,肝肾功能,血清中CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞、干扰素γ、白细胞介素2浓度检测。 结果与结论：与对照组、小剂量他克莫司组、Genistein组比较,Genistein+小剂量他克莫司组移植胰腺组织损伤减轻,淋巴细胞浸润减少,急性排斥反应减轻,血清CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞明显减少,干扰素γ、白细胞介素2水平降低 (P < 0.05);并且避免了大剂量他克莫司对肝肾功能的损害。说明Genistein联合小剂量他克莫司能有效减轻胰腺移植急性排斥反应而不增加肝肾毒性。     

重症肌无力患者外周血Foxp3和CD152表达变化及其相关性分析

目的研究重症肌无力(MG)患者经全胸腺切除治疗外周血中调节性T细胞(CD4~+ CD25~+ Treg)中Foxp3及CD152(CTLA-4)的表达情况。方法采集重症肌无力经手术切除胸腺患者50例术前和术后6个月外周血为实验组,对照组为25例健康志愿者的外周血。应用流式细胞分析方法检测患者手术前后和健康志愿者外周血中的调节性T细胞Foxp3及CD152(CTLA-4)的表达情况。结果患有MG患者术前外周血中调节性T细胞Foxp3及CD152(CTLA-4)表达水平与对照组相比显著降低(P0.05);全胸腺切除6个月后CD4~+ CD25~+ Foxp3~+ Treg细胞及CD152(CTLA-4)表达比例与手术前比较升高(P0.05),与健康对照组比较水平低(P0.05);调节性T细胞中Foxp3表达水平与CD152(CTLA-4)表达水平呈现一定的正相关性(P0.001)。结论重症肌无力患者外周血调节性T细胞中Foxp3和CD152(CTLA-4)表达水平较低,手术治疗能够明显提高Foxp3及CD152(CTLA-4),然而与正常人比较还不能达到正常的水平,为重症肌无力发病机制与胸腺切除治疗提供了理论依据。     

抗胆碱酯酶联合免疫抑制剂治疗眼肌型重症肌无力临床分析

目的观察抗胆碱酯酶联合免疫抑制剂在眼肌型重症肌无力临床治疗中的效果。方法 80例眼肌型重症肌无力患者随机分为A组和B组,A组采用他克莫司+溴吡斯的明治疗,B组采用硫唑嘌呤+溴吡斯的明治疗。比较2组治疗效果,治疗前后眼球活动障碍改善情况,治疗前后AchR-QM、AchR-HM滴度变化情况。结果 A组总有效率87.5%,B组总有效率65%,A组总有效率显著高于B组(P0.05)。A组治疗后患者眼球活动受限评分显著低于B组,差异有统计学意义(P0.05)。2组治疗后AchR-QM、AchR-HM滴度显著低于治疗前,A组改善效果更显著(P0.05)。结论他克莫司联合溴吡斯的明治疗眼肌型重症肌无力临床效果显著,可显著改善眼球活动障碍。     

重症肌无力患者他克莫司血药浓度监测与CYP3A5基因检测分析

目的分析重症肌无力(MG)患者他克莫司血药浓度的影响因素,为个体化用药提供参考。方法收集2015年1月至2018年12月作者医院使用他克莫司治疗的MG患者258例,并收集患者的临床资料。采用化学发光微粒子免疫分析法测定他克莫司血药浓度,荧光染色原位杂交检测患者CYP3A5~*3基因多态性,采用多重线性回归法分析血药浓度与性别、年龄、体重、基因型、用药剂量、合并用药等因素的相关性。结果 258例MG患者共进行378例次他克莫司谷浓度测定,平均浓度为(6.02±4.93)ng/mL。多重线性回归分析结果显示,他克莫司剂量、CYP3A5基因型、合并使用奥美拉唑或艾司奥美拉唑与他克莫司血药浓度存在相关性(均P0.05)。结论 MG患者他克莫司血药浓度受诸多因素影响,临床应充分考虑个体化因素。     

奥卡西平联合银杏达莫注射液对癫痫患儿的作用机制研究

目的探讨奥卡西平联合银杏达莫注射液对癫痫患儿T淋巴细胞亚群及血清碱性磷酸酶(ALP)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平变化的影响。方法选取洛阳市妇女儿童医疗保健中心77例癫痫患儿,按照随机数字表法分组,对照组38例予以单一奥卡西平治疗,观察组39例给予奥卡西平+银杏达莫注射液治疗,观察2组临床治疗效果、T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)及血清ALP、ICAM-1水平变化情况,并统计2组不良反应发生情况及生活质量评分。结果观察组总有效率94.87%(37/39),高于对照组的71.05%(27/38),差异有统计学意义(P0.05)。治疗3个月后观察组CD3+及CD4+均高于对照组,CD8+低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗3个月后2组血清ALP水平比较,差异无统计学意义(P0.05),观察组血清ICAM-1水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组不良反应发生率15.38%(6/39),对照组为10.53%(4/38),差异无统计学意义(P0.05)。治疗3个月后观察组社会能力、认知功能、总体健康、生活质量、药物影响、精神健康及生活满意度评分均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论银杏达莫注射液辅助奥卡西平治疗癫痫效果显著,安全性高,可改善患儿血清ICAM-1水平及T淋巴细胞亚群,提高其生活质量。     

Thymectomy and azathioprine have no effect on the phenotype of CD4 T lymphocyte subsets in myasthenia gravis.

The influence of thymectomy and long term immunosuppression on the phenotype of CD4 T lymphocyte subsets, which were defined by the restricted expression of CD45RA and CD45RO markers, was studied by double immunofluorescence in 29 patients in different clinical stages of generalised myasthenia gravis. In the acute stage of myasthenia, before thymectomy and immunosuppression, no differences in CD4 subsets were observed in the peripheral blood from nine patients and 21 matched controls. Four to seven weeks after thymectomy, there was a slightly decreased proportion of CD4+CD45RO+ (UCHL1+) memory cells (p < 0.05, paired t test). Patients on steroids showed a more pronounced decrease of CD4+CD45RO+ cells suggesting, in addition, a drug-related effect. CD4 subsets (CD45RA, CD45RO, and CD29 positive) in the peripheral blood compartment remained largely stable over 18 to 24 months thereafter. In addition, CD4 subsets were examined in 20 patients with myasthenia gravis who had had a thymectomy between two and 17 years before. With the exception of patients on steroids, there were no differences in CD4 subsets in patients on or off azathioprine. These data did not show any relation of CD4 T cell subsets to the clinical course of myasthenia, or significant changes due to thymectomy, or immunosuppression with azathioprine. These results also complement the authors' clinical experience that thymectomy in adults does not leave a deficit in cell-mediated immunity. The slight change associated with steroid treatment might deserve further attention.     

Beneficial effect of tacrolimus on myasthenia gravis with thymoma

We examined the effect of tacrolimus on myasthenia gravis (MG). Five patients with thymoma and 5 patients without thymoma underwent prior thymectomy but showed persistent myasthenic symptoms. Oral administration with tacrolimus significantly improved MG scores 1, 3, and 6 months following the beginning of treatment in all patients (P < 0.05), and the improvement was significantly higher in the thymoma group compared with the nonthymoma group (P < 0.05). However, there was no significant change in antiacetylcholine receptor titers in either group. This indicates a particular application of immunosuppressive therapy for thymomatous MG following thymectomy.     

重症肌无力患者汉密尔顿抑郁量表评分分析

目的探讨重症肌无力(myasthenia gravis,MG)患者汉密尔顿抑郁量表(Hamilton depression rating scale,HDRS)评分情况及其影响因素分析。方法横断面研究2013-07—2015-03作者医院就诊的188例MG患者的临床资料和HDRS评分情况,并根据HDRS评分将其分为抑郁组和非抑郁组,分析两组MG患者的临床特点及其与HDRS评分间的关系。结果所纳入MG患者男女比例为1.02∶1,眼肌型重症肌无力(ocular myasthenia gravis,OMG)和全身型重症肌无力(generalized myasthenia gravis,GMG)的比例为1.2∶1,以OMG起病和以GMG起病患者的比例为6.2∶1,病程中位数为2年,四分位数间距为1.8年,平均量化重症肌无力评分(quantitative myasthenia gravis,QMG)为(6.7±2.3)分,平均HDRS评分为(8.7±3.4)分,并发抑郁者65例,未并发抑郁者123例。影响HDRS评分和抑郁发生的相关因素包括性别(P0.01)、MG类型(P0.01)、QMG得分(P0.01)和美国重症肌无力协会(myasthenia gravis foundation of America,MGFA)分型(P0.01)、有无甲状腺功能亢进(P0.05)。结论影响MG患者HDRS评分和抑郁发生的相关因素包括性别、MG类型、QMG评分和MGFA分型、有无甲状腺功能亢进,充分认识其抑郁发生情况有利于更好地治疗MG。     

垂体腺瘤术后外周血T淋巴细胞亚群及血清MMP-9水平的变化

目的 探讨内镜下和显微镜下经鼻蝶入路切除垂体腺瘤术后病人外周血T淋巴细胞亚群及血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平的变化。方法 2014年6月至2017年3月收治符合标准的垂体腺瘤89例,根据治疗方法分为观察组（45例）和对照组（44例）。观察组采用内镜下经鼻蝶入路切除垂体腺瘤,对照组采用显微镜下经鼻蝶入路切除垂体腺瘤。结果 与对照组相比,观察组术中出血量明显减少（P<0.05）,手术时间与住院时间明显缩短（P<0.05）,术后并发症发生率明显降低（P<0.05）;术后3个月CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均明显升高（P<0.05）,血清MMP-9水平明显降低（P<0.05）。结论 与显微镜下手术相比,内镜下经鼻蝶入路切除垂体腺瘤可明显减轻手术创伤,改善外周血T淋巴细胞亚群及血清MMP-9水平,减少并发症发生。     

脑胶质瘤患者T淋巴细胞亚群检测的临床意义

目的 探讨T淋巴细胞亚群与胶质瘤恶性程度及其预后的关系,寻找术前评估胶质瘤恶性程度及其预后的临床免疫学指标. 方法 对中山大学肿瘤防治中心神经外科自2003年1月至2004年12月收治住院的117例脑肿瘤患者[其中胶质瘤共85例,高级别组(WHO Ⅲ～Ⅳ级)45例,低级别组(WHO Ⅰ～Ⅱ级)40例;脑膜瘤32例]术前用流式细胞仪(FACS)测定T淋巴细胞的含量,统计分析不同级别胶质瘤、脑膜瘤之间免疫学指标的差异,并依据术前外周血T淋巴细胞亚群检测结果,把胶质瘤患者分为CIM+/CD8~+比值>1及CD4~+/CD8~+比值<1两组,随访3～5年,作生存分析,比较两组之间的差异. 结果 统计分析结果显示,高级别胶质瘤组较低级别胶质瘤组CD4~+/CD8~+比值下降、CD8~+升高,差异均有统计学意义(P<0.05),其余指标差异无统计学意义.高级别胶质瘤组较脑膜瘤组CD4~+/CD8~+比值下降、CD8~+升高,差异均有统计学意义(P<0.05),其余指标差异尤统计学意义.低级别胶质瘤组较脑膜瘤组CD4~+/CD8~+比值下降,差异有统计学意3L(P<0.05),其余指标差异无统计学意义.胶质瘤组与脑膜瘤组比较,CD4~+、CD4~+/CD8~+值下降、CD8~+升高,差异均有统计学意义(P<0.05),CD3~+差异无统计学意义.CD4~+/CD8~+比值>1组患者48例随访3～5年,死亡21例(43.8%),中位生存期31个月;CD4~+/CD8~+比值<1的患者37例,死亡23例(62.2%),中位生存期16个月.两者行生存分析Kaplan Meier法检验,差异有统计学意SL(P<0.05). 结论 术前外周血T淋巴细胞亚群与胶质瘤的恶性程度相关.CD4~+/CD8~+比值低的患者生存时间较短,预后差.术前外周血T淋巴细胞哑群检测可以作为临床评估胶质瘤恶性程度及预后的参考指标.     

大剂量丙球蛋白抢救重症肌无力危象的临床研究

目的:探讨大剂量丙球蛋白(Ig)在抢救重症肌无力危象的临床疗效。方法:根据Qsseman分型,Ⅱa型2例、Ⅱb型8例、Ⅲ型13例、Ⅳ型3例MG危象患者在综合抢救的同时联合应用大剂量Ig静脉注射为治疗组。Ⅱa型1例、Ⅱb型6例、Ⅲ型15例、Ⅳ型2例综合治疗患者为对照组。以临床绝对评分及临床相对评分作为治疗前、后疗效判定标准,于治疗前、后2周抽清晨空腹血查AChRAb,观察治疗前、后重症肌无力的免疫状态的变化。结果:治疗组治疗前、后AChRAb有明显差异(P<0.01)。对照组治疗前、后无明显差异。临床评分两组治疗前、后均有明显差异(P<0.05),但治疗组治疗前、后分值差明显大于对照组(P<0.01)。经治疗后两组危象持续时间及有效率有明显差异(P<0.01)。结论:大剂量Ig在抢救MG危象中疗效明显、安全、可靠,值得临床应用。     

神经梅毒患者淋巴细胞亚群分析

目的分析神经梅毒患者外周血中淋巴细胞亚群的特点,探讨其与神经梅毒发病的关系。方法选取神经梅毒患者52例为研究对象,分为无症状神经梅毒组、早期神经梅毒组与晚期神经梅毒组,选取同期健康体检者50例为健康对照组,采集外周血,运用流式细胞术分析神经梅毒组与健康对照组的外周血淋巴细胞的表达水平。结果神经梅毒患者的CD3~+CD8~+T淋巴细胞数量明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05),神经梅毒患者NK细胞数量显著低于健康对照组;无症状神经梅毒患者的CD3~+T细胞与CD3~+CD8~+T细胞数显著高于早期神经梅毒患者和晚期神经梅毒患者,差异均有统计学意义(P0.05)。结论神经梅毒患者的T淋巴细胞亚群失衡与NK细胞减少与神经梅毒的发生发展有一定关系。     

The effects of FK506 on refractory inflammatory myopathies

We performed an observational clinical study, the effects of tacrolimus (FK506) on the thymic output in patients with refractory inflammatory myopathies. Sixteen patients with polymyositis (PM) and 15 with dermatomyositis (DM) were treated orally with tacrolimus. Serum CK levels significantly decreased 2 to 4 months after tacrolimus therapy (p < 0.01), and MRC (Medical Research Council) scores were significantly improved 2 months after tacrolimus therapy (p < 0.01). T-cell receptor excision circle (TREC) content, a proxy for thymic export was not significantly different from that in age-matched controls, except for an increase in the TREC content within CD8+ single positive cells in patients with DM. TREC contents within double-positive cells and CD4+ single-positive cells were significantly decreased 4 M after tacrolimus therapy (p < 0.05) in PM/DM patients. Tacrolimus treatment significantly attenuated TREC content within cultured CD4+CD8- cells from PM/DMpatients (p < 0.05), but total cell counts were not significantly changed. These results indicate that tacrolimus therapy suppresses not only activated T-lymphocytes, but also some na?ve T-cell subsets in both PM and DM.