p63、角蛋白及肌动蛋白在乳腺导管增生性病变中的表达及应用价值

目的 探讨p63、角蛋白及肌动蛋白在乳腺增生性病变中的表达,并比较它们及不同类型细胞角蛋白(CK5/6、34βE12和CK8)在乳腺导管增生性病变诊断及鉴别诊断中的应用价值.方法 对24例普通型导管增生(UDH)、20例不典型导管增生(ADH)、35例导管原位癌(DOS)、52例浸润性导管癌(IDC)患者及16例正常乳腺对照者的组织进行p63、CK5/6、34βE12、CK8、Actin免疫组化染色.结果 正常乳腺、ADH、DCIS、IDC腺体基底膜侧及癌巢周围肌上皮中p63、Actin、CK5/6、34βE12连续和(或)不连续表达,表达率分别为87.50％、70.00％、95.00％、0,100％、75.00％、94.30％、0,93.75％、65.00％、94.30％、0,87.50％、75.00％、42.86％、0,四种抗体在IDC和前三者之间表达差异有统计学意义(P均＜0.05);CK8表达均为0;在UDH、ADH、DCIS、IDC增生腺上皮细胞中CK5/6、34βE12表达率分别为95.80％、20.00％、2.90％、9.62％和91.20％、30.00％、22.90％、13.46％,二者在UDH和其他三组表达差异有统计学意义(P均＜0.05);CK8表达分别为95.8％、100％、94.3％、90.3％,Actin和p63表达均为0,各组之间表达差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 联合检测p63、角蛋白及肌动蛋白有助于乳腺导管增生性病变的鉴别诊断,其中p63和CK5/6分别优于Actin和34βE12; CK5/6优于34βE12,有助于UDH和ADH/DCIS鉴别诊断,UDH细胞为多克隆增生,包括定向干细胞、腺中间细胞和腺终端细胞等.ADH、DCIS、IDC表现为单克隆增生.     

3p、9p微卫星DNA异常与肺癌早期诊断的研究

目的研究3p、9p微卫星DNA异常在肺癌早期诊断中的价值。方法用PCR—银染法从外周血检测原发性肺癌病人、肺部良性病人及正常人3p14、3p21、9p21上的三个微卫星位点（D3S1228、D3S1029、D9S171）的异常表现。结果肺癌病人血清中DNA含量多于良性病人及正常人。肺癌组各微卫星位点的MSI或LOH异常的阳性率在43。50％之间（n=105）．以D3S1029最高。达到49．6％。三个位点中至少一个位点出现微卫星异常为76．2％，其中有45．7％呈多位点的改变。与肺良性病变组（n=97）及健康对照组（n=7）均有显著差异（P〈0．05）。在肺癌组中，各个微卫星位点的异常表现与肺癌临床分期和临床病理类型之间无明显差异（P〉0．05）。结论3p、9p微卫星DNA异常和肺癌分期无关，可以作为一项肺癌早期基因检测的新途径。不同微卫星位点出现异常表现的具体形式有所不同。多位点联合检测可以提高诊断的敏感性和特异性。     

急性白血病p16基因微卫星不稳定性及杂和性缺失的研究

目的分析急性白血病（AL）患者p16基因连锁的微卫星不稳定性（MSI）和杂和性缺失（LOH）,了解p16基因改变与AL发生的关系。方法采用多重PCR方法检测53例AL患者骨髓及口腔黏膜细胞标本的p16基因连锁的3个微卫星位点（D9S162、D9S1748、D9S171）,观察其MSI及LOH情况。结果53例AL患者中,MSI检出率为43．4％（23／53）;位于9p21的p16基因连锁的微卫星D9S162、D9S1748、D9S171的LOH发生率分别为0（0／53）、5．7％（3／53）和9．4％（5／53）,MSI发生率分别为13．2％（7／53）、7．6％（4／53）和7．6％（4／53）。结论AL患者p16基因连锁微卫星均可检测到高频率的MSI和LOH,说明p16基因突变与AL发生、发展有关。     

食管癌组织微卫星DNA序列不稳定性和杂合性缺失及预后的研究

目的探讨微卫星DNA序列不稳定性（MSI）和杂合性缺失（LOH）与人食管癌发生、临床病理特征及预后的关系。方法应用聚合酶链反应（PCR）和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对30例人食管癌中MSI及LOH阳性情况进行研究,术后随访5年,了解预后。结果D3S1067位点MSI发生检出频率较高,为26.7%;D18S58位点MSI阳性率为20%。MSI的发生在食管小细胞癌中较食管鳞癌为高（P〉0.05）;MSI、LOH与肿瘤的病理分级、PTNM分期、有无区域淋巴结转移和浸润深度无关（P〉0.05）。结论食管癌在3p和18q染色体位点均存在微卫星不稳定现象;D3S1067和D18S58二个位点上MSI与食管癌的临床病理类型均相关;研究未发现这两个位点MSI、LOH与食管癌的临床分期、细胞分化程度、癌组织浸润深度和有无区域淋巴结转移等参数相关;3p位点基因的改变在食管鳞癌发生过程中具有较重要意义。     

肝癌患者血浆循环DNA杂合性缺失的检测及其临床意义

目的检测HCC患者血浆循环DNA杂合性缺失（LOH），并探讨将其作为有关临床预测标记的可能性。方法选择位于染色体8p上3个具有高度多态性的微卫星标记D8S277、D8S298和D8S1771，对62份HCC患者血浆循环DNA进行LOH检测，并进一步探讨LOH与患者HBsAg表达、是否肝硬化、血清AFP水平、肿瘤大小及细胞分化程度和有无肝内转移等临床病理特征之间的关系。结果在62份HCC患者血浆循环DNA标本中，36份（58．1％）在1个或多个位点发生LOH，D8S277、D8S298和D8S1771位点杂合度分别为74．2％（46／62）、75．8％（47／62）和69．4％（43／62），LOH频率分别为32．6％（15／46）、44．7％（21／47）和46．5％（20／43）。D8S298位点有肝内转移患者血浆循环DNA标本的LOH频率（62．5％）明显高于无肝内转移者（26．1％），差异有统计学意义（P〈0．05）；其他临床病理特征与3个位点上的LOH频率无明显相关。结论血浆循环DNA中D8S298位点LOH有可能成为HCC术后转移复发及预后的一个潜在的预测标记。     

老年人食管鳞状上皮化生和不典型增生及腺癌序列微卫星改变

目的评估老年人食管鳞状上皮和化生-不典型增生-腺癌的微卫星变化。方法应用稀释性聚合酶链反应（PCR）方法检测存档手术切除的食管癌标本中的D2S123、D3S1616、D3S1300、BATRII、D5S346、D17S787和D18S61位点微卫星的变化。结果在非稀释DNA中，17例食管鳞状细胞癌和12例腺癌微卫星不稳定性（MSI）的频率分别是52．9％（9例）和41．7％（5例），杂合性丢失（LOH）的频率分别是23．5％（4例）和16．7％（2例），两者差异均无统计学意义（P〉0．05）。在8例食管鳞状上皮和化生-不典型增生-腺癌组织稀释DNA中，MSI和LOH频繁出现，与其非稀释DNA的结果比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论MSI和LOH在上述组织中普遍存在，它们可能是食管腺癌发生、发展的早期事件。     

促凋亡蛋白BAD在乳腺导管增生及乳腺癌组织中表达的研究

目的检测促凋亡蛋白BAD在人乳腺导管增生及乳腺癌组织中表达,探讨其在乳腺癌癌变过程中的作用及意义.方法采用免疫组织化学S-P法,检测131例乳腺导管增生及乳腺癌组织中促凋亡蛋白BAD的表达.结果BAD蛋白在正常乳腺组织中的阳性率为33.3%（3/9）.从普通导管增生、轻中度不典型导管增生、重度不典型增生及导管原位癌到浸润性导管癌组织,BAD蛋白表达阳性率呈递增趋势,在乳腺普通导管增生和重度不典型增生及原位癌组间阳性表达率差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论促凋亡蛋白BAD蛋白表达在乳腺癌癌变过程中呈递增趋势;BAD蛋白表达水平与组织学分级有关,组织学分级越低,其蛋白表达阳性率越高.     

乳腺浸润性导管癌组织中BRCA1、Ki-67的表达变化及意义

目的观察乳腺浸润性导管癌（IDC）组织中乳腺癌易感基因1（BRCA1）、肿瘤增殖相关基因（Ki-67）的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测46例IDC组织中的BRCA1、Ki-67蛋白。结果IDC组织中BRCA1蛋白阳性19例（41．3％）,Ki-67蛋白阳性34例（74．9％）;BRCA1、Ki-67蛋白表达与IDC淋巴结转移和TNM分期有关（P均〈0．05）;相关分析显示,IDC组织中BRCA1、Ki-67蛋白表达呈负相关（r=-0．27,P〈0．01）。结论IDC组织中BRCA1低表达、Ki-67高表达,二者在IDC的发生发展中发挥重要作用。     

乳腺浸润性导管癌组织中Ki-67、CK34βE12的表达变化及意义

目的观察乳腺浸润性导管癌（IDC）组织中Ki-67、细胞角蛋白34βE12（CK34βE12）的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测153例IDC组织（观察组）及30例乳腺纤维腺瘤组织（对照组）中的Ki-67、CK34βE12。结果观察组Ki-67、CK34βE12阳性率为68．0％（104／153）、41．2％（63／153）,对照组分别为0、73．3％（22／30）,两组比较,P均〈0．05。Ki-67表达与IDC的组织分级、pTNM分期、C-erbB-2、ER、PR有关（P均〈0．05）,CK34βE12表达与IDC淋巴结转移、组织学分级、pTNM分期、C—erbB-2、ER、PR有关（P均〈0．05）;IDC组织中Ki-67、CK34βE12表达呈负相关（r=-0．223,P〈0．01）。结论IDC组织中Ki-67高表达、CK34βE12低表达,二者可能在IDC的发生发展过程中发挥重要作用。     

Cyclin D1在乳腺肿瘤组织中的表达及其与基因扩增的相关性

目的研究细胞周期蛋白（Cyclin D1）表达在乳腺肿瘤发生中的作用及影响因素。方法采用免疫组化染色法检测122例乳腺恶性肿瘤和良性乳腺增生标本Cyclin D1表达；Southern杂交方法检测Cyclin D1基因变异。结果40例良性乳腺增生组织均未观察到Cyclin D1表达，40例浸润性导管癌组织、早期乳腺癌和淋巴结转移病变组织阳性率分别为55．0％（22／40）、52．0％（22／42）和53．3％（8／15）；25例浸润性导管癌组织Cyclin D1基因扩增率为16．0％，明显低于其蛋白表达率。结论Cyclin D1表达在乳腺癌发病早期即发挥作用，其在肿瘤发生、发展过程中的作用尚受基因扩增以外因素的影响。     

KAI1、OPN、MMP-9在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的 进一步探讨乳腺浸润性导管癌的发生机制。方法选择手术切除的原发性乳腺浸润性导管癌标本66例（观察组）,另取距癌灶〈5cm正常乳腺组织30例（对照组）,采用免疫组化SP法检测其KAI1基因蛋白、骨桥蛋白（OPN）、基质金属蛋白酶（MMP）-9表达情况,采用Spearman等级相关分析法分析三指标间及与乳腺浸润性导管癌病理特征的关系。结果观察组与对照组KAI1阳性表达率分别为45．45％、83．33％,OPN阳性表达率分别为74．24％、33．33％,MMP-9阳性表达率分别为63．64％、40．00％,两两比较P均（0．05;三者的表达与乳腺浸润性导管癌淋巴结转移、肿瘤复发及5a生存率密切相关;KAI1与OPN、MMP-9呈负相关,OPN与MMP-9呈正相关。结论KAI1、OPN、MMP-9异常表达在乳腺浸润性导管癌发生、发展中起重要作用。     

浸润性乳腺癌组织中14-3-3σ、p73α蛋白表达及临床意义

目的探讨表皮细胞特异性标志物14-3-3σ、p73α蛋白在浸润性乳腺癌发生发展中的作用。方法选择我院手术切除的浸润性乳腺癌组织标本94份（浸润癌组）,导管原位癌15份（原位癌组）,上皮不典型增生15份（不典型增生组）,导管内乳头状瘤15份（乳头状瘤组）,乳腺增生症20份（增生症组）,乳腺癌旁5 cm组织10份（癌旁组）,采用免疫组化PV-9000两步法检测各组14-3-3σ、p73α蛋白表达情况,并分析两者间及与浸润性乳腺癌临床病理特征的相关性。结果浸润癌组14-3-3σ蛋白阳性率明显低于其余各组,p73α蛋白阳性率明显高于其余各组,P均〈0.05。14-3-3σ蛋白阳性表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移、HER-2受体、组织学分级、TNM分期相关,p73α蛋白与腋窝淋巴结转移、ER受体、PR受体、TNM分期相关。14-3-3σ与p73α蛋白表达呈负相关。结论 14-3-3σ和p73α蛋白与浸润性乳腺癌的发生发展相关,两者联合检测可为乳腺癌早期诊断和治疗提供参考。     

Single institute experience of intraoperative radiation therapy in early-stage breast cancer

Intraoperative radiation therapy (IORT) is an alternative to whole breast irradiation in selected early-stage breast cancer patients. In this single institute analysis, we report the preliminary results of IORT given by Axxent Electronic Brachytherapy (eBT) system.Patients treated with lumpectomy and eBT within a minimum follow-up period of 12 months were analyzed. Eligible criteria include being over the age of 45, having unifocal invasive ductal carcinoma (IDC) or ductal carcinoma in situ <3 cm in diameter, not exhibiting lymph node involvement on preoperative images, and negative sentinel lymph node biopsy. The eBT was given by preloaded radiation plans to deliver a single fraction of 20 Gray (Gy) right after lumpectomy.From January 2016 to April 2019, a total of 103 patients were collected. There were 78 patients with IDC and 25 with ductal carcinoma in situ. At a mean follow-up time of 31.1 months (range, 14.5–54.0 months), the local control rate was 98.1%. Two IDC patients had tumor recurrences (1 local and 1 regional failure). Post-IORT radiotherapy was given to 4 patients. There were no cancer related deaths, no distant metastases, and treatment side effects greater than grade 3 documented.We report the largest single institute analysis using the eBT system in Taiwan. The low recurrence and complication rates at a 31.1 month follow-up time support the use of the eBT system in selected early-stage breast cancer patients.     

肺癌和癌前病变组织中FHIT、MSH2、p21蛋白表达及意义

目的探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）、mutS同种组织蛋白2（MSH2）及p21蛋白表达在肺癌发生、发展中的意义。方法应用免疫组化SP法检测89份原发性肺癌组织（原发癌组）、12份淋巴结转移性肺癌组织（转移癌组）、12份肺癌癌前病变组织（癌前变组）及10份正常肺组织（对照组）中FHIT、MSH2及p21蛋白表达情况,分析各指标间相关性及其与肺癌临床病理参数的关系。结果与对照组比较,FHIT、MSH2及p21蛋白在其他三组中表达均下调（P〈0．05）;FHIT、MSH2蛋白表达与肺癌组织学类型、分化程度相关,p21蛋白表达与肺癌分化程度、临床分期及有无淋巴结转移有关（P均〈0．05）;FHIT和MSH2蛋白在原发癌组表达呈显著正相关（P〈0．01）,但均与p21蛋白表达无明显相关。结论FHIT、MSH2及p21蛋白与肺癌发生、发展有关,联合检测三项指标可为临床预测疾病进展提供依据。     

Loss of heterozygosity and microsatellite instabilities of fragile histidine triad gene in gastric carcinoma

AIM: To detect the loss of heterozygosity (LOH) and microsatellite instabilities (MSI) of fragile histidine triad (FHIT) gene in gastric carcinoma and to study their association with the clinical pathological characteristics of gastric carcinoma. METHODS: LOH and MSI of FHIT gene were detected at four microsaterllite loci D3SI3H, D3S4I03, D3SI48I and D3S1234 using PCR in matched normal and cancerous tissues from 50 patients with primary gastric cancer. RESULTS: The average frequency of LOH and MSI of FHIT gene in gastric cancer was 32.4% and 26.4% respectively. LOH and MSI of FHIT gene in gastric cancer had no association with histological, Borrmann, and Lauren's classification. LOH of FHIT gene in gastric cancer was related to invasive depth. The frequency of FHIT LOH in gastric cancer with serosa-penetration was obviously higher than that in gastric cancer without serosa-penetration (73.5% vs 37.5%, P < 0.05). MSI of FHIT gene in gastric cancer was associated with the lymph node metastasis. The frequency of MSI in gastric cancer without lymph node metastasis was significantly higher than that in gastric cancer with lymph node metastasis (66.7% vs 34.3%, P < 0.05). CONCLUSION: LOH of FHIT gene is correlated with invasive depth of gastric carcinoma. MSI of FHIT gene is correlated with lymph node metastases. LOH and MSI of FHIT gene play an important role in carcinogenesis of gastric cancer.     

VEGF-C和VEGFR-3在非小细胞肺癌癌组织及癌旁组织中的表达及意义

目的通过对非小细胞肺癌患者肺癌组织中VEGF-C水平的表达以及对癌旁组织中淋巴管密度的测定来探讨VEGF-C和VEGFR-3在NSCLC肿瘤淋巴转移的意义。方法对55例无手术禁忌的NSCLC患者施行肺癌根治术,获得肺癌肿瘤组织,癌旁组织以及远离肿瘤的正常组织,应用VEGF-C抗体SP免疫组织化学等技术染色观察VEGF-C在细胞浆中的表达以及应用VEGFR-3抗体SP法标法淋巴管计数癌周组织中的微淋巴管密度（LMVD）。结果 （1）55例NSCLC患者癌组织中,40例VEGF-C呈阳性表达（占72.72%）,对照组正常组织中VEGF-C阳性仅5例（阳性率9.56%）,两者有显著差异（P〈0.005）。（2）55例癌旁组织中LMVD值为21.20±7.22个,而正常组织中LMVD值为9.48±5.52个,两者有显著差异（P〈0.01）。（3）试验组有肿瘤淋巴结转移者共计35例,其癌组织中VEGF-C阳性者为32例,3例为阴性;无肿瘤淋巴结转移者共计20例,12例阴性,8例阳性表达,两者有显著差异（P〈0.005）。（4）肺癌淋巴结转移者35例中,癌旁组织中LMVD值为27.42±6.38,比没有肺癌淋巴结转移者LMVD15.10±2.72亦显著增高（P〈0.05）。结论非小细胞肺癌组织中VEGF-C的高表达与癌旁组织淋巴管的高表达有密切关系,VEGFR-3的阳性脉管数与肺癌淋巴结转移相关联,可作为肺癌诱导生成淋巴管研究的量化指标。肿瘤组织的VEGF-C表达水平和对癌周组织淋巴管密度测定有助于对肺癌患者预后的判断和治疗方案的评价。     

LOX、VEGF在胃癌进展中的作用关系

目的探讨赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)、血管内皮因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在胃癌进展中的作用关系。方法收集手术切除的新鲜胃癌组织65例,采用Western blotting方法检测胃癌组织中的LOX、VEGF蛋白表达,并比较二者在T1T2与T3T4胃癌组织、有无淋巴结转移胃癌组织中的关系。结果 (1)LOX在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6003±0.1279,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4278±0.1437,差异有统计学意义(P0.05);(2)VEGF在T3T4胃癌中的相对表达量为0.6975±0.1639,在T1T2胃癌中的相对表达量为0.4263±0.1128,差异有统计学意义(P0.05);(3)LOX在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6827±0.1987,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4235±0.1763,差异有统计学意义(P0.05);(4)VEGF在伴有淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.6769±0.1659,在无淋巴结转移的胃癌中的相对表达量为0.4128±0.1471,差异有统计学意义(P0.05);(5)在T1T2和T3T4胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平呈正相关(r=0.735,P0.05),在有淋巴结转移和无淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平也呈正相关(r=0.914,P0.05)。结论 T3T4胃癌中LOX与VEGF的表达水平明显高于T1T2胃癌,在有淋巴结转移的胃癌组织中,LOX与VEGF的表达水平明显高于无淋巴结转移的胃癌组织中,且LOX与VEGF表达呈正相关;LOX与VEGF在胃癌的进展中有促进作用,并且相互协同。     

p73和p51基因在结直肠癌中的表达和意义

背景：p53基因是一种肿瘤抑制基因，其家族成员p73和p51在结构上与p53具有高度同源性，影响细胞转录和凋亡的功能与p53相似。目的：研究p73和p51基因在结直肠癌中的表达及其与细胞凋亡和肿瘤临床病理特征的关系，探讨两者在结直肠癌发生、发展中的可能作用。方法：以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测60例结直肠癌组织和相应癌旁组织中p73、p51mRNA表达，以原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡。结果：结直肠癌组织p73、p51AmRNA表达阳性率显著高于相应癌旁组织（p73：71．7％对5．0％，P〈0．01：p51A：46．7％对11．7％，P〈0．01）：p51B mRNA在结直肠癌组织与相应癌旁组织中的相对表达量无明显差异（0．7318±0．3628对0．6836±0．3516，P〉0．05）。p73、p51A mRNA表达阳性者肿瘤细胞凋亡指数分别显著低于p73、p51A mRNA表达阴性者（p73：3．2％±2．5％对5．5％±2．8％．P=0．003；p51A：2．6％±2．3％对4．9％±2．7％，P=0．001）。p73mRNA表达与结直肠癌的分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关（P〈0．05），p51A mRNA表达仅与淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论：结直肠癌中p73、p51A基因表达上调，两者可能通过抑制肿瘤细胞凋亡而参与了结直肠癌的发生、发展。p73过表达可能与结直肠癌预后不良有关。     

VEGFR-3信号途径相关蛋白在胃癌中的表达及意义

目的研究血管内皮生长因子受体（VEGFR）-3信号途径相关蛋白C、D（VEGF—C、VEGF—D）在胃癌中的表达并探讨其与淋巴结转移的关系。方法80例胃癌手术病例分为淋巴结阳性组（n=48）和淋巴结阴性组（n=32）,另设胃溃疡病例为对照组（n=10）。采用ELISA技术进行血清VEGF—C和VEGF-D水平检测,然后应用免疫组织化学EnVisionTM两步法检测胃溃疡组织和胃癌标本VEGF—C、VEGF-D表达。结果胃癌患者血清VEGF-C和VEGF—D水平明显高于对照组（P〈0．05）,胃癌患者血清VEGF-C水平与淋巴结转移有关（P〈0．05）;胃癌组织中VEGF—C、VEGF—D阳性表达率均高于对照组（P〈0．05）,伴淋巴结转移的胃癌组织VEGF-C阳性表达率较无淋巴结转移者更高（P〈0．01）。结论血清VEGF—C可作为胃癌的标记物,对术前判定淋巴结转移具有一定的临床价值。