重组人促红细胞生成素的临床应用

促红细胞生成素(EPO)是由肾脏分泌的一种活性糖蛋白,能刺激骨髓红系造血母细胞的增殖和分化。临床研究显示,EPO除可用于慢性肾性贫血治疗外,对多种疾病如获得性免疫缺陷综合征、肿瘤、充血性心力衰竭、危重疾病以及丙型肝炎病毒感染等疾病所致贫血亦有较好的疗效。本文就该药的作用机制、临床研究、不良反应及注意事项进行简要阐述。     

促红细胞生成素拟肽研究进展

促红细胞生成素(Epo)是一种主要由肾脏合成并且分泌的活性糖蛋白,可刺激骨髓造血,主要用于治疗慢性肾功能衰竭导致的贫血性疾病,Epo口服不吸收,需静脉注射给药。由于其在人体内的生物半衰期较短,需要频繁注射,给患者在使用过程中带来很多不便并造成一定的经济负担。因此,开发疗效好、不良反应小且持续时间长的Epo一直是研究热点,目前市场上出现了多种新型的促红细胞生成素类药物,其中Epo拟肽的相关研究一直备受人们的关注,本文综述了近年来有关Epo拟肽类药物的研究情况。     

促红细胞生成素在多发伤病人中的应用

目的评价促红细胞生成素在多发伤患者中应用的临床意义及安全性。方法85例多发伤患者随机分成2组,给药组(45例)于入院后即予重组人促红细胞生成素(rhEPO)1万U/D皮下给药,连续用药10天;对照组(40例)不给予rhEPO,其它处理同给药组。将两组的治疗结果进行分析。结果两组患者Hb恢复及HCT有显著差异,而收缩压、舒张压及血小板计数差异无统计意义。结论早期应用rhEPO进行人红细胞动员,可改善患者贫血及生活质量,促进恢复。使用中未发现明显不良反应。     

重组人促红细胞生成素纯化工艺

目的:建立适合大规模生产重组人促红细胞生成素(rhEPO)的纯化工艺.方法:采用无血清培养分泌rhEPO工程细胞株,收集培养基上清,经过滤、染料亲和层析,离子交换层析、分子筛层析纯化.结果:所纯化的rhEPO纯度达99%以上,比活(包括体内、体外)为2.0×105IU/mg以上,活性回收率为40%,相对分子量为38000左右,等电点为3.7～4.2.结论:该纯化工艺简便、重复性好、产品质量高,适合大规模生产.     

促红细胞生成素治疗早产儿贫血的临床观察

早产儿贫血的病因主要有红细胞生成素（EPO）不足、医源性失血、营养因素缺乏、红细胞寿命短、生长速度快、血液稀释、疾病因素等。随着重组人EPO（rhuEPO）被广泛用于临床治疗贫血,我们采用rhuEPO治疗早产儿贫血,以观察及评价其临床疗效。     

重组人促红细胞生成素治疗肿瘤相关性贫血

综述了肿瘤相关性贫血的病因及重组人促红细胞生成素在治疗中的意义。     

促红细胞生成素的临床应用

促红细胞生素(EPO)是一种由肾脏近曲小管合成的活性糖蛋白,能刺激骨髓红系造血母细胞的增殖和分化,对红细胞发育起主要调控作用。临床研究显示,EPO除可用于慢性肾性贫血治疗外,对多种疾病如早产儿、肿瘤、AIDS、充血性心力衰竭以及丙型肝炎病毒感染等疾病所致贫血亦有较好的疗效。近年来,重组人促红细胞生成素对人体免疫系统的影响开始受到重视。     

重组人红细胞生成素大规模制备中反相色谱的条件优化

目的优化重组人红细胞生成素(rhEPO)大规模制备纯化中主要影响回收率的反相色谱的条件,提高回收率。方法采用反相纯化作为三步法纯化的第一步,利用R1型反相填料采用不同分步洗脱条件进行洗脱。结果优化后经第一步反相色谱所得rhEPO蛋白纯度达70%,再通过阴离子交换和凝胶过滤色谱纯化,rhEPO终产物的纯度可达100%,体内比活达1.91×105IU/mg,rhEPO蛋白的回收率提高了1.2倍。结论优化的反相纯化条件(30%乙醇-1.5 mol/L尿素,60%乙醇-3.0 mol/L尿素)能更有效的从培养上清中大量纯化出rhEPO,回收率高。获得的产品纯度高,体内外活性好。适合大规模纯化。     

重组人促红细胞生成素防治早产儿贫血的疗效观察

目的:探讨重组人促红细胞生成素(rHu-Epo)防治早产儿贫血的疗效。方法:将60例早产儿随机分为治疗组和对照组各30例,治疗组出生第三天即rHu-Epo250IU/(kg·d),隔日1次,每周3次皮下注射,共6周;对照组未用rHu-Epo。两组早产儿自出生第三天起口服铁剂[元素铁5mg/(kg·d)]。结果:治疗组网织红细胞及血红蛋白明显高于对照组(P<0.01);治疗组输血率与对照组比较明显减少;治疗组体重增长速率明显高于对照组。结论:早期应用大剂量rHu-Epo能有效地防治早产儿贫血,减少输血,体重增长快,且用药安全,无明显不良反应。     

转基因牛乳中重组人乳铁蛋白的仿生亲和纯化

目的从转基因牛乳中亲和纯化重组人乳铁蛋白。方法从仿生亲和介质库中筛选亲和配体,进行重组人乳铁蛋白的纯化研究。结果筛选出可以特异性结合重组人乳铁蛋白的固定化β-丙氨酸亲和配体,从转基因牛乳中一步纯化的重组人乳铁蛋白纯度为95.2%,蛋白回收率可达81.9%。经放大实验表明该亲和纯化工艺适合工业上大规模纯化乳铁蛋白。结论固定化β-丙氨酸可从转基因牛乳中纯化出高纯度重组人乳铁蛋白,工艺适合工业化生产。     

人绒毛膜促性腺激素的精制、去热原工艺

以人绒毛膜促性腺激素（ＨＣＧ）粗品为原料，经乙醇分级沉淀和磷酸盐吸附两步骤获得符合《中华人民共和国药典》要求的ＨＣＧ精品．与ＤＥＡＥ－纤维素柱层析法比较，两种方法均可达到满意的纯化与去热原目的，但磷酸盐吸附法的回收率较高     

蚓激酶的提取纯化及性质研究

目的建立高效的蚓激酶纯化工艺,并研究其酶学性质。方法以赤子爱胜蚓(Eisenia foelide)为原料,经过匀浆抽提、硫酸铵分段盐析、色谱分离、电泳等技术对蚓激酶进行分离纯化及鉴定,并研究pH、温度、金属离子与抑制剂对蚓激酶活性的影响以及蚓激酶的作用机理。结果纯化蚓激酶比活达5 100 U/mg,经SDS-PAGE电泳分析得2条带,相对分子质量为32 000和33 500;体外溶栓实验表明,蚓激酶具有直接溶解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用。在中性和略偏碱性环境中稳定且活性高;温度适应范围广;不同种类及浓度的金属离子对蚓激酶活性的影响不尽相同;抑制因子及底物特异性研究发现,蚓激酶属于丝氨酸蛋白酶,不属于金属蛋白酶,同时含有二硫键。结论该分离方法可以得到较纯的蚓激酶。     

门冬酰胺酶用DEAE-Sephadex A-50层析法纯化的研究

采用DEAE－SephadexA－50层析纯化门冬酰胺酶，HPLC检测结果表明，产品纯度和收经均有提高。     

珠母贝氨基多糖的分离纯化及其抗肿瘤活性的初步研究

探讨珠母贝氨基多糖的分离纯化及其抗肿瘤活性。马氏珠母贝全脏器经胰酶和枯草杆菌蛋白酶双酶水解、醇沉后得到氨基多糖粗品(CPG)．再经DEAE-52-纤维素柱纯化，并采用MTT法检测其体外抗肿瘤活性。结果表明：CPG和经DEAE-52-纤维素柱纯化级分GAG-1，GAG-2中总氨基己糖的质量分数分别为45．9％，56．5％和59.2％，级分GAG-1硫酸基的质量分数高达13.8％；体外抗肿瘤试验表明CPG，GAG-1和GAG-2具有抑制肿瘤细胞生长的作用，对HL-60细胞的抑制率分别为54．6％。50.0％和35．4％，且能显著增敏化疗药物5-Fu抑制肿瘤细胞的作用，其中GAG-1为主要的活性成分。     

云芝糖肽的硼酸亲和色谱纯化

应用硼酸亲和色谱纯化云芝糖肽，最佳吸附条件为含0．4mo1儿NaCl的0．2mo1／L磷酸盐缓冲液(pH8．5)，最佳洗脱条件为o．2mo1儿的硼酸溶液。纯化后，糖含量提高66％，蛋白含量提高2．65倍，蛋白—糖之比从0．31提高到0.69。     

乌拉立肽的纯化工艺优化

本研究采用制备高效液相色谱法,对含有较多结构相似的多肽混合物的乌拉立肽粗品进行二步纯化。通过单因素试验与响应面法优化一步纯化工艺,结果表明,使用Daiso-SP-ODS(30 nm,10μm)填料,在70 mmol/L磷酸二氢铵水溶液,pH 4.0和柱温30℃条件下,一步纯化后样品纯度98.65%,收率70%。再经过转盐二步纯化后,产品纯度由文献中的98%提高至99.91%,总收率由29%提高至56%。该二步纯化工艺可为多肽分离纯化方法的建立提供参考。     

离子交换-反相色谱纯化育亨宾

目的从育亨宾树皮中提取的育亨宾粗品,一般纯度较低(10%左右)。本文研究纯化育亨宾粗品的方法。方法结合离子交换与反相色谱两种方法,考察了洗脱条件对纯化效果的影响。结果采用1×2型阳离子交换树脂,以乙醇-水-氨水(40∶55∶5)为洗脱液,洗脱的育亨宾纯度最高;然后用C18反相色谱进一步纯化,流动相为甲醇-水(含0.01%三氟乙酸),甲醇浓度按3%,30%,40%,95%分阶段增加,洗脱液中的育亨宾纯度提高至71.2%。结论这项工艺具有成本低、收率高、纯度好、步骤少的特点,在天然产物的分离纯化方面具有潜在的应用价值。     

高纯度平阳霉素铜螯合物纯化工艺研究

本试验采用单分散聚合物微球填料柱色谱法纯化平阳霉素铜螯合物粗品,使其HPLC纯度高于98%。首先采用XR 3SP微球反相色谱纯化,使纯度和单步收率分别提高至50%和85%以上。然后经过POlyRP 30-300反相色谱纯化,纯度和单步收率可分别提高至98%和88%以上,总收率达75%以上。该工艺简单可靠,适于工业化生产。