正交试验优选白芨多糖硫酸酯化工艺的研究

目的优选白芨多糖硫酸酯化的最佳工艺。方法采用氯磺酸-吡啶法合成白芨多糖硫酸酯。以取代度和产物量为指标,采用L9(34)正交设计对试剂比例、反应温度和反应时间进行优选。结果吡啶和氯磺酸比例6∶1,反应温度85℃,反应时间2h为比较适宜的工艺条件。结论白芨多糖硫酸酯化优化的工艺条件方法可行,为进一步扩大试验提供了有价值的参数。     

云芝胞外多糖的致突变性实验研究

云芝胞外多糖系杂色云芝菌深层培养后，从培养液中提取的多糖类物质。药理实验表明，云芝胞外多糖能增强机体免疫机能，提高网状内皮系统吞噬活性，但迄今未见有关云芝胞外多糖的致突变性报导。为此，受重庆制药五厂委托，我室进行了该药致突变作用的实验研究，为该产品应用于人体的安全性提供依据。现将研究结果报告如下。     

新月菱形藻胞外多糖的成分及其硫酸酯的制备

目的阐明新月菱形藻胞外多糖(exopolysaccharides of Nitzschia closterium,EPN)的成分、单糖组成及其硫酸酯化条件。方法新月菱形藻胞外多糖以醇沉法从该藻的培养液中制备;DEAE-Sephedex25柱分离,HPLC法测定其质量分数,HPLC测定其相对分子质量;以氯磺酸-吡啶法探索新月菱形藻硫酸酯化反应条件。结果新月菱形藻向胞外分泌3种多糖,相对分子质量分别为EPN11.886×105,EPN21.41×105,EPN31.134×105。3种多糖的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和岩藻糖。甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖和岩藻糖的摩尔比在EPN1为4.3∶1∶5.1∶8.9∶5.6,EPN2为4.2∶7.3∶3.7∶12.8∶3.4,EPN3为3.5∶2.1∶4.3∶4.9∶4.7。3种多糖的硫酸酯化条件基本一致,提高氯磺酸比例和延长反应时间均有利于增加酯化产物的硫酸根、提高取代度和酸酯化反应的产率。结论新月菱形藻胞外多糖为酸性多糖,其硫酸酯化产物多糖硫酸酯可能具有潜在的药理活性。     

桑黄胞外多糖抗肿瘤活性研究

目的研究桑黄胞外多糖对小鼠S180实体瘤、腹水瘤的生长抑制作用。方法将昆明种小鼠接种S180实体瘤或腹水瘤后随机分组,灌胃给予不同剂量100、200、400mg/(kg·d)的桑黄胞外多糖,以灌胃生理盐水和环磷酰胺为空白对照组和阳性对照组。检测受试药物对小鼠S180实体瘤生长的抑制作用以及对荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响,计算腹水型荷瘤小鼠的存活时间。结果桑黄胞外多糖显著增加荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数;3个剂量的桑黄胞外多糖对S180实体瘤的抑瘤率分别为31.25%、36.86%、44.38%;并且可以降低S180腹水瘤细胞的分裂指数,延长腹水型荷瘤小鼠的存活时间。结论桑黄胞外多糖具有较强的抗肿瘤作用。     

金耳胞外多糖的结构分析

金耳Tremellaaurantialba系银耳科中名贵药食真菌,具有止咳化痰、补气养心、平肝益胃等功效[1,2]。金耳子实体多糖和菌丝体多糖的结构和药效均有报道[3～10],本实验对从发酵液中提取的胞外多糖进行了分离纯化并对其结构作了初步研究。1实验部分1.1仪器与药品:Biof-2050发酵罐(上海高机实业总公司生产);SYNDER-UF402型超滤装置(SYNDER美国);KA-1000型台式离心机(上海安亭科学仪器厂);玻璃色谱柱(1cm×50cm、1.5cm×60cm);HL-2恒流泵(上海精科实业有限公司制造);TH-1000梯度混合仪(上海沪西仪器厂);BSA-100自动分部收集器(上海长宁…     

扁藻食用价值的研究

前言近年来小球藻的大面积培养及其利用引起了人们广泛注意,不少国家正在研究其各种培养方法,营养价值及加工利用,我国在藻种选挥,培养条件,营养成分,饲料应用以及临床治疗等方面亦见不少资     

硒多糖的研究与应用进展

硒是生命必需的微量元素[1],是谷胱甘肽过氧化物酶的主要活性成分,它可以直接或间接地清除体内氧自由基,可抑制脂氧化或过氧化,并能引起过氧化物的广泛分解或还原。某些癌症、肿瘤、心血管疾病、克山病、大骨节病和艾滋病等[2~4]都与体内缺硒有关。但是,硒不能由生物体自主合成,只能通过外吸收获得。硒在自然界中的存在形式分为无机硒与有机硒2种。与无机硒相比,有机硒因其具有更高的生物活性和更低的毒性而易被生物体吸收利用。有机硒包括硒多糖、硒蛋白、硒核酸等。其中硒多糖又称硒酸酯多糖、硒化卡拉胶(K appa-Se),是硒与活性多糖键合…     

应用正交设计优化天马颗粒剂配方的实验研究

目的优化天马颗粒剂的最佳配方。方法天马颗粒剂的17味药物按L20(217)正交表分为20组,并通过对20组大鼠灌胃获取含药血清。用5%、10%、20%含药血清分别对人大肠癌细胞HCT8、HCT116、HT29、COLO320、SW480、SW620干预24、48、72 h,CCK-8法检测细胞的吸光度,比较各组含药血清对细胞的增殖抑制率。结果经直接分析和方差分析,原方中蜈蚣、全蝎、半边莲、黄柏、三棱、大黄、胆南星、海藻、黄芪、山药均在大肠癌细胞的增殖抑制中发挥主要作用(均P0.05,P0.01),而其它药物则无明显作用(均P0.05)。结论根据正交设计优选天马颗粒剂的最佳配方为:蜈蚣、全蝎、半边莲、黄柏、三棱、大黄、胆南星、海藻、黄芪、山药。     

嗜盐隐杆藻胞外多糖抗肿瘤活性研究

目的探讨嗜盐隐杆藻胞外多糖(exopo lysaccharide of Aphanothece ha lophy tica,EPAH)的抗肿瘤活性。方法以S180肉瘤为肿瘤模型,检测EPAH对肿瘤生长的抑制活性;M TT法检测EPAH对S180肉瘤细胞、Sm cc7721肝癌细胞和H eL a细胞的体外抑制活性;以对荷瘤小鼠免疫器官、血液淋巴细胞数量及淋巴细胞增殖影响、NK细胞杀伤活性和巨噬细胞产生NO及其他细胞因子的影响评价EPAH对小鼠免疫功能的作用。结果EPAH对S180肉瘤生长有显著的抑制作用,其中预防给药和与肿瘤接种同时给药组最大抑瘤率分别达66.79%和47.93%。100μg/mL EPAH对Sm cc7721细胞、H eL a细胞以及S180细胞生长的抑制率达60%以上。EPAH显著提高荷瘤小鼠脾脏和胸腺质量以及血液淋巴细胞数量,促进淋巴细胞增殖反应,增加NK细胞杀伤活性,刺激巨噬细胞产生NO,分泌白细胞介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结论EPAH有显著的抗肿瘤活性,并能直接作用于肿瘤细胞,抑制肿瘤生长。EPAH可能是通过增加荷瘤小鼠免疫器官的质量和免疫细胞的数量、促进淋巴细胞分裂,提高NK细胞杀伤活性和巨噬细胞产生NO以及其他细胞因子实现其抗肿瘤活性。     

灵芝真菌发酵胞外多糖反馈抑制的初步研究

探讨了灵芝胞外多糖自身反馈抑制作用。在摇瓶中考察了灵芝真菌发酵菌丝体生长、胞外多糖(EPS)和胞内多糖(IPS)合成的动态过程。在培养168h时，生物量达到最大值3．18g／L(干重)，培养216h时，胞外多糖达到最高浓度1．24g／L，EPS和生物量的变化趋势大致呈正相关。在摇瓶培养基中添加同源胞外多糖，以浓度梯度实验法考察培养基中的同源胞外多糖浓度对灵芝真菌发酵胞外多糖产量的影响，结果表明：培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于0．59g/L时，EPS的产生受到明显抑制，其趋势是随着培养基中同源灵芝胞外多糖浓度的增加，反馈抑制作用逐渐增强，当培养基中添加的同源胞外多糖浓度高于2．34g/L时，菌丝的生长和胞外多糖的产生完全受到抑制。     

灵芝菌发酵培养基的优化及灵芝胞外多糖的分离纯化

用正交法研究了不同条件对灵芝菌生长影响,从中选出了灵芝 菌液体深层发酵的优化 培养基：葡萄糖 3.6%,蛋白胨 0.4%,pH 6.0,酵母膏 0.2%,KH2PO40.1%,MgSO 4· 7H2O 0.05%,Vit B1 0.005%,每升发酵液产干菌丝体 15.6 g,粗多糖 0.72 g。 经葡 聚糖凝胶层析对灵芝胞外多糖进行了分离纯化,共有 5 个组分,并用红外光谱、紫外光谱 ,气相色谱等手段进一步分析了灵芝胞外多糖的组成,结果表明灵芝胞外多糖系由甘露糖、 果糖、葡萄糖通过糖 β-D 糖苷键构成。     

基于正交设计优化当归多糖提取工艺的研究

目的利用正交设计优化当归多糖水提取工艺。方法采用L9(33)正交设计方法,取3个因素即水提取过程中的加水量(A)、提取时间(B)、提取次数(C),每个因素3个水平依次试验,醇沉工艺按照文献将水提液浓缩至1∶1.8,加95%乙醇至醇浓度为65%。最终采用苯酚-硫酸法测定当归多糖的含量,以当归多糖的得量作为考核指标对9次试验结果进行评价,考核本试验的可靠性并进行验证。结果影响当归多糖得率最主要的因素为提取时间。当归多糖得率最优的提取工艺为10倍量水,提取时间为60 min,提取3次;相关数据显示本次研究的精密度、稳定性均较好,验证结果基本与正交试验设计分析结果一致。结论当归多糖得率最优的提取工艺为加10倍量水、提取60 min、连续提取3次。     

正交试验优化白芷多糖的活性炭脱色工艺研究

目的 采用正交试验优化活性炭对白芷多糖提取液脱色的工艺条件。方法 考察脱色温度、活性炭添加量和脱色时间对白芷多糖脱色效果的影响。在单因素试验的基础上,以多糖脱色率和多糖剩余率为指标,采用L9(34)正交试验确定了最优工艺的参数。结果 活性炭添加量对脱色效果的影响最大,其次为温度,再次为时间。最佳脱色条件为脱色温度60 ℃,活性碳添加量2%,吸附时间30 min,在此条件下,脱色率为96.20%,多糖剩余率为82.36%。结论 活性炭对白芷多糖脱色工艺简便可行。     

正交实验优化天麻提取工艺研究

目的:通过正交实验方法,优化天麻中天麻素的提取条件,得到天麻素的最佳提取工艺。方法:采用正交设计的方法,以提取液中天麻素的含量为标准,以温度、乙醇浓度、固液比、提取时间为条件,筛选天麻中天麻素的最佳提取工艺条件。结果:天麻中天麻素的最佳提取工艺条件是70℃、60%乙醇、固液比1:20、提取时间2h。结论:采用传统方法回流提取天麻中天麻素,通过提取条件优化,能够提高天麻素产量,工艺简单,结果稳定,重现性强。     

虫草菌酸性胞外多糖的抗氧化作用

目的： 研究虫草菌酸性胞外多糖（EPS-A）的抗氧化作用。方法： 体外建立大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞氧化损伤模型,测定EPS-A对细胞内丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响;采用小鼠移植性肝癌模型,测定不同剂量EPS-A对荷瘤小鼠肝、脑和血清中MDA水平及SOD活力的影响。结果： EPS-A显著提高体外培养细胞的抗H₂O₂氧化能力;能逆转因移植肿瘤而引起的小鼠组织中MDA的升高和SOD的降低,同时显著抑制肿瘤生长。结论： EPS-A具有显著的抗氧化能力。     

正交实验优选一贯煎多糖的提取工艺

目的:确定一贯煎中提取多糖的最佳工艺。方法:采用正交设计法,以加入水量(A)、提取时间(B)、提取次数(C)和醇沉浓度(D)作为因素。结果:C因素和D因素对多糖含量的影响具有显著意义,A因素、B因素的影响不显著。结论:最佳提取工艺为A1B2C2D2,即提取2次,时间分别为60min,加水量为8倍,醇沉浓度为70%。     

双孢蘑菇胞外多糖及胞内多糖的分离纯化和化学结构分析

目的：研究双孢蘑菇胞内多糖及胞外多糖的化学结构。方法：采用葡聚糖凝胶纯化、高效液相色谱、紫外光谱、薄层层析、气相色谱、红外光谱、核磁共振氢谱、高碘酸氧化、Ｓｍｉｔｈ降解等色谱及化学方法测定。结果：胞内多糖及胞外多糖均由单一葡聚糖组成,具有β型糖苷键。结论：对双孢蘑菇胞内多糖及胞外多糖的结构研究为首次报道。     

不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株合成胞外多糖能力的实验研究

目的比较不同龋敏感儿童口腔中变异链球菌的临床分离株合成胞外多糖能力的差异。方法以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变异链球菌为实验菌株,常规复苏、增菌,配制相同浓度的菌悬液,按菌液与含1%蔗糖的BHI液体培养基1：10（v/v）比例接种细菌,37℃厌氧培养24h后,分别收集水溶性葡聚糖和水不溶性葡聚糖,用蒽酮法进行定量分析。结果儿童高、中龋患者口腔中分离出的变异链球菌临床分离株以及国际标准菌株合成胞外多糖能力明显高于无龋者口腔中分离出的变异链球菌,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论高龋儿童口腔中变异链球菌临床分离株具有高致龋性。     

一种红树林链霉菌的胞外多糖免疫功能研究

目的:对一种分离自海南红树林链霉菌的胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)进行了免疫调节活性研究。方法:以小鼠迟发型过敏反应、血清溶血素测定以及巨噬细胞吞噬实验探讨EPS的免疫调节活性,并以流式细胞仪测定脾脏淋巴细胞亚群。结果:EPS对小鼠免疫应答多项指标具有一定的正向调节作用(P﹤0.05);CD4+T细胞数量、CD4+/CD8+比率明显高于正常对照组。结论:此种产自链霉菌的EPS具有一定的免疫调节活性。