游离骨膜与复合rhBMP2的异种骨联合移植修复骨缺损的实验研究

目的 探讨复合基因重组人ＢＭＰ２（ｒｈＢＭＰ２）的异种骨与游离骨膜（ＦＰ）联合移植修复节段性骨缺损的效果。方法 将ｒｈＢＭＰ２与去抗原牛松质骨载体（ＢＣＢ）复合,制成ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ;选用新西兰大耳白兔２８只,制成烧骨干１５ｍｍ缺损动物模型,分别行ＦＰ和ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ复合移植（ｎ＝６）、ｒｈＢＭ２／ＢＣＢ移植（ｎ＝６）和单纯ＢＣＢ移植（ｎ＝２）;术后４、８、１２、１６周取材,通过Ｘ线、生     

复合rhBMP_2的异种骨(rhBMP_2/BCB)与骨膜联合移植修复兔桡骨节段性骨缺损

目的　探讨复合基因重组人ＢＭＰ２ 的异种骨（ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ） 移植及其与骨膜联合移植修复节段性骨缺损的效果。方法　将ｒｈＢＭＰ２ 与去抗原牛松质骨载体（ＢＣＢ）复合,制成ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ;并采用兔桡骨干１．５ ｃｍ 缺损的动物模型,通过Ｘ线、生物力学、骨密度、组织学等检测手段,比较单纯ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ移植、ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ 与带血运骨膜联合移植及ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ 与游离骨膜联合移植修复节段性骨缺损的疗效。结果　（１） 单纯ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ 移植,可在１６ 周使节段性骨缺损基本修复,其修复机制与过程和重组异种骨相似;（２）ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ与带血运骨膜联合移植,８ 周即可修复骨缺损,其修复机制与骨折修复相仿,包括膜内成骨和软骨成骨两种机制;（３）ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ与游离骨膜联合移植,在骨缺损修复早期（ ≤１２ 周） ,其成骨速度及成骨质与量均优于单纯ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ移植,约在１２ 周使骨缺损基本修复。结论　上述三种方法均可有效地修复节段性骨缺损,但以ｒｈＢＭＰ２／ＢＣＢ与带血运骨膜联合移植较为理想。该方法同时具有良好的骨生成、骨传导和骨诱导作用。     

重组合异种骨复合三种抗生素一期修复兔桡骨污染性节段性骨缺损的比较研究

目的将三种不同类别的抗生素引入具有良好诱导能力的重组合异种骨中,采用多种途径观察对比,客观地研究三种不同抗生素与重组合异种骨结合后,一期修复兔感染骨缺损的效果。方法制备重组合异种骨并与重组人骨形态发生蛋白BMP2复合,三种抗生素复合体的制备（G—KBX,C—RBX及V—KBX）,感染兔桡骨缺损模型的准备,通过多种途径：体外抑菌实验、体内药物释放、血清药物浓度检测、解剖学、放射学、组织学检查,对比研究三组抗生素复合体一期修复污染兔桡骨缺损的效果。结果三种抗生素复合体均可有效预防感染,并能在术后6个月内完成兔桡骨缺损的修复;而对照组发生感染,形成窦道,骨折不愈合,无法修复骨缺损,三组间差异无显著性（P〉0．05）。结论三种抗生素复合体均具备良好的骨诱导活性,均能够有效抗感染,并可一期植骨修复骨缺损。     

诱导性人工骨膜复合异体骨移植修复兔桡骨缺损

目的探讨诱导性膜引导骨再生技术与异体骨相结合修复兔桡骨节段性骨缺损的可行性.方法聚乳酸聚乙醇酸共聚物（poly lactic-co-glycolic acid,PLGA）复合牛骨形态发生蛋白（bovinebone morphogenetic protein,bBMP）、胰岛素样生长因子（insulin-like growthfactor-Ⅱ,IGF-Ⅱ）及碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）制备诱导性人工骨膜.将27只兔建立右侧桡骨10 mm节段性骨缺损动物模型,随机分成三组,每组9只.A组植入PLGA/bBMP＋IGF-Ⅱ＋bFGF人工骨膜和兔异体骨;B组植入PLGA/bBMP＋IGF-Ⅱ＋FGF人工骨膜;C组单纯植入兔异体骨.术后2、4、8周每组分别取3只动物,进行X线检查、大体标本观察、HE染色组织学观察和免疫学检测,比较各组骨缺损的修复情况.结果A组的成骨效果明显优于其他组,在8周时已经完成骨缺损的修复;B组在术后8周仍处于塑形改建之中;C组在术后8周时植入的异体骨坏死且被大量结缔组织包裹.A组移植物引发的宿主抗体水平低于C组,在体外明显抑制淋巴细胞增殖,多项免疫学指标差异有统计学意义（P＜0.05）.结论PLGA复合bBMP、bFGF和IGF-Ⅱ人工骨膜通过刺激血管增生和免疫调节作用能加快异体骨的血管化,降低免疫反应,促进其与宿主骨的愈合;同时,异体骨能起到支架的作用,可有效避免人工骨膜的塌陷.将诱导性膜引导骨再生技术与异体骨联合应用比单纯应用以上两种材料更能有效促进长骨节段性骨缺损的修复.     

自体游离骨膜—骨块复合组织移植修复关节骨软骨缺损

用三种类型的自体游离骨膜－骨块复合组织移植修复家兔膝关节的骨软骨缺损。实验结果显示，一个月后三组实验动物的膝关节骨软骨缺损区均被骨块和骨膜再生的新生软骨组织完全充填；不剥离翻转骨膜的骨膜－骨块复合组织移植具有操作简便、不影响骨膜再生软骨之优点；关节滑液能为骨膜再生软骨提供充足的营养。     

治疗节段性骨缺损的一种新方法—新型重组合异种骨与带血循骨膜联合移植

目的 探讨治疗节段性骨缺损新方法－新型重组合异种骨（NRBX）与带血循骨膜联合移植方法的效果。方法 将基因重组人BMP2（rhBMP2）与去抗原牛松质骨载体（BCB）复合,制成NRBX;并将之与带血循环骨膜联合移植修复兔桡骨干1．5cm缺损,通过X线、生物力学、骨密度、组织学等检测手段,对该联合方法治疗节段性骨缺损的效果进行研究,并与单纯NRBX移植方法对比。结果 ①单纯NRBX移植,可在16周使节段性骨缺损基本修复,其机制与过程与重组合异种骨（RBX）相似;②NRBX与带血循骨膜联合移植,仅用8周即可修复骨缺损,其修复机制与骨折修复相仿,包括膜内成骨和软骨成骨两种机制。结论 上述二种方法均可有效地修复节段性骨缺损,但以NRBX与带血循骨膜联合移植较为理想,该方法同时具有良好的骨生成、骨传导和骨诱导作用。     

块型重组合异种骨的研制及其修复兔桡骨节段性骨缺损的研究

本实验探讨块型去抗原异种松质骨载体（ＭＢＣ）与ｂＢＭＰ复合形成的块型重组合异种骨（ＭＲＢＸ）［１］修复兔桡骨节段性骨缺损的能力,为其临床应用提供实验依据。一、材料与方法１．ＭＲＢＸ的制备：依照Ｕｒｉｓｔ方法提取牛ＢＭＰ。将新鲜牛肱骨上端松质骨制成２０ｍｍ×２０ｍｍ×２０ｍｍ骨块,经脱脂、部分脱钙及过氧化氢浸渍处理制备ＭＢＣ,将ＭＢＣ与粗提ｂＢＭＰ按５∶１重量比复合,透析,冻干,消毒备用。２．兔桡骨干节段性骨缺损的修复：选用成年新西兰大耳白兔５０只,造成桡骨干１５ｍｍ骨骨膜节段性骨缺损,其中４０…     

不同剂量rhBMP2修复兔桡骨骨缺损的比较

[目的]利用兔桡骨临界骨缺损模型,研究不同剂量的重组人骨发生蛋白2 (recombinant human bone morphogenetic protein-2, rhBMP-2)对骨缺损修复的量效关系。[方法]将36只新西兰白兔建立单侧桡骨骨缺损模型,随机分为空白组、海绵空白组、自体骨组、低剂量组（0.25 mg rhBMP-2）、中剂量组（0.5 mg rhBMP-2）、高剂量组（2.5 mg rhBMP-2）,每组6只。对骨缺损给予相应处理。分别于术后4、8周,行X线检查、MicroCT检查和组织学观察评估。[结果]与术后第4周相比,8周时各组Lane Sandhu X线评分均增加,其中,空白组和海绵空白组两个时间点间差异无统计学意义（P>0.05）,而自体骨组、低、中、高剂量组的两时间点间差异有统计学意义（P<0.05）。相应时间点,Lane Sandhu X线评分由低至高均为空白组<海绵空白组<低剂量组<自体骨组<中剂量组<高剂量组,差异有统计学意义（P<0.05）。与术后4周相比,8周时6组MicroCT检测的骨矿密度（bo...     

新型复合异种骨的研制及其修复骨缺损的免疫组化观察

将人重组骨形成蛋白—2(rhBMP—2)与经综合化学处理的新生小羊骨松质(CB)结合,制备成新型复合异种骨.将其移植修复兔下颌骨缺损,免疫组织化学观察结果表明:复合异种骨移植后,术后各时期移植区成骨活跃,成骨细胞及软骨细胞呈强阳性染色;而单纯松质骨组移植区新骨形成少,染色浅淡,从而证实,rhBMP—2对复合异种骨内新骨形成具有决定性意义.这种新型复合异种骨是一种较理想的植骨材料.     

深低温保存的同种体骨膜台骨联合移植的实验研究

目的 探讨有生物活性的移植材料对骨缺损修复能力的影响。方法 实验采用兔桡骨缺损模型,经深低温保存的同种异体骨膜加胎兔骨移植为实验侧,胎兔骨移植为对照侧,分别在术后2、4、8及12周对实验侧和对照侧骨缺损模型进行大体观察、组织学检查、X线片及钙、磷含量检查。观察异体骨膜加胎骨复合体修复骨缺损的可行性及移植后骨膜、胎骨的动态变化。结果 实验侧术后4、8及12周钙、磷含量明显高地对照侧（P＜0.05）,随着时间的推移,钙、磷含量有升高的趋势。实验侧8周可见髓腔再通,组织切片可见骨陷窝及板层骨形成。结论 胎骨是良好的移植材料,深低温保存的同种异体骨膜联合胎骨能加速骨缺损的修复。     

重组人骨形态发生蛋白2/脱细胞骨基质材料复合移植修复兔骨缺损的研究

目的观察重组人骨形态发生蛋白2/脱细胞骨基质材料(rhBMP2/ACBM)对体外培养的骨髓基质细胞(MSCs)增殖和分化的影响及兔桡骨骨缺损的修复作用。方法在制备rhBMP2/ACBM复合缓释载体的基础上,取培养第3代MSCs种植到材料上,体外培养4～7d,观察MSCs的增殖及碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素的表达;将自体MSCs材料复合培养后24h回植到骨缺损局部,同期观察复合材料及空白对照组,分别于4、8、12周,通过X线、单光子放射计算机断层显象术(SPECT)、及组织学方法评价其对骨缺损的修复效果。结果与单纯体外培养组比较,复合载体在体外对MSCs具有成骨细胞诱导作用,而对细胞增殖无影响。与复合载体植入组比较,细胞材料复合植入组,4周时成骨量明显增多(P<0.05),且12周新骨塑型好。结论复合载体具有良好的体内外诱导成骨作用,细胞载体复合植入对骨缺损修复效果良好。     

猪骨-rhBMP-2复合重组人工骨的研制及临床应用研究

目的：选择猪骨作为rhBMP-2的载体,经去抗原处理,复合重组人工骨,观察该种人工骨临床应用骨缺损修复,促进骨折愈合及诱导成骨的能力,方法：选择猪骨经透析冻干法脱脂,脱蛋白及部分脱钙处理后与成品rhBMP-2按一定比例组成具有生物活性的猪骨－rhBMP-2复合人工骨,先行动物模型实验,随后以自愿随机的原则,临床应用32例,术后,1,4,8,12周进行X线检查,观察临床表现,功能恢复情况,结果：临床32例,34块骨,35处植入,随访31例,随访率96．7％,最长24个月,最短3个月;骨的愈合及缺损修复满意,临床无不良反应,结论：经透析冻干冻处理的猪骨能成为rhBMP-2的理想载体,与rhBMP－2复合后具有良好的成骨诱导活性,无免疫排斥反应,具有广泛的临床应用前景。     

治疗节段性骨缺损的一种新方法—新型重组合异种骨与带血循骨膜联合移植

目的探讨治疗节段性骨缺损新方法一新型重组合异种骨(NRBX)与带血循骨膜联合移植方法的效果。方法将基因重组人BMP2(rhBMP     

组织工程骨膜及脱蛋白骨修复兔桡骨大段骨缺损的早期观察

[目的]比较组织工程骨膜及脱蛋白骨对兔桡骨大段骨缺损的早期修复效果,研究组织工程骨膜移植修复大段骨缺损的可行性。[方法]分离兔骨髓间充质干细胞体外诱导增殖,制成细胞悬液接种于猪小肠黏膜下层表面,构建组织工程骨膜。3个月龄新西兰大白兔24只,随机分为3组各8只,手术制备单侧桡骨干30 mm骨膜-骨缺损模型,A组缺损区植入组织工程骨膜骨修复,B、C组则分别以猪小肠黏膜下层和脱蛋白骨作为对比。术后4周,行X线检查并杀取标本予以组织学染色及评分。[结果]经放射学和组织学观察,在A组中缺损区可见大量新骨形成并桥连两缺损端;而在B组和C组中无明显新骨产生。[结论]使用组织工程骨膜修复同种异体兔桡骨大段骨缺损是可行的,且明显优于脱蛋白骨。     

异体DBM复合rhBMP-2修复兔桡骨缺损的实验研究

目的探讨异体脱钙骨基质（demineralized bonematrix，DBM）复合重组人骨形态发生蛋白2（reconstruction humn bonemorphology protein-2，rhBMP-2）修复节段性骨缺损的能力。方法48只新西兰大白兔采用桡骨15mm节段性骨缺损模型，随机分为3组，A组植入异体DBM与rhBMP-2复合材料，B组植入异体DBM，C组为空白对照组。术后4周、8周、12周、16周．进行放射学和组织学检查。结果A组：术后4周宿主结缔组织长入植骨材料内的骨小梁间，并有岛状新生软骨、骨组织形成；术后8周，新生软骨及骨形成并融合成片；术后12周，新骨改建成熟，但仍能见到植骨材料；术后16周，管状骨结构形成，髓腔再通。B组：术后4周，植骨材料周围有软骨形成；术后8周，大量软骨形成；术后12周，大片状骨形成；术后16周，有髓腔形成。C组：各时问点仅见有纤维结缔组织，只在两端有新骨形成。X片示A组成骨量大，新骨改建、成熟迅速，术后16周全部达骨性愈合。B组成骨量少，仅2例达骨性愈合。C组未见骨性愈合。结论异体DBM复合rhBMP-2材料通过骨诱导和骨传导两种方式修复骨缺损，是一种较理想、具有高效成骨活性的植骨材料。     

自体成骨细胞与脱钙骨复合移植修复兔桡骨缺损的实验研究

目的 研究成骨细胞与DBM复合后的成骨能力,为临床修复骨缺损提供一条新途径。方法 20只新西兰大白兔随机分为4组,每组5只,右侧植入成骨细胞与DBM复合物,左侧植入DBM,分别在2、4、8、12周做X线、组织学切片、微量元素测定等观察,结果进行统计学分析。结果 纯化后的细胞具有成骨细胞的形态结构和生物学特性,复合物修复骨缺损的速度和质量明显优于对照组。结论 成骨细胞与DBM能很好地复合,制成有成骨活性的复合体,在修复骨缺损过程中起到诱导成骨和传导成骨的作用。     

带血管骨膜中央包裹与脱钙骨基质联合移植修复长段骨缺损的实验研究

首次提出带血管骨膜中央包裹与同种脱钙骨基质（ＤＢＭ）联合植骨修复长段骨缺损的新方法，通过Ｘ线片，骨矿质测定及组织学观察等手段研究表明，该方法可较快速地一期修复长段骨缺损。重点介绍了手术方法。认为：带血管骨膜中央包裹与同种ＤＢＭ联合植骨后，两者有机结合，相互促进，发生“中心爆炸”式的成骨方式，克服了长段骨缺损中间部分难以修复这一棘手问题。该手术方法，可为临床治疗长段及特长段骨缺损提供依据。     

骨形成蛋白2基因修复兔桡骨缺损的实验研究

目的观察携带人骨形成蛋白2（bone morphogenetic protein 2，BMP-2）基因的腺病毒载体（adenovirus carrying BMP-2 gene，Ad—BMP2），通过纤维蛋白凝胶与牛松质骨支架（bovine cancellous bone，BCB）复合，修复骨缺损的效果。方法将60只新西兰大耳白兔随机分为4组，每组15只。制成双侧桡骨中段1．5cm骨缺损模型，采用4种材料植入修复。A组：Ad-BMP-2＋BCB；B组：重组BMP-2＋BCB；C组：携带D-半乳糖酐酶基因的腺病毒对照载体（adenovirus carrying β—galgene，Ad—Lacz）＋BCB；D组：单纯BCB支架。修复术后各组于4、8和12周各处死动物5只取材，行X线片、组织学、生物力学和免疫组织化学染色检查。结果A、B两组骨缺损均得到了修复，但术后各时间点，A组在成骨活跃程度、新生骨量、力学强度及BMP-2表达等方面均明显优于B组；C、D两组均无新骨形成。结论BMP-2直接基冈治疗，操作简便、骨诱导能力强，是修复节段性骨缺损的有效方法。