碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心室肌细胞L型钙通道的阻断作用

目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心室肌细胞L-型钙通道(ICa)的影响。方法采用酶急性分离的单个大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术,观察F2对ICa的影响。结果F20.1,1,10×10-6mol.L-1可剂量依赖地抑制ICa,抑制率分别为40%,72%,84%,IC50为1.19×10-6mol.L-1。F2上移ICa的I-V曲线,但不改变ICa的最大锋电位和翻转电位;F2对ICa稳态激活曲线无明显改变;F2可使得ICa稳态失活曲线左移;延长ICa失活恢复时间。结论F2对心肌细胞ICa具有阻断作用。     

氟哌啶醇季铵盐衍生物抑制氯化钾所致大鼠主动脉平滑肌细胞内钙浓度增加

目的:动态观察氟哌啶醇季铵盐衍生物(F_3)对血管平滑肌细胞内钙浓度的影响。方法:利用激光共聚焦显微镜动态观察F_3(0.o1-10μmol/L)对由KCl(30mmol/L)诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙荧光强度增加的作用。结果:KCl可诱发细胞内钙荧光强度迅速增强,F_3可以拮抗由KCl诱导的细胞内钙荧光强度增强作用,并呈量效依赖性和时间依赖性,终强度(KCl:67±24;F_3 0.o1μmol/L:57±13;0.1μmol/L:40±13;1μmol/L:29±9;10μmol/L:20±6)。在加入F_3后,钙荧光强度的变化最快时程是在给F_3后0-30s。结论:F_3拮抗血管收缩主要是由于阻断了Ca~(2 )通道。     

氟哌啶醇季铵盐衍生物对猪冠状动脉螺旋条件作用机制的探讨

目的：研究氟哌啶醇季铵盐衍生物Ｆ２对猪冠状动脉的作用及其作用机制。方法：采用去内皮的猪冠状动脉螺旋条,观察在有钙和无钙的Ｋｒｅｂｓ液中,不同浓度（０．１～１００μｍｏｌ／Ｌ）Ｆ２对预先用３０ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＣｌ诱导冠状动脉螺旋条收缩曲线的影响,以及１０μｍｏｌ／Ｌ格列苯脲（ｇｉｌｂｅｎｃｈａｍｉｄｅ,Ｇｌｉ）对１００μｍｏｌ／Ｌ Ｆ２对抗ＫＣｌ诱导的冠状动脉条收缩作用的影响。结果：在含钙的Ｋｒｅｂｓ液中,０．１～１００μｍｏｌ／Ｌ Ｆ２均量效依赖地抑制３０ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＣｌ诱导的冠状动脉螺旋条收缩,在无钙的Ｋｒｅｂｓ液中,１００μｍｏｌ／ＬＦ２对３０ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＣｌ诱导的冠状动脉螺旋条收缩曲线无影响;１０μｍｏｌ／Ｌ格列苯脲不能恢复１００μｍｏｌ／ＬＦ２对抗ＫＣｌ诱导的冠状动脉条的收缩作用。结论：Ｆ２可能     

碘化N-正丁基氟哌啶醇抑制大鼠过氧化氢作用心肌细胞L型钙通道电流的增大

目的本实验旨在研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对过氧化氢作用大鼠心肌细胞L-型钙电流的抑制作用,并探讨其保护机制。方法采用Langendorff灌流系统灌流SD大鼠心脏,标准酶解法消化分离得到单个心室肌细胞,给予正常台氏液灌流5 min,灌流含过氧化氢的台氏液建立过氧化氢模型。采用全细胞膜片钳记录对照、模型以及不同浓度F2(0.1、1、10μmol·L-1)对L-型钙通道电流,观察过氧化氢作用后,F2对L-型钙通道电流的影响。结果过氧化氢作用后L-型钙通道电流增大,I-V曲线下移。F2呈浓度依赖地抑制L-型钙通道电流,I-V曲线上移。结论 F2能抑制L-型钙电流,防止过氧化氢作用时心肌细胞的钙超载,从而保护心肌细胞。     

氟哌啶醇季铵盐衍生物对血管平滑肌细胞钙离子的影响

目的　研究氟哌啶醇季铵盐衍生物 (F2 )对大鼠胸主动脉平滑肌细胞内钙离子荧光强度的影响。方法　用Ca2 +荧光染料Fluo 3 AM负载细胞 ,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙的变化。结果　在含氯化钙 (1 2 6mmol·L-1)的细胞外液中 ,30mmol·L-1KCl使细胞内钙荧光强度迅速增强 ,4种浓度F2 (0 1、1、10、10 0 μmol·L-1)作用 3min时 ,使KCl诱导细胞内钙荧光强度分别降至 6 4%± 9% ,(n=16 ,P <0 0 5 )、16 %± 5 % ,(n =2 0 ,P <0 0 1)、0 6 %±0 8% ,(n =2 0 ,P <0 0 1)、0 1%± 0 3 % ,(n =15 ,P <0 0 1) ,呈量效依赖关系。结论　F2 通过阻断细胞膜电压依赖性钙通道降低平滑肌细胞内钙浓度     

氟哌啶醇对新西兰兔心室肌细胞钾通道基因表达的影响

目的研究氟哌啶醇对兔左心室肌细胞钾通道基因水平的影响,探讨氟哌啶醇致心律失常的分子机制。方法实验组分别耳缘静脉注射氟哌啶醇(Haloperidol,Hal)1,2,4mg.kg-1.d-1,假手术组注射2ml.d-1生理盐水,同时监测心电图。应用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),对ERG、KvLQT1和mink的基因表达进行半定量分析。结果氟哌啶醇低、中、高剂量组KvLQT1、mink及ERG mRNA表达较正常组降低(P<0.05),假手术组与正常组差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟哌啶醇可能通过降低IKr、IKs钾通道基因KvLQT1、mink及ERG的表达,而使钾离子外流减少,心肌细胞动作电位时程延长,增加QT间期延长诱发Tdp的风险。     

氟哌啶醇季铵盐衍生物对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的　研究氟哌啶醇季铵盐衍生物 (F2 )对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法　大鼠冠状动脉左前降支结扎 30min ,再灌注 30min ,于缺血前舌下静脉注射不同剂量F2 (1,2 ,4mg·kg-1)。测定血清肌酸激酶 (CK)、肌酸激酶同工酶MB (CK MB)、乳酸脱氢酶 (LDH)、α 羟丁酸脱氢酶(HBDH)、谷草转氨酶 (GOT)、丙二醛 (MDA)的含量 ,超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ;透视电子显微镜下观察心肌形态学改变。结果　F2 能呈量效关系降低由于缺血再灌注引起的心肌损害心肌酶CK、CK MB、LDH、HBDH、GOT的释放 ,保护SOD的活性 ,降低MDA的产生 ;透视电子显微镜下可观察到F2 能减轻缺血再灌注心肌的形态学改变。结论　F2 对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用     

碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心肌细胞内钙离子的影响

目的:研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心肌细胞内钙离子([Ca2+]i)的影响。方法:采用钙荧光染料Fluo-3-AM负载心肌细胞,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内钙离子的变化。结果:在含钙(1.8mmol·L-1)台式液中,60mmol·L-1KCl使细胞内钙荧光强度由1.0增高至1.84±0.35(P<0.01,n=50),分别用0.1、1、10μmol·L-1F2预先孵育心肌细胞,F2可以浓度依赖地抑制钙荧光强度的增高,IC50为1.61μmol·L-1。0.1、1、10μmol·L-1F2使得KCl诱导增高的钙荧光强度从1.92±0.42分别降至1.88±0.39、1.31±0.36和1.09±0.05(P分别>0.05、<0.01和<0.01,n=50),IC50为1.78μmol·L-1。F2不影响静息状态下的细胞内钙的浓度。对咖啡因和三磷酸肌醇介导的细胞内钙的释放均无作用。结论:F2通过阻断心肌细胞膜电压依赖性钙通道降低心肌细胞内钙浓度,这可能是保护心肌缺血/再灌注损伤的机制。     

氟哌啶醇对褪黑素免疫调节作用的影响

目的：本文研究了氟哌啶醇对褪黑素免疫调节作用的影响。方法：小鼠自实验前１周置于标准明暗周期交迭环境中饲养,自由摄食饮水。实验时分别测定小鼠外周血淋巴细胞百分率－,Ｔ淋巴细胞百分经与血清溶血素生成水平。结果：ＭＴ２０μｇ／ｋｇ可以显著升高Ｌｙｍ％,Ｔ－Ｌｙｍ％与ＨＣ５０值,Ｈａｌ０．４－１．。６ｍｇ／ｋｇ对小鼠Ｌｙｍ％,Ｔ－Ｌｙｍ％无直接影响,对ＨＣ５０值有一定影响,但均安全抑制ＭＴ升高Ｌｙｍ％,Ｔ     

尾加压素Ⅱ对大鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的 研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对大鼠心室肌细胞L-型钙电流(Ica-L)的影响。方法 利用全细胞膜片钳技术,观察给予不同浓度的UⅡ灌流后,大鼠心室肌细胞Ica-L的变化。结果 运用全细胞膜片钳技术,在单个心室肌细胞上给予不同浓度的UⅡ(10-9～10-5mol/L)灌流5min后,Ica-L峰值下降分别为(6.7±1.8)pA/pF,(5.9±2.0)pA/pF,(5.4±2.2)pA/pF,(4.5±2.0)pA/pF,(3.8±1.8)pA/pF,与对照组(8.0±1.2)pA/pF相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 UⅡ呈浓度依赖性地抑制大鼠心室肌细胞Ica-L强度;UⅡ可能通过抑制心室肌细胞Ica-L而发挥其心功能抑制作用。     

Effect of methamphetamine on potassium and L-type calcium currents in rat ventricular myocytes

The mechanisms of cardiac toxicity caused by methamphetamine (MA) are poorly understood at present. This study was designed to investigate the effects of MA on ionic currents in myocardial cells. The effects of MA on transient outward potassium current (I_to), inward rectifying potassium current (I_K1), and L-type calcium current (I_Ca-L) in isolated rat ventricular myocytes were studied using the whole-cell patch clamp technique. It was demonstrated that MA inhibited the I_to, I_K1, and I_Ca-L in the rat ventricular myocytes concentration-dependently. MA shifted left the I_to steady-state inactivation curve and shifted down the recovery curve, but had no influence on the steady-state activation curve. MA did not affect the I_Ca-L steady-state activation curve or steady-state inactivation curve, but shifted down the recovery curve. We concluded that MA had inhibitory effects on the I_to, I_K1, and I_Ca-L in ventricular myocytes, which might be one of the possible electrophysiological mechanisms of cardiac damage caused by MA.     

藻酸双酯钠对豚鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的　研究藻酸双酯钠 (PSS)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L 型钙电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳记录技术。结果　PSS明显缩短动作电位时程 (APD) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使APD90 缩短 2 4 9% (P <0 0 5 ,n=6 )、37 7%和 4 7 7% (P <0 0 1,n =6 ) ,使APD50 缩短2 1 1% (P <0 0 5 ,n =6 )、4 5 0 %和 6 3 2 % (P <0 0 1,n =6 ) ,呈明显的剂量依赖关系。PSS浓度依赖性减小L 型钙电流 (Ica L) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使其峰值降低34 3% (P <0 0 5 ,n =6 )、5 8 4 %和 74 9% (P <0 0 1,n =6 )。随着PSS浓度的增加 ,L 型钙电流的I U曲线逐渐上移 ,但其最大激活电压保持为 0mV不变。结论　PSS明显缩短APD ,抑制Ica L,且呈浓度依赖关系     

银杏叶提取物对豚鼠心室肌细胞动作电位及L型钙离子通道的影响

目的 :观察银杏叶提取物 (EGB)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L 型钙通道的影响。方法 :采用全细胞膜片钳技术的电流钳记录动作电位和电压钳记录L 型钙离子通道电流 (ICa L)。结果 :银杏叶提取物 (原液含银杏黄酮甙 0 .80 4g·L-1,银杏内酯0 .0 6g·L-1)明显缩短心室肌细胞动作电位时程(APD) ,1 80 0稀释液致APD90 缩短 13% (P <0 .0 5 ) ,1 2 0 0稀释液致APD90 缩短 2 3% (P <0 .0 5 ) ;银杏叶提取物对心肌细胞L 型钙离子通道的开放有抑制作用 ,在 1 80 0时ICa L 峰值降低 15 % (P <0 .0 5 ) ,1 2 0 0时ICa L峰值降低 4 2 % (P <0 .0 5 ) ,均呈浓度依赖性 ,随着药物浓度的增加 ,I V关系曲线逐渐上移 ,但出现电流峰值的电压不变。结论 :银杏叶提取物能明显缩短APD ,抑制心肌细胞钙离子通道的开放 ,具有明显的浓度依赖关系 ,可能是其抗心律失常的分子基础。     

银杏苦内酯B对豚鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙通道的影响

目的　研究银杏苦内酯B(BN 5 2 0 2 1)对豚鼠心室肌细胞动作电位 (AP)和L 型钙通道的影响。方法　全细胞膜片箝技术。AP记录采用电流箝方式 ,电流记录采用电压箝方式。结果　BN 5 2 0 2 1明显缩短动作电位时程 (APD) ,在10 -6mol·L-1浓度 ,APD90 缩短 9% (P <0 0 5 )。在 10 -5mol·L-1浓度 ,APD90 缩短 12 % (P <0 0 1)。 10 -6mol·L-1以上浓度BN 5 2 0 2 1还明显缩短APD50 ,最大缩短达 14% (P <0 0 5 )。较高浓度 (10 -5mol·L-1)的BN 5 2 0 2 1可使静息电位增加 (P <0 0 5 )。BN 5 2 0 2 1浓度依赖性减少L 型钙电流(L ICa)。 10 -6mol·L-1浓度下 ,峰值L ICa降低 2 4 7% (P<0 0 1) ,10 -5mol·L-1浓度下 ,峰值L ICa降低 36 9% (P <0 0 1)。随着药物浓度的增加 ,I U关系曲线逐渐上移 ,但其峰值电压保持不变。结论　BN 5 2 0 2 1明显缩短APD ,抑制L ICa,且具有明显的浓度依赖关系。     

丹参素对大鼠心室肌动作电位、L-型钙电流和ATP敏感性钾电流的作用

目的研究丹参素对单个大鼠心室肌细胞动作电位、L-型钙电流和ATP敏感性钾电流（IKAVP）的影响,探讨丹参素在离子通道水平的药理机制。方法胶原酶急性酶解法分离单个大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳的方法,记录丹参素对动作电位、L-型钙电流和IKATP的影响。结果丹参素可影响心室肌细胞动作电位时程（APD）,并能使APD25、APD50和APD90显著缩短;丹参素能够抑制三．型钙电流;丹参素可使IKA卯外向电流增大,此效应呈浓度依赖性。结论丹参素的心肌保护作用机制与抑制L-型钙电流和部分激活IKA口外向电流有关。     

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的药理作用机制。方法用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录L型钙电流(ICa-L)。结果心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg.L-1使豚鼠心室肌细胞ICa-L分别增加(5±4)%、(21±5)%、(30±5)%、(55±8)%、(76±11)%、(80±9)%,半最大效应浓度(EC50)为(18±6)mg.L-1。心肌肽素50 mg.L-1使ICa-L激活时间(TTP)从(6.7±0.9)m s缩短为(5.9±0.7)m s(P<0.01);使ICa-L电流密度-电压曲线下移,但激活电压、峰电压和I-V曲线的形状不变;激活曲线向负电压方向变化,半数激活电压从(-4.3±0.4)mV减少至(-8.6±0.4)mV(P<0.05);不影响稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论心肌肽素浓度依赖性增强豚鼠心室肌细胞ICa-L。     

H-89对大鼠心肌细胞膜电流的影响

目的评估蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89对大鼠心室肌细胞膜主要离子通道和转运体的影响。方法应用全细胞膜片钳技术观察H-89对胶原酶分解的成年SD大鼠心室肌细胞膜离子电流L-型钙电流(ICa-L)、电压门控钠电流(INa)、内向整流钾电流(IK1)、瞬时外向钾电流(Ito)和钠钙交换体电流(INa/Ca)的影响。结果1～10μmol.L-1H-89可浓度依赖性抑制ICa-L、INa、Ito(P<0.05);对IK1有更强的抑制作用,在较低浓度(5μmol.L-1)时即可完全抑制IK1(P<0.05),与0.5mmol.L-1氯化钡的作用类似。但在1～10μmol.L-1浓度范围内H-89对INa/Ca无明显作用(P>0.05)。结论H-89对心肌细胞膜电流的影响可能是其对通道的直接作用或间接通过抑制PKA所致。     

胍丁胺对大鼠心室肌细胞L—钙通道电流的影响

目的:观察胍丁胺(Agm)对大鼠心室肌细胞L-型钙通道电流(I_(Ca-L))的影响.方法:以酶解法制备单个心室肌细胞.应用全细胞膜片箝技术记录大鼠单个心室肌细胞钙通道电流.结果:(1)Agm(0.5,1,2mmol/L)可浓度依赖性地降低电压依赖性激活I_(Ca-L)(pA)峰值,其值从1451±236 (对照组)到937±105(n=8,P<0.05),585±74(n=8,P<0.01),和301±156(n=8,P<0.01).(2)Agm 1 mmol/L使用依赖性地阻滞I_(Ca-L)·1 Hz时抑制率为53％±12％(P<0.05),3Hz时为69％±11％(P<0.01).(3)Agm使I-V曲线上移,但对I_(Ca-L)的电压依赖特征、最大激活电压以及I_(Ca-L)稳态激活无明显影响.在Agm 1 mmol/L作用下,半数激活电压(V_(0.5)和斜率参数(k)与对照组相比均无显著性差异.V_(0.5)分别为(-20.2±2.5)mV和(-20.5±2.7)mV,k分别为(3.2±0.4)mV和(3.0±0.5)mV.(4)Agm 1 mmol/L可明显使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性稳态失活.V_(0.5)分别为(-32±6)mV和(-40±5)mV,k分别为(7.6±O.9)mV和(12.5±1.1)mV(P<0.05).(5)Agm 1mmol/L还使I_(Ca)从失活状态下恢复明显减慢.结论:Agm抑制I_(Ca-L),并主要作用于L-型钙通道的失活状态,表现为钙通道失活加速和从失活状态下恢复减慢.     

Effect of resveratrol on L-type calcium current in rat ventricular myocytes

AIM: To study the effect of resveratrol on L-type calcium current (I(Ca-L)) in isolated rat ventricular myocytes and the mechanisms underlying these effects. METHODS: I(Ca-L) was examined in isolated single rat ventricular myocytes by using the whole cell patch-clamp recording technique. RESULTS: Resveratrol (10-40 micromol/L) reduced the peak amplitude of I(Ca-L) and shifted the current-voltage (I-V) curve upwards in a concentration-dependent manner. Resveratrol (10, 20, 40 micromol/L) decreased the peak amplitude of I(Ca-L) from -14.2+/-1.5 pA/pF to -10.5+/-1.5 pA/pF (P<0.05), -7.5+/-2.4 pA/pF (P<0.01), and -5.2+/-1.2 pA/pF (P<0.01), respectively. Resveratrol (40 micromol/L) shifted the steady-state activation curve of I(Ca-L) to the right and changed the half-activation potential (V0.5) from -19.4+/-0.4 mV to -15.4+/-1.9 mV (P<0.05). Resveratrol at a concentration of 40 micromol/L did not affect the steady-state inactivation curve of I(Ca-L), but did markedly shift the time-dependent recovery curve of I(Ca-L) to the right, and slow down the recovery of I(Ca-L) from inactivation. Sodium orthovanadate (Na(3)VO(4); 1 mmol/L), a potent inhibitor of tyrosine phosphatase, significantly inhibited the effects of resveratrol (P<0.01). CONCLUSION: Resveratrol inhibited I(Ca-L) mainly by inhibiting the activation of L-type calcium channels and slowing down the recovery of L-type calcium channels from inactivation. This inhibitory effect of resveratrol was mediated by the inhibition of protein tyrosine kinase in rat ventricular myocytes.