周围神经65KD蛋白对培养鼠胚脊髓运动神经元的影响

目的：为了解周围神经损伤后期远侧端特异性表达的６５ＫＤ蛋白对鼠胚脊髓神经元的影响。方法：选用ＳＤ大鼠坐骨神经横断后２周的动物模型，自然凝胶系统电泳分析损务后神经远侧端中的蛋白组分，将６５ＫＤ蛋白区带胶条与１４天鼠胚脊髓运动神经元联合培养，结果：损伤后２周的坐骨神经元侧端中特异性地出现表达增强的６５ＫＤ蛋白；与含６５ＫＤ蛋白区带胶条联合培养的脊髓运动神经元细胞存活数量多，突起生长旺盛，结论：坐骨神经     

多巴胺受体对大鼠纹状体突触前膜和突触后膜Na^＋—K^＋—ATP酶活…

目的 研究多巴胺（ＤＡ）受体对突触前膜和突触后膜Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性的调节作用。方法 应用蔗糖－Ｆｉｃｏｌｌ梯度不连离心法制备大鼠纹状体突触前膜和突触后膜。结果 ＤＡ（１０＾－８－１０＾－５）ｍｏｌ．Ｌ＾－１显著抑制突触后膜Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶的活性，单独应用选择性Ｄ１（ＳＫＦ３８３９３）或Ｄ２＊（ＬＹ１７１５５５５）受体激动剂均不抑制Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰ酶的活性，而当二者合用时则产生与ＤＡ相     

鱼抗冻肽基因在大肠杆菌中的克隆及表达

为探索鱼抗冻肽基因在大肠杆菌中的高效表达条件，我们将鱼抗冻肽基因克隆到原核高效表达载体Ｐ＾ｋｋ２２３－３上，筛选到８个重组克隆，经转化大肠杆菌ＤＨ５α，ＩＰＴＧ诱导５￣６ｈ，超声裂解细菌产物，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳胶带中分子量９ＫＤ处显示一条表达产物带，证明插入的抗冻肽基因已表达，含量占菌体总蛋白的１０％左右     

单抗亲和层析生产高比活HCG方法的建立

本实验以健康孕妇尿为原料，利用苯甲酸沉淀，有机溶剂沉积，离子交换层析和凝胶过滤等方法得到ＨＣＧ纯品（１４０００ＩＵ／ｍｇ）。用该产品免疫小鼠。将产生的免疫鼠脾脏与ＮＳ－１骨髓瘤细胞用半固相法要交细胞融合，筛选纯化出ＨＣＧ单抗克隆抗体（Ｋａ＝７．５×１０＾８ｍ＾－＾１）。将ＨＣＧ单抗与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联制成免疫吸附亲和层析柱，可将ＨＣＧ粗品（２０００ＩＵ／ｍｇ）一次纯化得到ＨＣＧ纯品（１５０     

疟原虫抗原B表位NKNDD和NANP串联重复片段与脊灰病毒全…

人工合成含有恶性疟原虫抗原Ｂ表位ＮＫＮＤ的单拷贝抗原基因片段ＮＫＮＤＤ和恶性疟原虫环子孢子蛋白ＣＳＰ的重复性抗原Ｂ表位ＮＡＮＰ的２拷贝基因片段，将ＮＫＮＤＤ和（ＮＡＮＰ）２分别进行自串联后克隆到中介载体ｐＳＫＭＭ，得到一系列不同拷贝数的串联多拷贝克隆，从（ＮＫＮＤＤ）ｎ／ｐＳＫＭＭ和（ＮＡＮＰ）ｎ／ｐＳＫＭＭ的各拷贝类克隆中挑选３，４，５，８拷贝的（ＮＫＮＤＤ）ｎ／ｐＳＫＭＭ和４，６拷贝的（ＮＡＮ     

大鼠周围神经组织cDNA文库的构建

为了克隆周围神经组织中新近发现的营养因子、生长因子和诱向因子的基因，本研究以ＳＤ大鼠坐骨神经为材料，提取和纯化ｍＲＮＡ，逆转录合成ｃＤＮＡ双链，与Ａｄａｐｔｅｒ连接后，再与脱磷酸化处理的λｇｔ１１臂相连，体外包装，构建了大鼠周围神经组织的ｃＤＮＡ文库。经测定，该文库的容量＞１．５×１０６，重组百分比为９６．７％，ｃＤＮＡ片段为０．５～８Ｋｂ。经扩增后的滴度达１．４×１０１３ｐｆｕ／ｍｌ。该文库的建立为筛选和分离目的基因，为从基因水平深入研究神经系统发育、再生、衰老与退行性变的机制奠定了基础     

溶栓药APSAC的制备和鉴定

重组链激酶（ｒ－ＳＫ）由工程菌提取液经Ｓｅｐｈａｃｒｙｌｓ－２００柱纯化，比活性达１０＾５ＴＵ／ｍｇ，十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）显示分子量为７８．０２４７×１０＾－＾２＾４ｋｇ的一条带。人新鲜血浆经Ｌｙｓｉｎｅ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５凝胶过滤制备纤溶酶原（ｐｌｇ），比活性达２３．７ＴＵ／ｍｇ，活性加收率为１３．６％，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示     

大剂量强啡肽A（1—17）对脊髓NMDA受体功能和一氧化氮？…

目的 观察大剂量强啡肽以及一氧化氮麦（ＮＯＳ）抑制剂对脊髓ＮＭＤＡ受体功能和ＮＯＳ活性的影响。方法 以＾３Ｈ－ＭＫ８０１为配基,采用放射配基法测定ＮＭＤＡ受体结合活性;以精氨酸转化法测定脊髓组织胞浆相ＮＯＳ活性。结果 给大鼠蛛网膜下腔注射Ｄｙｎ Ａ（１－１７）０．５ｈ后,脊髓腹侧组织的＾３Ｈ－ＭＫ８０１结合活性以及ｃＮＯＳ活性即显著升高,且持续４８ｈ;ｉＮＯＳ在给药后４ｈ升高,脊髓背侧＾３Ｈ－ＭＫ     

雪旺细胞源神经营养因子对脊髓损伤的保护作用

目的：观察雪旺细胞源神经营养因子（Ｓｃ－ＮＴＦｓ）对损伤脊髓组织的作用。方法：以７．５ｇ物体从１０ｃｍ高处落下致的大鼠Ｔ１０脊髓，伤后５，３０，６０ｍｉｎ在务局部分别注入Ｓｃ－ＮＴＦｓ５０μｌ对照组给予等量生理盐水，２４ｈ后一半动物取伤段脊髓标本测水及离子含量，另一半动物３周后神经功能检查，结果：脊髓损伤后组织水肿Ｎａ＾＋Ｃａ＾＋离子浓度升高，Ｋ＾＋，Ｍｇ＾２＋离子浓度降低，Ｓｃ－ＮＴＦｓ可显改     

人脑胶质瘤克隆细胞的放射敏感性

本实验以体外集落形成单位为终点指标，观察了人脑胶质瘤细胞ＤＥＦ７Ａ的４个克隆细胞株Ｋ１、Ｋ２、Ｋ４及Ｋ５受小剂量０、０．１、０．２、０．５、１．０和２．０ＧｙＸ线照射及受大剂量０、４、８、１０和１２Ｇｙ照射后细胞的种植系数、存活分数及剂量存活曲线。结果表明，Ｋ１细胞的Ｄ０值为４．５６Ｇｙ，Ｋ２的Ｄ０值为４．４３Ｇｙ，Ｋ４的Ｄ０值为３．６３Ｇｙ，Ｋ５的Ｄ０值为４．５８Ｇｙ。说明ＤＥＦ７Ａ人脑胶质瘤的