脱钙液的组分与处理时间对骨髓活检组织HE和免疫组化染色的影响

目的：探讨不同组分的脱钙液及脱钙时间对骨髓活检组织HE染色和免疫组化染色效果的影响。方法：收集36例骨髓活检穿刺组织，分为10%硝酸甲醛液(A液)、10%盐酸甲醛液(B液)和30%甲酸甲醛液(C液)3组，每组12例，分别观察各组的脱钙时间。另收集5例骨髓活检穿刺组织，将同一例标本分成两份，观察不同组分的脱钙液和脱钙处理时间对HE染色和免疫组化染色效果的影响。结果：A液、B液的脱钙时间比C液短；3种方法的HE染色效果均较好；而C液脱钙2 h的Ki67免疫组化染色效果好，但其他方法的Ki67免疫组化染色效果欠佳。结论：采用30%甲酸甲醛液处理2 h的脱钙法，实验操作简便，HE染色和免疫组化染色效果较为满意。     

Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用

目的：探讨Jy-Ⅱ脱钙液在骨髓活检中的应用。方法收集200例骨髓活检穿刺组织,选取其中150例采用Jy-Ⅱ脱钙液脱钙,同时选取50例采用5%的硝酸脱钙液脱钙做对照观察,脱钙后分别做HE染色、特殊染色（Go-mori氏网状纤维染色）和免疫组织化学染色（MaxVisionTM法CD38染色）,观察Jy-Ⅱ脱钙液对骨髓活检组织结构的保存及染色情况。结果经Jy-Ⅱ脱钙液脱钙后骨髓活检组织结构保持完整,完整率达98.67%。镜下形态结构清晰,组织结构清晰率达100.00%,染色情况良好,脱钙时间短,为150 min。脱钙完全,效果好。经5%的硝酸脱钙液脱钙后的骨髓活检组织,结构保持不完整,完整率达60.00%,镜下形态结构欠清晰,清晰率达52.00%,染色情况欠佳,脱钙时间长,长达240 min,脱钙不完全,效果欠佳（P〈0.05）。结论 Jy-Ⅱ脱钙液效果明显优于5%的硝酸脱钙液,骨髓活检组织结构保持良好,操作简便,脱钙时间短,在脱钙过程中无需更换脱钙液,HE染色、特殊染色、免疫组化染色效果也较满意,实用性强,不失为一种良好的脱钙液,值得推广     

改良混合脱钙液在骨髓活检组织中的应用

目的 探讨改良混合脱钙液在临床骨髓组织活检中的应用。方法 选取临床骨髓穿刺活检病例188例,分别采用改良混合脱钙液（改良混合脱钙液组,146例）与传统硝酸类脱钙液（硝酸类脱钙液组,42例）在常温下进行脱钙处理,比较两组脱钙的时间、制成切片的质量、HE染色效果及免疫组化表型表达情况。结果 改良混合脱钙液的脱钙时间短于硝酸类脱钙液,改良混合脱钙液的切片质量良好为97.9%（143/146）,HE染色效果良好为98.6%（144/146）;硝酸类脱钙液切片质量良好为61.9%（26/42）,HE染色效果良好为54.8%（23/42）。改良混合脱钙液组标本免疫组化表达效果优于硝酸类脱钙液组。结论 改良混合脱钙液效果良好、脱钙时间短、染色效果佳、组织抗原不丢失、实用性强,能很好地满足临床骨髓组织活检的脱钙需要。     

改良骨髓脱钙液对免疫组化染色结果的影响

目的 探讨酸脱钙液对骨髓活检组织免疫组化染色的影响.方法 对445例骨髓活检组织经混合酸脱钙及EDTA双重脱钙固定、免疫组化染色.结果 组织结构、细胞形态清晰完整,免疫组化染色定位准确、背景清晰.结论 混合脱钙液与EDTA联合应用有助于免疫组化染色,是骨髓活检病理诊断的有效方法.     

不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色效果的对比研究

目的:探讨不同脱钙液对骨髓组织切片HE染色质量的影响。方法:选用10%乙二胺四乙酸钠(EDTA)、HA S复合酸脱钙液和10%硝酸3种不同的脱钙液,分成A、B、C 3组用于脱钙,通过记录脱钙时间,观察HE染色效果,评价室温下(20~28℃)不同脱钙液对骨髓组织切片制作的影响。结果:A组脱钙液所制切片染色效果良好,但脱钙速度缓慢,所需时间较长;B组脱钙液脱钙速度快,所制切片染色好;C组脱钙液所制切片的染色强度和对比度均不如前两种脱钙液。结论:在制作骨髓组织切片时,EDTA脱钙液和HA S复合酸脱钙液所制切片均能取得良好的染色效果,但EDTA脱钙液脱钙周期过长;HA S复合酸脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合于临床速检工作;硝酸脱钙液组染色效果较差。     

改良硝酸脱钙方法的研究及应用

目的探讨低温微波-硝酸快速脱钙方法对骨、牙齿及其他钙化组织的脱钙效果。方法实验组采用＂低温微波-硝酸快速脱钙＂方法脱钙,对照组采用室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙,硝酸脱钙液的浓度均为10%。应用HE染色,显微镜下观察染色效果。结果低温微波-硝酸快速脱钙方法与室温（20℃）硝酸脱钙液脱钙比较,前者能得到一张高质量的HE切片。结论低温微波-硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

3种脱钙液对牙体牙周联合切片H-E染色效果的对比

目的对不同脱钙液在牙体牙周联合组织HE染色切片的效果进行比较，并初步探讨了乙二胺四乙酸二钠（EDTA）-微波技术在牙体牙周联合组织切片脱钙过程中的应用。方法取成年健康Beagle犬下颌骨牙体牙周联合组织做为标本，采用10％硝酸溶液、Krinstensen’S液、EDTA-微波辐射3种不同的脱钙方法进行脱钙，在完成组织脱钙后进行H—E染色，并在显微镜下观察组织结构及染色效果。结果EDTA-微波辐射完成组织脱钙约需53h，H—E染色效果良好，牙髓细胞、成牙本质细胞、牙周膜细胞和牙本质小管组织结构清晰；Krinstens—en’s液完成组织脱钙约需1500h，H—E染色效果较好，组织结构较清晰；10％硝酸溶液完成组织脱钙约需360h，H—E染色对比度差，组织结构模糊不清。结论应用EDTA-微波辐射技术能在相对较短的时间内完成牙体牙周联合组织的脱钙，并在H—E染色切片中较好地保存了牙体牙周组织的结构。     

含骨组织的蜡块脱钙方法

在临床病理技术实践中 ,由于骨组织中含有钙盐成分 ,具有脆、硬特点 ,常常会遇到骨组织脱钙不充分或混有碎骨的蜡块组织的制片。因此需要特殊处理 ,包括固定、脱钙、中和酸、充分水洗才能制成切片[1] ,以配合临床快速发出病理报告。但易出现切片撕开或碎裂 ,损伤刀刃 ,不能形成完整切片 ,或在染色过程中脱片 ,使制片失败。如果在经上述处理形成的组织蜡块的表达法进行二次脱钙法 ,进行补救处理 ,将取得较为满意效果。1　材料与方法1 1　标本来源　蜡块取自沈阳医学院附属中心医院病理科近年来骨组织蜡块。A组为脱钙充分的蜡块 10块 ,B组为…     

临床病理检验中不同骨组织脱钙液效果的比较

目的 对两种脱钙方法进行比较,获得简单、便捷、快速适用于临床病理制片的脱钙方法. 方法 观察两种脱钙液:5％硝酸脱钙液(硝酸5ml加入95 ml蒸馏水)和快速脱钙液(含36％-38％盐酸8ml、冰醋酸5ml、水杨酸10 g、蒸馏水87ml),在常温及微波条件下对骨组织脱钙及HE切片染色效果的影响. 结果 常温条件下,5％硝酸使组织结构有些破坏,染色效果不佳.微波条件下,使用快速脱钙液对骨组织结构损伤小,染色效果佳,适合于临床病理的骨组织制片. 结论 标本经快速脱钙液处理后,其切片质量大大提高并远远优于普通脱钙液.     

骨及钙化组织脱钙法的比较

目的：探讨骨及钙化组织的脱钙方法。方法采用三种不同方法处理相同的骨及钙化组织,甲组先将骨及钙化组织切成薄片,用甲酸氯化铝脱钙固定液彻底脱钙,流水冲洗,碳酸铝饱和溶液中和酸;乙组先用甲酸氯化铝脱钙固定液处理大块骨及钙化组织至彻底脱钙,再将骨及钙化组织切成薄片,碳酸铝饱和溶液中和酸;丙组按传统方法脱钙。三组组织脱钙后均常规制作HE切片,并行CD68和TTF-1免疫组化检测,比较三种方法的脱钙时间、HE染色和免疫组化检测结果。结果甲组脱钙时间短、切片完整、组织结构清晰、染色对比鲜明、长期保存不易褪色、免疫组化阳性信号正常,各项结果均优于乙组和丙组。结论甲酸氯化铝脱钙固定液处理骨及钙化组织,脱钙时间短,切片质量、染色质量、免疫组化质量好,切片长期保存不易褪色,值得推广。     

骨组织病理制片三种脱钙液的比较

目的:比较三种骨组织脱钙液的脱钙效果,以找到一种更加高效,简便快捷的方法应用于临床。方法:选取各种类型的骨的骨干、骨端骨皮质和骨髓质120份,分成A,B,C三组,分别用A,B,C三种脱钙液在常温下进行脱钙处理,记录脱钙的时间。最后比较三组样本的切片的质量及染色效果。结果:C组脱钙液的脱钙时间短于B组(t=8.67,P<0.05),B组脱钙时间短于A组(t=6.78,P<0.05)。另外,C组的切片质量良好占95%,HE染色效果良好的占95%;B组切片质量良好占80%,HE染色效果良好的占77.5%;A组切片质量良好占70%,HE染色效果良好的占70%。结论:三种脱钙液的比较,C液的效果是最好的,脱钙时间最短,染色效果最好。     

骨髓组织制片和胶原与网状纤维复合染色的应用

在病理活检组织中 ,骨髓穿刺标本的制片和特殊染色要求较高。为适应临床诊断和研究工作的需要 ,我们对组织制片和染色方法进行改进 ,提高组织固定液的浓度 ,以加强对组织细胞的渗透能力 ;选用酸和醛脱钙液 ,以减少对骨髓的损害程度 ,控制组织脱水、透明和浸蜡时间 ,提高制片质量。为了更好地证明骨髓纤维化中含有两种纤维成分 ,我们改进了双重染色法 ,能够较好地同时显示胶原和网状纤维成分 ,其色彩鲜艳、对比清晰 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　组织制片方法1.1.1　组织固定与脱钙　选用 15 %中性甲醛液固定 3 h,使组织得到及时固定 ,组…     

"低温微波-硝酸快速脱钙"技术研究及应用

目的 探讨低温微波-硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法 根据实验条件分为4组：①低温(10℃)微波硝酸；②室温(20℃)微波硝酸；③室温(20℃)硝酸，硝酸脱钙液的浓度分别是5％、8％、10％和13％；④10％乙烯二胺四乙酸钠(EDTA)脱钙液。应用免疫组织化学LSAB染色，光镜观察免疫组化染色结果。结果 以硝酸作为脱钙剂时，①组和④组的阳性细胞相近，均显著高于②、③组，经8％和10％硝酸脱钙的免疫组化染色阳性细胞明显多于5％和13％的硝酸。低温微波硝酸快速脱钙技术能显著缩短脱钙时间。结论 低温微波．硝酸快速脱钙能在短时间内获得满意的染色效果。     

骨组织电镜脱钙技术在免疫组化中的应用

骨组织的免疫组化一直是病理技术中的一大难题。由于骨组织中60％以上为钙盐组成的羟基磷灰石结晶，因而骨组织固定、脱钙都是制备标本的重要环节。一些强酸如盐酸、硝酸等虽能快速有效除去骨组织中的钙盐，但对其中的抗原蛋白也产生了致命性破坏；近几年发展的微波辅助EDTA脱钙技术，虽然可实现较好地保护组织抗原性且快速的效果，但操作程序复杂。骨组织的电镜制片技术对组织固定与脱钙要求均远高于常规染色与免疫组化，其脱钙液与固定液均与其他方法有较大差别，本实验用该方法进行骨组织免疫组化，取得了较理想的效果，现报道如下。     

三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响

目的探讨三种脱钙液对骨组织免疫组化染色的影响。方法选择12例骨组织,随机分为3组。A组用14%硝酸脱钙液进行处理,B、C组分别用EDTA脱钙液、PLANK脱钙液进行处理,同时对CD3、CD68、Ki-67和TTF-1染色。结果室温条件下,硝酸脱钙液的脱钙时间最短,但对组织损伤最大。PLANK脱钙液和EDTA脱钙液脱钙效果较好,组织结构完整,形态清晰,免疫组化染色较好。结论室温条件下,三种脱钙液中PLANK脱钙液和EDTA脱钙液对骨组织脱钙及免疫组化染色效果较好。但由于EDTA脱钙液脱钙时间过长,PLANK脱钙液脱钙均匀,速度快,更适合用于临床病理检查。硝酸脱钙液脱钙最快,但是免疫组化染色效果较差。     

微波在病理技术中的应用

目的探讨微波在病理特殊染色中的应用。方法对我院200例各类标本利用微波染色法进行病理染色,分析其结果。结果经过微波进行脱水后组织切片具有组织结构清晰,切片厚薄、染色均匀、背景无气泡、颜色鲜艳、细胞变形小、切片完整等特点,对比度好,无脱片现象,并可明显缩短整个制片过程。甲级片率在50％以上,没有丙级切片。结论本方法节省时间、染色效果稳定可靠、操作简便的特点,适合在病理科,尤其是基层单位开展。     

临床病理检验常用骨组织脱钙液效果的比较

目的 比较几种骨组织的脱钙溶液与脱钙方法 的效果,获得快捷、简便、适用于临床病理检验的脱钙技术.方法 考察在常温、恒温、搅拌状态下,几种常用的脱钙液对猪干骨中段脱钙、染色效果.结果 40℃恒温搅拌条件下,盐酸一氯化钠脱钙液(脱钙液I)、高浓度盐酸-甲酸-氯化钠脱钙液(脱钙液Ⅳ)、低浓度盐酸-甲酸-氧化钠脱钙液(脱钙液Ⅶ)、Plank-Rycho脱钙液(脱钙液Ⅸ),都具有脱钙时间短、组织损伤小、不影响染色效果.结论 恒温搅拌条件下,脱钙液I是最适合于临床病理检验的脱钙溶液.     

5％硝酸、10％EDTA用于大鼠尾椎椎间盘组织脱钙处理的效果观察

目的 观察并比较大鼠尾椎椎间盘经5％硝酸或10％EDTA脱钙处理后的病理表现.方法 成年SD雄性大鼠10只,取鼠尾Co6/7-Co9/10椎间盘,Co6/7和Co8/9为硝酸组进行5％硝酸脱钙处理,Co7/8和Co9/10为EDTA组进行10％EDTA脱钙处理.记录脱钙时间,采用HE染色、番红O固绿染色进行组织形态学观察,采用免疫组化染色观察II型胶原蛋白表达.结果 硝酸组脱钙需(18.35±4.71)h,EDTA组需(22.75±6.64)h.硝酸组整体形态保持更好,但是免疫组化染色II型胶原蛋白表达明显减少.EDTA组组织形态保持尚可,纤维环组织变硬变脆,有组织松散紊乱表现,但是II型胶原蛋白表达明显.结论 大鼠尾椎椎间盘经5％硝酸、10％EDTA两种脱钙液处理后,在进行普通病理及结构观察时,5％硝酸具有脱钙时间短,组织形态更完整的优势,但需要进行免疫组化染色时,10％EDTA进行脱钙处理更有优势.可以根据不同的科研需求选择脱钙方法.     

光波-微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的应用

目的探讨光波．微波辐射技术在骨组织快速脱钙与免疫组化染色中的作用。方法用8％硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波,微波组合Ⅰ和光波-微波组合Ⅱ的条件下脱钙，同时以室温脱钙作为对照；应用光波-微波-LSAB免疫组织化学染色技术检测不同脱钙条件下ANP、CD31、CD34、5-HT、S-100、NF、GFAP和Vimentin的表达。结果8％硝酸室温脱钙时间最长，光波．微波组合脱钙时间最短；微波组、光波组、光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显比对照组好；光波．微波组合Ⅰ组、Ⅱ组脱钙的免疫组化染色均明显优于单纯微波、单纯光波法；光波-微波组合Ⅱ-LSAB免疫组织化学染色技术比常规免疫组织化学染色所用时间短、染色效果好。结论光波．微波辐射脱钙及免疫组化染色所用的时间明显缩短，染色效果好。     

关于脱钙的实验研究

本研究结果证明,作者改进的含氯化铝的盐酸、甲酸混合脱钙液脱钙迅速、不引起组织损伤,染色效果优良。提出并讨论了常用脱钙剂、应用方法、脱钙程度判定、脱钙及不同处理对标本体积的影响,制作骨组织切片的经验体会。