GnRHa对子宫腺肌病在位内膜细胞凋亡及VEGF分泌的影响

目的:探讨促性腺激素释放激动剂(GnRHa)对子宫腺肌病(AM)在位内膜细胞凋亡及血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响。方法:取32例AM患者在位内膜细胞及20例对照组正常子宫内膜细胞进行体外培养,并予不同浓度GnRHa处理细胞,分别作用24、48、72 h后,用末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;采用ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF的含量。结果:(1)镜下可见两组部分细胞固缩、漂浮、核浓缩、碎裂,呈典型的凋亡小体;(2)不含GnRHa培养的AM在位内膜细胞凋亡率在各时间点均低于对照组,且两组都随时间的延长凋亡率增加(P<0.01);(3)GnRHa作用后,两组的凋亡率高于作用前,且均随浓度的增加而增加,且实验组各时间点、各浓度AM在位内膜细胞凋亡率均显著高于同时间、同浓度的对照组(P<0.01);(4)VEGF在AM在位内膜细胞中的分泌高于正常子宫内膜细胞(P<0.05),且GnRHa呈剂量依赖方式抑制AM在位内膜细胞及正常子宫内膜细胞VEGF的分泌。结论:(1)在位内膜细胞凋亡率异常可能是AM发病机制之一。GnRHa可能以自分泌或旁分泌机制直接作用于在位内膜细胞,提高了AM在位内膜细胞的凋亡率。(2)VEGF可能与子宫腺肌病的发生发展有关。GnRHa对子宫内膜细胞有直接作用,可能通过抑制VEGF的分泌,阻碍血管生成,从而达到抑制子宫内膜在子宫肌层内异位种植和生长的目的。     

促性腺激素释放激素激动剂治疗子宫内膜异位症的进展

促性腺激素释放激素激动剂（gonadotropin releasing hormone agonists,GnRH-a）有效的治疗子宫内膜异位症已得到普遍的认可及应用。随着对GnRH-a的作用机制及临床应用方面的不断认识,GnRH-a治疗子宫内膜异位症有了新的进展,随之产生的反加疗法及时减轻了GnRH-a治疗子宫内膜异位症的不良反应,即血管运动综合症及骨质疏松等。     

促性腺激素释放激素激动剂改善子宫内膜异位症患者生育力的作用机制及应用

促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa）为治疗子宫内膜异位症（EM）的常用药物之一。EM可多方面对女性生育力产生不利影响,而GnRHa可通过改善EM患者腹腔及卵泡微环境、提高子宫内膜容受性及改善输卵管功能等作用提高EM相关不孕患者生育力,并在联合腹腔镜手术及辅助生殖技术（ART）治疗改善EM不孕患者妊娠结局中具有一定价值。     

宫腔镜子宫内膜切除联合左炔诺孕酮宫内缓释治疗子宫腺肌病45例

目的探讨宫腔镜子宫内膜切除术(TCRE)联合曼月乐左炔诺孕酮药物缓释系统(Mirena)治疗子宫腺肌病的临床疗效。方法筛选我科诊治的子宫腺肌病患者45例,分为对照组22例,观察组23例。对照组采用单纯放置Mirena治疗,观察组先行TCRE,之后择期放置Mirena。记录2组患者阴道出血、痛经、闭经等指标情况,并定期随访。结果治疗后3个月、半年及1年,观察组患者阴道不规则出血发生率明显低于对照组(P<0.05),2种治疗方法对痛经的治疗效果无显著差异(P>0.05)。结论对子宫腺肌病患者行TCRE联合Mirena治疗,效果优于单纯放置Mirena。     

妊娠与非妊娠大鼠子宫内膜促性腺激素释放激素及其受体的免疫组织化学研究

目的：研究促性腺激素释放激素（GnRH)及其受体在妊娠与非妊娠大鼠子宫内膜中的分布及相对含量,为了解促性腺激素释放激素对子宫内膜的可能功能提供依据。方法：免疫组织化学ABC法及图像分析技术。结果：非妊娠大鼠子宫内促性腺激素释放激素及促性腺激素释放激素受体阳性反应发生在内膜上皮、腺上皮及基质细胞。妊娠大鼠子宫内这二者阳性反应主要发生在内膜上皮及基蜕膜的蜕膜细胞,妊娠大鼠子宫上皮细胞中的促性腺激素释放激素及其受体的相对含量明显高于非妊娠大鼠子宫内膜。结论：妊娠与非妊娠大鼠子宫内膜均能表达促性腺激素释放激素及其受体。     

子宫内膜异位症在位内膜腺上皮细胞及基质细胞的分离培养和鉴定

目的分离培养子宫内膜异位症在位内膜组织中子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞,建立研究子宫内膜异位症的细胞模型。方法对分泌期子宫内膜异位症在位内膜组织用混合酶消化,滤网过滤和差速梯度离心的方法分离,体外培养后通过光镜观察及免疫细胞化学、免疫荧光化学方法对分离细胞鉴定。结果分离的细胞角质蛋白阳性子宫内膜腺细胞百分率约90～95%;分离的骨架蛋白形成蛋白阳性的基质细胞百分率达90%以上。结论本研究获得较高纯度的子宫内膜腺细胞和基质细胞,成功建立了研究子宫内膜异位症的细胞模型。     

一级子宫内膜样腺癌累及腺肌病临床病理分析

目的探讨子宫内膜一级子宫内膜样腺癌(endometri-oid adenocarcinoma,EA)累及腺肌病(adenomyosis,AM)的临床病理特点及鉴别诊断。方法观察2例子宫内膜一级EA累及AM的临床病理和免疫组织化学特点,并复习相关文献。结果 2例患者均为中年妇女,年龄分别为47、52岁,表现为进行性痛经伴月经量增多和经期延长,彩色超声示子宫内膜增厚、子宫增大伴肌壁间不均匀回声。病理检查:大体观察子宫增大,子宫壁增厚,子宫体底部子宫内膜局限型结节状和息肉状肿块。镜下为子宫内膜无肌层侵犯的一级EA,肌层内受癌累及AM腺体与子宫内膜EA形态一致,呈膨胀式扩张推挤周围平滑肌,肿瘤周边可见子宫内膜间质细胞;同时肌层内见未被癌累及的腺体和间质细胞。免疫组化:受癌累及的AM腺体周围及肿瘤周边子宫内膜间质细胞CD10(+),desmin(-)。结论一级EA累及AM确诊主要依靠组织学和免疫组化,病理诊断容易误诊为EA肌层侵犯或AM恶变,应引起注意。     

VEGF基因多态性与子宫内膜异位症和子宫腺肌病遗传易感性研究

目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因启动子区-460C/T和-1154G/A单核苷酸多态性与子宫内膜异位症和子宫腺肌病发病风险的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态方法检测344例子宫内膜异位症患者(内异症组)和360名对照妇女(对照组)、174例子宫腺肌病患者(腺肌病组)和199名对照妇女(对照组)的VEGF基因2个多态性位点的基因型频率分布情况.结果 VEGF-460C/T多态的基因型和等位基因频率分布在两病例组与其对照组间差异均无统计学意义(P>0.05).在内异症组和对照组中,VEGF-1154G/A多态的AA、GA、GG 3种基因型频率分别是1.7%、28.8%、69.5%和5.8%、32.8%、61.4%,两组比较差异有统计学意义(P=0.006);G、A等位基因频率分别是83.9%、16.1%和77.8%、22.2%,两组比较差异有统计学意义(P=0.004);与GA+AA基因型相比,携带GG基因型明显增加内异症的发病风险(OR=1.43,95%CI:1.05～1.96).在腺肌病组和对照组中,VEGF-1154G/A多态的AA、GA、GG 3种基因型频率分别是2.9%、23.6%、73.6%和7.0%、34.2%、58.8%.两组比较差异有统计学意义(P=0.007);G、A等位基因频率分别是85.3%、14.7%和75.9%、24.1%,两组比较差异有统计学意义(P=0.001);与GA+AA基因型相比,携带GG基因型明显增加腺肌病的发病风险(OR=1.95,95%CI:1.26～3.03).结论 VEGF基因启动子区-1154G/A多态与子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病风险明显相关,携带GG基因型显著增加子宫内膜异位症和子宫腺肌病的发病风险.     

子宫腺肌病的病理超声分型研究

目的探讨子宫腺肌病的阴道超声声像图特征，旨在提高对子宫腺肌病的超声诊断准确率．方法分析82例经腹腔镜及病理确诊为子宫腺肌病的声像图分型特征．结果根据病理分析，将子宫腺肌病病理形态学特征在声像图上的表现分为三型：①局灶型53例(64．6％)．②腺肌瘤型11例(13．4％)．③弥漫型18例(22．0％)．结论经阴道超声的分型诊断有利于对子宫腺肌病超声特征的重新认识，提高诊断率．     

被动吸烟下调大鼠卵泡刺激素、黄体生成素、促性腺激素释放激素及其受体的表达

目的 研究被动吸烟对Wistar大鼠卵巢结构、激素受体及血清中激素的影响. 方法 Wistar大鼠32只,分为实验组和对照组(各16只).实验组大鼠吸烟3个月,对照组不予吸烟,3个月后处死大鼠.光镜及电镜下观察各组大鼠卵巢结构的改变,免疫组织化学染色检测激素受体的改变,酶联免疫吸附试验检测血清中激素的改变情况. 结果 实验组大鼠卵巢髓质血管收缩、减少,间质疏松.卵巢颗粒细胞内线粒体水样变、空泡样变,线粒体嵴断裂、模糊;粗面内质网脱颗粒样变.血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、促性腺激素释放激素(GnRH)水平比对照组显著降低,其浓度值比较差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05).实验组大鼠卵巢组织中卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)的表达显著低于对照组(P＜0.01,P＜0.05). 结论 被动吸烟可使大鼠血清中FSH、LH及GnRH水平明显降低,大鼠卵巢中FSHR及LHR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的结构及功能,引起生殖内分泌失调.     

促性腺激素释放激素受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布

目的探讨颈胸神经节是否具备接受促性腺激素释放激素(GnRH)作用的条件。方法实验采用免疫组织化学SP法,观察GnRH受体在雌性山羊颈胸神经节中的分布特点。结果在颈胸神经节中,神经元胞体均为GnRH受体免疫反应阳性,其细胞膜以及膜下胞质中的颗粒状物质呈棕黄色,GnRH受体为强阳性表达,而胞核呈阴性表达。部分神经元可见其突起,呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达。卫星细胞也呈黄色,GnRH受体为中等阳性表达。图像分析表明,呈阳性反应的神经元胞体与节内其他阳性成分相比,其GnRH受体相对表达量差异性极显著(P0.01)。结论在雌性山羊颈胸神经节中,神经元胞体是GnRH发挥作用的主要靶细胞,颈胸神经节具备接受GnRH作用的条件。提示GnRH有可能通过作用于颈胸神经节交感节后神经元上的GnRH受体来影响心肺器官的功能活动,即颈胸神经节可能是心肺功能活动中协调GnRH内分泌调节和该神经节自主神经调节两途径之间的中继站。     

GnRH在宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:从蛋白质及核酸水平研究GnRH(促性腺激素释放激素)在宫颈鳞状细胞癌中的表达,以探讨其存在的临床意义。方法:采用免疫组化和原位杂交两种实验方法,分别从蛋白质和核酸水平检测45例宫颈鳞状细胞癌及20例慢性宫颈炎中GnRH的表达。结果:在20例慢性宫颈炎宫颈上皮组织中GnRH及GnRH mRNA表达均为阴性,而在45例宫颈鳞状细胞癌组织中,GnRH阳性表达率为80%,GnRH mRNA阳性表达率为64.44%,即无论是在蛋白质水平还是在核酸水平比较两者均显示差异有显著性;定性及定量比较GnRH及GnRH mRNA在不同临床期别的宫颈癌组织中的表达情况,结果为GnRH定性表达率Ⅰ期50%(6/12),Ⅱa期85.7%(18/21),Ⅱb-期100%(12/12);GnRH mRNA定性表达率,Ⅰb期33.3%(4/12),Ⅱa期71.4%(15/21),Ⅱb-期83.3%(10/12);GnRH及GnRH mRNA在定性上表达有显著差别(P<0.05)。结论:宫颈鳞状细胞癌组织存在较高的GnRH,其有可能参与宫颈鳞状细胞癌发生、发展,为进一步研究通过抑制GnRH的产生,减少宫颈癌的发生及治疗宫颈癌提供了一定的理论基础。     

促性腺素释放激素受体与凋亡相关蛋白FAS在前列腺肿瘤中的共表达及意义

目的：研究促性腺素释放激素受体((GnRH-R)和凋亡相关蛋白FAS在前列腺肿瘤中的共表达及临床意义。方法：采用SABC免疫组化法及原位定量法,对前列腺肿瘤和前列腺增生患者中GnRH-R和FAS的表达与共存进行检测及半定量分析。结果：在前列腺癌组织高分化的1l例,中分化的3例以及低分化的5例中,各种不同分化的癌组织均显示不同程度的(GnRH-R和FAS阳性免疫反应,原位定量显示(GnRH-R表达分别随着组织分化程度增高而非常显著地增高,FAS表达随着组织病理分化的增高而非常显著地降低。结论：(GnRH-R和FAS的表达与前列腺癌的恶性程度有关,可能参与了前列腺恶性肿瘤的发生与发展。     

Immunohistochemical expression of gonadotropin releasing hormone receptor in human breast carcinoma

Gonadotropin releasing hormone (GnRH) analogs can cause regression of hormone-dependent breast carcinomas via the specific GnRH receptor (GnRH-R). In an attempt to obtain a better understanding of GnRH actions in human breast carcinoma, the expression of GnRH-R was examined immunohistochemically in 58 invasive ductal carcinomas and correlated with various clinicopathological parameters. GnRH-R was immunolocalized in the cytoplasm of carcinoma cells in 37 of 58 invasive ductal carcinoma cases (64%). Immunoreactivity for GnRH-R was also detected focally in the cytoplasm of morphologically normal glandular epithelia adjacent to the carcinoma. A significant correlation was observed between the immunohistochemical expression of GnRH-R and estrogen receptor labeling index (LI; P = 0.030) or progesterone receptor LI (P = 0.0074). There was a significant inverse correlation between GnRH-R immunoreactivity and Ki-67 LI (P = 0.012). No significant correlations were detected between GnRH-R and other clinicopathological parameters, including patient age, menopausal status, stage, tumor size, lymph node status, histological grade and prognosis. This study indicates that GnRH-R is widely distributed in human breast carcinoma cells and regulates GnRH actions locally. Breast carcinomas positive for GnRH-R maintain some hormonal regulatory mechanisms, and GnRH actions may lead to a low proliferative rate in human breast carcinoma.     

The expression of Bcl-2 in adenomyosis and its effect on proliferation,migration, and apoptosis of endometrial stromal cells

Adenomyosis is a common gynecologic disease that severe impact on women. Previous studies have found that Bcl-2 abnormally expressed in adenomyosis. However, the exact mechanisms of Bcl-2 in the pathogenesis of adenomyosis are unclear. In this study, we are to explore the effect of Bcl-2 on proliferation, migration, and apoptosis of endometrial stromal cells. The expression of Bcl-2 were evaluated by Western blot and RT-qPCR. We used RNA interference to silence Bcl-2 gene of endometrial stromal cells, and then Cell Counting Kit(CCK-8), cell scratch repair test, and Annexin V-APC/propidium iodide (PI) staining were performed to detect the cell viability, migration ability and apoptotic rate. The results of the present study revealed that the expression of Bcl-2 was evidently higher than that in control group. After silencing the Bcl-2 gene, the cytoactive and migration ability of endometrial stromal cells of adenomyosis decreased, and the apoptotic rate increased. In conclusion, Bcl-2 is overexpressed in adenomyosis and participate in the pathogenesis of adenomyosis. Bcl-2 may be a potential novel target for adenomyosis treatment.     

丹那唑对体外培养的原位与异位子宫内膜细胞生长的影响

应用胶原凝胶细胞培养和传代培养的方法培养原位与异位子宫内膜细胞，并经丹那唑处理在无丹那唑对照培养中，细胞生长良好，形态呈星形，以胞浆突起相互连接。而经两种浓度丹那唑处理后，细胞生长受抑，传代后２４ｈ细胞贴壁力受损，部分细胞呈致死性病理改变，丹那唑作用的超微结构变化包括胞浆内大量空泡与脂滴，溶酶体增多，线粒体肿胀与细胞核不规则，核膜内陷，提示胶凝胶培养系统为较佳的培养子宫内膜细胞的方法，丹那唑可直接     

大鼠消化道促性腺激素释放激素受体和胰高血糖素的免疫组织化学

目的：观察大鼠胃肠道胰高血糖素免疫反应阳性细胞(EG细胞)分布情况及大鼠回肠促性腺激素释放激素(GnRH)受体和高血糖素的共存关系。方法：免疫组化SABC法。结果：EG细胞散在分布于大鼠回肠和结肠的腺上皮细胞间,阳性物质分布于细胞质。大鼠胃、十二指肠、空肠未见EG细胞分布。回肠邻片免疫染色结果显示EG细胞呈GnRH受体免疫反应阳性。结论：大鼠胃肠道内只有回肠和结肠存在胰高血糖素细胞。回肠内的胰高血糖素细胞可能存在GnRH受体,GnRH可能以自分泌或旁分泌的方式对肠道内EG细胞所分泌的胰高血糖素进行调节。