膝关节骨性关节炎患者外周血自然杀伤细胞亚群比例变化研究

目的研究自然杀伤(NK)细胞亚群比例变化与膝关节骨性关节炎(knee osteoarthrosis,K-OA)的关系。方法补体裂解法分离K-OA组与对照组外周血NK细胞,酶免疫标记技术测定两种不同NK细胞亚群比例。结果与对照组比较,K-OA组CD16-CD56+比例减少,而CD16+ CD56+比例上升(P<0.05)。结论 K-OA的发生与具有杀伤活性的CD16+ CD56+ NK细胞亚群比例上升有关。     

脐血中CD56brightCD16dim/-NK细胞亚群的检测

目的了解新生儿脐血NK细胞和CD56brightCD16dim/-NK细胞亚群的比率,探讨CD56bright CD16dim/-NK细胞在脐血低免疫应答中的作用.方法使用血细胞分析仪计数淋巴细胞;采用流式细胞术检测脐血、母亲及对照组中NK细胞和CD56brightCD16dim/-NK细胞亚群的比率.结果脐血中淋巴细胞计数显著高于母亲及对照组;NK细胞比率无显著性差异;CD56brightCD16dim/-NK细胞高于母亲及对照组;母亲组CD56brightCD16dim/-NK细胞高于对照组.结论脐血中丰富的CD56brightCD16dim/-NK细胞是脐血低免疫应答的原因之一.     

IVIG被动免疫治疗对原因不明复发性自然流产患者细胞免疫功能的影响——附56例报告

目的:探讨静脉滴注免疫球蛋白(IVIG)被动免疫治疗对原因不明复发性自然流产(URSA)患者机体细胞免疫的影响。方法:选择71例URSA患者,根据患者意愿分为IVIG治疗组56例和对照组15例,IVIG治疗组56例接受国产IVIG 10 g,每3周1次,妊娠后每月接受国产IVIG 1次,直至妊娠26～30周。对照组则未予IVIG治疗。观察两组妊娠结局。流式细胞仪分析IVIG治疗前后妊娠成功者和失败者体内IFN-γ+CD4+T细胞、IL-10+CD4+T细胞和NK细胞亚群比例变化。结果:56例患者经IVIG治疗后,妊娠成功率为86%(48/56),明显高于对照组的20%。IVIG治疗组中,妊娠成功者体内IFN-γ+CD4+T细胞、CD56+CD16+NK细胞亚群比例比治疗前明显下降(P均<0.01),IL-10+CD4+T细胞、CD56+CD16-NK细胞亚群比例比治疗前明显升高(P<0.01);而妊娠失败者IVIG治疗前后体内各细胞亚群比例无明显改变。结论:IVIG被动免疫治疗能调节URSA患者机体细胞免疫应答,有利于维持妊娠。     

自身免疫病病人外周血NK细胞检测的意义

目的 探讨自身免疫病病人外周血NK(CD3-CD16+CD56+)细胞在自身免疫病发病机制中的作用。方法用流式细胞术检测29例自身免疫病病人和18例健康对照者外周血NK(CD3-CD16+CD56+)细胞数,同时检测NK细胞的胞膜活化性受体NKG2D(CD314)和抑制性受体NKG2A(CD159)以及穿孔素、颗粒酶-β的表达。结果自身免疫病病人外周血NK细胞数与健康对照组无明显差别。自身免疫病病人NK细胞膜活化性受体NKG2D和颗粒酶-β的表达在治疗前和治疗后均低于正常对照组(P0.05);自身免疫病病人NK细胞膜膜抑制性受体NKG2A和穿孔素的表达在治疗前和治疗后与正常对照组相比,均无明显差别。结论 外周血NK细胞的膜活化性受体NKG2D和颗粒酶-β表达减少可能与自身免疫病的发生、发展有关。     

分娩发动前后体内NK细胞、NKT细胞表型分析

目的研究分娩发动前后蜕膜及外周血中NK细胞、NKT细胞表面NKG2A和NKG2D受体的表达情况,探讨其在产程发动中的作用。方法选取正常孕足月孕妇分为分娩发动经阴道分娩组（以下简称分娩组20例）和分娩未发动行选择性剖宫产术组（以下简称剖宫产组20例）,分离蜕膜及外周血中单个核细胞后采用流式细胞学技术分别检测CD56＋细胞、NK细胞、NKT细胞表面NKG2A和NKG2D受体的表达情况。结果外周血单个核细胞中分娩组CD56＋NKG2A＋细胞构成下降、CD56＋NKG2D＋细胞构成增加,NK细胞、NKT细胞表面NKG2D表达上升。蜕膜单个核细胞中分娩组CD56＋NKG2A＋和CD56＋NKG2D＋细胞构成及NK细胞表面NKG2A和NKG2D表达均下降,NKT细胞表面NKG2A和NKG2D表达无显著差异。结论临产前体内NK细胞、NKT细胞表面NKG2A和NKG2D受体表达的变化可能在在产程的发动中起着重要作用。     

急性白血病病人外周血NK细胞检测的临床意义

目的探讨急性白血病病人外周血NK(CD3-CD16+CD56+)细胞检测的临床意义。方法用流式细胞术检测18例正常对照及54例急性白血病病人外周血NK细胞占淋巴细胞百分比,NK细胞膜活化性受体NKG2D和抑制性受体NKG2A及穿孔素、颗粒酶的表达。结果(1)白血病初治组NK细胞数量显著低于正常对照组(P0.05),缓解组、复发组与正常对照组均无显著性差异(P0.05);(2)初治组、复发组活化性受体NKG2D均显著低于正常对照组(P0.05);初治组、缓解组、复发组抑制性受体NKG2A与正常对照组无显著性差异(P0.05)。(3)初治组、复发组的穿孔素表达均显著低于正常对照(P0.05)。结论 NK细胞数量减少及NKG2D、穿孔素表达减少可能与白血病病人发病及复发有关。     

肿瘤坏死因子、NK细胞亚群对药物流产后阴道流血的影响

目的 探讨早孕妇女蜕膜中肿瘤坏死因子(TNF-α)和自然杀伤(NK)细胞亚群对药物流产后持续性阴道流血的影响。方法 采用流式细胞技术分析研究60例药物流产后持续性阴道流血患者蜕膜中TNF-α和NK细胞亚群的表达(观察组)。并以60例正常药物流产患者为对照(对照组)。结果 观察组蜕膜中TNF-α表达降低为10.23±1.20％,对照组20.51±6.42％,两组比较有显著性差异(P<0.01)。观察组蜕膜中NK细胞亚群CD56 CD16-、CD56 CD16-、CD56-CD16 的表达降低,分别为9.21±1.25％、2.32±0.78％、3.43±0.42％,,对照组分别为15.97±4.21％、5.32±0,98％、6.12±1.35％,两组比较有显著性差异(P<0.01;P<0.05;P<0.01)。结论 蜕膜中TNF-α和NK细胞亚群的表达降低,致孕囊与蜕膜剥离不全,从而引起持续性阴道流血以及阴道出血量多。     

血液系统恶性肿瘤病人外周血NK细胞及其受体检测的临床意义

目的探讨血液系统恶性肿瘤病人外周血NK(CD3-CD16+CD56+)细胞及其受体检测的临床意义。方法用流式细胞术检测18例正常对照及20例淋巴瘤、22例急性白血病、16例MDS病人外周血NK细胞占淋巴细胞百分比,NK细胞膜活化性受体NKG2D和抑制性受体NKG2A及穿孔素、颗粒酶的表达。结果 (1)初治淋巴瘤和白血病组NK细胞数量显著低于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05),MDS组与正常对照组无显著性差异(P0.05);(2)初治淋巴瘤组、白血病组、MDS组活化性受体NKG2D表达均显著低于正常对照组(P0.05),差异有统计学意义;淋巴瘤组、白血病组、MDS组抑制性受体NKG2A与正常对照组无显著性差异(P0.05)。(3)初治淋巴瘤组和白血病组的穿孔素、颗粒酶表达均显著低于正常对照(P0.05),差异有统计学意义。MDS组穿孔素、颗粒酶表达与对照组无显著性差异(P0.05)。结论淋巴瘤、白血病病人免疫功能减低与NK细胞数量减少及NKG2D、穿孔素、颗粒酶表达减少有关,MDS病人免疫功能减低可能只与NKG2D表达减低有关。     

IL-2和IL-15诱导扩增的脐带血NK细胞生物学特性研究

本研究探讨脐血CD3-CD56+NK细胞及其在IL-2、IL-15诱导扩增后的免疫表型、细胞毒活性等生物学特性的改变。分离脐血单个核细胞,在无血清培养条件下,分别加入IL-2或(和)IL-15,培养14 d,流式细胞术检测CD3-CD56+NK细胞亚群水平以及NK表面CD16、CD62L、NKG2D、NKG2A、NCR44、NCR46、颗粒酶B、穿孔蛋白的表达;用WST-1法检测NK细胞对K562细胞毒活性。结果表明,扩增14 d后IL-2、IL-15、IL-2/IL-15 3组NK细胞分别扩增了10.78±2.51、10.42±3.72、10.54±6.24倍,3组之间无显著差异;扩增后的NK细胞表达CD16的比例显著减低,IL-2和IL-15组之间差异显著;细胞因子扩增后CD62L表达无改变;IL-2有下调NKG2A、NCR46表达的作用,IL-15的作用则相反;两种细胞因子均有上调NKG2D、穿孔蛋白、NCR44表达的作用,且细胞因子之间也存在差异;IL-15有上调NK细胞颗粒酶B表达的作用;经细胞因子扩增的NK细胞毒活性显著增高,但细胞因子之间作用无显著差异。结论:在无血清培养条件下,IL-2和IL-15均能有效地扩增脐血中NK细胞。虽然2种细胞因子扩增后的CD3-CD56+NK细胞与功能相关的免疫表型呈现出不同的改变特征,但细胞毒活性均显著增加,且2种细胞因子之间作用无显著差别,协同作用不明显;NK细胞毒活性是各种活性分子共同作用的结果。     

原因不明习惯性流产患者外周血CD3~+CD16~+CD56~+自然杀伤T细胞的表达及意义

目的探讨自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)在原因不明习惯性流产(unexplained recurrent spontaneous abortion,URSA)发生机制中的作用。方法有URSA史患者50例,其中未孕者20例为URSA非孕组,难免流产者30例为UESA难免流产组,52例正常体检者中正常未生育者20例为正常未育组,正常妊娠孕妇20例为正常妊娠组,有正常生育史12例为正常生育组,采用流式细胞术检测各组外周血中CD3+CD16+CD56+NKT细胞的表达水平。结果外周血CD3+CD16+CD56+NKT细胞百分率正常未生育组[(4.62±1.38)%]与正常生育组[(4.90±3.00)%]比较差异无统计学意义(P0.05);URSA非孕组外周血CD3+CD16+CD56+NKT细胞百分率[(2.42±1.52)%]低于正常生育组(P0.05),URSA难免流产组[(4.18±2.77)%]低于正常妊娠组[(14.40±2.27)%](P0.05);正常妊娠组外周血中NKT细胞百分率是正常生育组的3倍,而URSA难免流产组是URSA非孕组的2倍。结论 URSA患者外周血NKT细胞表达水平降低,NKT细胞可能参与了URSA的发生。