结核分枝杆菌H37Ra感染对小鼠T细胞及Th1/Th2反应的影响北大核心CSCD

目的探讨结核分枝杆菌H37Ra菌株(H37Ra)感染对BALB/c小鼠T细胞及Th1/Th2反应的影响。方法建立H37Ra菌株BALB/c小鼠感染模型,设生理盐水(NS)处理小鼠作为对照组。在感染早期(4周)和晚期(8周)分别取小鼠脾脏细胞及淋巴结细胞,或培养后的细胞,经荧光抗体染色后采用流式细胞术对不同感染时期小鼠的T细胞表型进行检测分析。结果实验组小鼠感染H37Ra 4周时与对照组比较,脾脏总T细胞(CD3^+)、CD4^+T细胞百分率(CD3^+CD4^+CD8^-)降低((43.03±5.57)%,t=5.804,P=0.000;(47.76±6.22)%,t=2.327,P=0.042),CD8^+T细胞百分率(CD3^+CD4^-CD8^+)增高((47.72±4.39)%,t=-3.698,P=0.004);与感染4周时比较,感染8周时脾脏总T细胞、CD4^+T细胞百分率增高((68.23±4.38)%,t=-8.712,P=0.000;(57.89±4.93)%,t=-3.125,P=0.011),CD8^+T细胞百分率降低((39.23±3.80)%,t=3.585,P=0.005),且晚期时恢复至正常。H37Ra感染4周和8周时与对照组比较,H37Ra感染对小鼠淋巴结总T细胞(CD90.2^+)及T细胞亚群(CD4^+T细胞及CD8^+T细胞)分布无显著影响(P>0.05)。H37Ra感染晚期,与对照组比较,IFN-γ表达升高(加培养液而无TB-PPD组:(7.50±1.60)%,t=-4.173,P=0.002;加入PPD组:(6.80±1.36)%,t=-5.014,P=0.001)。结论 H37Ra感染可影响T淋巴细胞及亚群的分布,并出现Th1反应而未见明显Th2反应,促进了机体的抗结核感染作用。     

结核分枝杆菌感染与Th1/Th2免疫应答的研究进展

CD4+T淋巴细胞据其产生的细胞因子不同可分为Th1和Th2两类细胞,其中Th1细胞介导Th1免疫反应;Th2细胞介导Th2免疫反应.在一定条件下,Th1免疫反应可转化为Th2免疫反应.结核病发病时表现为Th1免疫应答受抑和(或)Th2免疫应答亢进,并且 Th1免疫反应抑制程度与结核病严重程度相一致,随着结核病的治愈,Th2为主的免疫反应转化为Th1为主的免疫反应.CpG DNA能在动物体内激发Th1相关的免疫反应,抑制Th2相关免疫反应.因此,CpG DNA可能在防治结核病方面发挥重要作用.     

Ra1362调控环二鸟苷酸影响结核分枝杆菌H37Ra的生物膜发育和休眠

通过敲除环二鸟苷酸(c-di-GMP)合成酶基因Ra1362探讨该基因在结核分枝杆菌(MTB) H37Ra株生物膜发育和休眠中的作用。     

耻垢分枝杆菌疫苗对小鼠细胞因子产生及Th1/Th2应答的影响

目的研究以耻垢分枝杆菌(M.S)制备的M.S疫苗对小鼠免疫应答的影响,验证M.S的免疫原性、探讨M.S疫苗的免疫调节作用。方法将BALB/c小鼠随机分成生理盐水对照组和M.S疫苗低、中、高剂量组,每组6只,分别注射生理盐水和不同剂量的M.S疫苗。取小鼠脾细胞或腹腔巨噬细胞体外培养,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养上清中白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-12和γ干扰素(IFN-γ)的含量,分析M.S疫苗对小鼠Th1/Th2类应答的影响。结果(1)生理盐水对照组和M.S疫苗低、中、高剂量组小鼠产生的IL-12分别为(32.6±22.7)、(58.9±18.6)、(77.3±38.0)、(114.7±9.9)pg/m l,M.S疫苗中、高剂量组与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)生理盐水对照组和M.S疫苗低、中、高剂量组小鼠产生的IL-2分别为(5.0±2.6)、(13.4±9.3)、(15.3±9.7)、(22.6±7.5)pg/m l,M.S疫苗高剂量组与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。(3)体外以ConA刺激时,生理盐水对照组和M.S疫苗中剂量组小鼠产生的IFN-γ分别为(662±279)和(807±163)pg/m l,IL-4分别为(407±127)和(101±26)pg/m l,但M.S疫苗组与生理盐水对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);体外以M.S-纯化蛋白衍生物(PPD)刺激时,生理盐水对照组和M.S疫苗中剂量组小鼠产生的IFN-γ分别为(14.0±6.31)和(55.3±32.4)pg/m l,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),各组产生的IL-4均在检测限以下。结论M.S具有良好的免疫原性,以此制备的M.S疫苗具有促进Th1类应答、抑制Th2类应答的免疫调节作用。     

结核分枝杆菌感染对BALB/c小鼠B细胞发育分化的影响

目的 探讨结核分枝杆菌感染对小鼠B淋巴细胞分化发育的影响。方法 建立Mtb感染BALB/c小鼠模型,在感染早期(4周)及晚期(8周)分别取小鼠骨髓细胞及脾脏细胞,或经培养后,荧光抗体染色,用流式细胞术对感染早期及晚期小鼠的B细胞表型进行分析,设生理盐水处理的小鼠作为对照。结果 Mtb感染组与对照组比较,pro-B细胞(CD45R⁺CD43⁺)(4周:t=2.886,P<0.05)、未成熟B细胞(CD45R⁺IgM⁺IgD^-)(4周:t=4.760,P<0.05)减少,骨髓成熟B细胞(CD45R⁺IgM^+/-IgD⁺)(4周:t=-3.485,P<0.05;8周:t=-2.594,P<0.05)与脾脏成熟B细胞(CD45R⁺IgMlowIgDhi)(4周:t=-2.275,P<0.05;8周:t=-2.97,P<0.05)增多;小鼠脾脏B细胞活化分子CD69表达升高(4周:t=-2.271,P<0.05;8周:t=-2.052,P<0.05);小鼠脾脏记忆性B细胞 (CD45R⁺CD27⁺IgD^+/-)升高(4周:t=-4.203,P<0.05;8周:t=-5.280,P<0.05)。结论 Mtb感染能影响B细胞的分化发育,促使B细胞向成熟细胞分化,并能促使B细胞活化,使机体更有利于抗结核的感染。     

结核分枝杆菌复合HIV感染患者Th1/Th2型炎症标志物水平的研究

目的探究结核分枝杆菌复合人类免疫缺陷病毒感染患者Th1/Th2型炎症标志物水平。方法选择2015年1月至2017年6月于我院就诊的30例结核分枝杆菌复合HIV感染患者(TB+HIV组),选择同时期同年龄段的30例肺结核患者(TB组)、HIV感染患者(HIV组)和健康对照组,比较四组患者外周血Th1、Th2型炎症标志物水平以及Th1/Th2细胞活性间的差异。结果 TB组、HIV组和TB+HIV组患者的IL-2、IL-12和TNF-α水平明显低于对照组(P0.05);TB+HIV组患者的IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α的水平明显低于TB组(P0.05)。TB组和TB+HIV组患者的IL-4、IL-6和IL-10的水平明显高于对照组(P0.05);TB+HIV组患者的IL-4、IL-6、IL-8和IL-10的水平明显高于HIV组(P0.05)。与对照组相比,TB组、HIV组和TB+HIV组的INF-γ/IL-10比值较低(P0.05),其中TB+HIV组明显低于TB组和HIV组(P0.05)。TB+HIV组患者HIV病毒载量的对数值与INF-γ/IL-10比值具有较高的相关性(r=-0.844,P0.001)。结论结核分枝杆菌复合HIV感染患者存在明显的Th1/Th2型炎症标志物紊乱,IFN-γ/IL-10比值与患者HIV病毒载量高度负相关。     

结核分枝杆菌H37Ra感染的THP-1细胞TGF-β1、Smad2、Smad3、TNF-α、IL-6 mRNA表达变化

目的 观察结核分枝杆菌H37Ra在不同感染复数及不同感染时间感染的THP-1细胞内TGF-β1/Smad2、3信号通路活化以及炎症因子TNF-αmRNA、IL-6 mRNA的表达变化,明确TGF-β1/Smads经典信号通路的激活程度是否与结核分枝杆菌感染的细菌量有关以及在结核分枝杆菌感染后的哪个时间阶段发挥主要作用....     

Th1/Th2细胞因子与蠕虫感染

蠕虫感染后引起复杂的免疫应答中辅助性T细胞处于核心位置,Th1/Th2细胞分泌的细胞因子在蠕虫感染后表达地位的不同,将决定蠕虫感染的发展与转归。本文对Th1/Th2细胞因子在蠕虫感染中的表达研究进展予以综述。     

曼氏血吸虫感染改变Th1/Th2细胞因子对非寄生虫抗原的反应

曼氏血吸虫感染小鼠伴有血吸虫抗原及分裂原诱导的Th1相关的细胞因子(IL-2和IFN-γ)分泌下降和Th2相关的细胞因     

CpG ODN对日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响

目的　观察CpGODN对日本血吸虫感染小鼠后不同时期Th1/Th2细胞因子表达水平的影响 ,探讨CpGODN介导Th1/Th2免疫偏移对控制血吸虫虫卵肉芽肿的作用。方法　取小鼠感染后 4、8、12和 16周的脾淋巴细胞经CpGODN和N CpGODN处理后 ,培养 72h ,用ELISA双抗体夹心法测定培养上清中IFNγ和IL - 4表达水平的动态变化。结果　CpGODN能显著上调IFNγ的表达水平 ,下调IL - 4的表达水平 ,而N -CpGODN对IFNγ及IL - 4表达水平无显著影响。CpGODN处理后小鼠脾淋巴细胞Th2分化指数明显减小。结论　CpGODN可以调节Th1/Th2细胞因子的表达水平 ,显著上调Th1型细胞因子水平和下调Th2型细胞因子水平 ,介导小鼠Th1型细胞免疫优势应答 ,为控制日本血吸虫慢性肉芽肿病变提供了一种新途径。     

结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验对淋巴结结核的辅助诊断价值研究

目的 探讨评价结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验（T-SPOT.TB）对淋巴结结核的辅助诊断价值.方法 本研究募集北京胸科医院2011年7月至2013年12月收治住院的淋巴结肿大患者185例,最终分为确诊结核性淋巴结组（51例）、非结核性淋巴结疾病组（105例）,其余诊断不明确或临床诊断淋巴结结核患者予以剔除.所有患者均行外周血T-SPOT.TB及免疫印迹法检测结核分枝杆菌抗体.采用SPSS 17.0进行统计学分析,非正态分布的计量资料数据用中位数（上下四分位数）[M（P25,P75）]表示,两组间斑点形成个数（SFCs）数据比较采用Mann WhitneyU检验,组间样本率的比较采用x2检验,以P＜0.05为差异具有统计学意义.结果 T-SPOT.TB和免疫印迹法检测结核分枝杆菌抗体的敏感度分别为92.2％（47/51）和60.8％（31/51）,特异度分别为79.0％（83/105）和77.1％（81/105）,T-SPOT.TB敏感度显著高于免疫印迹法检测结核分枝杆菌抗体方法,差异有统计学意义（x2=13.95,P＜0.01）.结核分枝杆菌特异抗原刺激下结核性淋巴结组SFCs中位数为242个（57,621个）/106外周血单个核细胞（PBMCs）,非结核性淋巴结疾病组SFCs中位数为0个（0,20个）/106 PBMCs,结核性淋巴结组SFCs数量显著高于非结核性淋巴结疾病组,应用Mann Whitney U检验,两组间差异具有统计学意义（U=472.0,P＜0.01）.在T-SPOT.TB结果阳性的69例患者中,47例结核性淋巴结患者SFCs的M（P25,P75）为280个（98,684个）/106 PBMCs,显著高于对照组22例非结核性淋巴结疾病患者SFCs的M（P25,P75）52个（35,93个）/106 PBMCs（U=146.5,P＜0.01）.结论 T-SPOT.TB方法在淋巴结结核的诊断中有着较高的敏感度,有可能成为淋巴结结核辅助诊断的一项重要手段.     

TIGIT信号在日本血吸虫感染小鼠Th1/Th2 反应平衡中的作用研究

目的 研究TIGIT信号在日本血吸虫感染过程中Th1/Th2反应平衡中的作用。方法 C57BL/6小鼠感染日本血吸虫尾蚴,并以未感染小鼠作为正常对照。感染0、3、5、8、13周时取小鼠脾脏,采用流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞中TIGIT阳性细胞比例,以及TIGIT阴性和TIGIT阳性细胞上Ki67、IFN?γ、IL?4表达水平。结果 日本血吸虫感染组小鼠脾脏中TIGIT+细胞占CD4+ T细胞的比例显著高于正常对照组（29.30%±0.70% vs. 3.09%±0.50%;t = 29.09,P < 0.01）,但感染组和对照组小鼠脾脏中TIGIT+细胞占CD8+ T细胞的比例差异无统计学意义（3.61%±0.26% vs. 3.58%±0.16%;t = 0.108,P > 0.05）,且感染组和对照组小鼠脾脏中TIGIT+细胞占非T细胞的比例差异亦无统计学意义（1.86%±0.19% vs. 1.37%±0.17%;t = 1.931,P > 0.05）。进一步分析发现,Ki67在TIGIT+细胞上的表达比例（17.03%±0.64%）较其在TIGIT?细胞上表达的比例（6.59%±0.37%）显著升高（t = 14.09,P < 0.01）,而CD4+ TIGIT+细胞中Th2/Th1比值显著高于CD4+ TIGIT?细胞（39.28%±3.75% vs. 11.79%±1.64%;t = 6.721,P < 0.01）。结论 感染日本血吸虫后,CD4+ T细胞上TIGIT表达增加,且可能通过诱导Th2细胞增殖进而促进Th2细胞比例增加。     

刚地弓形虫感染致Th1/Th2细胞因子变化对大鼠生精细胞的影响

目的 研究弓形虫感染后雄性大鼠Th1、Th2细胞因子IFN-γ、IL-4及一氧化氮(NO)水平的变化,探讨其对雄性睾丸生精细胞损伤的影响.方法 选用9～10周龄雄性SD大鼠132只,按随机数字表法分为3组:正常对照组、低剂量感染组(1×102个速殖子)、高剂量感染组(1×104个速殖子),感染后第0、3、6、9、……30天,感染组和对照组分别取4只大鼠,检测大鼠血清IFN-γ、IL-4及NO的水平,并且做睾丸的病理学检查和精子计数.结果 弓形虫感染组大鼠血清IFN-γ显著升高,低剂量组及高剂量组在第6天达峰值,分别为(286.3±45.3) pg/ml和(506.6±34.3) pg/ml;血清NO亦显著升高,高剂量组第9天达峰值(77.7±7.0) μmol/L,低剂量组第12天达峰值(59.5±5.3) μmol/L,之后均迅速降低;感染组大鼠血清IL-4逐渐升高,低剂量组及高剂量组于第15天达峰值(233.3±36.9) pg/ml、(366.7±52.4) pg/ml后逐渐降低.以上指标至实验末期均未恢复正常水平.病理检查显示,正常对照组大鼠生精小管层次清晰,细胞丰富,精子计数为175.7±23.7,感染组大鼠生精小管层次混乱,精母细胞、精子细胞明显减少,低剂量组及高剂量组至第15天达谷值84.5.23.5、47.3±14.7,至实验末期无明显恢复.结论 弓形虫感染导致的早期Th1细胞因子IFN-γ极化及NO显著升高,随后引起Th2细胞因子IL-4反应性增高,并介导以精母细胞为主的生精细胞损伤及生精障碍.     

结核分枝杆菌感染小鼠动物模型的建立及研究进展

小鼠动物模型是结核分枝杆菌(MTB)感染研究中应用最为广泛的动物模型,能不同程度地模拟人体结核病发展过程,并且可以较为准确地评价结核病的病理损伤、存活时间以及免疫学机制,为研究感染状态下MTB生理特性,抗原表达情况及解释MTB感染的发生、维持、活化提供病原体方面的信息。成功建立MTB感染的小鼠动物模型对MTB感染研究工作非常重要。     

母牛分枝杆菌菌苗对HIV感染合并结核分枝杆菌潜伏感染者外周血T细胞亚群的影响

目的:探讨母牛分枝杆菌菌苗对HIV合并结核分枝杆菌潜伏感染(latent tuberculosis infection, LTBI)者T细胞亚群的影响及其使用的安全性。方法:采用多中心前瞻性队列研究方法，连续纳入2003年6月至2020年6月宁夏回族自治区银川市AIDS管理机构管理的经结核菌素皮肤试验筛查确诊的96例HIV感染合并LTBI者作为研究对象。研究对象按照银川市所辖县区划分为试验组(63例)和对照组(33例)。试验组在高效抗逆转录病毒治疗的基础上，注射母牛分枝杆菌菌苗22.5μg/次，每2周注射1次，共3次。对照组在高效抗逆转录病毒治疗的基础上，口服异烟肼300 mg/次，1次/d,连续服用6个月。于治疗前和治疗结束后1个月、3个月随访时，检测并比较两组研究对象的CD4⁺、CD8⁺、CD3⁺T细胞等免疫细胞水平及肝功能指标变化情况；同时，评价两组研究对象不良反应发生情况。结果:试验组在治疗结束后1个月，CD3⁺T细胞水平为(1583.83±584.69)个/μl,明显高于治疗前[(1221...     

白藜芦醇对JurcatT细胞分化为Th1/Th2细胞作用的影响及机制

目的探讨白藜芦醇调节Jurkat T细胞分泌为Th1/Th2型细胞作用的影响。方法将不同浓度的白藜芦醇作用于受植物血凝素（PHA）刺激的Jurkat T细胞,于不同时间点分别用ELISA法检测Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-10;RT-PCR法检测T-bet和GATA-3 mRNA表达。结果白藜芦醇作用后IFN-γ、IL-10及T-bet mRNA、GATA-3 mRNA的表达均明显降低,具有浓度和时间依赖性。结论白藜芦醇对受PHA刺激的JurcatT细胞由Th0向Th1、Th2细胞分化起抑制作用。     

结核分枝杆菌感染T细胞斑点试验的临床应用价值

目的 寻找一种敏感度和特异度都较高的临床诊断方法,以提高结核病的确诊率.方法 搜集110例经实验室与临床诊断确诊的患者,采用结核分枝杆菌感染T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT.TB),检测其诊断结核病的敏感度和特异度.同时行PPD试验的患者104例.结果 66例结核患者中56例T-SPOT.TB检测阳性,敏感度为84.85％；66例中61例作PPD试验,42例为阳性结果,敏感度为68.85％,两者比较差异有统计学意义(x2=7.76,P＜0.05)；44例非结核性疾病患者中39例T-SPOT.TB检测阴性,特异度为88.64％；44例中43例作PPD试验,31例阴性,特异度为72.09％,两者比较差异有统计学意义(x2=4.72,P＜0.05).T-SPOT.TB检测在敏感度、特异度上均显著优于临床常用的PPD.T-SPOT.TB阳性预测值91.80％(56/61). PPD试验阳性预测值76.36％(42/55).结论 T-SPOT.TB试剂盒在检测结核病诊断方面具有很高的应用价值.     

结核患者Th1/Th2细胞因子和前炎性因子研究

目的研究结核患者细胞因子变化规律和调控机制,以帮助临床鉴别诊断.方法对54例结核患者、18例肺癌患者和12例健康人血清、肺泡灌洗液、胸水及脑脊液等多种标本的各种细胞因子进行检测.结果结核患者血清白介素（IL）-12、IL-18等Th1细胞因子及IL-10、IL-4等Th2细胞因子水平均较高.各种细胞因子在脑脊液中含量均较低;干扰素γ（IFN-γ）在胸水渗出液中含量很高.前炎性因子IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在结核患者中水平较高.IL-10与TNF-α的比值在结核和肿瘤患者之间有显著差异.结论细胞因子检测有助于结核病和肺癌患者的鉴别诊断.     

结核菌H37Ra皮内接种对小鼠巨噬细胞的激活效应

目的探讨小鼠皮内接种结核菌H37Ra后,腹腔MΦ是否被免疫激活以及激活后氮氧化物的产生、抗结核细胞因子的表达,从而了解H37Ra的免疫应答过程及对MΦ的抗菌免疫作用。方法用H37Ra、BCG皮内免疫小鼠后第30、60天,分别采用Griess法、化学法、ELISA法检测小鼠腹腔MΦ在受到、未受到IFN-γ刺激后NO、H2O2的产生以及IL-12、TNF-α的表达水平。结果①H37Ra免疫小鼠后能显著诱导MΦ分泌表达IL-12、TNF-α,与BCG皮内接种组、未免疫组比较,其差异均有统计学意义(P<0.05);也能诱导MΦ产生NO、H2O2,与未免疫组比较具有统计学意义(P<0.05),与BCG皮内接种组比较,无明显差异;②IFN-γ对巨噬细胞氮氧化物的产生、细胞因子的表达具增强效应。结论H37Ra皮内接种小鼠后能诱导巨噬细胞活化并产生较强的激活效应,且该效应略优于BCG。