细胞因子诱导的杀伤细胞对慢性髓性白血病细胞的体外净化作用

在长期骨髓培养(LTBMC)7—9天的基础上,配对比较观察细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK) 白细胞介素2(IL-2)或淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK) IL-2或IL-2活化的骨髓细胞或单纯LTBMC对慢性髓性白血病(CML)患者骨髓Ph~ 细胞的净化作用。结果为LTBMC CIK IL-2组(n=8)细胞的Ph~ 百分率明显低于单纯LTBMC组(n=8,P<0.001),也低于LTBMC LAN IL-2组(n=3)或单纯IL-2(n=3)。结论:CIK IL-2与LTBMC对CML患者骨髓Ph~ 细胞的净化有明显的协同作用。     

长期随访α-干扰素诱导慢性髓细胞白血病细胞遗传学缓解对预后的影响

α干扰素(IFN-α)治疗Ph~+慢性髓细胞白血病(Ph~+CML)获血液学及细胞遗传学缓解已为多数学者证实。为了解IFN-α诱导CML的细胞遗传学缓解对预后的影响,作者分析了62例Ph~+CML应用α-2bIFN治疗的情况。 研究方法: 1.病例选择:1984年6月至1990年12月就诊的71例初治慢性期Ph~+CML,男性40例,女性31例,中     

α-2b干扰素治疗Ph阳性的慢性粒细胞白血病

为进一步证实α-2b干扰素(1FN-α-2b)对慢性粒细胞白血病(CML)的治疗作用,作者应用重组IFN-α-2b治疗114例Ph~1(+)CML患者。慢性期患者有105例,其中35例以前未经治疗,36例常规化疗≤12个月,IFN-α-2b用法:2～5百万单位/m~2(mU/m~2),每天1次或每周3次;34例常规化疗>12个月,IFN-α-2b为2～5mU/m~2,每天1次,大多     

自体树突状细胞活化的骨髓细胞对慢性粒细胞白血病骨髓的净化

为考察慢性粒细胞白血病(CML)患者自体树突状细胞(DCs)活化骨髓细胞、净化骨髓的作用,采用免疫磁珠从2例血液学缓解的CML骨髓单个核细胞(BMMNCs)分离DCs,另取BMMNCs置T-25塑料培养瓶建立Dexter培养体系,分为3份,第1份为对照,第2份加rhIL-2,第3份加自体DCs.每周取半量非贴壁细胞、计数、行CFU-GM检测,然后加等量新鲜培养基继续培养.当非贴壁细胞总数＜2×105时终止培养,收集贴壁细胞做CFU-GM集落形成试验并检测CD34和P210表达.取贴壁细胞形成的CFU-GM集落,抽提RNA,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测BCR/ABL的表达.结果发现,在DCs加入CML骨髓Dexter培养体系培养后1-2周,非贴壁细胞的CFU-GM产量明显下降,与rhIL-2的体系基本平行,同时体系中的P210阳性细胞显著减少.不过,培养3周后含DCs的体系CFU-GM产量下降减缓,而含rh-IL-2的体系CFU-GM产量持续下降.在含自体DCs的Dexter体系,贴壁细胞中CD34+细胞和P210+细胞比例最低,只是贴壁细胞产生的CFU-GM集落中,BCR/ABL(+)的集落比例与不合DCs的体系比较无明显差别.这些结果说明自体DCs加入CML骨髓Dexter培养体系能减少白血病的祖细胞,包括成熟的祖细胞和原始的祖细胞,自体DCs有可能用于CML骨髓的体外净化.     

慢性粒细胞白血病血中干扰素的研究

对五年间住院的慢性粒细胞白血病(CML)患者进行外周血干扰素(IFN)活性的测定,其方法是使用人羊膜细胞和疱疹性口内炎病毒的血小板减少法。CML29例,检查110人次,其中慢性期21例72人次,进展期(ACC)6例16人次,急性变9例22人次。Ph~1染色体均为阳性。正常对照50例50人次。结果血中IFN正常对照组平均26.0±12.3U/ml(60.0-5.0U/ml),CML慢性期平均70.0±37.4U/ml(160.0-30.0U/ml)呈现高值,与正常对照组之间有显著差异(P<0.001),急性变组平均24.6±19.2U/ml(60.0-4.0U/ml),大致与正常对照组相同,而与慢性期之间有差异(P<0.01)。     

IFN-α对体外培养CML-DC功能、表达- 趋化因子及其受体的影响

为了研究α干扰素(IFN-α)对慢性粒细胞白血病(CML)来源的树突状细胞(DC)分泌趋化因子、表达趋化因子受体及其功能的影响,取13例CML慢性期患者骨髓单个核细胞,在小牛血清培养体系中诱导培养CML来源的DC,以rhSCF、rhFlt3L作为扩增体系的细胞因子,加入rhGMCSF、rhTNFα、rhIL4,加或不加rhIFN-α诱导DC的生成,培养2周后流式细胞术检测培养细胞的免疫表型,ELISA法检测培养上清液中CMLDC分泌MIP3-β的含量,MTT法检测CMLDC刺激健康人外周血T淋巴细胞增殖能力。结果表明:IFN-α组培养所获DC表面CD86、CD83、CD40、MHCⅠ类分子、CCR7的表达均高于对照组(P<0.01);IFN-α组诱导培养的CMLDC表达MIP3β较对照组明显增高(P<0.01);IFN-α组诱导培养的CMLDC刺激异体T淋巴细胞增殖的能力较对照组明显增强(P<0.01)。结论:IFN-α可能部分通过纠正CMLDC的免疫表型以加速CMLDC的成熟,增强CMLDC的功能。     

CD34+干/祖细胞与纤维连接蛋白的粘附在慢性粒细胞白血病发病中的意义

目的探讨CD34 干／祖细胞与纤维连接蛋白（FN）的粘附在慢性粒细胞白血病（CML）发病中的作用。方法①采用流式细胞术双标记法检测初治CML慢性期30例和正常骨髓10份CD34 细胞上整合素β1链（CD29）和α4链（CD49d）的表达;②结晶紫染色法观察免疫磁珠分选的CML慢性期5例和5名正常人骨髓CD34 细胞与FN的粘附功能;③极限稀释液体微培养观察FN对正常和CML慢性期骨髓粒细胞-巨噬细胞祖细胞集落（CFU－GM）形成能力的影响。结果①CML慢性期骨髓CD34 细胞CD29和CD49d的表达与正常骨髓比较,差异无显著性;②CML骨髓CD34 细胞与FN的粘附明显低于正常（P＜0．01）;③FN显著抑制正常骨髓CFU-GM的形成（P＜0．01）,而对CML骨髓CFU-GM的形成无显著影响。结论CML骨髓CD34 干／祖细胞与FN的粘附功能减弱,因而缺乏FN对祖细胞增殖的调节作用是CML髓系扩增的原因之一。     

吉西他滨对慢性粒细胞白血病患者骨髓细胞G-CSFR及bcr/abl mRNA的影响

为了观察吉西他滨对慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)及bcr/ablmRNA的作用,收集CML慢性期、急变期患者的及骨髓象正常的非血液病患者骨髓液,分为吉西他滨组(加入吉西他滨,调整浓度为10μg/ml)和对照组,培养48小时后收集细胞。采用流式细胞术检测各组标本骨髓G-CSFR的表达率;采用RT-PCR技术检测各组标本bcr/abl mRNA的表达。结果表明:吉西他滨组CML慢性期、急变期患者及骨髓象正常者骨髓G-CSFR的表达率分别为(50.72±8.57)%、(36.32±4.25)%和(59.42±7.62)%。对照组CML慢性期、急变期患者及骨髓象正常者骨髓粒系G-CSFR的表达率分别为(45.42±6.52)%、(30.58±5.68)%和(58.56±5.54)%。两组CML患者骨髓G-CSFR的表达率分别与骨髓象正常组比较,差异有显著性(p0.05),CML慢性期患者与急变期比较,差异有显著性(p0.05)。吉西他滨组CML患者G-CSFR的表达率与未加药组相应组别比较,差异有显著性(p0.05)。吉西他滨组CML慢性期、急变期患者bcr/abl mRNA表达水平比较,差异无显著性(p0.05)。吉西他滨组与对照组、CML慢性期、急变期患者G-CSFR表达率与bcr/abl mRNA表达水平呈负相关(p0.05)。结论:在体外培养下,吉西他滨可以提高CML慢性期、急变期患者骨髓G-CSFR的表达率,对bcr/abl mRNA表达的作用不明显,CML慢性期、急变期患者G-CSFR表达率与bcr/abl mRNA表达水平呈负相关。     

骨髓长期培养及其在自体骨髓移植中的应用

由于目前还不清楚白血病细胞通常不能存活的原因,因此骨髓长期培养(LTBMC)能否作为白血病患者自体骨髓移植前骨髓净化的一种手段,是本文探讨的目的。一、白血病细胞在LTBMC中的生长特点 1985年Coulombel等首次报导AML患者骨髓细胞经LTBMC后,白血病细胞明显减少,而使正常造血细胞占优势;另外,Ph′阳性的CML细胞经3～4周的LTBMC后可产生明显数量的ph′阴性细胞。本文作者的实验结果也证实了这一发现,他们培养AML患者骨髓细胞,其中50％的病例的白血病细胞     

bcr/abl反义寡核苷酸净化后自体骨髓移植治疗慢性粒细胞白血病

目的　观察bcr/abl反义寡核苷酸 (AS ODN)净化后自体骨髓移植 (ABMT)治疗慢性粒细胞白血病 (CML)的疗效。方法　 5例CML中慢性期 2例 ,加速期 1例 ,急变期 2例 ,均具b3a2型bcr/ablmRNA。骨髓采集前患者均经 2个疗程大剂量联合化疗的体内净化 ,自体骨髓经CS30 0 0plus浓集后加入 18bp的硫代bcr/ablAS ODN(40～ 6 0 μg/ml,48～ 6 0h)体外净化Ph 细胞。预处理方案为全身照射 环磷酰胺 (TBI CTX)或马法兰、阿糖胞苷、CTX和环己亚硝脲 (MAC CCNU)。结果　体内净化后骨髓Ph 细胞减至 34 % (2 4%～ 46 % ) ,bcr/ablmRNA( )的CFU GM减至 45 .6 % (33%～ 5 8% )。经bcr/ablAS ODN净化后 ,2例骨髓bcr/ablmRNA(- ) ,3例bcr/ablmRNA( ) ,但bcr/ablmRNA( )的CFU GM明显减少。 5例ABMT后造血重建有延迟现象。经 2年以上随访观察 ,3例移植后持续 9～ 12个月主要遗传学缓解 (MCR) ,且移植后慢性期明显延长 ,其中 1例急变期患者至今无须治疗 ,现已无病生存 37个月 ,bcr/ablmRNA(- )。 1例急变期患者仅获短暂MCR ,移植后 7个月急变期复发 ,1例移植后第 74天因造血重建延迟而感染、出血死亡。结论　bcr/ablAS ODN净化后ABMT可使部分患者取得相当一段时期的MCR及延长慢性期。     

α-干扰素治疗慢性髓细胞白血病对骨髓纤维化的影响

骨髓纤维化往往与慢性髓细胞白血病(CML)的自然史相伴随,纤维化程度的加深标志着疾病的进展。作者观察了α-干扰素(IFN-α)治疗CML后对骨髓纤维化程度的影响。 所选病例均为Ph染色体阳性的慢性期CML患者IFNα 5×10~6U/m~2·d,治疗期最少12个月,最长40个月。治疗前后分别进行骨髓活组织检查。确定骨髓纤维化分级杯准:一级,微量小硬蛋白或网状纤维占造血面积小于25％,无出血现象和人为的细胞空泡,包括脂肪沉积;二级,网状纤维占检测区域的25％～     

慢性粒细胞白血病的骨髓染色体核型分析及其临床意义

目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓染色体核型分析的临床意义。方法选取2013年—2016年在本院血液科诊治的CML住院患者109例,包括男性69例、女性40例,其中慢性期89例、加速期18例、急变期2例;采取患者骨髓标本行细胞短期培养,染色体标本制备包括骨髓标本的预处理、接种、培养、中期染色体的收获和制片以及采用G-显带技术显带,最后做核型分析。结果本组CML患者携带异常染色体核型的比例为100%(109/109);其中含特征性染色体重排t(9;22)(q34;q11)占比90.82%(99/109),复杂变异型t(9;15;22)(q34;q15;q11)占7.34%(8/109);同时合并染色体数量异常者占16.51%(18/109)、合并染色体部分缺失型2.75%(3/109)、单纯性数目异常1.83%(2/109)。加速期和急变期患者的染色体异常主要表现为特征性染色体重排合并数目异常。结论 CML患者无论治疗前后,定期做细胞遗传学染色体核型分析有益于为其疾病的诊断、病情发展和预后提供重要信息。CML患者在t(9;22)(q34;q11)基础上发生附加的染色体数目异常,与...     

高三尖杉酯碱对晚期慢性期慢粒白血病病人有治疗作用

高三尖杉酯碱(HHT)是一种对骨髓有显著抑制作用和毒性小的植物生物碱。HHT都用于急粒白血病治疗,但对慢粒白血病(CML)的治疗作用研究较少。作者研究HHT对晚期慢性期CML的治疗作用。 病人和方法 71例CML晚期慢性期病人。其中活动期58例,缓解期13例(从诊断到治疗的时间超过12个月),全部Ph染色体阳性,其中58例曾接受IFN-α治疗,41例对IFN-α耐药。HHT通过中心静脉导管持续输注,剂量2.5mg/m~2·d.连用14天,血液学缓解后维持治疗每月用7天。使用天数则根据粒细胞达最低     

慢性粒细胞白血病患者粒系定向干细胞集落的细胞遗传学研究

作者以 Ph~1染色体作为细胞分化早期阶段正常与白血病性细胞克隆的鉴别标记,用改良的 Worton 甲基纤维素培养技术研究了10例 Ph~1阳性的慢性粒细胞白血病患者(CML,6例缓解期,2例急变期,2例未经治疗)骨髓和血液粒系定向干细胞(CFU-C)的细胞遗传学性质,以阐明在整个疾病过程中 Ph~1阴性骨髓干细胞是否始终存在。     

干扰素治疗慢性髓性白血病

干扰素(IFN)对慢性髓性白血病(CML)细胞的作用特征在于其特殊细胞膜受体的表达。有人提出:组织和细胞特异的IFN受体异质性,以及起作用的膜受体数目,可分别控制IFN作用。所以为了预测IFN治疗的效应,对CML慢性期或加速期的IFN-α和IFN-γ受体进行监测无疑是重要的。Bartsch等对15例CML分别用rIFN-γ和rIFN-α_2进行治疗的患者,把各自外周血单个核细胞(PBMNC)膜受体,用~(125)I-IFN进行结合、标记结合数目。CML治疗前PBMNC膜rIFN-α受体约为1000个/细胞,无高亲和性受体,与正常骨髓和PBMNC一致。经rIFN-γ治疗后各阶段未见异常。治疗前     

体外液体培养联合白介素-2加干扰素-α净化的自体骨髓移植治疗急性白血病

目的 观察白介素-2(IL-2)加干扰素-α(IFN-α)体外净化完全缓解后的急性白血病骨髓(BM)进行骨髓移植(ABMT)的临床疗效。方法 用IL-2加IFN-α体外净化ABMT患者的BM，培养3天后回榆给患者。结果 4例患者榆用净化处理的BM后均成功恢复造血功能，3例患者移植后至今分别持续缓解超过27，28，30个月；其中1例急性淋巴细胞白血病患者移植前染色体为Ph( )，移植后2个月Ph染色体转阴；1例患者于移植后3个月复发，3个月惑死亡。结论 初步研究显示，IL-2加IFN-α用于临床移植患者是安全可行的，并且对白血病患者的骨髓有一定的净化作用。     

慢性粒细胞白血病骨髓移植后的过继免疫治疗

T细胞清除的骨髓移植(BMT)丧失了移植物抗白血病作用(GVL)。为诱发GVL,作者对3例T细胞清除的HLA相配的同胞为供体的BMT后复发的慢粒白血病(CML),用供体外周血单个核细胞(PBMC)输注结合短疗程程α_2干扰素(INFα_2)治疗,慢粒在90天内完全控制,Ph~1染色体消失。 3例均经环磷酰胺(CY)和分次全身照射(TBI)(总剂量为1200cGY)预处理,例1、例2于慢性期,     

白血病患者骨髓基质细胞上清TNF—α含量的测定

近年来 ,人们对白血病细胞自分泌造血细胞因子进行了广泛的研究 ,对于揭示白血病细胞的生物学特性及造血调控提供了实验依据。为研究白血病骨髓基质细胞对造血调控的影响 ,我们对 13例白血病骨髓基质细胞集落培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF α)含量进行了测定。材料与方法病例选择AL 10例 (AML 7例 ,ALL 3例 ) ,CML 3例。男 8例 ,女5例 ,年龄 2 1- 6 9岁 ,中位年龄 38岁 ,均为初治患者。健康骨髓 10例为正常对照 ,年龄 2 0 - 45岁 ,中位年龄 34岁。骨髓基质细胞集落培养按文献 [1,2 ]的方法。将培养体系接种于 2 5ml培养瓶中 ,置于 37…     

长春新碱、强的松龙治疗儿童慢性粒细胞白血病急变

作者报导儿童慢性粒细胞白血病(CML)急变6例。5例Ph~1染色体(+);1例Ph~1(-),由于无皮疹、淋巴结肿大和出血倾向,故仍诊断为Ph~1(-)的成人型,而非幼年型CML。对急变是接1971年Canellos等所拟诊断标准判断。6例中有1例初诊时已呈慢粒急变,其他5例之慢性期为3至32月;取马利兰治疗,仅1例加用过6—巯基嘌呤。每例均在急变时检测骨髓有核细胞之末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)活性,结果3例为(+),3例(-)。3例TdT(+)的原始细胞外形均似淋系;而3例(-)患者中,有2例原始细胞外形似粒系,另1例则呈粒—淋混合型。急变期均用长春新碱+强的松龙(VP)疗法,前者用1～2mg每周1次静注;后者口服60mg/日。有3例加用环磷酰胺与阿糖胞苷;1例用过红比霉素+阿糖胞苷;     

骨髓增生异常综合征患者的骨髓造血和间质细胞功能研究

长期骨髓培养(LTBMC)可用来研究骨髓细胞的增殖能力。本文研究25例(男15,女10)未经治疗的MDS患者(其中RA7例,RSA和RAEB各8例,RAEB-t和CMML各1例)和30例(男20,女10)正常骨髓的LTBMC,培养后进行集落分析,LTBMC结果与常规的短期克隆测定相对比。结果:在最初骨髓体外培养中,与正常对比,25例MDS患者祖细胞分布比较分散,中数值较低,为50％。56％的培养中,克隆很少或完全缺如。有些仅有集落或克隆为主,这些异常生长,RA/RSA占53％,RAEB/RAEB-t占44％。这与骨髓中原始细胞百分率无关。1例CMML患者骨髓可见高克隆形成。在LTBMC的细胞增殖和分化中,19例患者(RA