鲍曼不动杆菌PER型超广谱β 内酰胺酶耐药基因研究

目的探讨某院产PER型超广谱β 内酰胺酶（ESBLs）鲍曼不动杆菌分子流行病学特点及耐药机制。方法选取该院2009年1-5月临床分离的非重复鲍曼不动杆菌129株,采用K B纸片扩散法进行药敏试验,聚合酶链反应（PCR）扩增PER基因并测序,肠杆菌科基因间重复一致序列（ERIC） PCR进行同源性分析。结果78株鲍曼不动杆菌携带PER 1型基因,阳性率60.47%（78/129）。PER 1阳性鲍曼不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、氨苄西林/舒巴坦、米诺环素和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为46.15%、44.87%、38.46%、10.26%和8.97%,对其余10种抗菌药物的耐药率均＞60%;PER 1阳性菌株对头孢他啶、头孢噻肟、头孢吡肟、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率明显高于PER 1阴性菌株（均P＜0.05）。78株PER 1阳性菌株包括7型,分别为A型（1株）、B型（1株）、C型（55株）、D型（18株）、E型（1株）、F型（1株）、G型（1株）,C和D型为主要克隆型。结论C和D型PER 1阳性鲍曼不动杆菌为该院最主要的流行株。产PER 1型ESBLs鲍曼不动杆菌呈多重耐药,米诺环素、头孢哌酮/舒巴坦可作为该院鲍曼不动杆菌感染治疗的最佳选药。     

多重PCR在多重耐药鲍曼不动杆菌耐药基因检测中的应用

目的 建立能够同时检测多重耐药鲍曼不动杆菌(Multidrug-Resistant Acinetobacter Baumannii , MDRAB)多个耐药基因的多重PCR反应体系,了解MDRAB耐药基因分布情况,为临床治疗及感染控制MDRAB提供分子生物学依据。 方法 针对MDRAB 4种耐药基因blaoxa-23、blaAde-B、blaint-1及blaISCR-1分别设计4对引物,设计反应条件在同一PCR反应体系中同时检测这4种耐药基因,并采用建立的多重PCR反应体系检测临床分离MDRAB耐药基因携带情况。结果 本研究成功建立了一个可以同时检测4种MDRAB耐药基因的多重PCR反应体系,临床分离68株MDRAB耐药基因检测显示,1株同时携带有4种耐药基因,5株携带有blaAde-B、blaint-1及blaISCR-1,62株携带有blaoxa-23和blaAde-B。结论 多重PCR可以快速、高效、低成本检测MDRAB携带的耐药基因,多重PCR检测显示blaoxa-23及blaAde-B 是MDRAB携带的主要耐药基因。     

儿科多重耐药鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶基因研究

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性性及超广谱β-内酰胺酶基因携带情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法收集2016年日照市妇幼保健院儿科分离的鲍曼不动杆菌38株,采用纸片扩散法对分离菌株进行药物敏感性试验。对其中21株多重耐药菌进行PCR检测PER、SHV、TEM、CTX和VEB基因携带情况。结果38株鲍曼不动杆菌,对多粘菌素B、替加环素均敏感,对头孢哌酮-舒巴坦(34.2%)、阿米卡星(36.8%)耐药率较低,对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类、喹诺酮类耐药率均>50%。在21株多重耐药菌中,16株SHV型基因阳性,8株PER型基因阳性,未检出TEM、CTX和VEB基因。结论儿科鲍曼不动杆菌多重耐药与携带SHV、PER基因相关。     

多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染的直接经济损失研究

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)医院感染的直接经济损失。方法选取重庆市某三级甲等综合医院2014年9月—2016年8月住院患者中发生MDR-AB医院感染的65例住院患者(设为病例组),采用1∶1配对病例对照研究方法,按配对条件选取同期未发生医院感染的住院患者65例(设为对照组),分析比较MDR-AB医院感染的直接经济损失。结果病例组住院总费用、药占比、住院日数中位数分别为167 579.56元、37.40%、52 d;对照组则为59 386.77元、31.85%、27 d,MDR-AB医院感染所导致的平均直接经济损失为108 192.79元,主要为药费、护理费、治疗费、检验费,其中药费所占比例最高;MDR-AB医院感染延长的平均住院日数为25 d;病例组各分类费用高于对照组,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 MDR-AB医院感染所导致的经济损失严重,增加药占比,延长住院时间,应重视其预防与控制。     

多重耐药鲍曼不动杆菌的分子流行特征分析

目的 研究不同医院分离的鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶的基因型和分子流行特征.方法 采用琼脂稀释法检测64株多重耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC);PCR检测碳青霉烯酶基因、整合酶基因及per基因,选取不同的耐药克隆菌株进行序列测定;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源关系,确定菌株的分子流行特征.结果 50株菌(78.1%)携带blaOXA-23-like基因,经测序分析确定为OXA-23;1株菌检测出blaOXA-58-like基因;57株菌(89.1%)携带I类整合子;25株菌(39.1%)检测出blaPER-1基因.PFGE图谱显示64株菌分为A、B、C、D、E等13个基因型,三家医院分别以A型、B型和U型为主要流行株.结论 三家医院均发现多耐药鲍曼不动杆菌的播散流行,不同医院间和同一医院不同科室间存在同型别流行;三家医院多耐药鲍曼不动杆菌产生的碳青霉烯酶常携带OXA-23型酶,同时检测出blaOXA-58、I类整合子和balPER基因.     

多重耐药鲍曼不动杆菌感染调查

目的了解某院多重耐药鲍曼不动杆菌（MDR Ab）分离率及感染患者基本情况,为预防和控制MDR Ab引起的医院感染提供依据。方法查阅该院2009年1月1日-2011年9月30日期间99 665份出院病历,对其中126例MDR Ab感染患者病历进行回顾性调查分析。结果126例MDR Ab感染患者科室分布为：重症监护室（ICU） 63例,普通外科14例,呼吸科12例,颅脑外科10例,骨科8例,心胸外科6例,脑血管科3例,心内科3例,综合内科2例,血液科、产科、消化科、中西医科和口腔科各1例;其中特级护理89例（70.63%）、有侵入性操作史89例（70.63%）、住院时间和抗菌药物使用时间＞7 d者各75例（59.52%）;采集环境标本387份,检出MDR Ab 14株（3.62％）。结论该院MDR Ab医院感染严重,应采取有效措施预防和控制MDR Ab医院感染的发生和流行。     

2010年APIC消除医疗机构内多重耐药鲍曼不动杆菌传播的指南节译(Ⅰ)——多重耐药鲍曼不动杆菌感染暴发的识别和控制

要点1鲍曼不动杆菌(Ab)是一种能够在医疗护理机构长期生存的微生物.2多重耐药Ab(MDR-Ab)能够长期定植,且容易在患者间交叉传播.3已经有许多文献报道,发生了MDR-Ab感染的暴发流行,有些案例涉及许多患者,并且采取了较多的干预措施.4需及时与长期采取措施来确认定植源,清除MDR-Ab,以防范暴发的发生.     

多重耐药鲍曼不动杆菌DNA同源性与耐药基因研究

目的研究邵阳市中心医院多重耐药鲍曼不动杆菌分子流行病学特征与相关耐药基因流行情况。方法对临床分离的40株多重耐药鲍曼不动杆菌经采用肠杆菌科间一致重复序列PCR方法同源性分析获得的A、B、C、D 4种克隆株,应用聚合酶链反应及序列分析方法分析耐药基因类型。结果本院多重耐药鲍曼不动杆菌共检测出TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,未检出SHV、DHA、OXA-24、GES、IMP、VIM耐药基因。TEM-1检出率为100%,OXA-23(45%),PER-1(10%),其中2株菌同时检测到TEM-1、OXA-23和PER-1三种耐药基因,分别为A型和C型各1株,另2株菌同时检测到TEM-1和PER-1两种耐药基因,分别为C型和D型各1株,有16株菌同时检测到TEM-1和OXA-23两种耐药基因。结论携带TEM-1和OXA-23耐药基因多重耐药鲍曼不动杆菌是本院主要流行菌株,且存在克隆流行。携带TEM-1、OXA-23、PER-1三种耐药基因的菌株和携带TEM-1、PER-1两种耐药基因的菌株在临床分离株中已不鲜见。临床应加强鲍曼不动杆菌医院感染的控制,防止耐药菌株在医院暴发流行。     

鲍氏不动杆菌的耐药性分析及β-内酰胺类耐药基因的初步研究

目的分析临床分离的鲍氏不动杆菌耐药性,研究耐亚胺培南菌株的碳青霉烯酶基因型。方法利用VITEK-2系统检测85株鲍氏不动杆菌的药物敏感性,聚合酶链反应(PCR)技术检测耐亚胺培南菌株的碳青霉烯酶基因型。结果 85株鲍氏不动杆菌对氨苄西林的耐药率最高,为94.1%,对亚胺培南的耐药率为64.7%;亚胺培南的耐药的菌株中携带OXA-23基因有46株,占83.6%,携带OXA-64-like基因有32株,占58.2%,携带OXA-58基因有13株,占23.6%,以上阳性产物经测序比对与GenBank提供的标准序列99.0%同源;其余OXA-20、OXA-24、OXA-48基因型检测结果均为阴性。结论医院检测的鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类耐药严重,并以携带OXA-23基因型碳青霉烯酶为主。     

阴道炎中耐药鲍曼不动杆菌β内酰胺酶ADC基因的变异检验分析

目的:探讨阴道炎中耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶ADC基因的变异情况,为进一步分析耐药基因和耐药机制打下基础。方法:2011年7月~2013年12月选择阴道炎妇女72例,分离病原菌后进行8种药物的耐药分析,然后对耐药鲍曼不动杆菌进行ADC基因的变异检验。结果:检出30株鲍曼不动杆菌,鲍曼不动杆菌对亚胺培南无耐药菌株产生,对头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星的耐药率较低,而对青霉素类和二代头孢类药物最高。检出ADC阳性11株,占36.7%;其中同时携带ADC、DHA基因8株,同时携带ADC、DHA和EBC基因2株,同时携带ADC、EBC基因1株。结论:阴道炎的病原菌多为耐药鲍曼不动杆菌,同时产ADCβ-内酰胺酶基因型的菌株较多,为此临床治疗应根据其耐药分布合理选用抗菌药物。     

多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染危险因素

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌（MDRAB）医院感染的危险因素,为临床控制MDRAB感染,制定预防和控制措施提供依据。方法调查2011年4月-2012年9月某院鲍曼不动杆菌（AB）患者的临床资料,对AB和MDRAB科室分布、标本来源情况进行分类,了解MDRAB医院感染危险因素。 结果236株AB 中,共检出MDRAB 74株,检出率为31.36%。重症监护室（ICU）和神经外科MDRAB检出率高达60.00%（27/45）和58.06%（18/31）;MDRAB感染部位以创口（45.45%）、呼吸道（34.27%）和泌尿道（17.65%）为主。单因素分析结果显示,患者住ICU天数、血清清蛋白、使用纤维支气管镜、昏迷天数、气管切开、使用呼吸机、留置切口引流管、留置导尿管、使用碳青霉烯类抗生素以及抗菌药物使用天数,各组差异均有统计学意义（均P＜0.05）。多因素logistic回归分析结果显示,气管切开（OR95%CI：1.152~7.187）和使用呼吸机（OR95%CI：1.263~7.664）是MDRAB医院感染的危险因素。结论气管切开和呼吸机使用在MDRAB的产生和传播中起重要作用;加强医院多重耐药菌管理,对减少MDRAB感染具有重要意义。     

临床分离沙门菌的耐药性及超广谱β-内酰胺酶类耐药基因

目的研究北京地区2012—2015年沙门菌临床分离株的血清型分布、耐药状况及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因特征。方法采用最小抑菌浓度法测定北京市肠道门诊分离的677株沙门菌株对16种抗菌药物的耐药情况,采用聚合酶链反应(PCR)方法对244株β-内酰胺酶类耐药菌株进行耐药基因检测。结果677株沙门菌分为68种血清型,其中肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌和山夫登堡沙门菌位居前3位。沙门菌对氨苄西林和阿莫西林/克拉维酸的耐药率分别为42.54%、40.77%,至少耐3种以上抗菌药物的菌株占57.16%。244株对氨苄西林和阿莫西林/克拉维酸耐药的沙门菌,携带至少一种ESBLs基因的菌株174株(71.31%),146株bla_(TEM-1)型,30株bla_(OXA-1)型,18株bla_(CTX-M)型(其中7株bla_(CTX-M-15),6株bla_(CTX-M-55)和5株bla_(CTX-M-14));20株同时携带2种耐药基因。结论该地区沙门菌携带ESBLs耐药基因水平较高,以bla_(TEM-1)为主,同时伴有bla_(OXA-1)和3种bla_(CTX-M)基因亚型,呈现基因多样性。     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性与整合子关系研究

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌整合子的表达及耐药基因的携带情况。方法收集2012年8-10月某院临床分离的51株多重耐药鲍曼不动杆菌,对其进行药敏试验;采用聚合酶链反应（PCR）检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类整合酶基因及整合子可变区基因盒,应用限制性片段长度多态性（RFLP）分析和测序结果进行同源性分析。结果多重耐药鲍曼不动杆菌整合酶基因阳性率为78.43%（40/51）,均为 Ⅰ 类整合子,未检出Ⅱ、Ⅲ类整合子。Ⅰ类整合子阳性菌中,39株（97.50%）扩增出可变区,检出5种耐药基因盒组合形式,分别为aacA4（14株）、aacA4+catB8（22株）、arr 3+aacA4 （1株）、dfrA15 （1株）和arr 3（1株）。结论该院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药性可能与Ⅰ类整合子表达有关。Ⅰ类整合子主要携带aacA4、aacA4+catB8、arr 3+aacA4、dfrA15和arr 3 基因盒。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌目标性监测

目的了解耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)的临床分布和耐药特征。方法回顾性分析某院2015年1—12月所有住院患者送检标本CRAB检出情况,分析其药敏试验结果。结果 721株AB中检出CRAB231株,CRAB检出率为32.04%。1—4季度中每季度CRAB的检出率分别为48.99%(73/149)、41.98%(68/162)、27.39%(63/230)、15.00%(27/180),呈下降趋势(P0.001)。CRAB主要来源于痰标本(140株,60.61%),其次是创面分泌物(33株,14.28%)和尿标本(24株,10.39%)。CRAB主要来源科室为重症监护病房(101株,43.72%)、神经外科(37株,16.02%)及烧伤整形科(22株,9.52%)。CRAB对氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、左氧氟沙星、环丙沙星的耐药率为85.28%~90.48%,对妥布霉素的耐药率较低(19.48%),未发现对多粘菌素B耐药的菌株。结论 CRAB耐药性较为严重,应针对重点科室进行重点管理,采取科学防控举措,有效减少医院感染事件的发生。     

呼吸ICU耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药基因的携带情况及同源性

目的了解我院呼吸ICU耐碳青酶烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)携带的β-内酰胺酶的耐药基因及其流行特征。方法收集2015年10—12月呼吸ICU临床患者送检标本分离的CRAB。试验菌株进行5种耐药基因(KPC-2、IMP、VIM、NDM-1、OXA-23)PCR特异性扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,并且进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)同源性分析。结果 2015年10—12月呼吸ICU共分离CRAB22株,其中19株(86.36%)分离于痰。22株CRAB对复方磺胺甲口恶唑的耐药率为59.09%,对米诺环素的耐药率为9.09%,对多粘菌素B均敏感,对其他检测抗菌药物的耐药率均为80%以上。PCR扩增未检出KPC-2、IMP、NDM-1三种耐药基因,而VIM、OXA-23阳性率均为100%。PFGE同源性分析结果:22株菌分为13种不同带型,每种带型包含菌株数为1~5株不等,其中9种带型(69.23%)分别只包含1株菌,其他4种(30.77%)带型包含菌株数为2~5株不等。其中,A5、A7和A8为同一型,A9、A11、A14、A19和A22为同一型,A4、A10和A12为同一型,A16和A18为同一型。结论呼吸ICU分离CRAB携带的β-内酰胺酶耐药基因主要为VIM、OXA-23型基因。同源性分析证实,有小部分为同一克隆株,存在小范围的流行。     

多重耐药鲍曼不动杆菌体外抗菌活性分析

目的了解抗菌药物对多重耐药鲍曼不动杆菌的体外抗菌活性。方法 对某院2013年1-5月临床各科室送检标本分离的224株多重耐药鲍曼不动杆菌进行鉴定及药敏试验。结果224株多重耐药鲍曼不动杆菌主要分布在呼吸内科（21.43%）,其次是脑外科（16.07%）、脑外重症监护室（ICU,12.50%）和神经内科（12.50%）等。标本来源以痰液（57.14%）为主,其次是气管插管（16.52%）和引流液（9.82%）等。多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素敏感,对米诺环素耐药率为7.14%,对其余8种抗菌药物的耐药率均≥75%,其中头孢替坦耐药率高达98.21%。结论替加环素对该院多重耐药鲍曼不动杆菌具有良好的抗菌效果。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染暴发的分子流行病学研究

目的分析某院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）的分子流行病学特征和耐药机制,为预防和控制医院感染提供依据。方法对该院2010年1月-2012 年5月临床分离的32株CRAB,采用随机扩增多态性DNA法进行基因分型,并进行流行病学分析;通过改良Hodge试验和EDTA协同试验对碳青霉烯酶进行表型分析;检测外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙（CCCP）对美罗培南最低抑菌浓度（MIC）的影响,筛选外排泵表型阳性菌株。结果32株CRAB检测出9种基因型,其中以A（10株）、H（7株）两种基因型为主,其次为I型（4株）,B和E基因型各3株,其他基因型各有1或2株。2012年3-5月分离11株CRAB,10株为H(7株)和I(3株)两种基因型,1株为A型。21株（65.63%）CRAB检测到OXA 23特异性条带,且其在改良Hodge试验中均为阳性（包括2012年3-5月分离的11株CRAB）;除1株CRAB检测到NDM 1外,其余金属β 内酰胺酶基因检测均为阴性;CRAB在CCCP存在的条件下对美罗培南MIC仅有轻微改变,均为外排泵表型阴性。CRAB主要分布在重症监护室（13株）和神经外科（7株）。结论该院2012年3-5月间暴发了CRAB同一基因型克隆株的医院感染,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的主要机制是表达OXA 23;鲍曼不动杆菌对美罗培南耐药与外排泵无关,产NDM 1菌株已在该院出现。     

吴江地区多重耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因携带情况及同源性

目的了解吴江地区临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)碳青霉烯酶基因携带情况和同源性。方法收集吴江地区3所综合性医院2010年1月—2013年12月临床分离的非重复MDRAB 44株,测定其最低抑菌浓度(MIC);采用聚合酶链反应（PCR）扩增碳青霉烯酶基因OXA 51、OXA 23、OXA 24、OXA 58、IMP、TEM、SHV和GES,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果44株MDRAB主要来源标本为痰（占93.18%）,主要分布在重症监护病房（ICU）、呼吸科和神经外科,各占45.45%、27.27%和13.64%;MDRAB对米诺环素和多粘菌素B均敏感,对哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星耐药率均为100.00%,对亚胺培南和美罗培南耐药率均为97.73%。44株MDRAB均检出OXA 51、OXA 23和TEM基因,其中12株菌GES基因阳性,OXA 58和SHV基因阳性各1株,未检测到OXA 24及IMP基因;MDRAB分为A—G 7个型别,分别为19、3、9、3、1、4、5株。A型主要来源于吴江地区的两所大型综合性医院（吴江第一人民医院和盛泽医院）,吴江第一人民医院未发现B、D和E型;E型仅1株,分布在永鼎医院,其余型别散在分布。结论吴江地区临床分离鲍曼不动杆菌多重耐药严重,基因OXA 23和TEM是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,并以A、C型为主,呈克隆性传播。