基层医生基础与临床千题解

什么叫细胞呼吸？物质在人体内的代谢过程中，通过氧化作用，最后生成水和CO。以及释放能量，此过程称为生物氧化。生物氧化包含机体内进行的氧化还原反应。在化学反应中，把加氧、脱氢、失去电子叫氧化；反之，脱氧、加氢、得到电子则叫还原。此种变化规律，在体外和体内都是一样的。在体内所说的氧化和还原，主要是指脱氢、失去电子和加氢与得到电子。生物氧化是在细胞内进行的，表现为细胞摄取氧（O。），放出二氧化碳（COZ），而肺吸入（）2和呼出C（）z的现象，实际上是各组织细胞内利用O。和放出CO。的总结果。因此，生物氧化又被…     

内毒素休克大鼠肝线粒体H+-ATP酶活性变化的研究

目的：研究内毒素休克时线粒体呼吸功能的变化及其与 Ｈ＋ Ａ Ｔ Ｐ酶活性变化的关系。方法：测定内毒素休克大鼠肝线粒体呼吸控制率（ Ｒ Ｃ Ｒ）、磷氧比（ Ｐ／ Ｏ）和 Ｈ＋ Ａ Ｔ Ｐ酶活性的变化;并通过体外孵育实验研究离体情况下不同浓度梯度细菌内毒素（ Ｌ Ｐ Ｓ）对线粒体 Ｒ Ｃ Ｒ、 Ｐ／ Ｏ 和 Ｈ＋ Ａ Ｔ Ｐ酶活性的影响。结果：内毒素休克早期,大鼠肝线粒体 Ｒ Ｃ Ｒ、 Ｐ／ Ｏ 及 Ｈ＋ Ａ Ｔ Ｐ酶活性显著增强,晚期则显著减弱。而 Ｌ Ｐ Ｓ与线粒体共同孵育导致线粒体 Ｒ Ｃ Ｒ、 Ｐ／ Ｏ 和 Ｈ＋ Ａ Ｔ Ｐ酶活性下降。线粒体 Ｈ＋ Ａ Ｔ Ｐ酶活性的变化和 Ｒ Ｃ Ｒ、 Ｐ／ Ｏ 的变化有较好的一致性。结论： Ｈ＋ Ａ Ｔ Ｐ酶活性的变化可能是内毒素休克线粒体功能变化的重要原因之一;提出了内毒素休克时线粒体功能早期增强晚期减弱的观点。     

线粒体遗传性疾病的基因诊断

线粒体是真核细胞中一类重要的细胞器,是细胞氧化磷酸化产生ATP的主要场所。细胞内近90%的ATP由线粒体产生,而ATP对氨基酸、维生素辅因子、脂肪酸和铁硫簇生物合成等不同代谢途径都具有重要作用。因此,线粒体又被称为细胞的"能量工厂"[1-2]。当线粒体基因发生突变时,线粒体的能量代谢也会发生异常,呼吸链氧化磷酸化功能     

危重症时肝细胞线粒体功能的损伤

众多研究表明 ,肝细胞线粒体的损伤在重症感染合并多器官功能障碍综合征 (ＭＯＤＳ)的发病中出现最早 ,程度最显著 ,并且影响着机体器官之间能量及代谢底物的交换平衡〔1〕。线粒体是典型的双膜细胞器 ,具有外膜、内膜、膜间间隙和基质。线粒体内膜是氧化磷酸化的重要场所 ,全部呼吸链中电子传递酶系和ＡＴＰ酶都位于线粒体内膜上 ,而三羧酸循环和脂肪酸氧化的大部分反应都在基质中进行 ,线粒体的氧化磷酸化是机体的重要能量来源。近代生物学研究表明 ,线粒体不仅是细胞能量转换的中心 ,而且是细胞内活性氧的主要来源。线粒体耗氧的 2 %～ 6…     

麻醉药对线粒体功能的影响

线粒体作为一种重要的半自主性细胞器,是细胞生命活动的“动力工厂”;是进行能量转换、调节细胞的氧化还原势能和信号转导的主要场所;是生成活性氧簇、调控细胞凋亡和某些基因表达的重要部位。近年来还发现,线粒体是麻醉药物的一个作用位点（图1）。尽管麻醉药的分子结构各不相同,但它们都会造成线粒体水平多个功能的改变。如异丙酚输注综合征（propofol infusion syndrome,PRIS）的发生,被认为是由于异丙酚直接干扰线粒体的呼吸链或妨碍脂肪酸氧化功能所致。本文就全麻药对线粒体的氧化磷酸化、膜ATP敏感性钾通道、膜通透性转换及细胞色素C（cytochromec,Cytc）释放的影响作一综述。     

细胞色素C与凋亡的研究进展

细胞色素C(cyt-c)是呼吸链中的一个基本成分,在细胞氧化还原和能量代谢中起着重要的 作用,同时cyt-c又是线粒体启动凋亡程序的关键物质之一,在细胞凋亡中发挥着至关重要的作用。本文就 cyt-c在凋亡中的作用、和Bcl-2家族的关系以及从线粒体释放机制等进行综述。     

细胞色素C与凋亡的研究进展

细胞色素C(cyt-c)是呼吸链中的一个基本成分，在细胞氧化还原和能量代谢中起着重要的作用，同时cyt-c又是线粒体启动凋亡程序的关键物质之一，在细胞凋亡中发挥着至关重要的作用。本文就cyt-c在凋亡中的作用、和Bcl-2家族的关系以及从线粒体释放机制等进行综述。     

冬虫夏草提取液对糖尿病小鼠肝线粒体氧化损伤的保护效应

目的:从线粒体呼吸链角度分析中药冬虫夏草提取液对糖尿病引起的氧化损伤的保护作用。方法:实验于1998-03/2000-07在中国科学院动物研究所生物膜与膜生物国家重点实验室完成。雄性昆明小白鼠32只,随机分为4组,每组8只。正常对照组不加任何处理因素,虫草组、维生素E组和糖尿病组小鼠用四氧嘧啶建立实验性糖尿病小鼠模型,分别给予口服虫草提取液(1mL/只)和皮下注射维生素E溶液(4mg/kg),糖尿病组不用任何保护作用药物。利用比色法从线粒体水平测定抗氧化酶活性,用铁氰化钾脉冲法测定线粒体呼吸活链Ⅱ Ⅲ电子传递与质子泵出偶联状况(H /2e)。结果:32只小鼠均进入结果分析。①小鼠谷胱甘肽含量,谷胱甘肽过氧化物酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量比值:糖尿病组低于正常对照组,虫草组、维生素E组高于糖尿病组,差异有显著性意义(P<0.05～0.001)。②丙二醛含量:糖尿病组高于正常对照组,虫草组、维生素E组低于糖尿病组(P<0.001)。③糖尿病组线粒体呼吸链复合体Ⅱ Ⅲ电子传递与质子泵出总比值、净比值低于正常对照组,降低了24.76%,32.31%(P<0.001)。虫草组、维生素E组线粒体呼吸链复合体Ⅱ Ⅲ电子传递与质子泵出总比值、净比值显著回升,高于糖尿病组(P<0.001)。结论:线粒体呼吸过程产生的自由基在糖尿病的肝损伤中可能具有重要的作用,其原因与电子漏增加、电子传递与质子泵出脱偶联有关;同时也证明了虫草提取液能有效的拮抗由糖尿病引起的肝线粒体的氧化损伤。     

山莨菪碱对全脑缺血-再灌流后脑线粒体损伤的保护作用

目的：探讨山莨菪碱对急性全脑缺血－再灌流后脑线粒体损伤的保护作用。方法：采用家兔全脑缺血－再灌流损伤模型。缺血20min，再灌流2h,观察脑线粒体呼吸功能、呼吸缺氧化酶活性、线粒体内Ca^2 和丙二醛含量的变化。结果：脑缺血－再灌流后，脑线粒体呼吸控制率、磷氧化、氧化磷酸化效率及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶活性明显降低（P＜0．01），而线粒体Ca^2 、丙二醛含量明显升高（P＜0．01）；再灌流早期给予山莨菪碱治疗后，上述线粒体损伤性改变明显减轻。结论：山莨菪碱对脑缺血－再灌流后线粒体损伤具有一定的保护作用，其机制可能与Ca^2 拮抗、抑制脂质过氧化及保护呼吸链酶活性有关。     

卵巢过度刺激综合征的观察和护理

卵巢过度刺激综合征 (Ｏｖａｒｉａｎｈｙ ｐｅｒｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｓｙｒｄｒｏｍｅＯＨＳＳ)是应用促性腺激素诱导排卵引起的一种严重并发症[1] 。文献报道[2 ] ,在促排卵治疗和辅助生育技术过程中 ,ＯＨＳＳ的发生率为 1%～ 14% ,重度为 0 5 %～ 2 %。本组 2 89个治疗周期 ,发生 2 0例 ,发生率为 6 9% ,重度为 5 2 8%。患者均为医源性。我院生殖医学中心自 1992年 1月至 1997年 1月共收治医源性ＯＨＳＳ 2 0例 ,经有效治疗和护理均康复出院。 1997年以后采用了综合措施预防ＯＨＳＳ ,未出现 1例重度ＯＨＳＳ。现将医源性ＯＨＳＳ…     

全脑缺血再灌注后脑线粒体功能变化及山莨菪碱的保护作用

目的：探讨全脑缺血再灌注后脑线粒体功能变化及山莨菪碱的保护作用。方法：采用家兔全脑缺血再灌注损伤模型，缺血20min、再灌注2h观察脑线粒体呼吸功能、呼吸链氧化酶活性、线粒体内Ca^2 和MDA含量的变化。结果:脑缺血再灌注后，脑线粒体呼吸控制率、磷氧比、氧化磷酸化效率及烟酰胺腺喋呤二核苷酸氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶活性明显降低(P＜0、01)，而线粒体Ca^2 、MDA含量明显升高(P＜0．01)；再灌注早期给予山莨菪碱治疗后，上述线粒体损伤性改变明显减轻。结论：山莨菪碱对脑缺血再灌注后线粒体损伤具有一定的保护作用，其机制可能与Ca^2 拮抗、抑制脂质过氧化及保护呼吸链酶活性有关。     

山茛菪碱对家兔全脑缺血再灌注后脑线粒体损伤的保护作用(英文)

背景:山莨菪碱是从茄科唐古特莨菪中提取的一种生物碱,是一种良好的细胞保护剂。而线粒体功能变化是反映细胞损伤的最敏感指标之一。目的:观察山莨菪碱对家兔全脑缺血再灌流后脑线粒体损伤的影响,探讨山莨菪碱的脑保护作用。设计:完全随机对照实验。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院。材料:实验于2002-09／12在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成。选择30只健康家兔,随机分为假手术组、缺血再灌流组、山莨菪碱组,每组10只。方法:采用“结扎双侧椎动脉和夹闭双侧颈总动脉+体循环低血压”建立全脑缺血再灌流模型,缺血20 min,再灌流2 h。山莨菪碱组于再灌流前 1 min由股静脉给予山莨菪碱,剂量为10 mg／kg,并以5 mg／h速度维持治疗2 h。缺血再灌流组再灌流期间给予等量生理盐水治疗;假手术组只接受手术,但不结扎和夹闭血管。①采用氧化电极法测定脑线粒体呼吸功能,包括呼吸控制率,磷氧比,氧化磷酸化效率。②采用氧电极法测定脑线粒体内还原型烟酰胺腺瞟呤二核苷酸氧化酶,琥珀酸氧化酶,细胞色素C氧化酶活性。③采用原子吸收光谱法测定脑线粒体钙含量。④采用改良八木国夫法测定脑线粒体丙二醛含量。主要观察指标:①各组家兔大脑皮质线粒体呼吸功能、呼吸链氧化酶活性变化。②各组家兔大脑皮质线粒体内钙和丙二醛含量。结果:30只家兔均进入结果分析。①各组家兔大脑皮质线粒体呼吸控制率、磷氧比、氧化磷酸化效率:缺血再灌流组和山莨菪碱组低于假手术组[烟酰胺腺嘌呤二核苷酸链:呼吸控制率:2．34±0．18,3．58±0．29, 4．07±0.38,P<0．05-0．01;磷氧比:1．77±0．10,2．23±0．14,2．41±0．17, P<0．05-0．01;氧化磷酸化效率:(5．27±0．78),(8．03±1.30),(9．63±150)μkat／g, P<0.05-0．01;黄素腺嘌呤二核苷酸链:呼吸控制率:1.47+0.23,2.53±0．28, 2．84±0．36,P<0．05-0．01;磷氧比:0．88±0．09,1．58±0．11,1．73±0．17, P<0．05-0．01;氧化磷酸化效率:(6．05±1．13),(7.47±1.40),(8．62±1．60)μkat/g, P<0．05-0．01],山莨菪碱组明显高于缺血再灌注组(P<0．01)。②各组家兔大脑皮质还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶、琥珀酸氧化酶、细胞色素C氧化酶活性:缺血再灌流组和山莨菪碱组低于假手术组 [还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶:(2．62+0.35),(4．55+0．48), (5．07±0．60)μkat／g;琥珀酸氧化酶:(1.48±0．17),(1．83±0．22), (2．10+0．28)μkat／g;细胞色素C氧化酶:(5．03±1．12),(7．62±1．23), (9．00±1．53)μkat／g,(P<0．05-0．01)],山莨菪碱组明显高于缺血再灌注组(P<0,01)。③各组大鼠脑线粒体钙和丙二醛含量:缺血再灌流组和山莨菪碱组高于假手术组[钙:(2．36±0．23),(1．39±0．17),(1．22±0．12)mg／g;丙二醛:[(36．38±10．42),(22．69±9．56),(19．74±7．26)μmol/g(P<0．05-0．01)]。山莨菪碱组低于缺血再灌流组(P<0．01)。结论:山莨菪碱可通过钙拮抗、抑制脂质过氧化、稳定线粒体膜,减轻线粒体结构损伤,并促进缺血再灌流后线粒体呼吸功能、呼吸链酶活性的恢复,从线粒体水平发挥脑保护作用。     

线粒体基因m.3700G>A突变作为线粒体疾病发生筛查位点的可靠性评估

目的探讨线粒体还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-脱氢酶亚基1(ND1)基因m.3700GA突变在线粒体疾病,尤其是Leber遗传性视神经病发生中的作用。方法分别构建含m.3700G以及m.3700A碱基的胞质融合细胞各2株。通过测定线粒体内三磷酸腺苷(ATP)生成、呼吸链复合体酶活性以及酶复合体含量、线粒体内活性氧分子(ROS)的变化评估m.3700GA变异对线粒体功能的影响。结果 m.3700GA并不影响线粒体氧化磷酸化复合体Ⅰ的功能,相应的线粒体ATP生成以及ROS均不受影响。结论 m.3700GA变异并非线粒体疾病发生的致病突变位点,该突变位点不应列为线粒体疾病基因检测的筛查位点。     

Foot网织纤维染色改良

目前 ,国内病理科做网织纤维染色时 ,常用Ｇｏｍｏｒｉ银染色法及Ｆｏｏｔ染色法。这两种方法都存在着下列几个问题 :①染色步骤多、操作麻烦、费时 ;②切片背景不清 ;胞核与网织纤维位置关系模糊 ;③色彩较暗 ,不利于照相。我们经过 2年的摸索与实践 ,改进了Ｆｏｏｔ网织纤维染色法 ,取得了良好的效果 ,现将方法介绍如下。1　材料与方法1 1　材料　 1%Ｈ5ＩＯ6,1%草酸 ,4%甲醛 ,10 %ＡｇＮＯ3,4%ＮａＯＨ ,8%ＮＨ4 ＮＯ3,蒸馏水 ,0 5 %ＡｕＣｌ2 。配制氨银液 :取一干净容器 ,先加入蒸馏水 17 5ｍｌ,再加入ＮａＯＨ 4ｍｌ(防止氧化 ) ,接…     

线粒体生物学性状及细胞衰老和运动的影响

背景:线粒体结构和功能的改变与细胞衰老有密切联系。目的:归纳线粒体生物学性状改变对细胞衰老的影响。方法:应用计算机检索Medline数据库(1990-01/2011-06)、中国期刊全文数据库(1994-01/2011-06)、万方数据库(1994-01/2011-06)中有关线粒体对细胞衰老影响的文章。结果与结论:从线粒体呼吸链逸出形成的活性氧导致线粒体膜通透性升高,线粒体跨膜电位降低,ATP合成减少。持续的活性氧氧化作用使线粒体DNA损伤增多,导致线粒体结构功能严重受损,促进细胞衰老甚至死亡。有氧训练可显著提高机体的有氧代谢水平,增进有氧工作能力,并提高机体线粒体基质酶及呼吸链酶活性,降低糖酵解酶活性,减少线粒体的氧化损伤,降低线粒体DNA缺失突变率,使线粒体产生适应性变化,提高氧化磷酸化功能。在训练中应合理安排运动间歇,避免大强度训练对细胞的持续损伤造成线粒体结构功能下降,从而对延缓细胞及机体衰老起一定的积极作用。     

线粒体介导的凋亡途径及调控机制

线粒体是细胞的一个独特而重要的细胞器,是细胞的“动力工厂”。新近研究表明,线粒体功能改变与细胞凋亡密切相关,包括释放促凋亡因子、活性氧(ＲＯＳ)过度生成、能量生成障碍、胞浆内钙失衡等。有关线粒体与凋亡关系的研究,不仅揭示了凋亡信号传递过程中的另一重要通路,而且对阐明细胞毒药物的毒理机制,开发新的抗肿瘤药物具有重要意义。1　线粒体促凋亡因子的释放　定位于线粒体内、外膜间的促凋亡因子可被释放至胞浆中,引起细胞凋亡。这类促凋亡因子主要有两种:细胞色素Ｃ(ｃｙｔｏｃ)和凋亡诱导因子(ＡＩＦ)。成熟的ｃｙｔｏｃ是维持线…     

高氧化还原电位酸性水对HBsAg抗原性破坏的试验观察

采用悬液试验法,观察了高氧化还原电位酸性水（ＥＯＷ）对ＨＢｓＡｇ抗原性的破坏作用,及与其酸性的关系。结果, ＥＯＷ对 ＨＢｓＡｇ作用 １０ｓ,即可将其抗原性破坏;而与 ＥＯＷ相同酸碱度的盐酸溶液（ｐＨ ２．７）,作用 ６０ｓ仍不能将 ＨＢｓＡｇ抗原性破坏。     

从母系遗传研究肾阴虚型慢性再生障碍性贫血的发病机制

背景：多项研究表明恶性血液病可以出现线粒体的突变,但尚未有关于慢性再生障碍性贫血中线粒体变化的研究。目的：研究肾阴虚和肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变情况,探讨母系遗传的本质——线粒体与肾阴虚型慢性再障发生、发展的关系,以期进一步研究慢性再障的发病机制。方法：收集10例诊断明确的肾阴虚型5例肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者骨髓和口腔黏膜上皮,提取DNA,进行线粒体DNA的全测序,比较线粒体基因。结果与结论：肾阴虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体全测序表明许多患者的突变位点发生在与线粒体氧化呼吸链密切相关的区域,涵盖了还原态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶1~2、4~6,细胞色素B等多个线粒体DNA的编码基因。而肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变不明显。提示线粒体基因突变引起的呼吸链酶复合体表达水平的改变,造成细胞能量代谢障碍,可能在造血干细胞衰竭的发生发展中起到关键作用。而这一变化是与肾阴虚——母系遗传息息相关的。     

从母系遗传研究肾阴虚型慢性再生障碍性贫血的发病机制

背景:多项研究表明恶性血液病可以出现线粒体的突变,但尚未有关于慢性再生障碍性贫血中线粒体变化的研究。目的:研究肾阴虚和肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变情况,探讨母系遗传的本质——线粒体与肾阴虚型慢性再障发生、发展的关系,以期进一步研究慢性再障的发病机制。方法:收集10例诊断明确的肾阴虚型5例肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者骨髓和口腔黏膜上皮,提取DNA,进行线粒体DNA的全测序,比较线粒体基因。结果与结论:肾阴虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体全测序表明许多患者的突变位点发生在与线粒体氧化呼吸链密切相关的区域,涵盖了还原态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶1~2、4~6,细胞色素B等多个线粒体DNA的编码基因。而肾阳虚型慢性再生障碍性贫血患者线粒体突变不明显。提示线粒体基因突变引起的呼吸链酶复合体表达水平的改变,造成细胞能量代谢障碍,可能在造血干细胞衰竭的发生发展中起到关键作用。而这一变化是与肾阴虚——母系遗传息息相关的。     

两种方法检测高氧化还原电位酸性水对微生物杀灭效果的比较

试验用高氧化还原电位酸性水（简称 ＥＯＷ）的氧化还原电位为 １１４８～ １１６５ ｍＶ, ＰＨ值为 ２．０８～ ２．４０,含有效氯 ２３．３７～ ５４．２８ ｍｇ／ Ｌ。对其杀灭微生物效果,分别用悬液与载体试验进行了检测。结果, ＥＯＷ原液对悬液中大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种芽胞分别作用 １、 ３、 ６０ ｍｉｎ,杀灭率均达 １００％;而对布片上者,需分别作用 １０、 １０、 ２４０ ｍｉｎ,杀灭率才达 １００％。 ＥＯＷ原液对含 ５％小牛血清的悬液中 ＨＢＳＡｇ作用 ０．５ ｍｉｎ,即可将 ＨＢＳＡｇ抗原性破坏;对不锈钢表面 ＨＢＳＡｇ作用 ９０ ｍｉｎ,仍不能将其抗原性破坏。说明ＥＯＷ杀灭悬液中微生物的作用时间,较杀灭载体表面者短。