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相似文献
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1.
本研究将含HEVORF3cDNA的真核表达质粒作为基因疫苗直接注射到BALB/c小鼠骨胳肌内,引发了实验小鼠特异性抗-HEVIgG反应。小鼠经2次基因疫苗接种或1次基因疫苗,然后用HEV重组蛋白加强免疫后,血清抗-HEVIgG滴度较接种1次基因疫苗组明显升高。  相似文献   

2.
戊型肝炎病毒(HEV)基因疫苗免疫小鼠的初步研究   总被引:10,自引:0,他引:10  
本研究将含HEV ORF3 cDNA的真核表达质粒作为基因疫苗直接注射到BALB/c小鼠骨骼肌内,引发了实验小鼠特异性抗-HEV IgG反应。小鼠经2次基因疫苗接种或1次基因疫苗,然后用HEV重组蛋白加强免疫后,血清抗-HEV IgG滴度较接种1次基因疫苗组明显升高。  相似文献   

3.
抗HSV—1杂交瘤细胞系的建立及单抗特性研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
以HSV-1为抗原,免疫BALB/C鼠,取其脾细胞在PGE介导下与SP2/0细胞常规融合,IFA法筛选鉴定,反复克隆,共获得7株能稳定、持续分泌抗HSV的McAb的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为87 ̄103条之间,Ig类型分别为IgG1、IgG2b、IgG3,腹水抗体效价在10^-5 ̄10^-7之间免疫沉淀。SDS-PAGE分析,2株与132K多肽发生特异性反应,只具有HSV-1型特异性,其余3  相似文献   

4.
目的:通过基因免疫诱导BALB/c小鼠产生抗Ⅲ型中国株HCV来源F2糖蛋白的体液免疫应答,方法:质粒p3W14在NIH3T3细胞中能够表达E2糖蛋白,纯化该质粒并用于BALB/c小鼠直接肌注,于加强注射后不同时相采血,以重组的E2糖蛋白检测特异性抗E2抗体。结果;接种p3W14质粒的小鼠中检出抗E2抗体(5/6),抗体滴度1:15~1:120。结论;采用含E2/NS1基因的质粒DNA免疫,成功地诱  相似文献   

5.
以自己合成的黄曲霉毒素B_1一人血清白蛋白(AFTB_1-HSA)偶联物免疫BALB/c鼠,应用杂交瘤技术,建立了两株能持续分泌抗AFTB_1单克隆抗体(AFTB_1McAb)的杂交瘤细胞株,命名为IB5和2F1,接种BALB/c鼠腹腔均能诱发产生含特异性抗体的腹水。用间接竞争抑制ELISA鉴定McAb的反应特异性,使McAb与固相黄曲霉毒素B_1一牛血清白蛋白(AFTB_1-BSA)结合产生50%抑制所需的AFTB_1、B_2、G_1、G_2浓度依次为:1B54.0、36.9、23.3、403.3ng/ml,2F12.4、2.6、2.8、4。7ng/ml。  相似文献   

6.
黄曲霉毒素B1单克隆抗体的制备和鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
以自由合成的黄曲霉毒素B1-人血清白蛋白(AFTB1-HSA)偶联物免疫BALB/c鼠,应用杂交瘤技术,建立了两株能持续分泌抗AFTB1单克隆抗体(AFTB1McAb)的杂交瘤细胞株,命名为1B5和2F1,接种BALB/c鼠腹腔均能诱产生含特异性抗体的腹水。  相似文献   

7.
目的 观察不同品系小鼠(H-2^b,H-2^d)经乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)基因疫苗免疫后特异性辅助性T细胞反应类型和特异性细胞毒性T细胞活性。方法 Western blot法鉴定该基因疫苗的体外表达产物;基因枪法和肌内注射法接种该基因疫苗;间接ELISA法检测小鼠血清抗-HBc IgG亚类(IgG1,IgG2a)水平;^51铬释放法测定小鼠脾细胞HBcAg特异性细胞毒性T细胞活性。结果  相似文献   

8.
Ruan B  Zhuang H  Ma Y 《中华医学杂志》1998,78(7):498-500
目的研究戊型肝炎病人抗戊型肝炎病毒(HEV)开放读码框架2(ORF2)和3(ORF3)及IgM和IgG抗体的消长规律及其临床意义。方法采用HEVORF2、ORF3合成多肽单独和联合酶联免疫法,动态检测52例病人血清抗HEV。结果起病初期ORF2抗体和ORF3抗体水平均较高,随病程的延长两者均下降,ORF3抗体尤为明显。联合检测ORF2和ORF3抗体可提高试验的敏感性。血清抗HEVIgM和抗HEVIgG阳性率于起病半个月内分别为71.1%(32/45)和97.8%(44/45),随病程的延长抗HEVIgM较早阴转。结论HEV抗体诊断试剂盒至少应含有ORF2和ORF3两种抗原。抗HEVIgM的特异性好而抗HEVIgG的灵敏度高。  相似文献   

9.
将市售HCV-IgG诊断试剂盒加以改良,建立了HCV-IgM抗体检测方法,与抗HBc-IgM,抗HBs-IgM,抗CMV-IgM,抗RV-IgM,RF及抗核抗体(ANA)阳性血清均不起反应。正常人群中抗HCV-IgM阳性率为1.5%(1/68),抗HCV-IgG阳性的43例血透患者检出抗HCV-IgM14例(32.6%),12例输血后肝炎抗HCV-IgM全部阳性。以上结果表明,抗HCV-IgM可作为输血后HCV感染的一个敏感指标  相似文献   

10.
以HSV-1为抗原,免疫BALB/C鼠,取其脾细胞在PGE介导下与SP2/0细胞常规融合,IFA法筛选鉴定,反复克隆,共获得7株能稳定、持续分泌抗HSV的McAb的杂交瘤细胞系。核型分析染色体数为87~103条之间,Ig类型分别为LgG_1、IgG_(2g)、IgG_3,腹水抗体效价在10 ̄(-5)~10 ̄(-7)之间免疫沉淀。SDS—PAGE分析,2株与132K多肽发生特异性反应,只具有HSV-1型特异性,其余3株与120~128K多肽,2株与60K多肽发生特异性反应,具有HSV型共同抗原特异性。7株McAb与CMV均不发生特异反应。这些杂交瘤细胞系的建立对于HSV的临床早期、快速诊断有重要的应用价值。  相似文献   

11.
笔者对2008例散发性急性病毒性肝炎的血清标本,用ELISA方法进行HAV-IgM,HBsAg/或抗HBc-IgM,HCV-Ab,HEC-Ab检测,结果发现HAV-IgM阳性967例,HBsAg和/或抗HBc-IgM阳性562例,HCV-Ab阳性69例,HEV-Ab阳性246例,尚有164例,为非甲乙丙戊型肝炎,结果提示人群中甲型肝炎发病率最高。  相似文献   

12.
为观察乙肝病毒HBsAg基因疫苗免疫小鼠后的细胞及体液免疫应答,将该疫苗定向克隆于质粒peDNA3巨细胞病毒启动子下游,构建能在真核细胞内表达的重组基因疫苗pcDNA-HBsAg。将此疫苗通过多点肌肉注射免疫Balb/C小鼠后第六周,实验组小鼠均出现抗-HBsIgG阳性,其抗体水平明显高于对照组,同时Th1免疫应答相关的细胞因子IL-2及γ干扰素水平显高于对照组,表明本文构建的基因疫苗pcDNA3  相似文献   

13.
本文用两种18染色体上特异性DNA片段的探针和14号染色体上免疫球旦白重链结合区探针,用Southernblot法对25例B型非何杰金淋巴瘤病例(B-NHL)进行bc1-2基因重排的检测,并作了免疫表型和染色体核型检查。发现56%(10/18例)的滤泡型NHL和1/7例弥漫型NHL病人出现了bc1-2基因重排。91%(10/11例)重排病例的bcl-2基因片段与重排的Ig重链结合区的片段一起移动。证实了t(14;18)染色体易位。结果表明,bc1-2基因重排与滤泡型NHL的发病有密切关系。  相似文献   

14.
张正益 《海军医高专学报》1998,20(2):107-107,109
慢性乙肝的乙肝病毒复制指标(HBV-DNA、HBeAg、抗-HBcIgM)的检测方法较多,阳性率各异。文章就本院近年开展的前-S2及其与HBV-DNA、HBeAg、抗-HBeIgM等多指标的联合检测方法。对慢性乙型病毒肝炎住院病人两组53例分析,结果表明,以前-S2阳性率为最高,并在与HBV-DNA、HBeAg、抗0HBcIgM等多指标的联合检测时,可进一步提高阳性率。因此,前-S2及其联合检测是  相似文献   

15.
TGFβ1对胃腺癌细胞SGC—79001,Bcl—2表达的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
乔文  王剑波 《医学争鸣》1998,19(5):539-540
研究转化生长因子β1对胃癌细胞Bcl-2的表达的影响。方法:TGFβ1作用于人胃癌细胞SGC-7901,48H后收集细胞爬片。用抗Bcl-2mAb和免疫组织化学SABC法及图像分析技术分析Bcl-2。结果;TGFβ1作用的胃腺癌细胞Bcl-2表达量1  相似文献   

16.
单克隆抗体F(ab‘)2片段2种纯化方法的建立及比较   总被引:2,自引:1,他引:1  
刘成刚  陈志南 《医学争鸣》1998,19(4):388-390
目的:建立纯化(mAb)F(ab‘)2片段的有效方法。方法:在pH5.5环境下,用DTT激活木瓜酶,在没有DTT存在下消化抗人肝癌mAb HAb18 IgG1,37℃,反应8h,然后分别用Sephacryl S-200(1cm×65cm)凝胶过滤柱和DEAE-Sepharose-FF(2cm×18cm)阴离子交换柱纯化。结果:经SDS-PAGE(100g/L)电泳测定,2种方法纯化的F(ab’)2  相似文献   

17.
目的:通过基因免疫诱导BALB/c小鼠产生抗Ⅲ型中国株HCV来源E2糖蛋白的体液免疫应答。方法:质粒p3W14在NIH3T3细胞中能够表达E2糖蛋白,纯化该质粒并用于BALB/c小鼠直接肌注,于加强注射后不同时相采血,以重组的E2糖蛋白检测特异性抗E2抗体。结果:接种p3W14质粒的小鼠中可检出抗E2抗体(5/6),抗体滴度1∶15~1∶120。结论:采用含E2/NS1基因的质粒DNA免疫,成功地诱导小鼠产生抗Ⅲ型株来源的E2抗体。  相似文献   

18.
乙肝病毒S基因的研究概况李凤梅,甘宝文(广西柳州市中医院)(广西医科大学第一附属医院)近年研究发现:①HBsAg/Ig是HBsAg与IgM、IgG、IgA结合形成的免疫复合物;②抗-HBs-Ab2是HBsAg/Ig在体内作为抗原刺激机体而产生的独特型...  相似文献   

19.
研究抗HER2/neu胞外区的特异性抗体对SKBR3乳腺癌细胞株酪氨酸磷酸化及细胞增殖的影响。方法Western印迹法及抗体介导的特异性细胞增殖试验;筛选乳腺癌病人抗HER2/neu抗体阳性血清IgG的ELISA方法。结果试验发现单抗cneu5对SKBR3细胞p185酪氨酸磷酸化有明显促进作用,但对细胞增殖的影响不明显;而单抗cneu2对SKBR3细胞p185酪氨酸磷酸化及细胞增殖均有明显作用。在此基础上,收集乳腺癌病人血清14份,分离纯化其血清IgG,并经ELISA方法筛选出5份乳腺癌病人抗HER2/neu抗体阳性血清IgG。细胞增殖试验发现该5份标本中有3份对SKBR3细胞增殖有显抑制作用。选其中1份抑制增殖的阳性血清IgG进一步研究其对SKBR3细胞p185酪氨酸磷酸化的影响,结果发现该病人血清IgG对细胞酪氨酸磷酸化也有抑制作用。结论抗HER2/neu的特导性抗体可能通过抑制细胞的信号传递系统而抑制肿瘤生长。  相似文献   

20.
目的 克隆H-2K^bcDNA及研究其在多种真核细胞中的表达。 方法 RT-PCR法扩增H-2K^bcDNA,克隆入双顺反子逆转录病毒载体pGCEN,PA317包装出重组病毒后,分别感染NIH3T3、COS7及MM45T.Li,PCR和RT-PCR分析目的基因表达,FACS分析H-2K^b在细胞膜上的表达。结果 以双顺反子逆转录病毒载体pGCEN介导,分别建立了H-2K^b基因转导细胞:NIH3T  相似文献   

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