火炮打击兔应激防护模型心脏病理及p38表达的形态学研究

目的探讨实弹演习火炮打击后,不同位置掩体保护下兔心脏损伤病理变化及丝裂原活化蛋白激酶p38（p38-MAPK）表达。方法闽南山地团进攻演习,设置远离演习场的空白对照实验兔纽,火炮打击区域设置炮火覆盖山体反角近距隐蔽组和迎面角近距隐蔽组。火炮打击应激损伤后6h,各组存活兔取心脏,HE染色观察其病理损伤形态学,观察改进型SP法免疫组化染色检测心脏p38-MAPK表达。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组p38-MAPK表达强阳性,迎面角组心脏结构紊乱,细胞数减少,基质间充血,血管痉挛狭窄,微血栓形成。p38-MARK免疫反应强度亦高于反角隐蔽组。结论火炮打击后实验兔应激损伤反应强烈,反角掩体保护减轻心脏损伤,p38-MAPK参与心脏损伤病理过程。     

山地团进攻制式火炮打击兔应激防护模型肾损伤实验研究

目的探讨战争条件下火炮打击后,不同位置掩体内兔肾脏损伤情况。方法闽南山地团进攻演习,于火炮覆盖区域设置实验兔远离演习场的空白对照组、炮火覆盖区反角近距隐蔽组和迎面角近距隐蔽组。火炮打击应激刺激后6 h,存活兔取肾,改进型SP法进行免疫组化染色检测肾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α),HE染色观察肾脏病理损伤情况。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组TNF-α表达显著升高(P<0.05),差异具有统计学意义。与反角近距隐蔽组相比,迎面近距隐蔽组TNF-α表达显著升高(P<0.05),差异具有统计学意义。HE染色结果显示迎面角组、反角组较对照组出现明显镜下病理性改变,且迎面角组更为严重。结论火炮打击后实验兔应激反应强烈,不同位置掩体显著影响兔存活及肾脏损伤程度,反角隐蔽可在一定程度上减轻肾损伤。     

火炮打击兔应激复合损伤-保护机制的实验研究

目的探讨实弹演习火炮打击后,不同位置掩体保护下兔应激损伤的综合病理机制及保护方法。方法闽南山地团进攻演习,按照模拟实战士兵隐蔽情况,将30只实验兔随机分为远离火炮打击的空白对照组。及火炮打击区域的反角隐蔽组和迎面隐蔽组。火炮打击6h后,各组观察存活情况,取兔脑、心、肺、肾、小肠、卵巢及血清,观察其病理损伤形态学及N-甲基-D-天冬氨酸受体-1（NMDArl）、p38和肿瘤坏死因子表达的变化。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面隐蔽组兔打击后各器官均组织结构呈病理改变,各因子表达阳性。迎面隐蔽组组织损伤程度及各因子免疫反应强度高于反角隐蔽组。结论火炮打击后兔各器官、组织应激综合损伤反应强烈,反角掩体保护能够有效减轻组织损伤,多因子参与组织损伤病理过程。阻断其通路是有效的保护干预方法。     

山地团进攻制式火炮打击兔应激防护模型血清自由基变化实验研究

目的探讨战场火炮覆盖应激后,不同位置掩体内兔血清自由基变化规律。方法闽南山地秋季团进攻演习中,根据隐蔽位置设置实验兔空白对照组、反角隐蔽组和迎面角隐蔽组。基数火炮覆盖应激刺激后6 h,存活兔检测血清氧自由基含量,进行统计学比较。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组一氧化氮(NO)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量显著升高(P<0.01),总超氧化物歧化酶(TSOD)的含量明显降低(P<0.01),差异具有统计学意义。与反角近距隐蔽组相比,迎面近距隐蔽组NO显著升高(P<0.01),TSOD显著降低(P<0.01),差异具有统计学意义。结论火炮打击后实验兔应激反应强烈,不同位置掩体对存活及血清自由基含量影响显著。     

大鼠颅脑外伤后突触素P38在中枢神经系统的表达变化

目的观察大鼠颅脑外伤后突触素p38在中枢神经系统表达的变化。方法将SD大鼠分为正常对照组、假手术对照组和损伤组,损伤组用侧位液压冲击法应用不同压力制成颅脑损伤动物模型,于损伤后不同时间点采集标本,采用免疫组织化学技术,检测大鼠损伤灶周边皮层及海马CA1区p38的表达变化,结果采用方差分析和q检验进行统计学分析。结果创伤性颅脑外伤后,损伤灶周边皮层及海马CA1区p38免疫阳性表达增强。结论中枢神经系统损伤后,突触素p38表达增强,且损伤越重,表达增强越明显。     

p38蛋白表达与结肠癌患者临床病理特征和预后的关系研究

目的 探讨p38蛋白表达与结肠癌患者临床病理特征和预后的关系。方法 收集2015年6月至2017年6月在西安大兴医院行手术治疗的110例结肠癌患者癌组织及癌旁组织标本。采用免疫组织化学法检测结肠癌组织中p38蛋白表达情况,分析p38蛋白表达与临床病理特征及预后的关系。结果 结肠癌组织中p38蛋白阳性表达率为80.9%(89/110),高于癌旁组织的7.3%(8/110),差异有统计学意义(P<0.05)。p38蛋白表达与肿瘤浸润程度、TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05)。110例结肠癌患者3年总生存率为60.0%(66/110),3年无复发生存率为49.1%(54/110)。p38蛋白阳性表达患者的总生存率和无复发生存率均低于阴性表达患者,差异均有统计学意义(Log-rank χ²=4.094、4.428,P=0.043、0.035)。多因素Cox比例风险模型分析结果显示：肿瘤TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、中/低分化程度、有淋巴结转移和p38蛋白阳性表达是结肠癌患者死亡的独立危险因素(P<0.05);肿瘤最大径>5 cm、浸润程度为侵...     

P38MAPK在炎性痛大鼠背根神经节中的表达及CCR2对其调控的影响

目的:观察p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)在炎性痛大鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中的表达及趋化因子受体2(chemokine receptor 2,CCR2)对其调控的影响。方法:青年雌性SD大鼠72只,150~180 g。随机分为对照组(A组,在右后足底皮下注射100μl生理盐水)、炎性疼痛模型组(B组,在右后足底注射100μl完全弗氏佐剂CFA制备大鼠炎性痛模型)、拮抗剂组(C组,在右后足底注射100μl CFA,同时腹腔注射CCR2拮抗剂RS102895 20 mg/kg,连续注射7天)。三组分别于制模前和制模后1、3、5、7天测定制模侧后足机械刺激缩足阈值(MWT),在3、5、7天分别处死8只大鼠,取制模侧L4~5 DRG,采用免疫组化与荧光定量PCR方法测定CCR2和p-p38MAPK表达水平。结果:与A组相比,B组与C组制模侧后足MWT显著降低(P<0.05),制模后3、5、7天CCR2和p-p38MAPK表达水平明显增高(P<0.05)。B组与C组比较,C组大鼠制模后相应时间点MWT显著增高(P<0.05),CCR2和p-p38MAPK表达水平明显下降(P<0.05)。结论:p38MAPK在炎性痛大鼠DRG中表达升高;抑制CCR2活性可以降低p38MAPK在大鼠DRG的磷酸化水平,达到减轻炎性疼痛的作用。     

氧气对兔胃应激性溃疡预防及治疗作用的研究

目的：探讨胃内充氧对预处理的试验兔应激性溃疡的预防及治疗作用。方法40只纯种大白兔应用随机数字表法分为4组（每组10只,各组白兔均用R1～R10表示）,均用水浸法制作应激性溃疡模型：对照（空气）组（C组）,持续充氧组（E1组）,浸水后充氧组（E2）,奥美拉唑组（E3）。C组从浸水每隔6 h胃内充入空气50 ml;E1组从白兔浸水开始每隔6 h胃内充氧气50 ml;E2组模型制作过程中处理同C组,模型建立后每隔6 h胃内充氧气50 ml;E3组处理同C组,并每隔12 h经胃管给予奥美拉唑4 mg/kg。各组试验兔均于模型建立后24 h处死取胃,观察胃黏膜变化,并取组织做病理切片,光镜下观察组织形态改变。结果与C组比较E1、E2、E3三组的胃黏膜病变均轻。E1组肉眼黏膜基本正常,可见散在微小出血点,光镜下仅有黏膜充血水肿及小的缺损;E2组肉眼可见黏膜出血灶,多在胃小弯、胃底侧,光镜下可见浅表出血点,黏膜出血糜烂;E3组多为浅小黏膜缺损,黏膜下细胞坏死出血,黏膜水肿;C组肉眼可见多发大出血灶,光镜下可见典型的深而大的出血点,侵及黏膜全层。结论胃内充氧气对兔胃应激性溃疡有预防和治疗作用。     

电针对大鼠神经病理性疼痛及背根神经节中p38 MAPK蛋白表达的影响

目的:观察电针刺激“足三里”穴位对大鼠神经病理性疼痛的影响,及电针治疗对大鼠背根神经节中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)信号转导途径的影响.方法:40只雄性Wistar大鼠随机均分为4组(n=10):空白对照组(Con组);坐骨神经结扎组(CCI组);假电针治疗组(CCI+A组);电针治疗组(CCI+EA组).分别于实验前及坐骨神经结扎后第7、14、21 d,观察并记录大鼠的热缩足反射潜伏期(paw withdrawal latency,PWL)和机械缩足反应阈值(paw withdrawal threshold,PWT)变化和大鼠受累后肢的运动功能评分.在实验结束(即第21 d)时,处死大鼠,取出右侧L4～6节段的背根神经节,之后采用免疫组化的方法检测大鼠背根神经节中p38MAPK蛋白的表达.结果:PWT和PWL在Con组中没有变化,而在CCI组和CCI+A组中显著降低,并持续至实验结束.CCI+EA组在电针治疗后PWT和PWL与CCI组和CCI+A组相比显著升高(P＜0.05).电针治疗后,CCI+EA组大鼠受累后肢的运动评分显著低于CCI+A组和CCI组(P＜0.05).免疫组化结果显示:CCI+EA组大鼠背根神经节中的磷酸化p38MAPK (phosphor-p38 MAPK,p-p38 MAPK)阳性细胞表达均显著低于CCI组和CCI+A组(P＜0.05).结论:电针刺激“足三里”穴位能够减轻神经病理性疼痛大鼠的热痛和机械痛,改善大鼠受累后肢的运动功能评分;电针抑制CCI大鼠背根神经节中p38MAPK的表达.     

超声刀及单、双极电凝对兔卵巢组织热效应及术后粘连的比较研究

目的比较腹腔镜下使用超声刀及单、双极电凝对兔卵巢组织造成的热损伤程度和术后粘连情况,探讨腹腔镜下卵巢手术中适宜的止血方法。方法将中国家兔随机分为四组,对照组开腹缝合卵巢组织,其余组则模拟腹腔镜手术对兔卵巢分别进行超声刀和电凝止血,术后2周观察卵巢组织粘连及热损伤范围。结果对照组较腹腔镜各组粘连分数高,比较差异有显著性(P<0.01),腹腔镜各组间比较无差异(P>0.05)。腹腔镜各组中组织热损伤以超声刀损伤范围最小,以单极电凝损伤最大。结论腹腔镜能减轻术后卵巢粘连的发生;超声刀对组织热损伤小。     

p38 MAPK抑制剂对急性肺损伤的治疗作用

目的 观察p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580对LPS诱导的兔急性肺损伤(ALI)的保护作用及其机制.方法 用大肠杆菌内毒素(LPS)制备兔ALI模型;测定不同时间点的动脉血气分析、血清TNF-α和ICAM-1浓度;测量肺干/湿质量比值(肺D/W)及观察肺组织病理学改变.结果 动物注射内毒素1 h后P_(A-a)O_2、血浆TNF-α和ICAM-1水平、肺损伤评分均明显升高(P＜0.05),肺D/W下降(P＜0.05);应用SB203580治疗后,P_(A-a)O_2、血浆TNF-α和ICAM-1水平、肺损伤评分均明显下降(P＜0.05),肺D/W升高(P＜0.05).结论 本研究结果 表明,p38 MAPK抑制剂SB203580对内毒素诱导的ALI,可以明显减轻低氧血症、减轻肺水肿、改善组织病理学和减轻炎症反应.     

应激后大鼠下丘脑磷酸化p38MAPK的变化及电针足三里穴的调节作用

目的 观察应激对大鼠下丘脑磷酸化p38MAPK的影响及电针足三里穴的调节作用。方法将28只Wistar大鼠随机分为对照组、束缚应激组和束缚应激 电针组，后2组再根据束缚解除后及电针足三里穴位治疗后不同时间点分别分为3个亚组。电针治疗采用频率为5～12Hz的疏密波，治疗总时间30min。于相应时间点处死各组大鼠，采用Western印迹杂交法观察其下丘脑内磷酸化p38MAPK的变化。结果束缚应激组大鼠下丘脑内p38MAPK磷酸化水平明显高于对照组，且在束缚应激解除后3h仍保持在较高水平；应激大鼠经电针足三里穴处理后，下丘脑内磷酸化p38MAPK与束缚应激组相比明显回落，这种调节作用可持续到电针治疗结束后3h。结论束缚应激能引起下丘脑应激信号转导系统中p38MAPK的磷酸化，这可能是应激活动过程中的重要事件之一。电针足三里穴对下丘脑内磷酸化p38MAPK的调节作用可能与下丘脑-垂体-肾上腺轴的活动有关。     

p38MAPK和JNK在大鼠肾缺血-再灌注损伤模型中的表达及意义

目的 观察p38MAPK、JNK在肾缺血-再灌注损伤大鼠肾组织中的表达和活化,从而探讨p38MAPK、JNK信号转导通路与肾缺血-再灌注损伤的关系.方法 用缺血1 h再灌注1 h 制备缺血-再灌注模型,20只健康雄性SD大鼠[体质量(200±20)g]随机分为假手术组(n=10)、缺血-再灌注损伤组(n=10).检测肾组织丙二醛(MDA)浓度、超氧化物歧化酶(SOD)活性及血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)浓度.观察肾组织光镜、电镜下的形态学变化,用RT-PCR技术检测两组肾组织p38MAPK、JNK mRNA的表达情况,Western印迹法观察p38MAPK、JNK的活化情况.结果 缺血-再灌注损伤后,大鼠肾功能和肾小管上皮细胞明显受损,BUN、Cr、MDA浓度均高于假手术组(P<0.01),SOD活性低于假手术组(P<0.01),p38MAPK、JNK磷酸化蛋白在假手术组呈少量散在表达或不表达,缺血-再灌注损伤后磷酸化p38MAPK、JNK呈阳性表达(P<0.01).p38MAPK、JNK mRNA在缺血-再灌注损伤组的表达较假手术组显著增高(P<0.01).结论 肾缺血-再灌注可增加p38MAPK、JNK的磷酸化水平及p38MAPK、JNK mRNA的转录水平,p38MAPK、JNK可能在肾缺血-再灌注损伤中起到至关重要的作用.     

C5aR和P38-MAPK在脓毒性休克大鼠心肌损伤中的作用

目的 研究补体C5a受体与P38-MAPK在脓毒性休克情况下诱导心肌损伤的关系.方法 采用盲肠结扎剪切法构建早期脓毒性休克大鼠动物模型,实验地点在武汉大学人民医院麻醉科实验室.30只Sprague-Dawley大鼠随机(随机数字法)分为正常对照组6只和模型组24只(12 h组12只,24 h组12只).12 h组于术后12 h时点检测血清乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)水平,12 h后麻醉处死大鼠,迅速开胸取出心脏组织,行HE染色、应用免疫组织化学方法检测C5a受体和P38-MAPK的表达情况.24 h组亦于术后24 h时点检测血清LDH和CK值,24 h后处死大鼠取心肌组织行HE染色、检测C5a受体和P38-MAPK的表达情况.结果 模型组(12 h组和24 h组)与正常对照组相比,LDH值和CK值均明显升高(P＜0.05).24 h组LDH值和CK值与12 h时间点相比,差异具有统计学意义[(2 568.9±280)vs.(2 201.2±149),(5 029.7±458)vs.(2 629.4±140),P＜0.05].C5aR和P38-MAPK灰度值分析显示,模型组与正常对照组相比,均有显著性增高(P＜0.05),24 h组较12 h组相比,差异具有统计学意义[(702.77±122)vs.(388.36±113),(646.40±181)vs.(307.32±61),P＜0.05].相关分析显示C5aR和P38-MAPK存在显著正相关关系,(P＜0.05),P38-MAPK与LDH和CK均存在显著正相关关系(P＜0.05).结论 C5a受体和P38-MAPK在诱导脓毒性休克心肌损伤中有着强大的协同效应.

Abstract：

Objective To investigate effects of complement C5a receptor and P38-MAPK on myocardial injury brought about by septic shock in rats. Method The early septic shock models were established by the method of cecal ligature and incision (CLI). A total of 30 Sprague-Dawley rats were randomly( random number) divided into normal control group ( n = 6 ) and model group ( n = 24 ) and the model group was further 12 hours later divided into 12 h subgroup (n = 12) and 24 h subgroup (n = 12). The arterial blood samples were collected 12 hours later for detecting the levels of lactate dehydrogenase (LDH) and creatine kinase (CK), and then the rats were sacrificed and the myocardial tissues were taken to assay the expressions of C5a receptor and P38-MAPK by using immunohistochemistry after HE staining. And the above procedure as did in 12 h subgroup was done 24 hours later. Results Compared with the control group, the levels of LDH and CK in rats of Model group were significantly higher (P ＜ 0. 05). There were significant differences in LDH and CK between 24 h subgroup and 12 h subgroup [(2 568.9 ± 280) vs. (2 201.2 ± 149)] and [(5 029.7±458) vs. (2 629.4±140)] ,P＜0. 05, P＜0.05. The analysis of C5aR and P38-MAPK gray values showed that there were significant differences between the model group and normal control group [(702.77 ±122) vs. (388.36±113)], P＜0. 05 and [(646.40±181) vs. (307.32 ±61)] ,P＜0.05,and those differences also found between the 24 h subgroup and 12 h subgroup. There was a significant positive correlation between C5aR and P38-MAPK (P＜0.05 ), and also the P38-MAPK had significant positive relationships with LDH(P＜0.05) and CK (P＜0.05). Conclusions The C5aR strongly potentiates the P38-MAPK to induce myocardial injury by septic shock.     

p38 MAPK抑制物对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及凋亡信号通路的影响

目的探讨p38 MAPK抑制物SB20358(SB)对心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及凋亡信号通路的影响。方法选择45只250~300 g雄性SD大鼠,通过阻断其左冠状动脉前降支(LAD)30 min再灌注180 min制备I/R损伤模型。随机分3组(n=15):溶剂对照组(Vehicle组)、低剂量SB预处理组(SB-L组)和高剂量SB预处理组(SB-H组);同时选取15只同周龄SD大鼠仅穿线但不结扎(Sham组)。SB-L组和SB-H组分别于LAD结扎前30 min注射50μg/kg、100μg/kg SB,其余两组注射等体积的生理盐水。分别在术前(T0)、缺血30 min后(T1)、再灌注60 min(T2)、120 min(T3)及180 min后(T4)检测各组血浆肿瘤坏死因子(TNF-α)水平及I/R后的心功能情况[舒张末期压力(LVEDP)、左室收缩期平均压(LVSP)、短轴缩短率(FS)和射血分数(EF)],处死大鼠并通过TTC染色分析缺血程度和梗死程度,将心脏组织包埋并采用HE染色观察各组的心肌形态学变化,同时采用Western blot检测心肌梗死区p38及其磷酸化形式的p-p38的蛋白水平。结果与Sham组相比,Vehicle组除T0外的I/R其余时间点的TNF-α水平均升高,LVSP、FS和EF均降低,LVEDP、心肌p-p38/p38值及缺血和梗死程度均升高(P0.05),心肌肌纤维出现断裂溶解及坏死,心肌间质出现水肿且间隙增大,出现坏死灶;给予SB处理后可减轻以上异常指标及心肌病理改变,与Vehicle组的差异均有统计学意义,但仍与Sham组有差异(P0.05)。SB-H组的改善效果优于SB-L组(P0.05)。结论 SB对大鼠心肌I/R损伤有改善作用,可降低心肌缺血及梗死程度,改善心功能和炎症反应并抑制p38 MAPK信号通路活化。     

p38信号通路参与呼吸机所致肺损伤大鼠高迁移率族蛋白B1的表达

目的 研究p38信号通路在呼吸机所致肺损伤(ventilator-induced lung injury,VILI)大鼠肺组织表达高迁移率族蛋白BI(high mobility group box 1 protein,HMGB1)中的作用.方法健康sD大鼠24只随机分为3组:对照组(A组)不行机械通气,保留自主呼吸;常规通气组(B组)潮气量(Vt)为8mL/kg;大潮气量通气组(C组)Vt为40 mL/kg.机械通气4 h后处死动物,测定支气管肺泡灌洗液中总蛋白水平、白细胞计数以及肺湿干重比值(W/D)和中性粒细胞髓过氧化物酶(MPO)活性.采用Western blot方法检测肺组织HMGB1蛋白和p38激酶活性变化,采用RT-PCR方法检测HMGB1 mRNA的表达.应用单因素方差分析进行不同组别间的比较.结果 通气4 h后,与A组相比,C组总蛋白水平(1.77±0.68)g/L、白细胞计数(106.55±28.17)×10~7 L~(-1)、肺W/D比值(7.16±1.02)、MPO活性(3.94±1.21)U/g、HMGB1蛋白(0.64±0.17)和mRNA(1.17±0.45)表达以及p38激酶活性(0.51±0.12)均明显增加(P<0.05),而B组上述各项指标的变化均无统计学意义(P>0.05).结论大潮气量机械通气可引起大鼠急性肺损伤,p38参与了机械牵张诱导肺组织HMGB1的表达.