阴道分泌物支原体固体和液体培养基培养结果差异及原因分析

目的分析阴道分泌物支原体固体培养基和液体培养基培养结果差异及其原因,为临床医生科学解读阴道分泌物支原体通过不同方法培养后的结果提供试验依据。方法收集该院妇产科送检的354份阴道分泌物标本,同时做固体培养基和液体培养基培养,比较两种培养方法的阳性率,并将液体培养基培养阳性但固体培养基培养阴性的标本进一步做细菌和真菌鉴定,支原体液体培养基培养阴性但固体培养基培养阳性标本再进行液体培养。结果354份阴道分泌物标本中固体培养基培养阳性[解脲脲原体(Uu)或人型支原体(Mh)阳性]标本为112份,阳性率为31.64%。112份阳性标本中,单纯Uu阳性86份,阳性率为24.29%;单纯Mh阳性9份,阳性率为2.54%;Uu合并Mh阳性17份,阳性率为4.80%。液体培养基培养阳性率(40.96%)明显高于固体培养基培养阳性率(31.64%),差异有统计学意义(χ2=6.65,P<0.001)。结论支原体固体培养基培养阳性率明显低于液体培养基培养,通过观察固体培养基的菌落形态,可准确诊断Uu和Mh感染;分解尿素和精氨酸的细菌或真菌感染是造成支原体液体培养基假阳性的主要原因。     

快速液体培养法在检测泌尿生殖道支原体感染中的应用

目的 分析支原体快速液体培养基临床应用价值.方法 泌尿生殖道标本采用解脲支原体(Uu)及人型支原体(Mh)液体培养基对泌尿生殖道200例患者标本进行培养,同时用UU-DNA-PCR方法鉴定.结果 48h内上清液变红且清亮者判为阳性.200例患者中,共检出阳性68例,其中Uu 60例,Mh 8例;再用UU-DNA-PCR检测,60例Uu阳性者均显示为阳性,8例Mh阳性者及132例阴性者均显示阴性.结论 支原体快速液体培养法在泌尿生殖道支原体感染的诊断中具有较高特异性且操作简便、快速.     

快速液体培养法在检测泌尿生殖道支原体感染中的应用快速液体培养法在检测泌尿生殖道支原体感染中的应用

目的 分析支原体快速液体培养基临床应用价值.方法 泌尿生殖道标本采用解脲支原体（Uu）及人型支原体（Mh）液体培养基对泌尿生殖道200例患者标本进行培养,同时用UU-DNA-PCR方法鉴定.结果 48h内上清液变红且清亮者判为阳性.200例患者中,共检出阳性68例,其中Uu 60例,Mh 8例;再用UU-DNA-PCR检测,60例Uu阳性者均显示为阳性,8例Mh阳性者及132例阴性者均显示阴性.结论 支原体快速液体培养法在泌尿生殖道支原体感染的诊断中具有较高特异性且操作简便、快速.     

泌尿生殖道支原体液体培养法检测的实验评价

目的比较液体培养法和固体培养法平行检测解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)结果的一致性;评价液体培养法检测Uu和Mh的可靠性,加强Uu和Mh检测的质量控制。方法采用液体培养基和固体A7琼脂培养基平行检测369例临床标本的Uu和Mh。结果液体培养法阳性155例,阳性率为42%;固体培养法阳性111例,阳性率为30%;液体培养法阳性而固体培养法阴性49例;固体培养阳性而液体培养法为阴性5例。两种方法的阳性检出率差异有统计学意义(P0.005)。两种方法所得结果基本一致(kappa系数为0.554)。结论泌尿生殖道支原体的检测不能仅凭液体培养法变色而报为阳性,应结合固体培养法作鉴定,才能报为阳性.用固体培养法提高检验的特异性,用液体培养法进行药敏试验,两者结合诊断和指导临床治疗,具有较好的临床应用价值,值得临床推广应用。     

泌尿生殖道支原体培养假性结果原因探讨

目的探讨泌尿生殖道支原体培养假性结果的原因以及提高准确率的方法。方法对380例标本进行支原体液体培养法、固体平板培养法、血平板培养法检测,并对血平板上生长的菌落作脲酶和精氨酸分解试验。结果 380例标本Uu-Mh二合一液体培养有180例颜色变红呈阳性反应,而这180例标本支原体固体平板培养仅115例检出支原体,检出率仅为63.9%,在液体培养变红且未见浑浊的140例标本中,固体培养法未见支原体的有33例,而这33例标本采用血平板培养法全部有菌落生长,这些菌株的脲酶或精氨酸分解试验呈阳性。结论支原体液体培养易受分解尿素或精氨酸菌株的干扰而呈现假阳性结果,因此支原体培养应以固体平板培养结果为准。     

快速液体培养法检测呼吸道标本中的肺炎支原体

目的 探讨快速液体培养法检测肺炎支原体(MP)的临床应用价值,分析其假阳性的情况及原因.方法 对93例呼吸道标本进行MP快速液体培养,培养液用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测肺炎支原体核酸,同时测定血清中肺炎支原体抗体,进行统计学分析.结果 在93例检测标本中,肺炎支原体快速培养阳性16例,检出率是17.2%(16/93);FQ-PCR法阳性10例,检出率10.7%(10/93);血清学检测阳性22例,检出率23.6%(22/93).3种方法检测结果无显著差异.结论 快速液体培养法干扰因素多,影响其特异性;结果判断时结合显微镜检查,排除细菌或真菌等导致的假阳性,其特异性可达到与血清学及FQ-PCR法一致水平.     

荧光定量聚合酶链反应在女性泌尿生殖道感染中的应用

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测技术在女性泌尿生殖系沙眼衣原体（CT）、解脲脲原体（Uu）感染诊断中的应用。方法用FQ-PCR、普通PCR对156例患泌尿生殖感染的女性分泌物进行了CT、Uu的检测,并比较了其优劣。结果 156例女性中,FQ-PCR检出阳性标本81例。CT、Uu的阳性检出率分别为14.74%、37.18%;普通PCR法检出阳性标本72例,CT、Uu的阳性检出率分别为11.54%、34.62%。在FQ-PCR检测中,DNA数量小于7.0×103copy/mL者12例,普通PCR检测阴性。结论应用FQ-PCR检测CT、Uu具有简便、快速、高特异性、高敏感度的优点,不仅可以准确诊断,而且其定量技术可指导临床用药,值得推广。     

尿液不同检测方法对泌尿系统感染的诊断价值

目的:观察尿有形成分分析及干化学分析筛查泌尿系统感染的价值.方法:留取130例尿路感染患者中段尿标本,应用培养法进行细菌计数和鉴定,应用UF-1000i尿有形成分分析仪检测细菌计数和WBC,应用H-100MA尿干化学分析仪测定白细胞酯酶和亚硝酸盐.以中段尿定量细菌培养结果为标准,比较尿有形成分分析及干化学分析诊断尿路感染的准确率.结果:培养法检出细菌阳性标本954份(73.1%),分离出细菌102株.尿干化学分析和尿有形成分分析检测结果中分别有49份和83份为阳性,阳性率分别为37.7%和63.8%.结论:诊断尿路感染需做细菌培养,尿有形成分分析和干化学分析参数不能作为诊断尿路感染的依据,可用于尿路感染治疗时动态监洲.     

新型培养基检测解脲支原体的实用性分析

目的 对新型固体培养基和液体培养基分离培养解脲支原体(Uu),并进行研究、比较.方法 185例女性生殖道标本中,95例用青霉素处理后接种液体培养基,90例直接接种液体培养基;185例未处理标本直接接种新型固体培养基,比较新型液体培养基与固体培养基检测Uu的阳性率及污染率.结果 两种培养基检测Uu的阳性率相似,差异无统计学意义;而未处理标本接种新型固体培养基与液体培养基污染率比较差异有统计学意义;未处理标本接种新型固体培养基与处理标本接种液体培养基污染率比较,差异无统计学意义;未处理与处理过的标本接种液体培养基污染率比较,差异有统计学意义.结论 新型固体培养基直接在临床上分离培养Uu具有通用性强、特异性好、污染率低的优点,比液体培养基更准确、科学,值得临床进一步推广.     

支原体培养假阳性结果原因分析

解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）是泌尿生殖道中非淋菌性炎症中最常见的病原体。商品化的Uu—Mh二合一液体培养以基因其快速和经济的特点而在临床广泛应用，但我们在工作中发现此方法假阳性较高。因此，我们对300份泌尿生殖道标本采用Uu-Mh二合一液体培养法和传统的液体．固体培养法进行对比研究。     

荧光定量PCR技术检测结核分支杆菌DNA的应用价值

目的评价荧光定量PCR技术检测临床标本中结核分支杆菌的应用价值。方法应用荧光定量PCR法及抗酸染色、结核杆菌培养法,对179例活动性肺结核患者晨痰、123例活动性肺结核患者外周血、34例结核性胸膜炎患者胸水、20例非结核性呼吸系统疾病患者的晨痰标本进行检测。结果179例活动性肺结核患者晨痰、123例活动性肺结核患者外周血、34例结核性胸膜炎患者胸水,涂片抗酸染色阳性率分别为20．67％（37／179）、0．00％、0．00％;细菌培养阳性率分别为41．34％（74／179）、0．00％、2．94％（1／34）;荧光定量PCR技术阳性率分别为64．25％（115／179）、38．21％（47／123）、44．12％（15／34）。3种标本荧光定量PCR技术阳性率高于抗酸染色和结核杆菌培养,经统计学处理发现,差异有统计学意义。用荧光定量PCR技术检测临床标本特异性为95．00％。结论荧光定量PCR技术将PCR扩增、荧光探针杂交及检测一体化,在单一管内完成,具有简便、快速、防污染、敏感性及特异性高等优点,是结核病诊断的有效方法之一。     

血清稀释与否对检测乙型肝炎核心抗体结果的影响

目的 探讨血清稀释与否对乙型肝炎核心抗体检测结果的影响.方法 ELISA作为初步检测法,配合电化学发光法检测乙肝五项和FQ-PCR检测HBV-DNA.结果 稀释血清与原倍血清在检测乙型肝炎核心抗体的结果中存在不同.原倍血清HBcAb呈阳性,而稀释血清HBcAb呈阴性的有64例,占总标本的4.0％.经FQ-PCR检测稀释血清发现,其中2例标本HBV-DNA测定值＞1.00×103 copies/mL,判定为漏检,故ELISA稀释法检测HB-cAb漏检率为3.1％.结论 ELISA稀释法检测低浓度的HBcAb,血清因稀释易呈假阴性,需根据临床需要结合FQ-PCR法检测HBV-DNA判断乙肝病毒的复制情况.     

FQ-PCR检测肠黏膜结核杆菌DNA对肠结核的诊断价值

目的建立一种实时定量检测结核分枝杆菌（MTB）插入序列IS6110 DNA的方法,探讨其在肠结核（ITB）诊断中的价值。方法采用FQ-PCR技术对36例内镜活检ITB标本（30例石蜡、6例新鲜组织）、36例Crohn’s disease标本（16例石蜡手术标本,15例石蜡内镜活检标本,5例新鲜内镜活检组织）及34例阴性对照标本进行IS6110 DNA的实时定量检测,并比较上述标本抗酸染色结果。结果13例ITB抗酸染色阳性,CD无1例阳性,抗酸染色对ITB诊断的敏感性36.11%。MTBIS6110DNA检测结果：23例ITB（63.89%）阳性,6例CD（16.67%）阳性,另有1例阳性为升结肠腺癌癌旁正常组织。MTBIS6110 DNA在ITB与CD中的阳性率差异有统计学意义（P〈0.05）。FQ-PCR对ITB诊断的敏感性为63.89%,特异性83.33%。FQ-PCR敏感性显著高于抗酸染色（P〈0.05）。MTBIS6110 DNA阳性的ITB标本其定量结果范围为2.44×10^-4-2.26×10^1拷贝/细胞。结论FQ-PCR检测MTBIS6110 DNA是一种快速有效的ITB诊断方法,其定量范围广,检测灵敏度高。对活检组织少、病理改变不典型、抗酸染色阴性组织的诊断和鉴别诊断尤有意义。     

泌尿生殖道感染者性传播疾病病原体荧光定量PCR检测分析

目的了解淋球菌(NGH)、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(Uu)、单纯疱疹病毒(HSV-Ⅱ)、人乳头瘤病毒(HPV6,11)5种性传播疾病(STD)病原体的检出情况,为临床预防提供依据。方法采用实时荧光定量PCR法对该院门诊2 029例患者进行NGH、CT、Uu、HSV-Ⅱ、HPV6,11病原体DNA定量检测。结果 STD病原体总阳性率为24.15%(490/2 029),HPV6,11、Uu、HSVⅡ、CT和NGH阳性率分别为39.53%(34/86)、36.85%(276/749)、28.49%(51/179)、17.92%(93/519)和7.26%(36/496);男和女阳性率分别为20.34%和33.92%;21～40岁年龄段患者占85.51%。结论加强泌尿生殖道炎症患者STD病原体的检测,对STD的防治有重要意义。     

荧光定量聚合酶链反应对生殖器疱疹病毒感染的检测

目的 探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）在诊断生殖器疱疹病毒感染中的应用。方法 本研究共分两组，检测组即就诊的疑似生殖器疱疹患者347例，对照组12例。分别用FQ-PCR方法检测两组送检标本中的单纯疱疹病毒（HSV）DNA。结果 347例疑似生殖器疱疹患者送检标本中，HSVDNA阳性139例，阳性率为40．1％（139／347），其中阳性标本中有皮损组织液75例、男性尿道拭子31例、女性宫颈分泌物33例，各类标本的阳性率依次为91．5％（75／82）、21．1％（31／147）、28．0％（33／118）。HSVDNA阳性人群中性别差异无统计学意义（P〉O．05，X^2检验）。12例对照标本中没有检出HSVDNA。结论 分泌物中检出的HSVDNA能直观地反映患者当前病毒感染状况，在有皮损组织的患者中，HSVDNA的检出率更高，FQ-PCR能准确、快速地对生殖器疱疹病毒感染做出诊断。     

两种方法对丙型肝炎病毒检测的对比研究

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）在检测丙型肝炎病毒（HCV）方面的差异。方法 60例确诊为丙型肝炎的住院患者样本作观察组,80例健康体检人群样本作健康对照组,应用FQ-PCR和ELISA分别对这两组样本进行HCV-RNA和抗HCV抗体（抗-HCV）检测。结果 60例观察组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阳性54例和49例,阳性率分别为90%和81.67%,80例健康对照组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阴性80例和77例,阴性率分别为100%和96.25%。结论在检测HCV方面,FQ-PCR比ELISA更具灵敏性和特异性,其结果更加符合患者真实情况,且FQ-PCR检测HCV具有更好的临床应用价值,若两种方法同时使用,则可大大提高临床对丙型肝炎的准确诊断。     

终点法荧光定量PCR检测HBV-DNA的临床应用

目的运用终点法荧光定量PCR检测HBV-DNA,探讨其临床应用价值。方法运用本研究组制备的引物和荧光探针分别将HBV-DNA质粒及临床标本进行普通PCR和实时荧光定量PCR反应,再将普通PCR产物在荧光测定仪上测定荧光强度,与实时荧光定量PCR结果相比较,观察其符合程度。另外,运用相同方法比对本研究制备的PCR体系与市售荧光定量PCR试剂检测HBV-DNA的符合程度。结果终点法荧光定量PCR与实时荧光定量PCR检测HBV-DNA质粒及临床标本结果一致(P>0.05),与市售荧光定量PCR试剂比较,其符合程度较高(P>0.05)。结论终点法荧光定量PCR检测临床HBV-DNA标本稳定可靠,可作为荧光定量PCR的应用方法之一在基层医院推广应用。     

Bactec FX和Bact/Alert 3D两种血培养系统对菌血症的检出性能分析

目的对比分析Bactec FX血培养系统Bactec Plus树脂需氧瓶(简称BO-P瓶)和Bact/Alert 3D全自动血培养系统SA标准瓶(简称Bio-SA瓶)/SN厌氧瓶(简称Bio-SN瓶)对菌血症的检出能力及特点,探讨提高血培养阳性率、快速准确地作出病原学诊断的方法。方法从双侧部位抽取患者的静脉血,一侧注入BO-P瓶,另一侧注入Bio-SA瓶和Bio-SN瓶,置于相应培养系统培养,比较这3种血培养瓶的阳性率及检出时间。结果 6 188份标本中确认阳性765份(12.36%);确认污染134份(2.17%);假阳性11份(0.18%)。332株临床分离菌中BO-P瓶检出293例,占88.25%;Bio-SA瓶检出271例,占81.63%,前者阳性率高于后者(χ2=5.687,P<0.05);Bio-SN瓶检出201例,占60.54%,其中厌氧菌3例,占0.90%。与Bio-SA瓶相比,BO-P瓶检出阳性的时间优于Bio-SA瓶(P<0.05),尤其是对非发酵菌。污染菌以革兰阳性菌为主(89.55%),主要是凝固酶阴性的葡萄球菌(67.91%),少部分革兰阴性杆菌(9.7%)。结论双侧抽血并联合使用Bactec FX和Bact/Alert 3D血培养系统可利用各自优势,更有效地提高血培养阳性率。     

112例男性患者淋球菌、沙眼衣原体及解脲支原体荧光定量PCR检测分析

目的了解男性患者泌尿生殖道淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲支原体(Uu)感染状况,为临床诊治提供依据。方法用荧光定量PCR(FQ-PCR)对112例男性患者3种病原体基因进行定量测定。结果 3种病原体总阳性检出率为73.21%(82/112),单项感染阳性检出率为43.75%(49/112),混合感染模式阳性检出率为29.46%(33/112),单项感染模式显著高于混合感染模式,差异有统计学意义(χ2=4.92,P0.05);CT单项感染率为16.96%(19/112),NG为15.18%(17/112),Uu为11.61%(13/112),三者差异无统计学意义(χ2=1.34,P0.05);CT与Uu、CT与NG、NG与Uu及NG与Uu和CT的阳性率分别为9.82%(11/112)、7.14%(8/112)、7.14%(8/112)和5.36%(6/112),4种病原体混合感染模式差异无统计学意义(χ2=1.67,P0.05)。结论男性患者3种病原体的检测中,单项感染模式显著高于混合感染模式(χ2=4.92,P0.05);CT单项感染模式最为常见,有必要进行常规检查;对CT阳性患者应进行全面检查,以便及时发现合并感染,给予有效治疗;FQ-PCR检测NG、CT、Uu具有操作简单、反应时间短、结果客观准确、敏感性和特异性好的优点,适宜门诊初查。     

Evaluation of selection media for the detection of borderline MRSA

Recently, hospital-associated as well as community-acquired methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) strains showing a low level of resistance to oxacillin have emerged worldwide, and as a result, a highly sensitive method to detect MRSA has become more important. To prevent MRSA being overlooked, some selection agar media have recently been developed. We evaluated six commercially available selection agar media in regard to the detection of 35 borderline MRSA (BOMRSA) strains which were mecA-positive but showed low resistance to oxacillin. The MIC values of oxacillin differed between the broth dilution method and the agar dilution method, and 11 of the 35 BOMRSA strains were judged as sensitive by the broth dilution method and 14 of the 35 strains were judged as sensitive by the agar dilution method. Thirty-two of the 35 strains were also judged as sensitive by an oxacillin disk diffusion test. Moreover, there was no consistent pattern of resistance to the tested beta-lactams among the BOMRSA strains. Some commercially available selection media designed for the detection of MRSA contain a beta-lactam antibiotic; oxacillin, ceftizoxime, or cefoxitin, and we evaluated media containing each of these agents. The detection sensitivities of cefoxitin-based agar media, such as CHROMagar MRSA and MRSA ID, for BOMRSA were 100% at 24-h culture. On the other hand, the media containing oxacillin or ceftizoxime gave lower results at 24 h, suggesting that, possibly, BOMRSA strains may not to be able to grow on these media. These results suggest that cefoxitin-based agar media should be recommended for the first-round screening of BOMRSA.