c-Jun氨基末端激酶信号转导在神经元损伤中作用

神经系统疾病是一类发病率较高的疾病。神经变性疾病、脑血管疾病等常见的神经系统疾病影响全球数千万人的健康。虽然目前已有一些方法用于某些神经系统疾病的临床诊断和治疗,但用于预防和治愈这类神经系统疾病的方案依旧匮乏。目前研究发现通过细胞信号转导机理的研究能够使我们在细胞和分子水平上阐明这类疾病的部分机理,而c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）信号转导通路在神经元损失中作用也被逐步发现,其为神经系统疾病的治疗提供新的潜在药物靶标。     

c-Jun氨基末端激酶信号通路与胰岛β细胞凋亡

近年的流行病学调查显示,我国成人糖尿病患病率达11．6％,糖尿病前期患病率高达50．1％,糖尿病总体防治形势严峻［1］。据一项英国糖尿病前瞻性研究显示,患者确诊糖尿病时胰岛β细胞的功能仅残留约50％,且随着糖尿病的进展胰岛β细胞的功能呈进行性下降［2］。在2型糖尿病患者中,β细胞数量减少及凋亡增加是引起β细胞功能受损的主要原因［3］。 c‐Jun 氨基末端激酶（c‐Jun amino‐terminal kinase ,JNK ）作为一类丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶,参与了内质网应激、氧化应激及细胞因子等途径介导的胰岛β细胞凋亡。对JN K 信号通路的调控,有望成为保护胰岛β细胞功能的重要手段。笔者围绕JNK在胰岛β细胞凋亡中的作用作一综述,旨在阐明糖尿病发病的可能机制。     

c-Jun氨基末端激酶信号转导通路在细胞凋亡中的作用

细胞凋亡是当前生物医学热门话题之一,近年已取得了众多的发现,但细胞凋亡信号转导通路尚处于揭示阶段.现已证明丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族可转导并调控细胞凋亡信号,而JNK信号通路则在其中起着十分重要的作用,本文就近年来JNK信号转导通路与细胞凋亡研究的主要进展,包括JNK在应激反应的细胞凋亡中的研究,在Fas、TNF诱发细胞凋亡中的作用等的研究作了介绍.     

c-Jun氨基末端激酶在高血糖加重脑缺血性损伤中的作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）在高血糖加重大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法建立大鼠全脑缺血模型,通过免疫组织化学、Western blot,研究正常血糖和高血糖大鼠脑缺血时JNK的表达。结果正常血糖缺血组和高血糖缺血组大脑皮质和海马CA1区随着缺血再灌注时间的延长,JNK表达明显升高,与对照组比较有统计学意义（P〈0.01）,但两组在缺血再灌注相同时间点比较JNK表达均无统计学意义（P〉0.05）。Western blot分析可见,正常血糖组再灌注后1h,JNK达到高峰;高血糖组再灌注后3h,JNK达到高峰,与对照组比较有统计学意义（P〈0.05）,高血糖组与正常血糖组在各缺血再灌注时间点比较无统计学意义（P〉0.05）。结论高血糖可加重脑缺血再灌注损伤;JNK参与了脑缺血性损伤的发生,但高血糖并不能明显增加脑缺血性损伤时JNK的表达,故在高血糖加重脑缺血性损伤中JNK可能不发挥主要作用。     

慢性氟中毒大鼠脑组织中c-Jun氨基末端激酶表达水平观察

[摘要]目的：观察慢性氟中毒大鼠脑组织中c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号转导激酶表达变化,进一步揭示慢性氟中毒神经损伤的分子机制。方法：SD大鼠随机分为3组：对照组、低氟组、高氟组,每组24只,     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶通路的影响

目的 探讨α-硫辛酸(ALA)对糖尿病(DM)大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路及足细胞的影响.方法 链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,大鼠分为正常组(NC组)、糖尿病组(DM组)和ALA干预组(ALA组),8周后测各组大鼠血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血糖、肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA);透射电镜观察足细胞超微结构;Western blotting法测.肾脏P-JNK、JNK蛋白的表达;免疫组织化学法测足细胞Nephrin蛋白的表达.结果 与NC组比较,DM组BUN、Scr、UAER和血糖均显著增加;肾皮质MDA含量显著增加,SOD活性显著降低;透射电镜示:DM组足突增宽,肾小球基底膜增厚,系膜基质增多;肾脏p-JNK、JNK蛋白的表达及p-JNK/JNK均显著增加;Nephrin的表达显著降低.与DM组比较,ALA组BUN、Scr、UAER和MDA含量均显著降低;SOD活性显著增加;足细胞超微结构明显改善;肾脏p-JNK、JNK蛋白的表达及P-JNK/JNK均显著降低;Nephrin的表达显著增加.结论 ALA可能通过抑制DM大鼠JNK信号通路的活性,上调足细胞Nephrin蛋白的表达而发挥对糖尿病肾痛的肾保护作用.     

积雪草酸对糖尿病大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶信号通路的影响

目的:探讨积雪草酸(AA)对糖尿病(DM)大鼠肾脏c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路及足细胞的影响。方法:链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,将糖尿病大鼠随机分为糖尿病组(DM组)和AA干预组(AA组),并以正常组(NC组)作对照。干预8周后测各组血尿素氮(BUN)、肌酐(SCR)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血糖、肾皮质超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;透射电镜观察足细胞超微结构;Western blot法测肾脏p-JNK、JNK蛋白的表达;免疫组化法测足细胞nephrin蛋白的表达。结果:与NC组比较,DM组血BUN、SCR、UAER、血糖均显著增加(均P<0.01);肾皮质MDA含量显著增加(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05);透射电镜示:DM组足突增宽,肾小球基底膜增厚,系膜基质增多。肾脏p-JNK、JNK表达均显著增加(均P<0.01);nephrin的表达显著降低(P<0.01)。与DM组比较,AA组血BUN、SCR、UAER、MDA含量均显著降低(均P<0.05),SOD活性显著增加(P<0.05);足细胞超微结构明显改善;肾脏p-JNK、JNK表达均显著降低(均P...     

c-Jun氨基末端激酶抑制剂SP600125对杏仁核电点燃癫痫模型大鼠海马CA1区神经元的保护作用

目的探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对杏仁核电点燃大鼠海马CA1区神经元的保护作用。方法将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为点燃组、加药组及加药对照组,每组10只。大鼠10次癫痫发作后灌注取脑,Western blot法检测JNK和磷酸化JNK表达,进行胶原纤维酸性蛋白(GFAP)和尼氏染色,并将各组进行观察和比较。结果 Western blot显示加药组海马区JNK磷酸化水平(0.347±0.033)较点燃组(0.510±0.039)和加药对照组(0.476±0.045)显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),总JNK水平各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);加药组GFAP阳性细胞计数(42.27±4.63)较点燃组(68.82±5.36)和加药对照组(69.06±4.63)显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);尼氏染色正常神经元计数加药组(37.82±6.30)较点燃组(19.87±3.58)和加药对照组(20.13±5.37)显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 JNK特异性抑制剂SP600125对大鼠杏仁核电点燃癫痫模型CA1区海马神经元具有保护作用。通过SP600125抑制JNK的活性可能是治疗颞叶癫痫一种新的有效策略。     

c-Jun氨基末端激酶1和2在角质形成细胞系Hacat细胞中的作用

目的研究同工酶JNK1和JNK2在Hacat细胞中的功能差异,探讨其在皮肤肿瘤治疗中的潜在价值。方法分别将JNK1和JNK2的siRNA导入Hacat细胞,通过Western Blot技术在蛋白质水平对其敲低效果进行鉴定。CCK-8法检测细胞增殖曲线,流式细胞术检测细胞周期,不同剂量的Taxol进行凋亡诱导实验,分析正常Hacat细胞与JNK1/2敲低细胞的区别。结果细胞增殖实验表明,JNK1或JNK2敲低均可导致增殖变缓,JNK1敲低效果更明显。细胞周期结果显示,JNK1敲低可导致S期细胞减少,G2/M期升高。Taxol凋亡诱导实验表明,JNK2敲低组凋亡显著增加,而对照组和JNK1敲低组凋亡变化不明显。结论在细胞增殖方面,JNK1作用强于JNK2;而在抗凋亡方面,JNK2作用强于JNK1。     

IgA肾病中磷酸化c-Jun氨基末端激酶与肾小管上皮细胞转分化关系的研究

目的检测IgA肾病（IgAN）患者肾小管间质中转化生长因子β1（TGF-β1）、磷酸化c—Jun氨基末端激酶（p-JNK）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,探讨c—Jun氨基末端激酶（JNK）在体内对肾小管上皮细胞转分化的调控作用。方法参考IgAN病理类型HASS分级标准,把39例IgAN患者的肾活检标本,分为轻度增生组（HaasⅠ、Ⅱ型）、局灶增生组（HaasⅢ型）和增生硬化组（HaasⅣ、Ⅴ型）。据Katafuchi半定量积分标准评估肾小管间质损伤指数,用免疫组织化学技术检测TGF-β、p-JNK、d—SMA在肾小管间质的表达。结果IgAN各病变组肾小管间质损伤指数和TGFβ1、p-JNK、α-SMA表达均增高,且p-JNK与TGF-β1、α-SMA表达和肾小管间质损伤指数正相关。结论在I酗N患者肾组织中,JNK可能是调控TGF-β1介导的肾小管上皮细胞转分化的关键细胞内信号。     

三七总皂苷调控c-Jun氨基末端激酶改善大鼠肝组织胰岛素抵抗的作用

目的构建高脂高胆固醇饮食诱导胰岛素抵抗SD大鼠模型,探讨三七总皂苷改善胰岛素抵抗的作用及其机制.方法 Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠60只,随机分为对照组、模型组和治疗组.对照组喂以普通饮食,模型组和治疗组以高脂高胆固醇灌胃加普通饮食喂养16周诱发胰岛素抵抗(IR)后,治疗组给予三七总皂苷治疗8周,2组大鼠继续高脂高胆固醇灌胃直到24周取材.用化学比色法检测3组大鼠肝组织氧化应激相关酶和产物:谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽还原酶(GR)、丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力;Western blotting检测3组大鼠肝组织中丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)家族的c-Jun氨基末端激酶(JNK)活性变化.结果模型组体重、Lee’s指数、甘油三酯、总胆固醇、游离脂肪酸、血胰岛素和胰岛素抵抗指数明显高于对照组(P<0.05);内源性巯醇抗氧化剂(酶)GSH和GR含量减少,MDA的含量明显升高,JNK激酶磷酸化增高;三七总皂苷治疗8周后大鼠高脂血症和胰岛素抵抗明显改善;抑制JNK激酶磷酸化.但空腹血糖在3组间没有差异(P>0.05).结论三七总皂苷能减轻胰岛素抵抗模型大鼠高脂血症,上调大鼠肝组织中内源性巯醇抗氧化物(酶)GSH和GR含量,抑制应激蛋白激酶JNK活性,改善大鼠肝组织胰岛素抵抗.     

氨溴索对胃内容物吸入性肺损伤中c-Jun氨基末端激酶信号通路的影响

目的探讨氨溴索对大鼠胃内容物吸入后损伤肺组织中c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路的影响。方法 40只健康SD雄性大鼠随机分为对照组、损伤组、SP600125组和氨溴索组,每组10只。复制大鼠胃内容物吸入性肺损伤动物模型,SP600125组术前给予尾静脉注射JNK特异性抑制剂SP600125(3 mg/100 g),氨溴索组于损伤发生后2 h给予尾静脉注射氨溴索(50 mg/kg)。检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中性粒细胞计数与丙二醛(MDA)活性、肺组织湿/干重比值(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性变化。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中JNK、磷酸化JNK(p-JNK)及诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的蛋白表达。光镜下观察肺组织结构变化。结果与对照组比较,损伤组BALF中性粒细胞计数与丙二醛(MDA)活性、肺组织W/D及MPO活性显著增加(均P0.05);p-JNK与i NOS蛋白表达均显著增高(均P0.05);肺组织出现明显病理组织学损伤。与损伤组比较,SP600125组和氨溴索组BALF中性粒细胞计数与MDA活性、肺组织W/D及MPO活性显著下降(均P0.05);p-JNK与i NOS蛋白表达显著下降(均P0.05);肺组织病理学损伤减轻。Western blot结果显示各组大鼠肺组织中JNK蛋白表达差异无统计学意义。结论 JNK参与胃内容物吸入性肺损伤炎症反应。氨溴索可能通过抑制JNK信号通路、抑制i NOS表达发挥抗炎、抗氧化保护作用。     

c-Jun氨基末端激酶活化在三丁基锡诱导凋亡中的作用及机制

目的：研究c-jun氨基末端激酶（JNK）参与三丁基锡（Tributyltin, TBT）诱导正常人羊膜细胞FL凋亡的分子机制。方法：FL细胞经不同浓度TBT染毒1h后,PI/Annexin V双染色法检测FL细胞凋亡率。Western blot检测FL细胞JNK的磷酸化水平,Bax定位、Bcl-2的磷酸化水平及总Bax和Bcl-2表达水平。结果：与对照组相比,4μmol/L和6μmol/L的TBT染毒剂量组细胞凋亡率明显升高,2μmol/L～6μmol/L剂量组JNK磷酸化水平升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。JNK特异抑制剂SP600125明显降低TBT诱导的FL细胞凋亡率,而JNK特异抑制剂SP600125对Bax定位、Bcl-2的磷酸化水平及总的Bax和Bcl-2表达量无影响。结论：JNK的活化是TBT诱导FL细胞凋亡的重要因素,但JNK介导凋亡的途径并非通过调控凋亡相关因子Bax和Bcl-2。     

Urantide对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉组织中c-Jun氨基末端激酶表达的影响及其意义

目的：探讨Urantide对动脉粥样硬化（AS）大鼠胸主动脉组织中c-Jun氨基末端激酶（JNK）mRNA和蛋白表达的影响,阐明其防治AS的分子机制。方法：采用腹腔注射维生素D₃（VitD₃）联合高脂特制饲料饲养方法建立大鼠AS模型,同时设对照组。建模成功的150只AS模型大鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、Urantide 3 d组、Urantide 7 d组和Urantide 14 d组,每组30只。辛伐他汀组大鼠灌胃给予辛伐他汀,连续14 d;Urantide 3、7和14 d组大鼠经尾静脉注射Urantide,分别连续3、7和14 d。采用全自动生化分析仪检测大鼠血清学指标,HE染色观察大鼠胸主动脉组织病理形态表现,免疫组织化学染色、qRT-PCR和Western blotting法检测大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平。结果：与对照组比较,AS模型组大鼠血清中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白（LDL）水平均升高（P<0.05）,高密度脂蛋白（HDL）水平降低（P<0.05）。HE染色,模型组大鼠胸主动脉组织中泡沫细胞形成,中膜弹性纤维断裂以及钙化形成;与模型组比较,辛伐他汀组和Urantide组大鼠胸主动脉病理改变明显改善。免疫组织化学染色,对照组大鼠胸主动脉组织中JNK阳性颗粒微量表达;与对照组比较,模型组大鼠胸主动脉组织中JNK阳性表达强度明显增加（P<0.05）;与模型组比较,辛伐他汀组和不同时间Urantide组大鼠胸主动脉组织中JNK阳性表达强度明显降低（P<0.05）。qRT-PCR和Western blotting法检测,与对照组比较,模型组大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.05）;与模型组比较,辛伐他汀组和不同时间Urantide组大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平明显降低（P<0.05）;与辛伐他汀组比较,不同时间Urantide组大鼠胸主动脉组织中JNK mRNA和蛋白表达水平进一步降低（P<0.05）。结论：Urantide可改善AS大鼠胸主动脉的病理损伤,其机制可能与抑制JNK信号通路的表达有关。     

c-Jun氨基末端激酶在转化生长因子-β1诱导肾系膜细胞合成纤维连接蛋白中的作用

目的研究c—Jun氨基末端激酶（c—JunN—terminal kinase，JNK）在转化生长因子-β1（transforming growth factor—β1，TGF-β1）诱导肾系膜细胞合成纤维连接蛋β（fibronectin）中所介导的作用。方法用蛋白免疫印迹法检测TGF—β1诱导的。肾系膜细胞纤维连接蛋白合成以及JNK的磷酸化。用SP600125来抑制JNK的活性。结果加入TGF—β1后，系膜细胞JNK磷酸化水平逐渐增加，5h时达高峰，TGF-β1显著增加系膜细胞纤维连接蛋白的表达。用SP600125预处理系膜细胞能增加TGF-β1引起的纤维连接蛋白表达，且具有剂量依赖性。结论JNK活化可能负性调控TGF—β1引起的纤维连接蛋白表达。     

用BOC-Leu-Ser-Thr-Arg-pNA建立前激肽释放酶活性测定法

作者发现发色底物ＢＯＣ－Ｌｅｕ－Ｓｅｒ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－ｐＮＡ对激肽释放酶具有良好的敏感性和特异性。它受激肽释放酶作用的Ｋｍ和Ｖｍａｘ。分别为２３５ｐｍｏｌ·Ｌ－１和３３７ｎｍｏｌ（ＰＮＡ）·Ｓ－１·Ｕ－１（ｋＫ）；抑制试验显示，该底物对ＡＴ－Ⅲ和ＬＢＴＩ不敏感，用作激肽释放酶测定的回收率为９７．２％～１０２．ｌ％，ＣＶ值２．３％～４．６％。用它建立了血浆激肽释放酶活性测定法，标准曲线线性甚佳，线性范围６．２５％～３００．０％（激肽释放酶活性）．测得健康人、妊娠妇女、肝功能衰竭病人和晚期癌症病人的血浆前激肽释放酶活性分别为１１３．９％，１４５．７％，４０．０％和９０．０％。作者认为，发色底物ＢＯＣ－Ｌｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｈｒ－Ａｒｇ－ｐＮＡ是ＰＫ（ＫＫ）活性测定的良好底物，建立的ＰＫ活性测定法简便、快速、敏感、可靠，实用价值大。     

结直肠癌中黏着斑激酶、整合素、c-Jun氨基末端激酶的表达及相关性研究

目的 检测黏着斑激酶(FAK)、整合素Src、c-Jun氨基末端激酶(JNK)在结直肠癌组织中的表达,并探讨其与结直肠癌临床病理指标的相关性.方法 采用免疫组织化学SP法检测68例结直肠癌组织与癌旁组织中FAK、Src、JNK的表达,结合结直肠癌临床病理指标分析相关性.结果 68例结直肠癌标本中,FAK、Src、JNK的表达水平均与癌旁组织差异显著(P值分别为0.012,0.002,0.012).3者的表达水平与肿瘤分化程度呈负相关(P值分别为＜0.001,0.002,0.004;r值分别为-0.346,-0.356,-0.340),FAK表达与淋巴结转移及UICC分期相关(P值分别为0.006和0.013),但与患者性别、年龄、肿瘤的大小及位置无显著相关.FAK蛋白的表达与Src及JNK蛋白的表达呈正相关(r=0.357,P=0.001;r=0.318,P=0.047).结论 FAK、Src、JNK在结直肠癌组织中均呈高表达,与肿瘤分化程度呈负相关,且Src、JNK的表达与FAK呈正相关,提示FAK/Src/JNK信号通路在结直肠癌的发生、发展中起重要作用.     

不同转移能力的人前列腺癌细胞亚系中p38和c-Jun氨基末端激酶激活机制

据《中华病理学杂志》2001年6月30卷第3期报道 北京大学医学部病理学系李红梅等,为研究P2嘌呤受体激动剂ATP对不同转移性的人前列腺癌细胞亚系1E8和2B4的