用同时检测血清中伤寒杆菌抗原和抗体的对流免疫电泳法进行伤寒的早期快速诊断

血清学诊断试验有助于诊断恢复期伤寒,由于急性期病人血清尚不存在相当滴度的扰体,所以很难作出早期诊断.作者介绍了一种同时检测血清中伤寒杆菌抗原和抗体的对流免疫电泳方法,能早期、快速诊断伤寒.方法 (1)CIE试验抗原:用伤寒杆菌对照菌株的超声波溶解产物经离心后作抗原,取已知滴度的抗血清滴定,确定最佳抗原稀释度.(2)CIE试验抗血清:制备抗伤寒杆菌血清,用付伤寒杆菌A和大肠杆菌E广泛吸收,取标准的伤寒杆菌超声波溶解抗原滴定,确定最佳抗血清稀释度.(3)CIE试验:按照Fossieck等人方法加以改进,即缓     

肺炎球菌荚膜多糖对人体免疫应答状态的初步研究

目的 探讨人体自然状态下对PPV23所涵括的各血清型肺炎球菌的总体应答情况.方法 以30名健康人、32名CAP患者为研究对象,采用ELISA法测定血清中抗体.结果 CAP患者血清抗肺炎球菌荚膜多糖IgG抗体浓度高于健康人（P＜0.05）,CAP患者抗肺炎球菌荚膜多糖IgM抗体浓度与健康人比无统计学差异（P＞0.05）.结论 健康个体既往均曾感染肺炎球菌,或可对寄生状态肺炎球菌产生一定的初次免疫应答.肺炎球菌荚膜多糖作为TI抗原可引起健康个体产生回忆性免疫应答.     

用对流免疫电泳进行阿米巴肝脓肿的快速筛检试验

用对流免疫电泳(CIE)诊断阿米巴病已有许多报导,但试验的可靠性尚不一致.以往的研究都是用琼脂或琼脂糖作载体,本文作者用醋酸纤维薄膜作CIE检筛阿米巴肝脓肿.血清标本试样取自40例阿米巴肝脓肿,3例大肠阿米巴瘤,13例肠阿米巴病,并以50例非阿米巴病人及50例待产病人的血清作对照.抗原将冰冻干燥制备的溶组织阿米巴HK9株的干粉溶于蒸馏水中,使浓度达13.2mg/ml(10~7     

数种检测抗核抗体、抗盐水可提取核抗原抗体方法的对比分析

目的评价检测抗核抗体和抗盐水可提取核抗原(ENA)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)的性能.方法将相关纯化抗原包被的ELISA试剂和间接免疫荧光抗核抗体(IFANA)试验、免疫印迹法(IBT)和对流免疫电泳法(CIE)等用于20份系统性红斑狼疮(SLE)、10份干燥综合征(SS)患者以及30份健康对照血清中自身抗体的检测.结果 ELISA和IFANA抗核抗体筛选试验对结缔组织病诊断的敏感性和特异性差异无显著性(P>0.05),但5例IFANA阴性而ELISA阳性的患者血清经鉴定为抗SS-A和/或dsDNA抗体阳性;1例ELISA阳性而IFANA阴性的正常人血清经证实为ELISA试验假阳性.ELISA、CIE、IBT 3种方法检测抗Sm抗体对诊断SLE的特异性均达到100%,敏感性差异无显著性(P值均>0.05).ELISA与IBT相比,在抗SS-A抗体检测上更为敏感(P<0.01),ELISA与CIE法相比对抗SS-B抗体的检测也更敏感(P<0.05).结论本研究中所用的ELISA抗核抗体检测试剂敏感性、特异性较好.     

对流免疫电泳作血分离培养的快速鉴定

本文描述了用对流免疫电泳(CIE)检测血培养中细菌抗原的方法,及其对303例血培养阳性标本的试验结果。材料:抗血清——革兰氏阳性球菌用肺炎球菌R抗血清,革兰氏阴性杆菌用肺炎杆菌抗血清,革兰氏阴性球菌用脑膜炎双球菌抗血清,抗葡萄球菌磷壁酸抗体效价为1∶32以上的人抗血清。参考用磷壁酸抗原系从金黄色葡萄球菌培养物获得。所有血培养阳性细菌均经革兰氏染色镜检,需氧和厌氧培养     

Optochin试验和胆汁溶解试验及MALDI-TOFMS在肺 炎链球菌鉴定中的应用价值

摘要:目的以分子生物学检测方法为金标准,对奥普托辛(Optochin)试验和胆汁溶解试验及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱( MALDI-TOF MS)3种鉴定肺炎链球菌的方法进行比较研究,探讨适合临床微生物实验室应用的准确快速鉴定肺炎链球菌的方法。方法282株疑似肺炎链球菌的a溶血链球菌分别用Optochin试验、胆汁溶解试验和MALDI-TOFMS质谱进行鉴定,并与肺炎链球菌特异性基因SPN0001 PCR 扩增结果比较。以行X列队卡方检验统计分析3种方法在鉴定肺炎链球菌中的检测性能。结果282 株a溶血链球菌SPN0001基因检测阳性234株,阴性为48株;Optochin敏感(Opt° )213株,耐药(Opt'')69株;胆汁溶解试验阳性235株,阴性47株;经MALDI-TOF MS鉴定为肺炎链球菌247株,鉴定为非肺炎链球菌35株。单独胆汁溶解试验.Optochin试验或MALDI-TOFMS联合胆汁溶解试验检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和约登指数达到最高,均为100.00%. .97.92% .99. 57%、100% .0.98。Optochin试验、胆汁溶解试验及MALDI-TOF MS对282株a溶血链球菌鉴定结果的差异有统计学意义(X =14.381,P<0.05)。结论在鉴定肺炎 链球菌方法中,MALDI-T0F MS鉴定肺炎链球菌快速且敏感性高,胆汁溶解试验的特异性最高, Optochin试验的敏感性和特异性均不理想,临床实验室可以用MALDI-T0FMS进行初筛,并用胆汁溶解试验进行验证。     

脑膜炎患者脑脊液中细菌抗原的检测

作者以协同凝集试验(COA),乳胶凝集试验(LA)、对流免疫电泳(CIE)及鲎试验(LAL)四种方法检测脑膜炎患者脑脊液中细菌抗原,并比较其敏感性和特异性。作者采取的155例脑膜炎患者的脑脊液标本,细菌培养阳性的99例,作敏感性测定;细菌培养阴性的56例,作特异性鉴定。分别以COA、LA、CIE法检测β型流感嗜血杆菌、肺炎链球菌及脑膜炎球菌培养阳性标本,发现测定流感嗜血杆菌抗原以COA及LA法敏感性较高(均为78%),CIE法略低     

ELISA检测系统性红斑狼疮患者血清中抗可提取性核抗原抗体

抗可提取性核抗原(ENA)抗体是系统性红斑狼疮(SLE)疾病的重要的血清学标志。目前抗ENA抗体的检测主要采用对流免疫电泳法(CIE)和免疫印迹技术(IBT)。本室自1996年开始试用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测自身免疫性疾病的抗ENA抗体,现将用ELISA和CIE同时检测244例SLE患者血清中抗ENA抗体结果报告分析如下。     

包虫病和囊虫病患者血清的血清学交叉反应

由于许多蠕虫具有多种抗原,以致长期以来都认为非特异性是寄生虫病血清学诊断中的一个问题。猪带绦虫囊虫病患者血清在用包虫抗原作血清学试验时,常产生高滴度的结果。不过,用定性的标准能大大提高特异性〔如用免疫电泳试验鉴定包虫特异的弧5(arc5)〕;经过对500多例患者作临床观察,已确认根据弧5的存在可以确诊细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫和E.Vogeli的感染。但是,最近又发现,囊虫病患者血清也出现弧5,这样就对弧5确诊包虫病的概念提出了怀疑。本文试图用包虫抗原与囊虫抗原来检测两种患者血清的间接血凝试验(IHAT)的滴度,并用包虫抗原作免疫电泳试验(IEPT)和双向扩散试验,观察出现沉淀带的数目和类型(包括弧5),以鉴别包虫病和囊虫病。取病理学确诊的包虫病和囊虫病患者血清,并记录病史和临床表现。在IHAT中,血清作2倍稀释,自1∶32～1∶4096,用单体的包虫囊液为抗原作     

一种检测DNA抗体的ELISA简易快速法

作者应用酶联免疫吸附技术(ELISA)来检测各种疾病患者和输血员血清中对天然(双链)DNA和变性(单链)DNA 的抗体,并将本法与放射免疫试验(RIA,用天然双链 DNA 作为抗原基质)和胶乳凝集法(用可溶性脱氧核糖核蛋白致敏)作了比较。本法经济、敏感、可靠,在临床实验室可代替RIA 来检测 SLE 抗体。材料和方法①用于 ELISA 的 DNA:将商品牛胸腺 DNA 先用蛋白酶消化,以除去其中的残存蛋     

百日咳的对流免疫电泳诊断法

百日咳杆菌至今仍是儿童严重呼吸道感染的主要病原。百日咳早期的卡他症状轻微,易误诊为感冒而错过作细菌培养的最佳期,且百日咳杆菌不易培养。为了此病的诊断,曾用过直接凝集试验、血凝试验、间接血凝试验、补体结合试验、酶联免疫吸附测定法等多种血清学技术。但这些方法都是测定体内抗体量的增多,诊断实属回顾性、且结果变化大,不能令人满意。而今,对流免疫电泳(CIE)已成功地用于细菌性脑膜炎和细菌性肺炎的快速诊断。CIE法测定的是细菌抗原,故具有早期诊断之优点。本文作者把CIE用于临床标本中百日咳杆菌抗原的检查。该法所用百日咳抗血清系以百日咳疫苗免疫家兔所得。每两周给兔子肌肉注射百日咳     

全程C反应蛋白的检测与临床应用

1930年Tillet和Francis首次在急性大叶性肺炎患者的血清中发现了一种能在Ca2+存在时与肺炎球菌细胞壁中的荚膜多糖(C多糖)形成复合物的物质,命名为C反应素.1941年Abernethy Avery和Macleod Avery等测知它是一种蛋白质,故称为C反应蛋白(CRP)[1].     

胶乳颗粒凝集试验检测B型流感杆菌磷酸聚核糖抗原的临床研究

在四个临床中心进行一种新的胶乳颗粒凝集(LPA)试验,以检测经细菌培养或对电流免疫电泳(CIE)证实的B型流感杆菌脑膜炎、败血症、会厌炎、肺炎或肺炎并发脑膜炎,以及菌血症患者的血液、脑脊液及尿液标本中的B型流感杆菌磷酸聚核糖(PRP)抗原,并与常用的细菌培养法或CIE法进行比较。LP人试验的试剂有:①将抗B型流感杆菌马血液球蛋白致敏的胶乳颗粒,经缓冲液洗涤后悬于蛋白质稳定缓冲液中。②对照胶乳颗粒用未免疫的     

传染病临床实验诊断新知

近年来,随着实验方法的不断发展,传染病范围内的实验诊断也在更新。在该领域中,进展很快,现就几个重要方面作简要介绍。免疫学试验免疫学试验广泛应用于病毒、细菌、真菌及寄生虫病的诊断。免疫学沉淀试验中最常用的方法是对流免疫电泳(CIE),可用以检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、粪中轮状病毒抗原、脑脊液及尿     

ELISA检测系统性红斑狼疮患者血清中抗可提取性核抗原抗体

抗可提取性核抗原 ( ENA)抗体是系统性红斑狼疮 ( SLE)疾病的重要的血清学标志。目前抗 ENA抗体的检测主要采用对流免疫电泳法 ( CIE)和免疫印迹技术 ( IBT)。本室自 1 996年开始试用酶联免疫吸附试验 ( ELISA)检测自身免疫性疾病的抗 ENA抗体 ,现将用 ELISA和 CIE同时检测 2 4 4例 SLE患者血清中抗 ENA抗体结果报告分析如下。材料和方法一、标本来源2 4 4例 SLE来自 1 996年～ 1 998年 1月我院皮肤科 ,内科门诊及住院病人 ,其诊断均符合美国风湿病协会诊断 SLE标准 [1] ,正常对照组为我院体检健康者 40例。二、试剂ELIS…     

(1,3)-β-D葡聚糖、半乳甘露聚糖、隐球菌荚膜多糖抗原联合检测对晚期艾滋病感染患者的临床意义

目的探讨(1,3)-β-D葡聚糖(BG试验)、半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)和隐球菌荚膜多糖抗原联合检测对晚期艾滋病感染患者的临床意义。方法收集AIDS晚期患者120例,根据侵袭性真菌病(IFD)诊断标准,真菌阳性数是70例。回顾性研究他们的CD4数量,真菌培养情况,BG试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原检测的敏感性和特异性的统计结果。结果 IFD组与非IFD组的CD4绝对值比较,前者显著小于后者(55±13/μl VS 250±45/μl,P0.05),90%IFD组CD4绝对值小于50/μl。120例AIDS患者中真菌培养出60例阳性(50.0%)。单独BG试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原试验的敏感性分别为:42.9%、64.3%、14.3%;特异性分别为:75.0%、90.0%、100.0%。三者联合应用的敏感性和特异性分别为:95.7%、78.9%,三者联合应用的敏感度显著大于单独试验的敏感度(P0.05),也显著大于真菌培养阳性率(95.7%VS 50%,P0.05)。结论AIDS晚期患者,尤其当CD4绝对值小于50/μl时患真菌感染概率很高,BG试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原试验的联合检测可以提高真菌诊断的敏感性,具有重要的临床意义。     

补充对流免疫电泳测定甲胎蛋白

测定甲胎蛋白(AFP)有助于诊断肝癌,睾丸肿瘤和某些先天性缺陷。测定方法以放射免疫测定法(RIA)最敏感,但是价格昂贵。对流免疫电泳(CIE)测定价格虽便宜,但它的敏感度只达80毫微克/毫升。作者介绍了一种补充CIE试验,即在CIE开始十分钟后,在样品孔里补充80毫微克/毫升的AFP溶液5微升,再继续电泳60分钟。在初步检查沉淀线后,可以用氨基黑染色法进一步检查沉淀线。电泳是在1%琼脂糖中进行,电流是4毫安/厘米,孔直径是3毫米,孔间距为4毫米。原先加入的待测样品和抗血清的体积各为10微升。用各种不同浓度的AFP10微升对10微升抗AFP血清进行CIE测定,结果证明AFP的最低可     

数种检测抗核抗体、抗盐水可提取核抗原抗体方法的对比分析

目的：评价检测抗核抗体和抗盐水可提取核抗原（ENA）抗体的酶联免疫吸附试验（ELISA）的性能。方法：将相关纯化抗原包被的ELISA试剂和间接免疫荧光抗核抗体（IFANA）试验、免疫印迹法（IBT）和对流免疫电泳地（CIE）等用于20份系统性红斑狼疮（SLE）、10份干燥综合征（SS）患者以及30份健康对照血清中自身抗体的检测。结果：ELISA和IFANA抗核抗体筛选试验对结缔组织病诊断的敏感性和特异性差异无显著性（P＞0．05），但5例IFANA阴性ELISA阳性的患者血清经鉴定为抗SS－A和／或dsDNA抗体阳性；1例ELISA阳性则IFANA阴性的正常人血清经证实为ELISA试验假阳性，ELISA、CIE、IBT3种方法检测抗Sm抗体对诊断SLE的特异性均达到100％，敏感性差异无显著性（P值均＞0．05）。ELISA与IBT相比，在抗SS－A抗检检测上更为敏感（P＜0．01）。ELEISA与CIE法相比对抗SS－B抗体的检测也更敏感（P＜0．05）。结论：本研究中所用的ELISA抗核抗体检测试剂敏感性，特异性较好。     

耐青霉素的肺炎球菌

肺炎球菌的感染较广泛,大多数病例用青霉素G或半合成青霉素治疗有效。然而目前已发现有耐青霉素的的肺炎球菌的感染。而这类感染的出现率尚不易掌握,因其与流行地区和时间变化均有密切关系。一般流行地区,耐青霉素的肺炎球菌还不普遍,因此药敏试验不作为肺炎球菌的常规试验。但学者们认为,必须考虑到两个问题:(1)选择作青霉素耐药性试验的病例(2)选择作青霉素耐药     

胰胆系疾病血清和胆汁糖抗原199的测定

糖抗原(CA)199是胰腺癌和胆管癌敏感而特异的肿瘤标志,一般用血清作为检测标本,临床上较少用胆汁进行测定。我们对117例胰胆良恶性疾病作了比较测定。