分色方法在常规HE染色过程中的对比分析

目的 对比分析不同分色方法在常规HE染色过程中的分色效果.方法 选取石蜡切片120张,随机分为四组,在常规HE染色过程中分别采用1%盐酸水溶液,1%盐酸酒精溶液、5%冰醋酸水溶液、5%冰醋酸酒精溶液中分色,统计比较两组染色时间、脱片率及染色效果等.结果 四组比较,1%盐酸酒精溶液组脱片率最高位33.3%,5%冰醋酸酒精溶液组脱片率为10.0%.5%冰醋酸酒精溶液的作用时间为(18.2±2.0)s,更易操作,且细胞核的着色程度较传统盐酸溶液更加鲜艳.结论 选用5%冰醋酸水溶液在常规HE染色过程中进行分色,与组织作用较温和,时间相对较长,对组织分化程度易掌握,细胞核染色与传统盐酸分色比较色彩更鲜艳,更蓝,胞质和胞核对比比较鲜明.     

大鼠不同器官组织的脱水方法改进

<正>近期,本实验室于大鼠组织病理学实验中发现,若按大鼠常规脱水时间和流程制备大鼠的组织蜡块,则组织切片易碎裂,染色易脱片,造成后续工作无法进行。即便使用防脱片剂效果亦不佳,尚未脱片的组织切片HE染色及特殊染色结果亦不理想。本实验室根据大鼠各个器官组织特点进行试验后,改进了大鼠组织的脱水方法取得较好效果,现介绍如下。     

制备硅化玻片技术方法的改进

防止组织切片或细胞涂片在染色过程中组织或细胞脱落 (简称脱片 )是免疫组织化学及原位分子杂交技术中的重要环节。为此 ,通常采用载玻片涂胶或硅化处理后再裱贴组织切片的方法来防止脱片。在众多的玻片涂胶和硅化方法当中 ,我们对一些方法进行了改进和探讨 ,总结出一种使玻片处理的操作更加简单 ,防止脱片效果更好的方法。一、材料与方法1.材料 :普通载玻片 ,3 氨丙基三乙氧基硅烷(3 Ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｉｔｒｉｅｔｈｏｘｙｓｓｉｃａｎｅ ,ＡＰＥＳ)试剂 ,为美国Ｓｉｇｍａ公司产品 ,多聚赖氨酸 (ｐｏｌｙ ｌｙｓｉｎ)和免疫组织化学试…     

几种生物材料种植人成纤维细胞的比较

目的 通过人成纤维细胞种植，比较几种形式的聚酯材料，以及脱细胞生物组织基质的细胞亲和性，为组织工程血管及瓣膜研究选择支架材料。方法 ①聚氨酯(PU)、第3代聚烷酸酯[PHAs，分子表达式为p(3HB—co—3HH)]、PHAs／PU共混物分别涂在载波片上制成薄膜，将人成纤维细胞种植其上，培养3天。HE染色后于显微镜下每片取相同4点计数，得出平均值。②分别在PHAs／PU片、脱细胞牛心包片、脱细胞猪肺动脉瓣(简称猪瓣)种植人成纤维细胞，PHAs／PU片培养7天，后两者培养3天。用HE染色、扫描电镜分别观察细胞生长情况。结果 ①3组薄膜片上细胞平均数分别为(PU)196、(PHAs)124、(PHAs／PU)160。②扫描电镜显示PHAs／PU片表面约50％有细胞覆盖，细胞聚合成粗大束带状结构，牛心包表面紧密覆盖着厚实的鳞甲状细胞结合体，猪瓣瓣叶表面覆盖紧密联结的板状细胞结合体。③HE染色显示PHAs／PU片和牛心包片、猪瓣瓣叶单侧有联结较完整的细胞层覆盖，局部有3—4层重叠而成，牛心包片和猪瓣瓣叶上细胞与基质联结紧密。结论 ①PHAs混入PU后细胞亲和性显著提高，适宜作血管及补片支架材料；②脱细胞牛心包组织和猪瓣细胞亲和性明显好于合成材料，适合作血管、补片及带瓣通道组织工程支架。     

DPX封片胶在牙组织免疫组化染色防脱片中的作用

目的:研究DPX封片胶在牙组织免疫组化染色中的防脱片效果。方法:狗上前牙EDTA脱钙、常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水洗、干燥后,用DPX封片胶在组织边缘和玻片上涂抹一圈,37℃烤干DPX封片胶,EnVision技术观察IL-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-9的表达。结果:DPX封片胶处理后的切片,经微波抗原修复后,切片上的组织完整没有边缘脱落破损现象。免疫组化染色后,组织形态基本完整,相应分子表达定位准确,染色结果清晰。结论:DPX封片胶在牙齿等含钙组织免疫组化染色中有良好的防脱片作用。     

牙和骨切片的粘片剂防脱片效果及应用方法探讨

牙和骨切片HE尤其是免疫组织化学染色需多次更换试剂、改变温度、反复水洗,经常造成切片易皱褶、卷曲、与载玻片分离（脱片）。目前尚无理想的防止牙和骨切片染色脱片的方法,亦未见防止牙和骨切片染色脱片的报道。以下是我们探讨牙和骨切片的氨醛酸乙基硅（APES）、多聚-L-赖氨酸（PLLS）两种粘片剂的防脱片效果和应用方法。     

免疫组织化学染色中几个问题的探讨

免疫组织化学染色技术在实际运用中,由于切片厚薄的掌握不当、脱片及核对比染色欠佳等问题曾使许多研究者感到为难。我们在进行垂体腺瘤的免疫组化研究中也曾遇到上述问题,现将我们的作法及改进介绍如下。     

改良微波辐射冰冻切片免疫荧光染色法

将微波技术应用于免疫荧光染色并作玻片反置孵育的改良创新。结果表明，反置玻片中低火档５～７ｍｉｎ染色效果最佳，且避免了干燥。该方法大大缩短了孵育时间，加快染色进程，降低背景染色，提高阳性强度及阳性检出率，防止了脱片，染色质量明显提高     

微波技术在髓鞘染色中的应用

碳酸锂苏木素法是显示髓鞘的经典方法，该法结果比较稳定、试剂来源方便、且易于掌握，但其染色时间长、易脱片。为此我们利用微波处理可大大缩短染色时间，解决脱片问题，且结果更满意，现介绍如下。１材料和方法１１标本６例慢性炎性脱髓鞘多神经根神经病（ＣＩＤＰ）...     

骨髓活检组织制片中改良脱钙液的应用及常见问题分析

正在临床病理外检工作中,骨髓组织由于含有大量的钙盐而比较坚硬,需经过脱钙处理后才能进行常规制片,脱钙不全或脱钙过度均影响骨髓HE染色及免疫组化染色效果,降低病理诊断的准确率。作者在长期的骨髓制片工作中,摸索出一种适合骨髓组织的改良EDTA脱钙液,提高了骨髓制片质量和染色效果。本文现就骨髓活检标本固定及取材、脱钙、制片和染色等环节进行总结,供广大同仁分析交流,共同提高骨髓活检组织制片和染色质量。     

针对组织工程多孔生物陶瓷的组织学技术优化探讨

目的 改进硬组织切片技术以适应生物陶瓷材料在骨组织工程中的研究.方法 探索硬组织切片的厚度、漂片温度、裱片方法、烤片温度和时间的最佳组合,针对阳离子防脱载玻片的使用条件进行反复比较,通过改进操作流程中的关键技术和需避免的问题,摸索出阳离子载玻片在硬组织切片裱片中的最佳应用条件,克服了硬组织切片制作技术中标本易破碎、切片易脱落及染色时染料容易吸附的缺点.结果 通过技术探索与改进,生物陶瓷支架材料体内植入后的类骨修复体标本的硬组织切片能保持其杂化后的组织结构与比较完整的材料结构,可进行Masson三色染色、苏木精-伊红(HE)及甲苯胺蓝染色.染色后镜下观察显示支架内杂化生长的组织结构完整、细胞形态清晰、切片质量好、生物陶瓷支架脱片少.荧光显微镜可观察到类骨修复体钙沉积现象完整.结论 改善了传统硬组织切片技术处理生物陶瓷材料时易于破坏组织-材料结构的缺点.改进的硬组织切片技术适应生物陶瓷材料在骨组织工程领域研究.     

热处理法在常规HE染色发灰组织切片中的应用

在常规HE染色过程中,经常发现固定前已干涸的组织、过度固定、脱钙及烤片过长的组织易造成切片着色困难,细胞核着色淡、不着色或一片灰染.此时若组织较少或已用完,无法重新再取材,势必给临床病理诊断带来严重影响.经大量实验,我们对原组织切片在染色前进行热处理,使染色质量得到了明显改善.     

组织工程血管基质的制备与改性

目的：完全脱除猪胸主动脉细胞，对脱细胞血管基质进行改性，增强基质的力学强度，制备组织工程血管支架材料。方法：取家猪的新鲜去除外膜胸主动脉20根，随机分成4组，分别采用胰蛋白酶、TritonX-100及十二烷基硫酸钠（SDS）作为脱细胞试剂对猪胸主动脉进行脱细胞处理，并对脱细胞后的血管基质进行改性，采用HE染色、弹力纤维染色、力学性能测试，以评价脱细胞效果以及材料的力学性能。结果：采用1％TritonX-100单独作用84h既能完全脱除细胞，同时又可完整保留血管基质的三维结构，对胶原纤维、弹力纤维的损伤小，是一种较理想的脱细胞方法。对脱细胞后的基质进行冷冻干燥及真空热交联处理，能有效提高材料的机械强度，冷冻干燥24h后真空120℃下热交联处理12h所获得的材料的机械强度最好，断裂强度可达到1．70MPa。结论：以脱细胞血管基质经冷冻干燥和真空热交联处理后，可以作为血管组织工程的支架材料。     

改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察

正骨髓活检结合免疫组化染色对于血液系统疾病诊断、判断临床预后具有重要意义~([1])。骨髓组织细胞种类多和组织学形态丰富,部分病例需结合免疫组化染色以明确诊断~([2])。骨髓组织质地较硬,需脱钙后才能进行常规制片和免疫组化染色~([3])。其中最常用的酸类脱钙液易造成组织细胞表面抗原破坏或丢失,影响免疫组化染色结果~([4])。EDTA的脱钙作用优于酸性脱钙液~([5]),但脱钙速度慢、脱钙后组织会稍微变硬~([6])。本实验通过比较改良EDTA脱钙液脱钙骨髓与混合酸脱钙液脱钙及不脱钙骨髓的HE染色和免疫组化染色效     

乳白胶作为粘片剂的应用

在病理HE制片及免疫组织化学制片工作中,经常遇到组织切片与载玻片粘合不牢而脱片的情况。既影响工作质量和速度,又造成试剂的浪费。尤其是在免疫组化染色中,因抗体试剂昂贵,若经常脱片,不仅影响病理诊断;也会降低经济效益。因此,使用好粘片剂以减少脱片提高制片质量是病理技术     

骨髓活检标本石蜡包埋制片方法

塑料包埋技术用于骨髓活检有许多优点，但目前还未能完全满足病理诊断需要。经过聚合后的骨髓组织，虽然能制成较薄的切片，但如需作免疫组织化学染色就相当困难。我们经过用多种脱钙液反复试验比较，最后选用“Formical-4”脱钙液用于骨髓活检标本脱钙，不论HE或免疫组织化学染色均收到良好效果。现将108例骨髓活检标本石蜡包埋制片方法介绍如下。     

脱细胞真皮基质补片修复滇南小耳猪胆管损伤☆

背景：目前胆管缺损的修复效果不佳,脱细胞真皮基质已广泛用于烧伤、疝修复、口腔黏膜及软组织修复等。 目的：观察脱细胞真皮基质修复滇南小耳猪胆管损伤的效果。 方法：将滇南小耳猪建立胆管损伤动物模型,建模成功后按修复方式分为胆肠吻合组、膨体聚四氟乙烯组及脱细胞真皮基质组,胆肠吻合组进行胆肠吻合修补,膨体聚四氟乙烯组及脱细胞真皮基质组分别用膨体聚四氟乙烯补片和脱细胞真皮基质补片制成直径稍宽管状进行修补。 结果与结论：治疗后2~4个月,脱细胞真皮基质组的总胆红素低于其他2组(P < 0.05);免疫组织化学染色显示,治疗后1~4个月,其转化生长因子β1表达均高于其他2组(P < 0.05),表达随时间增加而降低(P < 0.05)。脱细胞真皮基质组胆总管吻合口及周围组织出现胆道上皮、腺体、血管及平滑肌等再生。脱细胞真皮基质组治疗后未出现胆道狭窄、感染及排斥反应发生。结果证实,脱细胞真皮基质可生理性修复胆道并重建其功能,并发症少,生物相容性较好。 关健词：脱细胞真皮基质;补片;胆管损伤;转化生长因子β1;猪;生物相容性;细胞外基质材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.12.012     

骨和牙切片的甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法

骨和牙体组织非常坚硬,将其制成几微米薄切片难度较大。常用的方法是先脱钙,使组织变软后再切片,所以脱钙是非常关键的技术。脱钙不好切片破碎甚至切不成片,破坏组织的形态结构和细胞成分的性质,染色不佳甚至染不上色,无法进行观察和研究。脱钙液和脱钙方法虽然很多,但目前尚无公认的理想方法,为此我们在骨和口腔疾病诊断及在大骨节病、氟中毒骨病和很多口腔疾病实验研究中,证明甲酸氯化铝脱钙液及脱钙方法效果优良。     

HE自动染片机应用体会

随着病理技术的发展，自动染片机以其卓越的性能及良好的染色效果已开始逐步取代人工染色，我科近年来在使用HE自动染片机的过程中，对染色程序及染色剂的选择与更换和染片数量进行观察分析和改进，从而提高了石蜡切片的染色质量。     

骨及钙化组织术中冷冻切片的制片方法

骨及钙化组织，一般先经有机酸或无机酸稀溶液浸渍脱钙，再用流水洗涤24h，除去组织内的酸，然后才能按石蜡切片常规脱水、浸蜡、切片、HE染色。此种方法除酸时间长，而且染色效果并不十分理想，在不同程度上延误了患者的诊断与治疗，而骨及钙化组织由于组织硬，一般临床不用于冷冻切片快速诊断，但快速诊断对骨科手术方式选择的意