用MDCK细胞培养副流感病毒的初步尝试

目的:初步探索用MDCK细胞培养副流感病毒。方法:用不同血凝效价副流感病毒感染MDCK细胞,观察副流感病毒在细胞上的生长情况,并检测血凝效价的变化。结果:1∶512副流感病毒感染MDCK细胞后24h即出现明显的细胞病变效应,但病毒的血凝效价有所下降。结论:副流感病毒可以引起MDCK细胞出现细胞病变效应,但在该细胞内不能复制。     

细胞病变效应

细胞病变效应（ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃｅｆｆｅｃｔ，ＣＰＥ）：大多数病毒感染敏感细胞、在细胞内增殖并与之相互作用后，会引起受染细胞发生聚集、脱落、融合、形成包涵体、甚至损伤、死亡。这些恃征性的改变，可在低倍显微镜下直接观察，称为细胞病变效应。由于ＣＰＥ常...     

蓝舌病毒湖北株对小鼠前列腺癌RM-1细胞的杀伤效应

目的:体外研究蓝舌病毒湖北株3(BTV-HbC3)对小鼠前列腺癌细胞RM-1的感染性并探讨BTV-HbC3靶向性溶瘤的机制。方法:观察RM-1细胞感染BTV-HbC3的细胞病变效应;MTT法研究病毒致细胞病变率的特征;透射电镜观察感染病毒后细胞超微结构的变化;DNA Ladder分析病毒诱导细胞凋亡的情况;流式细胞仪测定病毒对RM-1细胞凋亡的影响。结果:BTV-HbC3感染RM-1细胞后有明显的细胞病变效应;DNA Ladder分析为阶梯状条带;透射电镜发现胞质内有大量病毒颗粒和典型细胞凋亡形态变化;流式细胞仪可见明显的细胞凋亡。结论:BTV-HbC3在体外能有效的感染RM-1细胞,并能诱导RM-1细胞凋亡。     

E1B缺陷溶瘤腺病毒dl1520体外对鼻咽癌细胞的杀伤作用

目的探讨E1B55KDa缺陷腺病毒dl1520体外对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法dl1520感染不同鼻咽癌株后测定病毒增殖;观察细胞病变效应;MTT法测定细胞生长抑制作用。结果dl1520在鼻咽癌细胞中可复制增殖并有致细胞病变效应,MTT法测定感染复数为0.032、0.16、0.8、4、20、100时CNE2细胞生长抑制率分别为2.78%、7.41%、10.19%、24.07%、45.37%、67.59%。结论dl1520体外可在鼻咽癌细胞中复制并裂解杀伤肿瘤细胞。     

人参皂苷Rg3体外抗HSV-1活性与免疫调节效应

目的：研究人参皂苷Rg3体外对单纯疱疹病毒1型 (HSV-1)的抑制作用与免疫调节效应。方法：采用结晶紫染色法观察Rg3对HSV-1致细胞病变效应的抑制作用。用MTT比色法检测Rg3对Vero细胞和小鼠脾细胞增殖的影响。以Rg3诱导小鼠脾细胞,用鼠脾T淋巴母细胞增殖分析法测定上清中IL-2活性,细胞病变抑制法测定IFN-γ活性。结果：浓度在1.56～25 m g•L^-1的Rg3对HSV-1致细胞病变效应抑制作用显著高于病毒对照组 (P<0.05);浓度小于25 mg•L^-1的Rg3对传代Vero细胞及小鼠脾细胞的增殖作用与细胞对照组比较差异无显著性 (P>0.05); 3.13~6.25 mg•L^-1的Rg3体外诱生IL-2和IFN-γ分泌水平显著高于对照组( P<0.05)。结论：一定浓度的Rg3具有体外抗HSV-1活性,对传代Vero细胞及小鼠脾细胞无毒性,可显著促进IL-2和IFN-γ分泌,参与免疫调节效应。     

红芪提取物对柯萨奇病毒抑制作用的研究

目的探讨红芪提取物对柯萨奇病毒(CB4V)的抑制作用。方法采用组织细胞培养法,观察人宫颈癌传代细胞(HeLa细胞)的细胞病变效应及通过抑制病毒复制指数测定反应抗病毒效果。结果红芪提取物具有抑制HeLa细胞病变的作用;抑制病毒复制指数为2.06。结论红芪提取物在细胞水平具有明显的抑制CB4V作用。     

板蓝根对柯萨奇病毒抑制作用的研究

目的 探讨板蓝根对柯萨奇B_4病毒(CB_4V)抑制作用。方法 采用组织细胞培养法,观察人宫颈癌传代细胞(HeLa细胞)病变效应及通过抑制病毒复制指数反应抗病毒的效果。结果 板蓝根具有抑制HeLa细胞病变的作用;抑制CB_4 V复制指数为2.75。结论 板蓝根在细胞水平具有明显的抗CB_4 V的作用。     

溶瘤病毒dl1520体外对肝癌细胞杀伤作用的研究

目的:探讨E1B缺陷溶瘤腺病毒dl1520体外对肝癌细胞Hep3B的杀伤作用。方法:通过细胞病变效应(CPE)观察d l1520对肝癌细胞株的杀伤作用;MTT法测定对肝癌细胞生长抑制作用,并通过空斑法测定病毒增殖,探讨其杀伤机理。结果:d l1520在肝癌细胞株Hep3B中可复制增殖并导致明显细胞病变效应,显著抑制癌细胞的生长。结论:d l1520体外可在肝癌细胞Hep3B中复制并裂解杀伤肿瘤细胞。     

轮状病毒分离与培养方法的建立

①目的探讨建立轮状病毒的分离与培养方法。②方法粪便标本经ELISA检测，离心后接种于MA104细胞株，观察病毒致细胞病变效应。提取病毒RNA．琼脂糖电泳检测。③结果经离心、双抗处理后，轮状病毒可在MA104细胞中克隆增殖．并引起细胞病变（CPE）。④结论MA104作为容纳细胞，可用于轮状病毒的大量扩增。     

板蓝根对柯萨奇病毒抑制作用的研究

目的 探讨板蓝根对柯萨奇B4病毒(CB4V)抑制作用。方法 采用组织细胞培养法，观察人宫颈癌传代细胞(HeLa细胞)病变效应及通过抑制病毒复制指数反应抗病毒的效果。结果 板蓝根具有抑制HeLa细胞病变的作用；抑制CB4V复制指数为2．75。结论 板蓝根在细胞水平具有明显的抗CB4V的作用。     

An Ultrastructural Study of Psoriatic Skin After PhotoHerbal Therapy of Angelica Dahurica and Ultraviolet A

The skin specimens of 20 patients with psoriasis were examined with electronmicroscope after the photo-herbal therapy with Angelica dahurica,Sichuan variety (ADS)and ultraviolet A (UVA) irradiation.It was found that the therapeutic effects of this photo-herbal therapy were similar to those of the photochemotherapy of psoralen and UVA.Boththe therapies could accelerate the degeneration and breakdown of the psoriatic cells andnormalize the proliferation of the basal cells.However the large vacuoles formed in thenuclei of psoriatic cells after photochemotherapy reported by other authors could not beobserved after the combined treatment of ADS and UVA (ADS-UVA).     

光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力及整合素表达的影响

目的 探讨光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力及整合素表达的影响.方法 应用体外管腔形成试验(UVA照射剂量分别为0、2.0、5.0 J/cm2)观察光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力的影响,同时应用逆转录链式酶反应及流式细胞术分别检测光化学疗法对内皮细胞整合素mRNA及蛋白表达的影响.试验中根据诱导剂分为bFGF刺激组和PMA刺激组,每组内又根据UVA的剂量(0、2.0、5.0 J/cm2)分为三个亚组.结果 2.0和5.0 J/cm2的长波紫外线联合100 ng/mL的8-MOP可在体外明显抑制内皮细胞的管腔形成能力,并下调整合素mRNA及蛋白的表达.结论 光化学疗法可能通过下调整合素的表达抑制内皮细胞管腔形成能力的抑制效应.     

光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力及整合素表达的影响

目的 探讨光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力及整合素表达的影响。方法 应用体外管腔形成试验(UVA照射剂量分别为0、2.0、5.0 J/cm2)观察光化学疗法对内皮细胞管腔形成能力的影响,同时应用逆转录链式酶反应及流式细胞术分别检测光化学疗法对内皮细胞整合素mRNA及蛋白表达的影响。试验中根据诱导剂分为bFGF刺激组和PMA刺激组,每组内又根据UVA的剂量(0、2.0、5.0 J/cm2)分为三个亚组。结果 2.0和5.0 J/cm2的长波紫外线联合100 ng/mL的8-MOP可在体外明显抑制内皮细胞的管腔形成能力,并下调整合素mRNA及蛋白的表达。结论 光化学疗法可能通过下调整合素的表达抑制内皮细胞管腔形成能力的抑制效应。     

PUVA therapy for psoriasis: choosing a suitable régime

Three age- and sex-matched groups of 30 patients with chronic plaque psoriasis were treated by photochemotherapy (PUVA). Groups I and II received routine maintenance PUVA therapy at different intervals and Group III had no maintenance treatment. The remission time after the clearance treatment with PUVA is compared with the total cumulative dose of long wave ultraviolet light (UVA). A lower mean dose of UVA (51.0 ± 1.7 joules/cm²) in Group III (no maintenance PUVA) achieved a comparable remission period to that after larger cumulative doses following routine maintenance therapy (87.8 ± 4.9 and 77.0 ± 4.1 joules/cm² in Groups I and II).     

光化学疗法对内皮细胞明胶酶表达的影响

目的观测光化学疗法对内皮细胞明胶酶表达的影响。方法应用RT-PCR法及明胶酶法分别观测光化学疗法对内皮细胞明胶酶mRNA及活性的影响。结果2.0~5.0 J/cm2的长波紫外线联合100 ng/mL的8-甲氧补骨脂素可在体外明显抑制明胶酶的表达及活性。结论光化学疗法可抑制内皮细胞明胶酶的表达及活性,此抑制效应与其抗血管新生效应密切相关。     

五类栽培白芷与兴安白芷的挥发油成分及其化学亲缘关系

目的 测定5类栽培白芷及野生兴安白芷（根）的挥发油成分及含量并分析各类白芷间的化学亲缘关系。方法 水蒸气蒸馏法提取6类白芷挥发油,采用GC-MS法对其组分分离及鉴定,采用面积归一化法计算各组分相对含量,并对挥发油成分进行聚类分析和主成分分析。结果 5类栽培白芷（川白芷、杭白芷、祁白芷、禹白芷、毫白芷）和野生兴安白芷共鉴定出81种化合物,分别鉴定出27、34、24、32、28、34种。主要为烷烃类、烯烃类、酯类、有机酸类、醇类等五大类化合物。壬基环丙烷、环十二烷和正十六酸分别为各类白芷共有成分中相对含量最高的挥发油成分。化学聚类结果显示：兴安白芷与5类栽培白芷形成2个分支,栽培白芷又可分为2小类,即川白芷、禹白芷、杭白芷聚为1小类,祁白芷和亳白芷聚为另1小类。主成分分析结果与聚类结果基本一致。结论 六类白芷的挥发油组份及其含量存在一定差异,壬基环丙烷、环十二烷和正十六酸在各类白芷中含量较高。六类白芷总体上分为野生与栽培2大类。     

强脉冲光及5-氨基酮戊酸对小鼠B16黑素瘤细胞的作用

目的 研究强脉冲光(IPL)及5-氨基酮戊酸(5-ALA)对小鼠B16黑素瘤细胞的影响.方法 以小鼠B16黑素瘤细胞为实验对象,分为阴性对照组(不加5-ALA,未辐射)、UVA阳性对照组(3、4、5 J/cm~2 UVA辐射)、5-ALA组(含5 mmol/L 5-ALA的细胞培养液孵育)、IPL组(20、30、40 J/cm~2 IPL辐射)及5-ALA+IPL组(含5 mmol/L 5-ALA的细胞培养液孵育细胞4 h后予20、30、40 J/cm~2 IPL辐射).辐射后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d以噻唑蓝比色法(MTT)测定细胞增殖情况、NaOH溶解法测定黑素含量、氧化多巴反应法测定酪氨酸酶活性的变化.结果 5 mmol/L 5-ALA不影响B16黑素瘤细胞增殖、细胞黑素含量及酪氨酸酶活性.3～4 J/cm~2 UVA可促进B16黑素瘤细胞增殖,5 J/cm2时细胞增殖受到抑制.3～5 J/cm~2 UVA可提高酪氨酸酶活性、促进黑素合成,其作用呈剂量依赖性.IPL及5-ALA+IPL可降低黑素含量,5-ALA+IPL的作用较IPL更明显.IPL及5-ALA+IPL对细胞增殖及酪氨酸酶活性无明显影响.结论 UVA可提高酪氨酸酶活性,促进B16黑素瘤细胞的黑素合成.IPL及5-ALA+IPL可使B16黑素瘤细胞黑素合成减少,对细胞增殖、酪氨酸酶活性无影响.     

白藜芦醇对UVA致HaCaT细胞氧化损伤的保护作用

目的：探讨白藜芦醇对UVA照射后HaCaT细胞的光保护作用及其可能机制。方法：采用5J／cm^2 UVA照射HaCaT细胞后,分别加入0．01mmol／L和0．1mmol／L的白藜芦醇进行干预．同时设正常对照组与UVA照射组,分别用MTT法检测细胞增殖能力,用羟胺法、比色法、TBA法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性及丙二醛（MDA）含量,电镜观察细胞超微结构的改变。结果：白藜芦醇能提高UVA照射后HaCaT细胞增殖能力、细胞SOD和GSH—Px活性,降低MDA含量,且呈剂量依赖性增加或降低（P〈0．05）。电镜结果显示白藜芦醇能减轻UVA对HaCaT细胞超微结构的损伤。结论：白藜芦醇能减轻UVA对HaCaT细胞增殖的抑制作用、超微结构和氧化功能的损伤,并有随剂量依赖性增加的保护作用,其机制可能与白藜芦醇提高氧化酶活性、清除自由基有关。     

Caspase8、3蛋白在PUVA诱导K562细胞凋亡时的变化

目的研究Caspase8、3蛋白在补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）诱导人白血病K562细胞凋亡时的变化。方法用不同浓度的中药补骨脂中提取的PSO和（或）不同照射时间、波长为360nm的UVA作用于K562细胞,检测细胞凋亡率、在电镜下细胞超微结构改变及Caspase8、3蛋白的表达,用多因素方差分析法对定量资料进行统计分析。结果PSO、UVA照射及PUVA均可使细胞凋亡率增加,后两者上调Caspase8、3蛋白的表达,PUVA的作用显著强于前两者;PUVA处理后的K562细胞超微结构出现明显的凋亡形态学改变。结论PUVA可通过激活Caspase8、3基因诱导K562细胞凋亡。     

PUVA诱导K562细胞凋亡时对Fas表达的影响

目的探讨补骨脂素（PSO）加长波紫外线（UVA）光化学疗法（PUVA）诱导人白血病细胞K562凋亡时对Fas表达的影响。方法以K562细胞为研究对象,以细胞凋亡率、电镜下细胞超微结构改变以及细胞Fas基因表达水平、蛋白表达水平为检测指标,观察中药补骨脂中提取的PSO加波长为360 nm的UVA对人白血病细胞诱导凋亡的作用以及部分作用途径,并采用多因素方差分析法进行统计学处理。结果（1）单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可诱导K562细胞发生凋亡,PUVA的作用显著强于前两者。（2）电镜下观察经PUVA处理后的K562细胞超微结构,可见明显的凋亡形态学改变。（3）单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可上调K562细胞Fas基因表达水平,PUVA的作用显著强于前两者。（4）单纯PSO、单纯UVA照射及PUVA均可上调K562细胞Fas蛋白表达水平,PUVA的作用显著强于前两者。结论（1）PUVA可诱导白血病细胞K562发生凋亡,作用强于单纯PSO及单纯UVA照射。（2）PUVA诱导K562凋亡的途径之一为上调K562细胞Fas基因表达水平。