流式细胞术检测B细胞淋巴瘤骨髓侵犯的初步研究

背景与目的：骨髓是恶性淋巴瘤发展过程中较易累及的结外器官，常规的检测方法包括骨髓活检和骨髓穿刺，但各有其优缺点，流式细胞术（Flow Cytometry，FCM）是近几十年来发展的新型细胞检测技术，在国外已经较广泛的应用于恶性淋巴瘤的诊断和鉴别诊断。本研究拟探讨FCM在检测B细胞淋巴瘤骨髓侵犯中的可行性及有效性．并初步评价其临床病理价值。方法：采用CD45-SSC设门联合三种不同荧光标记的抗CD45、CD5、CD10、CDl9、CD20、CD22、CD23、CD43、FMC-7、入和K抗体在流式细胞仪上对79例B细胞淋巴瘤患者骨髓进行检测，与骨髓细胞形态学检测比较。结果：①在79例B细胞淋巴瘤患者中，用FCM检测出35例（44．3％）患者有侵犯，而骨髓细胞形态学只检测出16例（20．3％），两者有显著性差异（P〈0．05）；符合率为60／79（75。9％）。②用FCM检测，弥漫大B细胞性淋巴瘤（DLBCL）、滤泡性淋巴瘤（FL）及小淋巴细胞性淋巴瘤（SLL）患者在初诊时的侵犯率分别为20．0％、43。8％和100％。③FCM结果阳性率和AnnArbor分期有明显关系，在分期晚的患者FCM阳性机会高（P〈0。001）．有B组症状及复治的患者中FCM检出骨髓侵犯高于相应的组别，但未显示统计学意义（P〉0.05）．与LDH水平和脾脏累及与否无相关（P〉0．05）。④对未确定具体类型的4例骨髓侵犯患者，根据免疫表型能够确定诊断。结论：FCM是检测B细胞淋巴瘤骨髓侵犯的有效方法，较骨髓细胞形态学敏感；且能够起到辅助诊断的作用；对不同类型淋巴瘤初治患者骨髓侵犯与临床表现、治疗反应的相关性尚需扩大病例进一步研究。     

骨髓涂片、骨髓活组织检查及流式细胞术在淋巴瘤骨髓侵犯诊断中的比较

目的 比较骨髓涂片、骨髓活组织检查和流式细胞术三种方法对淋巴瘤患者骨髓受累的检测情况,为临床检测骨髓受累提供选择.方法 收集68例恶性淋巴瘤初治患者,观察骨髓涂片、骨髓活组织检查和流式细胞术三种方法检测淋巴瘤患者骨髓受累的阳性率.结果 68例恶性淋巴瘤患者检测骨髓受累时,骨髓涂片、骨髓活组织检查和流式细胞术的阳性率分别为16.2％（11/68）、33.8％（23／68）和10.3 ％（7/68）,骨髓活组织检查阳性率高于涂片和流式细胞术检查,三种方法阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）.对三种检测方法进行相关性分析,骨髓涂片与骨髓活组织检查存在相关性（P=0.002）,与流式细胞术没有相关性（P=0.270）.结论 骨髓涂片细胞形态学检查是检测淋巴瘤患者是否有骨髓受累的基础方法,骨髓活组织检查阳性率较高,有明显的优势,但需与骨髓涂片互为补充.     

不同骨髓检查在淋巴瘤诊断中的价值

探讨3种骨髓检查方法（骨髓涂片、活检、流式细胞术分析）对淋巴瘤骨髓浸润的诊断及分期价值。方法：对74例患者进行3种方法的骨髓检查,评估不同方法的检出率、对分期的影响以及各亚型中骨髓浸润的风险。结果：骨髓涂片阳性者12例（16.2%）,骨髓活检阳性10例（13.5%）,流式细胞术分析阳性23例（31.1%）,流式细胞术分析的阳性率显著高于涂片和活检检查（P<0.05）;骨髓涂片、活检、流式细胞术分析可互相修正淋巴瘤患者的临床分期;弥漫大B细胞淋巴瘤亚型骨髓浸润比例最高;对于无淋巴结、肝脾肿大者,骨髓检查具有明确诊断的作用。结论：骨髓涂片、活检及流式细胞术分析对淋巴瘤有重要的诊断及分期价值,三者互为补充,不能相互替代。     

60例滤泡淋巴瘤骨髓肿瘤细胞的形态学分析

目的:对滤泡淋巴瘤骨髓的淋巴瘤细胞进行形态学分析总结形态特点,为骨髓病理医生对滤泡淋巴瘤骨髓累及诊断提供一定的参考依据。方法:回顾性分析2013年至2018年共565例经淋巴结活检病理确诊滤泡淋巴瘤患者,并挑选其中60例有骨髓侵犯的患者,对其骨髓涂片进行观察,根据其肿瘤细胞的形态特点进行分析归类总结,找出共同特点。结果:对本组60例滤泡淋巴瘤骨髓涂片根据肿瘤细胞形态特点共分为五种类型,包括小无裂细胞型（38.3%）、小裂细胞型（31.7%）、幼淋巴细胞型（5.0%）、母细胞化型（5.0%）以及滤泡转大B细胞型（20.0%）。结论:滤泡淋巴瘤累及骨髓病例可通过观察肿瘤细胞的细胞形态分为五种类型,其中以小无裂细胞和小裂细胞最为常见（70.0%）,每种类型肿瘤细胞具有明显的特点,具有重要的病理和临床指导意义。     

流式细胞术在非霍奇金淋巴瘤诊断与分型中的应用

 目的　探讨流式细胞术对非霍奇金淋巴瘤（NHL）诊断与分型的临床应用价值。方法　收集临床怀疑淋巴瘤的患者手术切除的新鲜淋巴结59例,流式细胞术（FCM）检测异常单克隆淋巴细胞数量及其免疫表型,分析FCM诊断及分型的结果与病理组织学诊断的符合率。结果　28例病理确诊NHL的淋巴结标本中,FCM检测到有异常克隆性淋巴细胞的24例,异常淋巴细胞的比例为4.28 %～89.10 %,其中确诊B-NHL 23例,T-NHL 1例。FCM对NHL的诊断与病理组织学诊断的符合率为85.71 %;FCM对B-NHL诊断的特异度为100 %,敏感度为92 %。在FCM确诊的24例NHL中,根据异常细胞表型进一步分型,与病理诊断均相符。结论　FCM能准确确定克隆性淋巴细胞,协助诊断NHL,并在B-NHL的分型和鉴别诊断中起重要作用。     

淋巴瘤骨髓侵犯及其检测的研究进展

淋巴瘤起源于淋巴网状系统，分为霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma，HL）和非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lymphoma，NHL）。骨髓侵犯（bone marrow involvement，BMI）在淋巴瘤中较为常见，并对病情分期、制定治疗策略以及判断预后有重要的临床意义。因淋巴瘤是一组异质性恶性肿瘤，骨髓侵犯的发生率因其病理类型而异，不同的检测方法可能影响其对骨髓侵犯的检出率。本文就常见类型的淋巴瘤骨髓侵犯及其检测方法的研究进展作一综述。     

恶性淋巴瘤骨髓受累的免疫表型特征

目的:探讨淋巴瘤骨髓受累的免疫表型特征。方法:采用流式细胞仪CD45/SSC设门方法对34例恶性淋巴瘤患者的骨髓标本进行检测,以骨髓涂片细胞学检查作阳性对照。收集骨髓受累患者的CD分子表达数据。结果:①对34例恶性淋巴瘤患者的骨髓应用流式细胞仪进行检测,发现23例阳性,阳性率67.65%(23/34),95%可信区间(51.92%,83.37%)。②该23例阳性患者中,非霍奇金淋巴瘤(NHL)19例,霍奇金淋巴瘤(HL)4例。NHL患者中B细胞来源免疫荧光单克隆抗体标记抗原出现频率最高的为CD19,CD20;T细胞来源标记抗原出现频率最高的为CD7。而在HL患者中出现频率最高的为CD9。结论:采用流式细胞仪CD45/SSC设门方法,发现非霍奇金淋巴瘤骨髓受累患者免疫表型特征为:B细胞来源:CD19、CD20;T细胞来源:CD7。霍奇金淋巴瘤为:CD9。     

非霍奇金淋巴瘤骨髓受累的免疫表型探讨

目的：探讨非霍奇金淋巴瘤（NHL）骨髓受累的免疫表型特点方法：应用流式细胞术对NHL患者的骨髓标本进行检测，收集受累者的CD分子表达数据。结果：1）在46例受检者中，31例阳性，阳性率67.39％，（95％可信区间53．84％，80．94％）经骨髓形态学检查确证为骨髓受累。2）31例阳性者中，B细胞NHL23例，T细胞NHL7例．NK细胞NHL1例B细胞NHL标记抗原出现频率最高的为CD19，CD20；T细胞NHL标记抗原出现频率最高的为CD7。6例B细胞淋巴瘤同时表达T细胞抗原，1例B细胞淋巴瘤还表达髓系抗原标志。结论：1）NHL骨髓受累免疫表型特点为B细胞来源：CD19、CD20；T细胞来源：CD7。2）T、B细胞抗原同时表达不少见．3）可同时表达髓系抗原．     

双表型急性白血病流式细胞术免疫分型检测结果

 目的　应用流式细胞术（FCM）检测双表型急性白血病（BAL）的免疫表型。方法　采用四色FCM检测23例BAL患者的免疫表型。结果　23例BAL患者中有10例（43.4 %）表达cCD3,16例（69.6 %）表达cCD79a,20例（87.0 %）表达cMPO,14例（60.9 %）表达TdT,19例（82.6 %）表达CD34,20例（87.0 %）表达CD117,同时表达髓系和B系抗原者13例（56.5 %）,均共同表达cCD79a和cMPO;同时表达髓系和T 系抗原者7 例（30.4 %）,均共同表达cCD3和cMPO;同时表达T系和B系抗原者3例（13.04 %）,均共同表达cCD3和cCD79a。结论　cCD3、cCD79a、cMPO为系列特异性抗原标志,对诊断及鉴别BAL具有重要意义,FCM是目前诊断BAL特异可靠的方法,在临床白血病治疗和预后方面有重要的指导意义。     

多参数流式细胞术在淋巴细胞白血病和非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯诊断的应用

背景与目的：骨髓形态学检查可诊断淋巴细胞白血病,结合淋巴结活检可诊断非霍奇金淋巴瘤(non—Hodgkin‘s lymphoma,NHL)侵犯骨髓,但形态学仅是初步的诊断,采用免疫分型而获得肿瘤细胞来源及发育阶段的资料是目前诊治淋巴系统恶性肿瘤所必需的。本研究探讨多参数流式细胞术(flow cytometry,FCM)在淋巴细胞白血病、NHL骨髓侵犯的诊断和免疫分型方面的应用价值。方法：取初治白血病患者骨髓标本11例和NHL患者骨髓侵犯的骨髓标本41例,以及2例分别表现为巨大纵隔肿块和腹部巨大肿块的患者因无法取得病理标本而取骨髓检测的骨髓标本2例。采用B细胞系列抗体、T细胞系列抗体、粒细胞系列抗体,按常规行FCM免疫表型检测,CD45结合两个系列单抗或阶段特异性单抗进行三色免疫荧光染色,CD45／SSC设门后可将骨髓细胞清晰地分出成熟细胞和幼稚细胞群,然后行FSC、SSC、McAb1-FITC、McAb2-PE、CD45-Cychrome五参数分析。结果：11例白血病患者骨髓形态学经FCM的免疫分型获得进一步确诊和分型。41例NHL骨髓侵犯标本免疫表型与其淋巴结病理免疫组化相符合的为80．5％(33／41),不相符的有19．5％(8／41),结合临床、病理、骨髓形态学诊断和骨髓FCM的结果,最终获得明确诊断。2例分别为巨大纵隔肿块和腹块的患者仅靠骨髓形态学和骨髓FCM确诊为T—NHL和B—NHL。结论：多参数FCM能进一步明确白血病和NHL骨髓侵犯的诊断,对急性淋巴细胞白血病和NHL的病例还可同时获得T或B细胞来源和细胞分化早期或后期的参数,有助于临床诊断、鉴别诊断和治疗方案的确定。     

骨髓活检对诊断非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润及分期意义的探讨

目的:探讨骨髓活检切片分析在非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润(NHLBMI)诊断及临床分期方面的价值。方法:对128例非霍奇金淋巴瘤患者行骨髓活检术,分析活检切片。结果:骨髓活检切片中非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润的阳性率为35.9%(46例)。经骨髓活检后,16例Ⅰ～Ⅲ期提升为Ⅳ期,骨髓活检前、后Ⅳ期所占比例有明显差异(P<0.01)。结论:骨髓活检切片分析对非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润的诊断及临床分期具有重要意义。     

系统性间变性大细胞淋巴瘤骨髓累及的临床病理学研究

 目的　探讨系统性间变性大细胞淋巴瘤（S-ALCL）骨髓累及的临床病理学特点、免疫学表型及临床生物学行为。方法　回顾性分析34例S-ALCL病例资料,进行骨髓活检（19例）或涂片（15例）。其中ALK（+）24例,ALK（-）10例。HE染色、免疫组织化学染色观察病理形态及免疫表型,原位杂交法检测EB病毒。结果　6例（17.6 %）S-ALCL存在骨髓累及,均经骨髓活检标本确定,15例患者骨髓涂片中均未见肿瘤累及。ALK（+）ALCL和ALK（-）ALCL骨髓累及的发生率分别为16.7 %（4／24）和20.0 %（2／10）,差异无统计学意义（P＝0.3555）。与无骨髓累及病例比较,骨髓累及病例的年龄、性别分布差异无统计学意义（P值分别为0.8089和0.3085）。骨髓累及者肿瘤细胞以间质性分布为主[83.3 %（5／6）]。生存分析统计提示伴有骨髓累及的患者预后明显差于无骨髓累及者（P＝0.0407）。结论　S-ALCL骨髓累及发生率低,与患者的发病年龄、性别及ALK 蛋白的表达无相关性。伴有骨髓累及的S-ALCL患者临床预后差,骨髓活检在判断S-ALCL预后中有重要意义。     

69例恶性淋巴瘤骨髓侵犯后骨髓象与血象分析

目的了解恶性淋巴瘤骨髓侵犯后骨髓与外周血白细胞之间的关系.方法对69例恶性淋巴瘤具有骨髓侵犯的骨髓细胞分类及外周血白细胞检验结果作回顾性分析.结果 69例恶性淋巴瘤骨髓侵犯者外周血白细胞计数异常33例,分类计数异常35例,骨髓增生正常者19例,增生异常者50例.结论当恶性淋巴瘤发展到骨髓侵犯或淋巴瘤细胞白血病时,外周血白细胞计数和分类计数与骨髓象之间没有绝对的对应关系,但如明确诊断为恶性淋巴瘤时则应把骨髓涂片细胞形态学列为常规检查,如其外周血白细胞形态出现异常,则应高度怀疑有淋巴瘤细胞白血病.     

淋巴瘤侵犯骨髓的骨髓活检病理学诊断研究进展

淋巴瘤侵犯骨髓(lymphomabonemarrowinvolvement,LBMI)主要靠骨髓活检确诊。霍奇金淋巴瘤(Hodgkin蒺slymphoma,HL)、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin蒺slymphoma,NHL)侵犯骨髓各有其不同病理特点。骨髓中瘤细胞的形态特点、分布方式及免疫表型多数与髓外部位一致,少数又可存在差别。本文比较了各型HL、B-NHL、T-NHL的骨髓侵犯病理学特点,并从形态学、免疫组化及淋巴瘤基因重排检测三方面对LBMI的骨髓活检诊断研究进展进行了综述。     

吡柔比星联合COP四周方案治疗侵袭性非霍奇金淋巴瘤骨髓浸润

 目的　观察吡柔比星（THP）联合COP 4周方案（CTOP-28）诱导缓解治疗侵袭性非霍奇金淋巴瘤（NHL）骨髓浸润的近期疗效和患者不良反应。方法　回顾性分析2002年1月至2007年1月收治的初治侵袭性NHL骨髓浸润患者65例,比较CHOP 3周方案（CHOP-21）和CTOP-28方案的近期疗效和不良反应。CHOP-21方案：环磷酰胺750 mg／m2 （第1天）、长春新碱1.4 mg／m2 （最大量2 mg,第1天）、多柔比星50 mg／m2 （第1天）、泼尼松100 mg（第1天至第5天）;CTOP-28方案：环磷酰胺750 mg／m2 （第1、15天）、长春新碱1.4 mg／m2 （最大量2mg, 第1、8、15、22天）、吡柔比星25 mg／m2 （第1、2、15、16天）、泼尼松40 mg／m2 （第1天至第28天）。结果　CHOP-21方案组30例完全缓解12例（40 %）,CTOP-28方案组35例完全缓解28例（80 %）,后者显著高于前者（P＜0.05）。CTOP-28方案Ⅲ、Ⅳ度血液毒性的发生率（100.0 %）显著高于CHOP-21方案（50.0 %）（P＜0.05）;CTOP-28方案心脏毒性发生率（8.57 %）与CHOP-21方案相当（10.0 %）（P＞0.05）,均为Ⅰ、Ⅱ度毒性;胃肠毒性和肝肾脏毒性两种方案相当,均为Ⅰ、Ⅱ度;两种方案均未出现治疗相关死亡。结论　THP联合COP 4周方案是治疗初始侵袭性NHL骨髓浸润的高效、安全的方法。     

18F-FDG PET-CT与磁共振成像在评估淋巴瘤骨髓浸润中的价值

淋巴瘤是血液系统常见的恶性肿瘤之一,淋巴瘤是否有骨髓浸润在淋巴瘤的诊断、分期、尤其化疗早期疗效评估方面具有重要的价值.目前临床上仍主要依据骨髓穿刺活组织检查诊断淋巴瘤骨髓浸润,但常因取材的局限性出现假阴性,延误治疗.近年影像技术日益发展、完善,为淋巴瘤骨髓浸润提供了新的检测手段,提高了诊断的敏感性和特异性.文章对磁共振成像(MRI)、18F-FDG PET-CT这两种新的影像检查方法在淋巴瘤骨髓浸润方面的研究作一综述.     

The value of bone marrow biopsy for staging of patients with primary CNS lymphoma

BackgroundIn patients with presumed primary CNS lymphoma (PCNSL), a systemic manifestation is found only in a small minority. Although bone marrow biopsy (BMB) is recommended for staging, its diagnostic value is unclear.MethodsA retrospective analysis of 392 patients with presumed PCNSL from 3 university hospitals and 33 patients with secondary CNS lymphoma (SCNSL) and initial CNS involvement from a multicenter Germany-wide prospective registry was performed.ResultsA BMB was performed and documented in 320/392 patients with presumed PCNSL; 23 had pathologic results. One harbored the same lymphoma in the brain and bone marrow (BM), 22 showed findings in BM discordant to the histology of brain lymphoma; n = 12 harbored a low-grade lymphoma in the BM, the other showed B-cell proliferation but no proof of lymphoma (n = 5), monoclonal B cells (n = 3), or abnormalities not B-cell-associated (n = 2). In the group of SCNSL with initial CNS manifestation, 32/33 patients underwent BMB; 7 were documented with bone marrow involvement (BMI); 1 had concordant results in the brain and BM with no other systemic manifestation. Six had additional systemic lymphoma manifestations apart from the brain and BM.ConclusionsIn only 2 out of 352 (0.6%) patients with CNS lymphoma (320 presumed PCNSL and 32 SCNSL), BMB had an impact on diagnosis and treatment. While collected in a selected cohort, these findings challenge the value of BMB as part of routine staging in presumed PCNSL.